TRPM1在舌癌组织及Tca8113细胞中表达的研究

目的 观察瞬间受体势M亚基1(Transient Receptor Potential Melastatin-1,TRPM1)在舌癌组织及舌癌Tca8113细胞系中的表达情况。方法 选取25例舌癌组织作为实验组,15例正常舌组织作为对照组,应用免疫组化及Western-blot的方法检测TRPM1蛋白在舌癌组织及Tca8113细胞与正常舌组织中的表达;应用RT-PCR方法检测TRPM1 mRNA在舌癌细胞与正常舌组织中的表达。结果 免疫组化实验结果显示,23/25例舌癌组织中TRPM1呈强阳性表达,2/25例呈阴性表达;12/15例正常舌体组织中TRPM1呈阴性表达,3/15例呈弱阳性表达。TRPM1在舌癌与正常舌组织中的表达有显著性差异(P<0.05);Western-blot实验显示舌癌组织及舌癌细胞系Tca8113细胞中TRPM1蛋白的表达水平高于其在正常舌组织的表达;RT-PCR实验结果也证实TRPM1 mRNA在Tca8113细胞中的表达高于正常舌组织。结论 TRPM1与舌癌的发生可能存在相关性。     

VEGF-C及受体在舌鳞癌中的表达及临床意义

目的：研究舌癌组织中血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C VEGF-C)及其受体VEGFR-3(flt-4)的表达情况，分析其在肿瘤淋巴转移中的作用。方法：采用RT—PCR法分析22例新鲜舌癌标本VEGF-C/flt-4mRNA的表达情况，免疫组化SP法分析55例石蜡标本中VEGF—C／flt—4蛋白表达情况，统计分析其与临床病理特点之间的关系。结果：VEGF—CmRNA表达阳性率为72.7％(16/22)，VEGF—C和flt—4mRNA的表达高度一致(P＜0．01)。VEGF—C蛋白阳性率为52.7％(29／55)，明显高于正常组织和良性病变。与肿瘤病理分级、肿瘤颈淋巴结转移显著相关；flt—4的阳性率为41％(23／55)，和VEGF—C阳性表达高度一致；VEGF—C阳性组5年生存率显著低于VEGF—C阴性组。结论：VEGF—C／flt4在舌癌表达高于正常组织和良性病变；与肿瘤的预后密切相关。在肿瘤淋巴转移中可能丘重要作用。     

高迁移率族蛋白在舌癌组织中的表达及意义

目的:探讨舌癌组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达情况。方法:采用免疫组化SABC方法和高分辨率溶解法,检测43例舌癌组织、11例正常舌组织中HMGB1蛋白及mRNA的表达情况,分析其与肿瘤大小、分化程度、转移和复发的关系。结果:HMGB1蛋白在舌癌组织中表达强阳性率为72.1%,弱阳性率为27.9%,在正常舌组织中弱阳性表达(P<0.01),HMGB1mRNA在舌癌组织的定量明显高于正常组织(P<0.05);HMGB1表达强度与舌癌分化程度无关(P>0.05),与病灶大小、淋巴结转移、临床分期、复发相关(P<0.05)。结论:HMGB1在舌癌组织中呈强阳性表达,可作为舌癌复发、转移及预后的判定指标之一。     

SMAD4在舌鳞状细胞癌中的表达及意义

目的检测SMAD4在舌鳞状细胞癌中的表达水平,并分析其与肿瘤细胞分化程度及淋巴结转移之间的相关性。方法收集正常口腔黏膜组织石蜡标本8例、舌鳞癌组织石蜡标本38例。采用免疫组化方法检测正常组织及肿瘤组织中SMAD4表达水平。结果 SMAD4蛋白在舌鳞癌组织中的表达显著低于正常舌黏膜组织(P<0.05)。SMAD4蛋白在癌细胞中的整体表达水平在高分化鳞癌与中低分化鳞癌组中无明显统计学差异(P>0.05),但其核表达量在高分化鳞癌组显著高于中低分化组(P<0.05)。伴淋巴结转移鳞癌组中SMAD4在细胞核内的表达量低于不伴淋巴结转移鳞癌组(P<0.05)。结论SMAD4在舌鳞状细胞癌中的表达水平,尤其是核表达水平与舌鳞癌的细胞分化程度及淋巴结转移相关。     

