立体定向杏仁核海马毁损治疗颞叶癫癎

目的 探讨立体定向杏仁核海马毁损治疗颗叶癫(癎)的原理、方法 和疗效.方法 患者头部安装MD-2000立体定向框架,使其平行于颞角长轴.针对12例颗叶顽固性癫(癎)患者,应用头部MRI扫描定位.局麻下深部电极行杏仁核及海马脑电监测和射频毁损术.结果 射频毁损前12例患者深部电极均记录到杏仁核和海马区棘波、尖波或多棘波,术后显示(疴)样放电消失.术后随访9～18个月,癫(癎)发作完全控制者58.3%(7/12),显著改善33.3%(4/12).结论 立体定向杏仁核海马毁损术治疗颞叶顽固性癫(癎)是一种安全有效的微创治疗方法 ,值得临床推广.     

脑内局部给药建立颞叶癫疒间模型的研究

目的研究脑内局部给药建立颞叶癫疒间(EP)模型的方法。方法通过立体定向技术向大鼠海马局部注射海人酸(KA)4μg/kg,观察注射后大鼠的行为学、脑电图和病理学改变。结果KA注入海马后大鼠表现为凝视、湿狗样抖动、咀嚼运动、点头、肢体阵挛等;随后出现阵发性旋转、向上窜跳、四肢抽搐,反复间歇性发作,约10h后发作停止。以后每周约自发性发作1～3次,主要为Ⅱ～Ⅳ级发作。EEG记录到大脑皮质丛集放电,棘波或尖波持续发放。光镜下KA致疒间鼠海马结构的CA1区和CA3区锥体细胞变性及坏死,实验侧CA3区神经元丢失尤为明显。结论大鼠脑内局部注射KA可成功建立颞叶EP模型,其行为症状、电生理及海马病理改变类似人颞叶EP,是很好的研究颞叶EP的工具。     

海人酸致(癎)大鼠海马结构GABAB受体亚单位表达的研究

目的:探讨海人酸诱导大鼠颞叶癫(癎)(EP)发作后2种Y-氨基丁酸(GABA)受体亚单位GABAnR亚单位1a(GBRla)和GABABR亚单位2(GBR2)在EP发生、发展中的作用.方法:运用原位杂交及免疫组化法,检测EP发作后GABABR亚单位mRNA及蛋白在海马的表达.结果:致痫早期Cal和CA3区2种亚单位mRNA表达持续低下后逐渐增加,DG区则暂时性下降后很快回升;而免疫反应早期却未见明显改变,随后Cal和CA3区表达处于低水平,DG区和颞叶皮质表达下降后很快恢复.结论:致(癎)后2种GABAB受体亚单位基因和蛋白表达上调为颞叶EP的内源性自我保护机制.     

海人酸诱导颞叶癫癎大鼠海马中GAP-43和NCAM的表达变化以及托吡酯的干预作用

目的研究海人酸（KA）对大鼠海马中生长相关蛋白-43（GAP-43）和神经细胞粘附分子（NCAM）表达的影响，以及托吡酯（TPM）对其的干预作用。方法将48只大鼠随机分成生理盐水（NS）组、4mgKA组、10mgKA组和10mgKA＋TPM组（n=12），建立KA诱导颞叶癫癎大鼠模型和TPM干预模型，观察大鼠行为学改变，并通过RT-PCR和WesternBlot的方法测定各组大鼠海马中GAP-43及NCAM的mRNA和蛋白表达水平。结果大鼠建模成功；4mgKA组、10mgKA组大鼠GAP-43及NCAM的mRNA和蛋白表达水平明显高于NS组（P〈0．01），且10mgKA组高于4nagKA组（P〈0．01）；10mgKA＋TPM组大鼠的GAP-43和NCAM表达明显低于10mgKA组（P〈0．01）。结论KA能够诱导致癎大鼠海马GAP-43和NCAM表达上调，且与KA剂量有关，而TPM能够抑制KA诱导的GAP-43和NCAM的表达上调。     

