冬虫夏草、虫草菌丝体及蛹虫草中核苷类成分的测定

目的:建立高效液相色谱法定量测定冬虫夏草、虫草菌丝体及蛹虫草中的腺嘌呤、腺苷、虫草素的含量,为冬虫夏草及其代用品的质量研究及开发利用提供科学依据。方法:采用资生堂MGⅡC18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速1.0 m L·min-1,外标法定量测定。结果:腺嘌呤、腺苷、虫草素分别在0.001239~0.3098 mg·m L-1、0.001241~0.3102 mg·m L-1、0.000813~0.2032 mg·m L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999);平均回收率(n=3)分别为97.9%、97.0%、95.8%。结论:本法简便准确,灵敏度高,通用性好,适用于冬虫夏草及其代用品中腺嘌呤、腺苷、虫草素的定量测定。     

HPLC测定凉山虫草中的腺苷

目的 测定凉山虫草中腺苷的含量.方法 采用HPLC法,Diamonsil C_(18)色谱柱为(200 mm×4.6 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液(pH6.5)-甲醇(80:20)为流动相,流速0.6 mL·min~(-1),柱温30℃;检测波长260 nm.结果 腺苷1～40μg·mL~(-1)与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9994);平均回收率为101.89%,RSD=3.11%(n=9).测定了10批样品中腺苷的含量,含量范围为0.0367～0.0590 mg·g~(-1).结论 所建方法准确、快速、简便,适用于凉山虫草中腺苷的测定.     

HPLC测定虫草培养基中腺苷和虫草素的含量

目的测定虫草培养基中腺苷和虫草素的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为W aters Nova-Pak C18柱(300 mm×3.9 mm,4μm);流动相为水-甲醇-醋酸(185:14:1);流速1.0 m l.m in-1,检测波长260 nm。结果腺苷的线性范围为2.5~50.0μg.m l-1(r=0.9999),回收率为104.5%,RSD=1.32%;虫草素的线性范围为6.5~130.0μg.m l-1(r=0.9999),回收率为106.1%,RSD=1.46%。结论该方法灵敏、快速、准确,适用于虫草培养基中腺苷和虫草素的检测。     

皖产古尼虫草中核苷和碱基成分的HPLC分析

目的:建立高效液相色谱法测定皖产古尼虫草中核苷和碱基成分(尿嘧啶、虫草素、腺苷、腺嘌呤、尿苷、次黄嘌呤、肌苷和鸟苷)的含量,并比较其与天然冬虫夏草核苷和碱基成分的异同。方法:采用Zorbax SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL.min-1,检测波长260 nm,柱温20℃。结果:尿嘧啶、虫草素、腺苷、腺嘌呤、尿苷、次黄嘌呤、肌苷和鸟苷进样浓度分别在0.38～191.08,0.37～188.48,0.37～189.72,0.37～190.92,0.37～188.55,0.50～168.55,0.37～190.36,0.24～125.00μg.mL-1范围内线性关系良好,R2为0.9998～0.9999;加样回收率分别为102.1%,102.1%,95.3%,96.2%,96.9%,94.1%,108.7%,101.8%,RSD未超过2.8%。皖产古尼虫草和冬虫夏草均含有核苷和碱基成分,其中:皖产古尼虫草含有较高的尿嘧啶、尿苷、腺苷,而冬虫夏草中肌苷含量较高;二者的次黄嘌呤、鸟苷、腺嘌呤的含量相近;在该检测限下,两者均未测得虫草素。结论:初步认...     

梯度洗脱RP-HPLC法同时测定蛹虫草子实体中腺苷和虫草素的含量

目的建立蛹虫草子实体中腺苷和虫草素的含量测定方法。方法样品用水超声提取,以梯度洗脱RP-HPLC法同时测定该两种成分。色谱条件为:Luna C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为260nm;流速为1mL.min-1;进样量为20μL。结果腺苷和虫草素之间能够达到很好的分离,供试品中其它杂质峰对两个主峰测定无干扰。腺苷的线性范围为10.76~107.60μg.mL-1,r=0.9997(n=6);平均回收率为99.16%,RSD=1.6%(n=5)。虫草素的线性范围为11.08~110.80μg.mL-1,r=0.9998(n=6);平均回收率为99.54%,RSD=1.3%(n=5)。腺苷对照品溶液和蛹虫草子实体供试品溶液在24h内基本稳定。结论本法简单快速,一次提取进样的可同时测定蛹虫草子实体中两种有效成分的含量,分析结果准确可靠,可作为蛹虫草子实体质量控制的分析方法。     

冬虫夏草和虫草菌丝体中腺苷成分的比较

目的 比较冬虫夏草与虫草菌丝体(以下简称菌丝体)中腺苷成分,为菌丝体在临床治疗中替代冬虫夏草提供实验依据.方法 采用薄层色谱法对腺苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(色谱柱为Hypersil ODS2 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为0.01 mmol·L-1磷酸二氢钾水溶液∶甲醇=17:3;流...     