CD44V6、MMP-9在舌癌中的表达及其意义

目的：观察CD44V6和MMP-9在舌癌（tongue squarnous cell carcinomas,TSCC）组织中的表达及其与临床病理因素和预后的关系。方法：采用免疫组织化学PV9000法检测60例舌癌、21例转移淋巴结及15例癌旁正常组织中CD44V6和MMP-9的表达。结果：CD44V6在舌癌中的阳性表达率略低于癌旁组织,无显著意义;MMP-9在舌癌中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织（P〈0.05）,并与舌癌的组织学分级呈正相关（P〈0.05）;在有颈淋巴结转移组中的舌癌组织CD44V6和MMP-9阳性表达率明显高于无颈淋巴结转移组（P〈0.05）;舌癌中CD44V6和MMP-9表达强阳性者有4例复发（5年内）。结论：CD44V6和MMP-9在舌癌组织中的表达与颈淋巴结转移密切相关,可作为评价舌癌颈淋巴结转移和预后的生物学指标。     

趋化因子受体CXCR4在口腔鳞癌中的表达和临床意义

目的研究口腔鳞癌中趋化因子受体CXCR4蛋白及mRNA的表达情况,探讨其与口腔鳞癌临床病理特点及颈淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化SABC法和原位杂交法检测64例口腔鳞癌中CXCR4蛋白的表达及在CXCR4阳性表达的口腔鳞癌中CXCR4 mRNA的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果CXCR4 mRNA和CXCR4蛋白在口腔鳞癌中呈阳性表达,CXCR4蛋白的阳性表达率为62.5%。同时,CXCR4在伴有淋巴结转移病例中的表达显著高于无淋巴结转移者（P=0.014 4）。此外,CXCR4的表达与肿瘤的分化程度（P=0.004 2）、TNM分期（P=0.001 2）、侵袭程度（P=0.002 3）密切相关,而与年龄、性别和肿瘤大小无关。结论CXCR4在口腔鳞癌中有阳性表达,其表达水平与口腔鳞癌侵袭发展和淋巴结转移有关。CXCR4有可能成为口腔鳞癌治疗的新靶点。     

p53上调凋亡调控因子在舌鳞癌中的表达及临床意义

目的：观察p53上调凋亡调控因子(p53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)在舌鳞癌组织、舌癌旁组织及正常舌黏膜组织中的表达,探讨其在舌鳞癌发生、发展中的作用及临床意义。方法：通过免疫组化检测30例舌鳞癌组织、13例舌癌旁组织及10例正常舌黏膜组织中PUMA的表达水平,分析PUMA在舌鳞癌中的表达与临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移之间的关系。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果：PUMA在舌鳞癌组织、舌癌旁组织及正常舌黏膜组织中的阳性表达率分别为36.67%、53.85%和80.00%,3组之间PUMA表达均有显著差异(P<0.05)。淋巴结转移组中PUMA的阳性表达率为18.18%,而无淋巴结转移组中PUMA的阳性表达率为47.37%,2组差异显著(P<0.05)。而在不同年龄、性别、临床与病理分期、肿瘤分化程度的舌鳞癌组织中,PUMA的表达差异无显著性(P>0.05)。结论：PUMA蛋白表达降低在舌鳞癌的发生、发展及转移过程中具有重要作用,对判断舌鳞癌的预后及治疗有一定的指导意义。     

VEGF-C和受体Flt-4mRNA在舌鳞癌中的表达及临床意义

目的　研究舌鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子C(vascularendothelialgrowthfactorC ,VEGF C)及其受体VEGFR 3(flt 4 )的表达情况 ,分析其在淋巴转移中的作用。方法　采用RT PCR法分析 2 2例新鲜标本VEGF C/flt 4mRNA的表达情况 ,并统计分析其与各临床病理特点之间的关系。结果　 2 2例中 1 6例VEGF CmRNA表达阳性 ,其中 1 2例flt 4mRNA阳性 ,VEGF C和flt 4mRNA的表达高度一致 (P <0 .0 1 )。舌鳞癌VEGF C明显高于正常组织和良性病变 ;和肿瘤病理分级、肿瘤颈淋巴结转移显著相关 ,和肿瘤发病年龄、性别以及肿瘤T分期无相关性。结论　VEGF C/flt4在舌癌表达高于正常组织和良性病变 ;与肿瘤的预后密切相关。在肿瘤淋巴转移中起重要作用     

Notch信号通路分子在舌鳞癌中的表达及意义

目的 明确Notch信号通路受体Notch1、Notch3及其配体Jagged1、Jagged2在舌鳞癌中的表达及其意义。方法 通过逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学和Western blot检测74例舌癌患者的组织标本（舌癌及癌旁组织）和人舌癌Cal-27细胞株中Notch1、Notch3、Jagged1和Jagged2 mRNA与蛋白质的表达水平,分析其与细胞增殖及临床病理的关系。结果 舌癌、癌旁组织及Cal-27细胞株中均检测到Notch1、Notch3、Jagged1、Jagged2 mRNA和蛋白质的表达。Notch1和Notch3蛋白在舌癌中的表达率高于癌旁组织,而Jagged1和Jagged2蛋白在舌癌和癌旁组织中的表达率无明显差异。Notch1和Notch3蛋白的表达和舌癌的临床分期具有相关性。4种信号蛋白的表达与患者的年龄、性别和临床病理分级无相关性。Notch3和Jagged2的表达具有相关性。Notch1蛋白在淋巴结转移阳性病例中的表达率高于转移阴性的病例,Jagged1在转移阳性病例的表达分级高于阴性病例。结论 Notch信号通路分子在舌鳞癌中表达活跃,与舌癌的发生发展有重要的相关性。     