海人酸大鼠癫痫模型的建立

目的 应用海人酸注射建立海人酸大鼠癫痫模型,评价其生物学特性.方法 通过立体定位手术,大鼠海马组织微量注射海人酸,术后观察大鼠行为学表现、电生理改变及海马超微形态结构变化.结果 海人酸注射后实验大鼠出现典型的颞叶癫痫发作过程,表现为湿狗样抖动、前肢抽搐、跌倒以及全身强直-阵挛性发作等,皮层脑电图出现多种形式的痫性放电,单神经元放电细胞外记录显示癫痫模型大鼠放电杂乱,形态不规整.电镜显示神经细胞固缩,星形细胞突起肿胀,神经突触水肿,可见兴奋性递质小泡,线粒体水肿崩解,嵴排列紊乱,血管内皮细胞水肿,血脑屏障破坏.结论 大鼠立体定向海人酸药物注射是一种较理想的癫痫模型.     

青霉素与海人酸癫痫模型的比较

目的 通过用青霉素、海人酸2种药物制作癫痫模型,探讨2种致痫剂的作用特点及应用条件.方法 取健康雄性昆明小鼠90只,分为3组,对照组(n=10)、青霉素致痫组(n=40)和海人酸致痫组(n=40),青霉素致痫组腹腔注射青霉素7×106 U/kg,海人酸致痫组腹腔注射海人酸10mg/kg,生理盐水组腹腔注射生理盐水35 μL/g.注射后连续5 h观察小鼠是否有痫性发作并分级,进行脑电图描记.结果 空白对照组无痫性发作,两模型组均出现痫性发作,海人酸致痫组与青霉素致痫组按Racine分级0～Ⅴ级各级之间无明显差异(P＞0.05),小鼠出现癫痫的潜伏期海人酸致痫组比青霉素致痫组短(P<0.05),而且海人酸致痫组比青霉素致痫组死亡率低(P<0.05).结论 腹腔注射海人酸所致的动物模型具有与人类颞叶癫痫极为相似的癫痫发作行为学、脑电图特征,是理想的模拟人类颞叶癫痫的动物模型.     

构建海人酸急性致痫小鼠模型

目的 建立海人酸诱导的小鼠急性癫痫模型,并探讨其特点.方法 实验取健康雄性昆明小鼠99只,随机分为生理盐水组(n=33)和致痫组(n=66),痫组腹腔注射海人酸10mg/kg,生理盐水组腹腔注射生理盐水35μl/g.注射后连续5h观察小鼠是否有痫性发作并分级.当小鼠持续痫性发作达1h时给予地西泮4mg/kg腹腔注射,对照组3只和致痫组9只同时描记脑电图,并取脑切片后苏木精-伊红染色法观察海马各区病理学改变.结果 ①行为学表现,模型组小鼠注射海人酸后可出现湿狗样抖动、头面部肌肉阵挛、肢体阵挛及全面强直阵挛发作.生理盐水对照组未见癫痫发作.②脑电图表现,癫痫持续状态小鼠表现为持续性节律性棘波、棘慢波或高波幅慢波.③病理学研究,双侧海马均可出现神经元变性,以CA1和门区为主.结论 腹腔注射海人酸致痫小鼠急性模型同相应的大鼠模型一样,具有制作简便、痫性发作潜伏期短、致痫率高等特点,其所产生的急性癫痫模型具有与人类颞叶癫痫相似的行为、脑电图与神经病理改变.     

耐药性颞叶癫癎的研究进展

1耐药性癫?的概述
　　癫?是多种原因所致的慢性脑部疾病,其特征为脑部神经元异常过度放电引发身体某一部分或整个肢体非自主性抽搐,有时伴有意识丧失和尿便失禁。世界卫生组织的数据表明,全球约有5000万癫?患者［1］,而我国就有癫?患者900万人,且每年新增癫?患者40万人［2］。癫?在卫生保健需求、过早死亡以及丧失工作生产力方面给社会经济带来严重的负担。     

癫癎实验动物模型

本文回顾了癫癎动物模型的要求和标准、不同模型的优缺点及其主要应用.     

