CTLA4Ig基因在糖尿病大鼠胰岛移植中的作用

为探讨融合蛋白（ＣＴＬＡ４Ｉｇ） 基因在糖尿病大鼠体内表达及其产物延长胰岛移植物存活的作用，利用脂质体（Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ） 载体包裹ＣＴＬＡ４ＩｇｃＤＮＡ 质粒后转染鼠胰岛和肌肉细胞，检测移植后ＣＴＬＡ４Ｉｇ 基因表达水平和Ｔ 淋巴细胞转化率，观察ＣＴＬＡ４Ｉｇ 基因表达在延长糖尿病鼠胰岛移植物和大鼠存活时间的作用。结果： 胰岛移植术后实验（ Ａ） 组、对照（Ｂ） 组Ｔ 淋巴细胞转化率有明显差异（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。Ａ 组胰岛移植后第７ 天２ 只大鼠血清ＣＴＬＡ４Ｉｇ 呈阳性（ 阳性率为２０ ％ ） ，分别为１４ ｎｇ／ ｍｌ 和３１ ｎｇ／ ｍｌ。Ｂ 组胰岛移植后维持血糖正常时间平均３ ．６ ±５ ．１ 天，Ａ 组胰岛移植后维持血糖正常时间平均１４ ．８ ±１２ ．３ 天，两组比较差异有显著性意义（ Ｐ＜ ０ ．０５ ） 。Ａ 组大鼠平均存活２４ ．０ ±１０ ．８ 天，最长４５ 天，Ｂ 组大鼠平均存活１０ ．８ ±４ ．８ 天，最长２１ 天，两组大鼠生存时间差异有统计学意义（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。本实验结果提示：ＣＴＬＡ４Ｉｇ 基因可以在受体大鼠胰岛细胞或肌肉组织表达，其表达产物可使胰岛移植物和受体鼠存活时间明显延长。     

CsA与肾移植患者的低血镁症

为研究环孢素Ａ（ＣｓＡ）降低血镁的作用及其机制，探讨ＣｓＡ诱导的低血镁是否与肾移植后高血压有关，以硫唑嘌呤（Ａｚａ）治疗组为对照组，以ＣｓＡ治疗血压正常组和ＣｓＡ治疗高血压组为研究组，检查了各组血镁浓度和镁排泄分数。结果：Ａｚａ组、ＣｓＡ血压正常组、ＣｓＡ高血压组的血镁浓度分别为０８２±０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ、０７５±０．０６ｍｍｏｌ／Ｌ、０６６±００８ｍｍｏｌ／Ｌ，两两比较有显著性差异（Ｐ＜００５）；镁排泄分数分别为：６４％±２３％、７５％±３６％、８８％±３９％，两两比较有显著性差异（Ｐ＜００５）；低镁血症发生率分别为：６７％、５５０％、８１１％，两两比较有显著性差异（Ｐ＜００５）。结果提示：ＣｓＡ能引起肾移植患者血镁显著下降，这种低血镁可能是肾性镁丢失的结果，与肾移植后高血压相关。     

CTLA41Ig基因在糖尿病大鼠胰岛移植中的作用

为探讨融合蛋白（ＣＴＬＡ４Ｉｇ）基因在糖尿病大鼠体内表达及其产物延长胰岛移植物存活的作用，利用脂质体（Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ０载体包裹ＣＴＬＡ４ＩｇｃＤＮＡ质粒后转染鼠胰岛和肌肉细胞，检测移植后ＣＴＬＡ４Ｉｇ基因表达水平和Ｔ淋巴细胞转化率，观察ＣＴＬＡ４Ｉｇ基因表达在延长糖尿病鼠胰岛移植物和大鼠存活时间的作用。结果：胰岛移植术后实验（Ａ）组、对照（Ｂ）组Ｔ淋巴细胞转化率有明显差异（Ｐ〈０．０５）。Ａ     