反相高效液相色谱法同时测定冬虫夏草中腺苷、虫草素、肌苷含量方法的研究

目的建立同时测定冬虫夏草中腺苷、虫草素、肌苷的HPLC方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱：Agilent C18柱（250 nm×4.6 mm,5μm）,甲醇与水梯度洗脱,柱温：30℃,流速：1.0 mL.min-1,检测波长：260 nm。结果腺苷进样量在0.200 8~1.004μg与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=2 876X＋0.458 8,r=0.998 7,平均加样回收率为100.5%,RSD为2.33%;虫草素进样量在0.202 2~1.011μg与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=2 018X＋8.726,r=0.999 2,平均加样回收率为99.3%,RSD为2.03%;肌苷进样量在0.201 4~1.007μg与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=5 845X-5.685,r=0.999 4,平均加样回收率为100.2%,RSD为1.44%。结论本方法简便、准确,重复性好,可用于同时检测冬虫夏草中的腺苷、虫草素及肌苷的含量测定。     

HPLC法测定虫草被孢菌胶囊中腺苷的含量

目的 建立虫草被孢菌胶囊中腺苷含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法测定虫草被胞菌胶囊中腺苷的含量.采用Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:磷酸二氢钾溶液(0.05 mol·L-1)-甲醇(85∶15)为流动相,流速1.0 mL· min-1,检测波长为260hm.结果 腺苷在1.011～ 50.55μg·mL-1范围内线性关系良好,线性方程为:A=60901C-2347.7,r=1;平均回收率为100.49％(n=6,RSD=1.1％).结论 本法操作简便,不受杂质干扰,精密度好,结果准确可靠,可用于虫草被孢菌胶囊的质量控制.     

HPLC法测定北冬虫夏草和常见食用菌中腺苷和虫草素

目的 建立一种HPLC法快速测定北冬虫夏草和几种常见食用菌中腺苷和虫草素的方法.方法Welch Material XB-C18色谱柱(250mm×4.6mn,5μm),以水-甲醇(85∶15)为流动相,体积流量1.0mL/min,检测波长258 nm,柱温40℃.结果腺苷在0.023 2～0.464 0μg、虫草素在0...     

康力欣胶囊中冬虫夏草质量控制方法的研究

目的:为完善康力欣胶囊质量标准,增加该制剂中冬虫夏草的显微鉴别项、冬虫夏草主成分腺苷的含量测定.方法:显微观察冬虫夏草组织特征;以HPLC法测定腺苷的含量,色谱柱:Capcell C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相:磷酸盐缓冲液(pH6.5)[0.01mol·L-1磷酸二氢钠68.5mL与0.01mol·L-1磷酸氢二钠31.5mL,混合(pH6.5)]-醇(85:15),检测波长:260nm,柱温:30℃,流速:1.0mL·mim-1,进样:10μL.结果:冬虫夏草的主要显微特征体壁碎片、腹足趾碎片在制剂中易于检出;腺苷在8.06×10-3μg～16.1×10-2μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.2％,RSD为0.5％(n=6).结论:该分析方法科学可行,专属性、重复性、稳定性均符合要求,可作为康力欣胶囊中冬虫夏草的质量控制标准.     

HPLC法测定冬虫夏草中核苷类成分的含量

目的建立用HPLC法测定不同方法(熏干、新鲜和阴干)处理冬虫夏草样品中核苷类成分(腺苷、尿苷、肌苷、鸟苷和胸苷)含量的方法。方法样品用纯化水超声提取,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,柱温:30℃,流速:1.0mL·min-1。结果虫草中含有的5种核苷标准曲线的相关系数均在0.999 0以上,精密度检测RSD值为0.31%~1.95%(n=5),重复性检测RSD值为0.50%~2.56%(n=5),回收率在99.46%~100.11%之间。结论该方法灵敏、简便、快速、准确、重复性好,能有效测定虫草中核苷类成分的含量,可为评价虫草的质量提供依据。     

冬虫夏草、亚香棒虫草中多糖的含量测定

目的测定青岛产冬虫夏草与山西产亚香棒虫草中多糖的含量。方法硫酸-蒽酮比色法于波长(624±1)nm处测定吸收度。结果冬虫夏草多糖含量为3.5%（n=5）,平均加样回收率为99.2%,RSD=2.3%;亚香棒虫草多糖含量为0.7%(n=5),平均加样回收率为101.3%,RSD=1.7%。结论硫酸-蒽酮法测定虫草中多糖,方法操作简便,准确,稳定性好;亚香棒虫草中多糖含量低于冬虫夏草中多糖含量,从此方面讲亚香棒虫草不能代替冬虫夏草。     