海马干细胞移植对癫癎鼠脑电影响的初步研究

目的研究神经干细胞移植对癫癎鼠脑电的影响,为神经干细胞移植治疗癫癎提供理论依据.方法分离、培养新生鼠海马干细胞,将其移植至海人酸(KA)所致癫癎模型鼠的右侧海马,比较移植组及未移植组大鼠在移植前和移植后1周、4周、8周及24周海马及杏仁核的脑电变化.结果海马干细胞移植可减少癫癎动物脑电的痫性发放,并降低癫癎波幅约50%.结论神经干细胞移植对于KA诱发癫癎鼠的癫癎具有一定的抑制作用,但其具体作用机制还有待于进一步的研究.     

大鼠颞叶癫痫模型的建立及评价

目的 探讨海马局部给药建立颞叶癫痫模型方法及其行为、形态学、脑电和影像学改变。方法 通过立体定向术向大鼠海马局部注射海人酸fKA）建立颞叶癫痫模型。观察其行为学、形态学、脑电和影像学改变情况。结果 KA注入海马后模型大鼠麻醉清醒后有典型癫痫发作表现：凝视、湿狗样抖动、口的咀嚼运动、点头、肢体阵挛等，随后表现为阵发性旋转，并身体立起、向上窜跳、跌倒、四肢抽搐，约8h后发作停止，逐渐恢复到正常大鼠状态。以后每周发作1-2次，主要为Ⅳ～Ⅴ级。同时有额叶皮层和海马的癫痫放电脑电图及病理、影像学表现。结论 大鼠脑内局部注入KA后癫痫发作明显，其行为表现、海马病理改变、脑电及影像改变类似人类颞叶癫痫．可作为较好的研究颞叶癫痫的工具。     

立体定向技术建立大鼠颞叶癫痫模型

目的 探讨立体定向技术在建立大鼠颞叶癫痫模型的实用性及模型长久癫痫敏感性的病理学基础。方法 按公斤体重计算的红藻氨酸剂量，应用立体定向手术一次性注入大鼠的海马组织，于手术后不同的时间段观察大鼠的癫痫发作情况和海马组织的形态学变化。结果 手术后的大鼠在经历“湿狗样抖动”、口唇和头的自运动症、前肢抽搐、后肢抽搐后，进入强直一阵挛性全身发作。以后，每周均有自行发作，发作表现与人类颞叶癫痫发作基本一致。海马神经元的缺失、胶质细胞增生是模型长期癫痫敏感性的基础。结论 立体定向手术建立的大鼠颞叶癫痫模型发作形式、病理学基础与人类的颞叶癫痫基本一致，并且具有长期的癫痫敏感性。同时，应用立体定向技术局部注药，用药量较系统给药明显减少，耗资大大降低，是临床科研中既可靠又经济实用的方法。     

海人酸颞叶癫痫模型及丙戊酸钠治疗作用的观察

目的 建立海人酸癫痫动物模型并给予丙戊酸钠治疗，探讨其治疗作用。方法 42只Wistar大鼠置于立体定向仪上，于右侧海马注射海人酸制备大鼠癫痫模型。根据癫痫发作病程，随机分为急性期、静止期、慢性期等实验组；另设丙戊酸钠治疗组，分别于海人酸注射后24h和自发性癫痫出现后给予丙戊酸钠治疗。在实验过程中以视频录像监测大鼠症状的改变，深部脑电图观察癫痫的病理过程及丙戊酸钠治疗前后脑电活动的改变。组织切片经Nissl和Timm染色观察海马神经元数目、苔藓状纤维发芽。结果 (1)电生理学改变：海人酸注射后数分钟大鼠即出现癫痫发作并呈现急性期、静止期和慢性期等病变过程。脑电图于急性期和慢性期均表现为典型的癫痫发作电活动及发作间期表现。(2)病理学改变：海马神经元死亡主要出现在急性期，以实验侧CA3、CA4区最为明显，齿状回无明显神经元缺失。Timm染色显示从静止期开始出现苔藓状纤维发芽并进行性增加。(3)丙戊酸钠治疗前后症状的改变：早期应用丙戊酸钠治疗可抑制癫痫发作及其症状的发展；出现自发性癫痫后丙戊酸钠的治疗效果欠佳，停药后症状再次出现。结论 海人酸模型是模拟人类颞叶癫痫较为理想的动物模型。早期丙戊酸钠治疗效果较好，否则不能有效控制癫痫。     