氧化亚氮对血乳酸的影响

２１冽非经胸手术患者，随机分为实验组１１例，Ｎ２Ｏ－普鲁卡因复合全麻）和对照组（１０例，普鲁卡因复合全麻），观察除外缺氧。低血压休克等因素后 Ｎ２Ｏ对血乳酸的影响。结果提示，吸入 ５０％～６０％Ｎ２Ｏ １小时后动脉血乳酸值（２．４７±０．６１ｍｍｏｌ／Ｌ）较麻醉诱导前（１．４９±０．４０ｍｍｏｌ／Ｌ）明显增加（Ｐ＜０．０１）；而对照组血乳酸无明显变化（从１．０３±０．３２ｍｍｏｌ／Ｌ．增至１．５９±０．５７ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＞０．０５）。此结果说明，５０％～６０％Ｎ２Ｏ可导致血浆乳酸浓度增加，虽所增加数值较微，未见明显临床意义，但对于危重．应激叵应强烈以及代谢功能紊乱等患者的影响，有待进一步探讨。     

固定化猪胰腺细胞移植治疗糖尿病小鼠的实验观察

用链脲霉素制备合格的糖尿病模型小鼠２４只，随机分为３组：对照１组为生理盐水组，对照２组为植入猪胰腺细胞组，治疗组为植入用免疫隔离膜包裹的猪胰腺细胞组。植入量均为１００ｍｇ。结果表明：治疗组小鼠在完全停用胰岛素的情况下，于第７天左右血糖水平可降至８．１１±３．０６ｍｍｏｌ／Ｌ并能维持２～４．５个月，与对照１、２组１９．６７±２．４５ｍｍｏｌ／Ｌ和１３。４４±２，５７ｍｍｏｌ／Ｌ相比均有显著差异（Ｐ＜０．０１；Ｐ＜０．０５）。可见免疫隔离膜具有良好的生物膜性，可以有效地避免宿主抗移植物的排斥反应，使猪胰腺细胞在小鼠体内仍具有生物功能。     

糖尿病肾小球内非酶糖化与苯那普利的抑制作用及机制

目的　探讨苯那普利对糖尿病肾小球内非酶促糖化反应的作用及机制。方法　以链脲佐菌素诱发的单侧肾切除糖尿病大鼠为模型，检测苯那普利投药４ 周后，糖尿病大鼠血胰岛素水平、肾功能指标、血清及肾小球内糖化产物表达水平的改变。结果　用药的糖尿病大鼠，肾功能指标［ Ｂ Ｕ Ｎ 从（１７３８ ±２２２）ｍ ｍｏｌ／ Ｌ 降至（１２８３ ±２０９）ｍ ｍｏｌ／ Ｌ， Ｐ ＜ ００５］ 、血清糖化蛋白水平［ 果糖胺从（５３０３ ±０１２３）ｍｍｏｌ／ Ｌ降至（２００３ ±０１２５）ｍ ｍｏｌ／ Ｌ， Ｐ ＜ ００５］ 明显下降，肾小球外基质（ Ｅ Ｃ Ｍ） 积聚被抑制，非酶糖化反应程度以及晚期糖化产物（ Ａ Ｇ Ｅｓ） 的蓄积亦有明显改善。血浆游离胰岛素水平升高［ 从（９０２ ±２３４） ｍ Ｕ／ Ｌ 升至（１６７ ±７１３）ｍ Ｕ／ Ｌ， Ｐ＜ ００５］ ，因而高血糖程度稍有改善。结论　苯那普利对糖尿病大鼠肾小球内基质蛋白的非酶糖化有显著的抑制作用，其作用途径与其部分改善胰岛功能、降低血糖或其他不依赖于血糖浓度降低的作用有关     

胆囊切除术中输入含糖平衡液对血糖和电解质影响

３０例ＡＳＡⅠ～Ⅱ级在连硬麻醉下施行择期胆囊切除术患者随机平分为两组：含糖（１．３３％）平衡液组和林格氏液组。两组分别于输液前、输液１ｈ及术毕采血测定血糖及电解质。结果：含糖平衡液组输液后１ｈ及术毕血糖分别为７．４３±０．９７和６．９９±１．１１ｍｍｏｌ／Ｌ，林格氏液组为８．２１±１．０７和７．２２±１．２４ｍｍｏｌ／Ｌ，与各组输液前基值比较有统计学差异（Ｐ＜０．０５），但两组同期比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５），两组血电解质各参数均在正常范围。提示术中输入含糖平衡液血糖升高是应激反应的结果，输液不会进一步使血糖增加，且对血电解质影响小。因此，对于心肺功能正常行择期中等手术病人，含糖平衡液不失为一种较合理的选择。     