天然与发酵培养冬虫夏草中核苷类成分的含量及其变化

目的 比较天然和人工冬虫夏草中核苷类成分的含量,并对其变化进行考察。方法 采用高效毛细管电泳法测定天然和人工冬虫夏草中核苷类成分的含量;考察湿热对冬虫夏草中核苷类成分含量的影响。结果 人工冬虫夏草的核苷含量明显高于天然冬虫夏草;新采集的天然冬虫夏草中核苷类物质含量极低,而采集日久者核苷类成分含量却较高;湿热可明显增加天然冬虫夏草中核苷类物质的含量,但对人工冬虫夏草中核苷类成分的含量无明显影响。结论 天然和人工冬虫夏草中核苷类成分存在一定差异,天然冬虫夏草中核苷类物质可能主要来源于大分子核苷(酸)的降解,腺苷在天然冬虫夏草质量控制中的应用价值尚值得进一步研究。     

高效液相色谱法测定蛹虫草人工固体培养物中核苷类化合物的含量

目的建立高效液相色谱法测定蛹虫草人工固体培养菌皮中核苷类化合物的含量。方法采用pH 6 .5磷酸盐缓冲液 甲醇 (85∶15 )为流动相 ,流速为 1.0ml/min ,检测波长为 2 6 0nm。结果蛹虫草人工固体培养物菌皮中主要成分虫草素在 4 .0 3～ 10 0 .8μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =39.5 8C - 0 .0 342 ;尿苷在 3.6 8～ 92 .0μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =2 4 .32 9C - 0 .0 0 2 7;腺苷在 3.84～ 96 .11μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =18.0 12C - 0 .0 2 35。结论人工固体培养菌皮中核苷类成分的含量随培养时间发生一定的变化 ,高效液相色谱法可用于蛹虫草人工培养物中核苷类化合物的测定 ,为控制其质量提供了简便易行的方法。     

冬虫夏草多糖脂质体口服液的质量标准

目的确定冬虫夏草多糖脂质体口服液质量标准。方法用蒽酮 硫酸比色法测定冬虫夏草多糖浓度;用透析法测定其包封率。结果平均加样回收率为98 73% ,RSD为1 4 8% ;冬虫夏草多糖浓度为6 4 4 8×10 -2 mol·L-1,包封率为31 77%。结论建立的方法可控制冬虫夏草多糖脂质体口服液的质量     

Analysis of Cordyceps by multi-column liquid chromatography

Cordyceps is a famous traditional Chinese medicine (TCM) that has been used in China for hundreds of years. In the present study a multi-column liquid chromatography (MC-LC) system was developed for the qualitative analysis of macromolecules and micromolecules in Cordyceps. The MC-LC system includes a size exclusion pre-column, a size exclusion column (SEC) and a reversed phase column (RP) which were controlled by column-switching valves. The sample was separated by the size exclusion pre-column into two fractions (macromolecules and micromolecules). These fractions were further separated on SEC and RP columns, respectively. A diode array detector (DAD) and a mass spectrometer (MS) were used to detect the components. This MC-LC method was utilized for analysis of Cordyceps samples. Two macromolecular peaks and 15 micromolecular peaks were found in Cordyceps, and 11 of the micromolecular peaks were identified as adenosine-5′-monophosphate (AMP), phenylalanine, uridine, hypoxanthine, inosine, guanine, guanosine, deoxyadenosine-5′-monophosphate (dAMP), adenosine, adenine and cordycepin (or its isomer). This method is useful for quality control of Cordyceps.     

RP-HPLC测定天然与人工冬虫夏草中游离麦角甾醇的含量

目的：比较天然与人工冬虫牙草中游离麦角甾醇的含量,探讨麦角甾醇作为冬虫夏草质控指标的可行性。方法：采用HP1100高效液相色谱仪,Allsphere C18色谱柱,甲醇－水（95∶5）为流动相,检测波长为275nm,流速1ml/min。结果：不同来源的天然冬虫夏草游离麦角甾醇含量差异显著,但均明显高于人工虫草菌丝。结论：麦象甾醇可作为冬虫夏草质控指标之一。     

人工北虫草指纹图谱研究

目的:建立人工北虫草TLC和HPLC法指纹图谱。方法:TLC法以三氯甲烷-乙酸乙酯-异丙醇-水(5∶2∶6∶0.6)为展开剂,磷酸氢二钠制备的GF_(254)板展开;HPLC法以乙腈-水梯度洗脱,检测波长260nm。结果:HPLC法精密度、重复性、稳定性试验中共有峰面积、保留时间的RSD均小于3.0%;不同产地的人工北虫草相似度大于0.9。结论:该方法简便可靠,可作为控制人工北虫草质量的依据。