舌鳞癌组织及转移淋巴结中MT和Cu/Zn-SOD的表达及意义

目的 探讨金属硫蛋白(metallothionein,MT)及铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)在舌鳞癌组织和淋巴结中的表达及其意义.方法 用免疫组化方法,观察41例舌鳞状细胞癌组织和颈淋巴结中MT和Cu/Zn-SOD的表达、定位,并进行定量分析和比较.结果 舌鳞状细胞癌标本中,有淋巴结转移的原发病灶与无淋巴结转移的原发病灶MT和Cu/Zn-SOD表达的差异有统计学意义.结论 MT和Cu/Zn-SOD表达与肿瘤的分化程度和转移相关.     

趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移中的作用

目的 检测趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞中的表达及其在肿瘤细胞增殖和 迁移中的作用。方法 采用逆转录聚合酶链式反应和Western blot法检测20例口腔鳞状细胞癌组织、颈部淋巴结组织、舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113、颊鳞状细胞癌细胞株Bca885和10例正常口腔黏膜组织中CXCR4的表达,采用逆转录聚合酶链式反应检测CXCL12的表达,通过MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察CXCR4特异性配体CXCL12对口腔鳞状细胞癌细胞的趋化迁移作用。结果 1）在口腔鳞状细胞癌组织、Tca8113细胞及Bca885细胞中, CXCR4 mRNA的相对表达量分别为2.31±1.13、1.89±1.20、1.67±1.10,CXCR4蛋白的相对表达量分别为1.36±0.15、1.85±0.34、1.97±0.23,正常口腔黏膜组织在mRNA及蛋白质水平均未检测到CXCR4表达。口腔癌患者颈部淋巴结组 织中,CXCL12 mRNA表达量的平均值为1.14±0.87,而口腔鳞状细胞癌组织和正常口腔黏膜组织未检测出CXCL12的 表达。2）口腔鳞状细胞癌细胞在CXCL12作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖。3）趋化实验显示CXCL12可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,在30~100 ng·mL-1的范围内,诱导口腔鳞状细胞癌细 胞迁移的作用呈明显量效关系。结论 CXCR4/CXCL12受体配体系统可介导口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移, 在癌细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用。     

A cervical lymph node metastatic model of human tongue carcinoma: Serial and orthotopic transplantation of histologically intact patient specimens in nude mice.

PURPOSE: A lymph node metastatic model of human tongue carcinoma using orthotopic and serial transplantation was established in nude mice to study the invasive and metastatic properties of human tongue cancer. Materials and Methods: Lymph node metastatic specimens of human tongue carcinoma were transplanted into nude mice orthotopically. Tumors dissected from the metastatic lymph nodes of the nude mice were serially transplanted into tongues of disease-free nude mice at 4-week intervals. RESULTS: All mice developed aggressive and diffuse well-differentiated squamous cell carcinoma at tongue recipient sites. Tumor cells invaded to lymphatic vessels. In addition, increased cervical lymph node metastasis was noted in the first (3 of 14, or 21%), second (4 of 11, or 36%), third (6 of 10, or 60%), or fourth (11 of 14, or 79%) transplantation. In mice, 2 of 14 lung metastases were found in the fourth round of transplantation. CONCLUSION: After surgical specimens of the lymph node metastasis for human tongue cancer were transplanted into the tongue of nude mice, the clinical characteristics of human tongue carcinoma, especially invasion and metastasis, were observed. This metastatic model involving orthotopic and serial transplantation should be useful for studies on the mechanisms, treatment, and prevention of human carcinoma of tongue.     

蓝染法定位CN0舌癌前哨淋巴结的价值

目的：探讨蓝染法在CN0期舌鳞癌前哨淋巴结定位的应用价值。方法：对32例CN0舌鳞癌病例术中应用蓝染法定位前哨淋巴结,采用先翻开颈部皮瓣后再在病灶边缘注射亚甲蓝的方法,观察颈部淋巴结蓝染情况,计数发现淋巴结蓝染的时间及蓝染淋巴结数目,切取蓝染淋巴结送冰冻病理检查,然后完成颈清扫术,观察前哨淋巴结病检结果与术后颈部淋巴结常规病理检查结果的相关性,计算前哨淋巴结对CN0舌癌患者颈部淋巴结转移的预测价值。结果：32例中31例成功定位前哨淋巴结,定位成功率96．88％,从注射染料到出现淋巴结蓝染平均25min,每例平均定位前哨淋巴结1．9个,8例前哨淋巴结病理检查阳性,与术后常规病理检查对照未发现假阴性病例,前哨淋巴结对CN0舌癌颈淋巴结转移的阳性及阴性预测价值均为100％。结论：蓝染法定位CN0期舌鳞癌前哨淋巴结有较高的临床应用价值。     