尿素动力学模型在持续性非卧床腹膜透析中的应用

对２０例ＥＳＲＤ患者先后给予持续性非卧床膜腹膜透析（ＣＡＰＤ）１Ｌ×５／ｄ和２Ｌ×４／ｄ方案透析，测定其尿素清除指数（ＫＴ／Ｖ）和标化每日蛋白质分解率（ＮＰＣＲ），同时应用１２个临床参数对两方案进行疗效评价．结果显示由ＩＬ×５／ｄ改为２Ｌ×４／ｄ时，ＫＴ／Ｖ和ＮＰＣＲ分别上升０．７４±０．２１和０．１２±０．０９（Ｐ＜０．００１），临床有效率上升８０％（Ｐ＜０．００５）；ＮＰＣＲ和ＫＴ／Ｖ呈正相关（ｒ＝０．４９，Ｐ＜０．０５）．ＮＰＣＲ与每日蛋白质摄入量（ＤＰＩ）呈高度正相关（ｒ＝０．９１，Ｐ＜０．００１），ＫＴ／Ｖ与临床评分也呈正相关（ｒ＝０．６１，Ｐ＜０．０１）．结果表明尿素动力学模型对评价ＣＡＰＤ治疗具有重要意义．     

胆汁酸代谢经典途径酶基因表达与豚鼠胆石病关系的研究

目的：研究豚鼠肝脏胆汁酸代谢经典途径关键酶──胆固醇７α一羟化酶（ＣＹＰ７ａｌ）和甾醇１２α－羟化酶（ＣＹＰ８ｂ１） 的基因表达与胆汁脂质含量及胆固醇结石形成的关系。方法：采用点杂交技术检测对照组（ｎ＝８）（普通豚鼠饲料喂 养）、未成石组（ｎ＝１３）和成石组豚鼠（ｎ＝９）（致石饲料喂养）肝脏ＣＹＰ７ａｌ和ＣＹＰ８ｂ１ ｍＲＮＡ的相对含量,并对三组豚 鼠胆汁脂质成份进行检测和分析。结果： １、与对照组豚鼠（ｎ＝８）相比,成石组豚鼠（ｎ＝８）肝脏ＣＹＰ７ａ１ ｍＲＮＡ的相对 含量显著减少（０．３９±０．１９比０．７３±０．３６,Ｐ＝０．０３）,ＣＹＰ７ａ１的ｍＲＮＡ相对量与胆汁胆固醇摩尔浓度、胆固醇在胆汁胆 固醇、胆汁酸和磷脂三者中的摩尔百分数、胆汁中胆汁酸摩尔浓度皆无明显相关。２、对照组（ｎ＝８）、未成石组（ｎ＝８）和 成石组豚鼠（ｎ＝８）肝脏ＣＹＰ８ｂ１ ｍＲＮＡ的相对含量无显著差异。３、未成石组（ｎ＝１３）和成石组豚鼠（ｎ＝９）胆汁胆固醇 浓度明显高于对照组（ｎ＝８）,分别为：０．５０ｍｍｏｌ／Ｌ±０．０９ｍｍｏｌ／Ｌ比０．３９ｍｍｏｌ／Ｌ±０．１１ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｐ＝０．０３;０．５０ｍｍｏｌ／Ｌ ±０．１０ｍｍｏｌ/     