立体定向方法建立大鼠红藻氨酸颞叶癫疒间模型及其脑电活动的实验研究

目的探讨采用立体定向技术建立大鼠颞叶癫癎模型的方法,并对发作后的脑电活动进行研究。方法用立体定向方法在20只SD大鼠的右侧海马注射红藻氨酸,用视频监测大鼠的行为学变化;在双侧海马、额叶皮质、杏仁核置入深部电极,对大鼠脑电活动进行长期记录。结果根据Racine行为学分级法,Ⅴ级6只,Ⅳ级10只,Ⅲ级3只,Ⅱ级1只;深部电极描记出起源于海马并向额叶皮质、杏仁核等传导癫疒间样波;病理变化提示长期癫疒间发作会导致海马锥体细胞逐渐缺失、坏死。结论用立体定向技术建立大鼠红藻氨酸颞叶癫疒间模型是一种可靠、经济和实用的方法。起源于海马并向额叶皮质、杏仁核等传导的癫疒间样波是颞叶癫疒间模型的神经电生理基础。     

Antiepileptogenic effects of trilostane in the kainic acid model of temporal lobe epilepsy

Objective

Epileptogenesis after status epilepticus (SE) has a faster onset in rats treated to reduce brain levels of the anticonvulsant neurosteroid allopregnanolone with the 5α-reductase inhibitor finasteride; however, it still has to be evaluated whether treatments aimed at increasing allopregnanolone levels could result in the opposite effect of delaying epileptogenesis. This possibility could be tested using the peripherally active inhibitor of 3β-hydroxysteroid dehydrogenase/Δ^5-4 isomerase trilostane, which has been shown repeatedly to increase allopregnanolone levels in the brain.

Methods

Trilostane (50 mg/kg) was administered subcutaneously once daily for up to six consecutive days, starting 10 min after intraperitoneal administration of kainic acid (15 mg/kg). Seizures were evaluated by video-electrocorticographic recordings for 70 days maximum, and endogenous neurosteroid levels were assessed by liquid chromatography–electrospray tandem mass spectrometry. Immunohistochemical staining was performed to evaluate the presence of brain lesions.

Results

Trilostane did not alter the latency of kainic acid-induced SE onset or its overall duration. When compared to the vehicle-treated group, rats receiving six daily trilostane injections presented a remarkable delay of the first spontaneous electrocorticographic seizure and subsequent tonic–clonic spontaneous recurrent seizures (SRSs). Conversely, rats treated with only the first trilostane injection during SE did not differ from vehicle-treated rats in developing the SRSs. Notably, trilostane did not modify neuronal cell densities or the overall damage in the hippocampus. In comparison to the vehicle group, repeated administration of trilostane significantly decreased the activated microglia morphology in the subiculum. As expected, allopregnanolone and other neurosteroid levels were remarkably increased in the hippocampus and neocortex of rats treated for 6 days with trilostane, but pregnanolone was barely detectable. Neurosteroids returned to basal levels after a week of trilostane washout.

Significance

Overall, these results suggest that trilostane led to a remarkable increase in allopregnanolone brain levels, which was associated with protracted effects on epileptogenesis.     

恒河猴颞叶癫痫模型的建立

目的 应用立体定向方法单侧海马内注射海人酸,建立恒河猴颞叶癫痫模型,并评价其生物学特性.方法 通过立体定向手术,恒河猴右侧海马注射海人酸,观察恒河猴行为学、神经电生理、影像学、组织病理及超微结构改变.结果 海人酸注射后恒河猴出现典型的颞叶癫痫发作表现,脑电图表现为棘波、慢波、棘慢波、尖波发放.MRI、MRS可见海马硬化的表现,组织学标本显示颞角扩大、海马硬化,HE染色可见神经元缺失、胶质细胞增生、瘢痕萎缩,电镜显示神经元固缩、血脑屏障破坏、星形细胞肿胀、细胞器受损.结论 立体定向单侧注入海人酸后恒河猴癫痫发作明显,其行为学、神经电生理、影像学、神经病理改变符合颞叶内侧型癫痫表现,可作为癫痫模型.     