狼疮肾炎患者血与尿白细胞介素-8测定的临床意义

目的　探讨血清和尿中白细胞介素８（ Ｉ Ｌ８） 水平变化在系统性红斑狼疮（ Ｓ Ｌ Ｅ） 及狼疮肾炎（ Ｌ Ｎ） 中的临床意义。方法　采用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法对４７ 例 Ｓ Ｌ Ｅ 患者（ 含３７ 例 Ｌ Ｎ） 、１３ 例原发性慢性肾小球肾炎和１４ 例正常对照进行血清和尿中 Ｉ Ｌ８ 水平检测,比较分析其与 Ｓ Ｌ Ｅ 活动指数（ Ｓ Ｌ Ｅ Ｄ Ａ Ｉ） 、肾脏损害的相关关系。结果　 Ｓ Ｌ Ｅ 患者血清 Ｉ Ｌ８ 水平活动期为５５３ ｐｇ／ｍｌ（ 中位数,下同） 静止期为２６３８ ｐｇ／ｍｌ,明显高于正常对照组２０５４ ｐｇ／ｍｌ（ Ｐ ＜ ０００１） ,并且活动期高于静止期（ Ｐ ＜ ００５） ,血清 Ｉ Ｌ８ 水平与 Ｓ Ｌ Ｅ Ｄ Ａ Ｉ正相关（ ｒ ＝ ０６００３ , Ｐ ＜ ００５） ; Ｓ Ｌ Ｅ 患者尿 Ｉ Ｌ８ 显著高于正常对照组２０６７ｐｇ／ｍｌ（ Ｐ＜ ００５） ,且 Ｌ Ｎ 组２５２９ ｐｇ／ｍｌ 明显高于 Ｓ Ｌ Ｅ 无肾炎组为２１１ ｐｇ／ｍｌ 及原发性慢性肾小球肾炎组１９４１ ｐｇ／ｍｌ（ Ｐ 值均＜ ００５） ;肾脏组织病理狼疮活动指数（ Ａ Ｉ） 高者其血清、尿 Ｉ Ｌ８ 水平显著高于 Ａ Ｉ低者（ Ｐ ＜ ００５） 。结论　血清 Ｉ Ｌ     

微囊化胰岛与滋养细胞对鼠胰岛功能和活性的影响

目的 研究微囊化滋养细胞对胰岛功能和活性的影响.方法 对单独、分别和联合微囊组胰岛素含量及不同条件(5.6、16.7mmol/L葡萄糖、16.7mmol/L葡萄糖+10mmol/L茶碱)下胰岛素释放试验进行检测;监测3组(每组8例)小鼠平均空腹血糖(FIG),将胰岛的功能和活性进行对照.结果 体外,联合组胰岛素含量(288±25)、(292±29)、(203±21)mmol/L及在胰岛素释放试验中的反应性(306±25)、(335±26)、(378±32)mmol/L均好于另两组,差异有统计学意义(P<0.01);移植后,单独组(27.3 d)、分别组(30.5 d)维持FPG<6.0的时间明显少于联合组(66.8 d),联合组恢复高血糖状态的平均时间为91.7 d,差异有统计学意义(P<0.01).结论 滋养细胞与胰岛联合微囊化能够改善胰岛的存活状况,提高其生物活性,并维持其分泌功能.     

微囊化大鼠胰岛异种移植治疗小鼠实验性糖尿病的研究

目的 研究海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠包裹胰岛进行移植的效果。方法 将Ｗｉｓｔａｒ大鼠的胰腺先行胶原酶胰管内注射消化,然后分离,纯化,所得胰岛经培养后制成微囊包膜的胰岛,微囊直径为０．４￣０．５ｍｍ,每个微囊内包１个胰岛。     

诱导供者胰岛细胞高表达血红素加氧酶-1延长大鼠胰岛移植物的存活时间

目的 探讨钴原卟啉(CoPP)诱导大鼠胰岛细胞高表达血红素加氧酚1(HO-1)后,对延长胰岛移植物存活时间的作用.方法 (1)将分离和纯化的供者(BN大鼠)胰岛细胞分为CoPP诱导组和未诱导组.CoPP诱导组供者在分离胰岛细胞前3天和前1天腹腔注射2.5 mg/kg的CoPP,未诱导组不注射CoPP.诱导后,采用免疫荧光法及Western免疫印迹法检测两组胰岛细胞中HO-1的表达情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和葡萄糖刺激试验检测胰岛细胞的胰岛素释放水平.(2)Lewis大鼠经四氧嘧啶静脉注射后建立糖尿病模型,取10只成功建立糖尿病模型的大鼠作为胰岛细胞移植的受者,随机平均将受者分为实验组和对照组,分别移植经CoPP诱导和未经诱导的供者胰岛细胞.移植后,观察和比较两组受者胰岛移植物的存活时间和发生排斥反应后胰岛移植物的组织病理学变化.结果 CoPP诱导组胰岛细胞高表达HO-1,而未诱导组不表达HO-1;CoPP诱导组和未诱导组供者胰岛细胞胰岛素分泌量,在低糖刺激下分别为(15.65±0.89)mU/L和(12.28±0.89)mU/L(P>0.05),在高糖刺激下分别为(46.60±1.13)mU/L和(19.01±1.49)mU/L(P<0.05),刺激指数分别为2.98±0.10和1.55±0.01(P<0.05).实验组和对照组胰岛移植物平均存活时间分别为(12.20±5.67)d和(5.60±1.14)d(P<0.05);当受者发牛排斥反应时,对照组胰岛移植物周边可见明显的淋巴细胞、成纤维细胞以及单个核细胞浸润,而实验组细胞浸润的程度明显较轻.结论 CoPP可诱导大鼠胰岛细胞高表达HO-1,其对胰岛细胞有明显保护作用.移植高表达HO-1的胰岛细胞能显著延长胰岛移植物的存活时间.     

不同免疫抑制剂所致肾移植受者血脂水平变化的比较

目的 探讨不同免疫抑制剂对肾移植患者术后血脂变化的影响. 方法 肾移植术后患者283例,分别选择他克莫司(FK506),环孢素(CsA)和西罗莫司(SRL)免疫抑制剂治疗方案,比较不同免疫抑制剂患者移植前及术后不同时段血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)浓度差异. 结果 FK506组93例患者服药前与服药后96周血清TC和TG浓度分别为(4.9±1.1)、(1.45=0.8)mmol/L与(4.9±1.1)、(1.4±1.0)mmol/L,差异无统计学意义(P>0.05).CsA组106例患者分别为(4.8±1.0)、(1.6±0.8)mmol/L与(6.6±1.7)、(3.2±1.0)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.01).CsA组和SRL组患者血清TC和TG浓度一般于服药后12～24周时开始升高.51例服用12周CsA后改为FK506,患者改药前及改药后72周血清TC和TG浓度分别为(6.7±1.1)、(2.8±1.0)mmol/L与(4.7±1.7)、(1.5±1.1)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.01). 结论 脂质紊乱是肾移植患者非免疫因素引起慢性排斥反应和慢性移植物失功的重要原因,CsA和SRL是引起肾移植患者术后血脂增高的主要因素之一.对于高脂血症肾移植患者免疫抑制剂应用可优先考虑FK506,避免SRL、CsA合用而加剧血脂升高.     

海藻酸-壳聚糖-聚乙烯乙二醇微囊生物相容性的研究

目的比较海藻酸-壳聚糖-聚乙烯乙二醇微囊(ACP微囊)和海藻酸-聚赖氨酸-海藻酸微囊(APA微囊)的生物相容性。方法(1)两种微囊(50、100和200个)与健康人血清共浴,检测微囊对补体的激活程度。(2)1000个APA和ACP微囊分别植入Wistar大鼠的腹腔,4d和3周时统计取出的微囊数和微囊的纤维化率。(3)Wistar大鼠胰岛用ACP微囊和APA微囊包裹,分别贯续置于含3.3mmol/L和16.7mmol/L葡萄糖的Hank's溶液中培养,测定培养液中胰岛素的浓度。结果(1)ACP微囊组残余补体活性高于APA微囊组。(2)4d时,ACP和APA微囊的取出数分别是845.0±40.4和807.6±45.7(P>0.05),囊周纤维化率分别是16.40%和65.68%(P<0.05);3周时两种微囊的取出数分别为715.0±133.0和367.5±105.6(P<0.05),囊周纤维化率为27.8%和83.9%(P<0.05)。(3)在含3.3mmol/L葡萄糖的Hank's液中,未微囊胰岛组、APA和ACP微囊化胰岛组的胰岛素浓度分别是(123.48±4.70)mIU/L、(110.11±12.18)mIU/L和(110.90±11.95)mIU/L,当葡萄糖浓度为16.7mmol/L时,胰岛素浓度分别是(754.75±13.81)mIU/L、(689.30±27.71)mIU/L和(684.28±70.10)mIU/L。结论海藻酸-壳聚糖-聚乙烯乙二醇微囊的生物相容性要优于海藻酸-聚赖氨酸-海藻酸微囊,前者更适合应用于微囊化胰岛移植。     