红藻氨酸致颞叶癫痫大鼠海马内Semaphorin3C、Semaphorin3F基因表达的研究

目的研究神经轴索导向分子Sem aphorin3C(Sem a3C),Sem aphorin3F(Sem a3F)mRNA对颞叶癫痫(TLE)大鼠海马神经轴索环路重建的调控作用。方法采用侧脑室内注射红藻氨酸(KA)制作TLE大鼠模型,用N issl染色及原位杂交的方法,分别检测致痫后1d、1w、2w、3w、4w大鼠海马的齿状回(DG),CA1区、CA3区神经细胞丢失程度以及Sem a3C、Sem a3F mRNA的表达。结果KA致痫后1d始出现神经元丢失,至4w神经元丢失明显增多。KA致痫后1w,Sem a3C、Sem a3F mRNA在海马的CA1区、Sem a3F mRNA在海马的CA3区表达明显下降,持续至3w(P<0.01),4w时恢复至正常(P>0.05);Sem a3C、Sem a3F mRNA在DG的表达,Sem a3C在CA3区的表达,实验组与对照组均无明显差别(P>0.05)。结论KA致痫后海马CA1区神经元下调Sem a3C、Sem a3F mRNA的表达,CA3区神经元下调Sem a3F mRNA的表达,可能促进TLE大鼠海马神经轴索环路重建。     

SD大鼠红藻氨酸诱导性癫痫发作时Nd活性的组织学观察

本研究根据形态学观察对一氧化氮（NO）在癫病发作中的意义进行探讨。方法：选用红藻氨酸（KA）诱导的复杂部分性癫痫模型。SD大鼠20只随机分为KA30、60、90、200min组及对照组。脑组织进行还原型辅酶II依赖性黄逸酶（NADPHd，Nd）染色。结果：①KA建模鼠全部出现点头、肢体抽搐、湿水样摇动、姿式失衡及全身强直一阵挛性惊厥；②在不同的脑区和同一脑区不同时点Nd阳性神经元的分布均不同；KA建模组Nd的表达比对照级低，在CA3区KA30min组Nd的表达比其它时点KA组低；在KA90min组大脑皮质Nd的表达与对照组相比无显著差异。结论：①Nd免疫阳性产物在不同的脑区分布不同。②一氧化氮合酶─—氧化氮（NOS－NO）途径可能参与癫痫的起动与传播，在癫痫发作的不同阶段，内源性NO的作用依赖于NO具体的氧化还原状态，且与其被释放的部位、时间、程度有关．在早期，NO起负反馈调节作用，即早期抗发作。     

A new potential AED, carisbamate, substantially reduces spontaneous motor seizures in rats with kainate-induced epilepsy

Purpose: Animal models with spontaneous epileptic seizures may be useful in the discovery of new antiepileptic drugs (AEDs). The purpose of the present study was to evaluate the efficacy of carisbamate on spontaneous motor seizures in rats with kainate‐induced epilepsy. Methods: Repeated, low‐dose (5 mg/kg), intraperitoneal injections of kainate were administered every hour until each male Sprague‐Dawley rat had experienced convulsive status epilepticus for at least 3 h. Five 1‐month trials (n = 8–10 rats) assessed the effects of 0.3, 1, 3, 10, and 30 mg/kg carisbamate on spontaneous seizures. Each trial involved six AED‐versus‐vehicle tests comprised of carisbamate or 10% solutol‐HS‐15 treatments administered as intraperitoneal injections on alternate days with a recovery day between each treatment day. Results : Carisbamate significantly reduced motor seizure frequency at doses of 10 and 30 mg/kg, and caused complete seizure cessation during the 6‐h postdrug epoch in seven of the eight animals at 30 mg/kg. The effects of carisbamate (0.3–30 mg/kg) on spontaneous motor seizures appeared dose dependent. Conclusions: These data support the hypothesis that a repeated‐measures, crossover protocol in animal models with spontaneous seizures is an effective method for testing AEDs. Carisbamate reduced the frequency of spontaneous motor seizures in a dose‐dependent manner, and was more effective than topiramate at reducing seizures in rats with kainate‐induced epilepsy.