Accelerated functional maturation of isolated neonatal porcine cell clusters: in vitro and in vivo results in NOD mice

Neonatal porcine cell clusters (NPCCs) might replace human for transplant in patients with type 1 diabetes mellitus (T1DM). However, these islets are not immediately functional, due to their incomplete maturation/ differentiation. We then have addressed: 1) to assess whether in vitro coculture of islets with homologous Sertoli cells (SC) would shorten NPCCs' functional time lag, by accelerating the beta-cell biological maturation/differentiation; 2) to evaluate metabolic outcome of the SC preincubated, and microencapsulated NPCCs, upon graft into spontaneously diabetic NOD mice. The islets, isolated from < 3 day piglets, were examined in terms of morphology/viability/function and final yield. SC effects on the islet maturation pathways, both in vitro and in vivo, upon microencapsulation in alginate/poly-L-ornithine, and intraperitoneal graft into spontaneously diabetic NOD mice were determined. Double fluorescence immunolabeling showed increase in beta-cell mass for SC+ neonatal porcine islets versus islets alone. In vitro insulin release in response to glucose, as well as mRNA insulin expression, were significantly higher for SC+ neonatal porcine islets compared with control, thereby confirming SC-induced increase in viable and functional beta-cell mass. Graft of microencapsulated SC+ neonatal porcine islets versus encapsulated islets alone resulted in significantly longer remission of hyperglycemia in NOD mice. We have preliminarily shown that the in vitro NPCCs' maturation time lag can dramatically be curtailed by coincubating these islets with SC. Graft of microencapsulated neonatal porcine islets, precultured in Sertoli cells, has been proven successful in correcting hyperglycemia in stringent animal model of spontaneous diabetes.     

Intraperitoneal alginate-encapsulated neonatal porcine islets in a placebo-controlled study with 16 diabetic cynomolgus primates

BACKGROUND: A nonhuman primate model of diabetes is valuable for assessing porcine pancreatic islet transplants that might have clinical benefits in humans. METHODS: Neonatal porcine islets, microencapsulated in alginate-polyornithine-alginate, were injected intraperitoneally (10,000 IEQs/kg islets) into eight adult male cynomolgus monkeys rendered diabetic with streptozotocin. Eight diabetic controls were given an equivalent dose of empty placebo capsules. All subjects received a repeat transplant 3 months after the first. RESULTS: The transplant was well tolerated and no adverse or hypoglycemic events occurred. There were two deaths from nontransplant treatment or diabetic complications unrelated to the transplants. After transplantation, the average insulin dose was reduced in the islet-treated group and increased in the control group. At 12 weeks after the first transplant there was a mean 36% (95% CI: 6% to 65%, P = .02) drop in daily insulin dose compared with the control group. After 24 weeks the difference increased to a mean of 43% (95% CI: 12% to 75%, P = .01) without significant differences in blood glucose values between the two groups. Individual responses after islet transplant varied and one monkey was weaned off insulin by 36 weeks. At terminal autopsy, organs appeared normal and there was no visible peritoneal reaction. No animal had polymerase chain reaction (PCR)-amplified signals of porcine endogenous retrovirus or exogenous virus infections in blood or tissues. CONCLUSION: Repeated intraperitoneal transplantation of microencapsulated neonatal porcine islets is a safe procedure in diabetic primates. It was shown to result in a significant reduction in insulin dose requirement in the majority of animals studied, whereas insulin requirement increased in controls.     

新生猪Sertoli细胞与大鼠胰岛细胞联合移植延长大鼠移植胰岛的存活时间

目的 探讨新生猪Sertoli细胞(NPSCs)与大鼠胰岛细胞联合移植对延长大鼠同种异体胰岛移植物存活时间的作用及其主要的机制.方法 将糖尿病Wistar大鼠随机分为3组.(1)单纯移植组(n=6):单纯移植1500个胰岛当量(IEQ)的SD大鼠胰岛细胞至糖尿病大鼠的左肾包膜下;(2)分侧移植组(n=4):将1500个IEQ的SD大鼠胰岛细胞移植到糖尿病大鼠的左肾包膜下,同时将1×10~7个NPSCs移植到糖尿病大鼠的右肾包膜下;(3)混合移植组(n=6):将1500个IEQ的SD大鼠胰岛细胞和1×10~7个NPSCs混合移植到糖尿病大鼠的左肾包膜下.移植后每天监测各组的血糖水平,以了解移植物的存活时间;移植后发生排斥反应时获取移植物标本,行HE和免疫组织化学染色,观察移植物中CD3~+T淋巴细胞浸润情况及细胞凋亡调控基因(Bcl-2)和血红素氧合酶1(HO-1)基因的表达水平.结果 单纯移植组、分侧移植组和混合移植组胰岛移植物存活时间分别为(5.7±1.0)d、(5.3±0.5)d和(16.3±1.4)d,混合移植组存活时间较其他两组显著延长(P<0.05).单纯移植组移植区可见大量淋巴细胞浸润,主要为CD3+T淋巴细胞;混合移植组移植区Bcl-2基因呈高表达;各组移植区HO-1基因均有表达,差异不明显.结论 NPSCs与大鼠胰岛细胞联合移植可以延长大鼠同种异体胰岛移植物的存活时间,其机制可能与NPSCs抑制移植物淋巴细胞浸润、促进Bcl-2基因高表达的局部免疫调节作用有关.     

磁共振成像监测大鼠肝脏内经超顺磁铁氧化物标记的胰岛移植物

目的 探讨磁共振成像(MRI)监测胰岛移植物的可行性.方法 在体外利用超顺磁铁氧化物(SPIO)标记大鼠胰岛,然后移植至用链佐星诱导的糖尿病大鼠肝脏内,同系移植标记组供、受者均为Wistar大鼠,同种移植标记组供者为Lewis大鼠,受者为Wistar大鼠.并设同系移植对照组(供、受者均为Wistar大鼠)和同种移植对照组(供者为Lewis大鼠,受者为Wistar大鼠),胰岛移植物未经SPIO标记.术后定期利用MRI监测肝内胰岛移植物,监测受者的血糖,并抽取动物,对其肝脏进行病理检查.结果 只有SPIO标记的胰岛移植物能被MRI检测到.经MRI检测,同系移植标记组术后第1、2、3周胰岛移植物的相对数量分别为(89.6±2.2)%、(87.5±14.4)%和(74.5±19.5)%,同种移植标记组术后第1、2、3周的相对数量分别为(43.2±17.2)%,(36.5±13.0)%和(26.5±17.4)%,组间相同时间点两两比较,差异有统计学意义(P<0.05).同系移植标记组血糖始终维持在正常水平,肝脏中能检测到胰岛素免疫组化和普鲁士蓝染色双阳性细胞;而同种移植标记组移植1周后的血糖水平超过16.8 mmol/L,肝脏中无法找到形态完整的胰岛.结论 MRI监测结果与血糖监测和病理检查结果一致,但它可直观、无创、连续地监测胰岛移植物在体内分布和存活情况.     

胃底贲门癌根治性近端胃切除术与全胃切除的临床对照研究及术后随访

目的对比研究全胃切除术和近端胃大部切除术治疗胃底贲门癌的临床疗效。方法回顾性分析64例贲门癌病人的临床资料,其中31例行全胃切除术(total gastrectomy,TG),33例行近端胃大部切除术(proximal gastrectomy,PG),比较其围手术期的情况及术后1年、3年生存率。结果 TG组手术时间为(201±36)min,PG组手术时间为(188±50)min,TG手术失血量为(170±18)ml;PG组失血量为(166±29)ml;TG组术后排气时间为(3.6±0.5)d,PG组通气时间为(3.5±0.6)d;围手术期TG组发生并发症6例,PG组发生8例。两组相比,差异均无统计学意义(P0.05)。TG组1年、3年生存率分别为85%、63%;PG组1年、3年生存率分别为82%、53%。两组1年生存率差异无统计学意义(P0.05),3年生存率TG组明显高于PG组(P0.05)。结论全胃切除术在围手术期间疗效和短期生存率与近端胃切除术差别不大,但其远期疗效较好。