RKIP在舌癌组织及转移淋巴结中的表达及意义

目的：探讨RKIP在舌癌组织及转移淋巴结中的表达及意义。方法：应用免疫组化法检测RKIP在60例舌癌组和癌旁组织表达情况,比较舌癌分化良好组和分化不良组RKIP表达,将舌癌淋巴结转移组和淋巴结无转移组RKIP表达进行比较。结果：舌癌组和癌旁组织相比,RKIP表达水平明显下降,两者之间有统计学差异（P〈0．05）。舌癌分化良好组RKIP表达高,分化不良组表达低,RK1P与舌癌病理分级之间,有相关关系（P〈0．05）。转移淋巴结RKIP表达低。结论：RKIP具有抑制舌癌转移的作用,其表达的上调能促进舌癌的分化,抑制舌癌的转移。     

兔舌不同部位VX-2鳞癌与颈淋巴结转移模型的生物学特性

目的:制作兔舌不同部位VX-2鳞癌和颈淋巴结转移模型,并对其生物学特性进行研究,为舌癌多学科治疗提供研究平台。方法:将新西兰白兔20只,随机分为4组,每组5只,分别植入VX-2鳞癌瘤块。观察瘤块植入后肿瘤生长、体积变化、成瘤率、颈淋巴结转移率、转移的部位、数目以及兔生存期等指标。数据采用SPSS11.5软件包进行游程检验、独立样本t检验和χ2检验。结果:总成瘤率75%,其中舌缘80%,舌中线区70%,颈淋巴结转移率均70%,舌缘转移至同侧颈淋巴结,舌中线区转移至双侧颈淋巴结。平均生存期为舌缘(33.25±6.20)d,舌中线区(39.00±3.74)d。各区间无统计学意义(P>0.05),舌癌和颈部转移淋巴结均为低分化鳞癌。结论:瘤块移植法能成功制作不同部位兔舌VX-2鳞癌模型,成瘤率和转移率均较高,生存期为4～6周。其生物学特性与人舌癌基本一致,生长迅速,容易转移,是研究舌癌较理想的动物模型。     

口腔癌及癌前病变组织中MMP-9基因表达的意义

目的：探讨口腔癌及癌前病变组织中MMP-9基因表达的临床意义。方法：应用原位杂交技术检测42例口腔癌,20例癌转移淋巴结,22例癌前病变组织及21例正常口腔黏膜组织中MMP-9的表达,并分析其与临床病理特性的关系。结果：转移淋巴结、口腔癌、癌前病变及正常组织中MMP-9基因阳性表达率分别为100％,73．81％,22.73％,9．52％。结论：MMP-9的过度表达与口腔癌的浸润和淋巴结转移密切相关。     

口腔鳞癌中趋化因子受体CXCR4和CCR7表达及其与临床病理特征的关系

目的检测CXC类趋化因子受体4(chemokine CXC motif receptor 4,CXCR4)和CC类趋化因子受体7(chemokine CCmotif receptor 7,CCR7)在口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中表达,探讨其与OSCC临床病理特点及颈淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测64例OSCC组织原发灶、39例转移淋巴结组织和10例正常口腔黏膜组织中CXCR4及CCR7的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果 OSCC组织细胞中CXCR4、CCR7蛋白的阳性表达率分别为62.5%、65.6%,明显高于正常口腔黏膜组织细胞(P<0.01),其中有淋巴结转移组表达率分别为74.36%、84.62%,无淋巴结转移组表达率分别为44%、36%,差异均有统计学意义(P<0.05),而CXCR4、CCR7在淋巴结转移灶中的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR检测结果也证实,CXCR4及CCR7在OSCC细胞中均有阳性表达。此外,CXCR4及CCR7的表达与肿瘤的分化程度、侵袭程度和TNM分期密切相关(P<0.05),而与年龄、性别和肿瘤大小无关(P>0.05)。结论趋化因子受体CXCR4、CCR7的表达与OSCC侵袭发展和淋巴结转移密切相关。CXCR4、CCR7有可能成为OSCC治疗的新靶点。     

Histological distribution of cervical lymph node metastases from intraoral/oropharyngeal squamous cell carcinomas.

The histological frequency and distribution of cervical lymph node metastases was studied in 326 neck dissections from 253 patients with an intraoral/oropharyngeal squamous cell carcinoma. Metastasis was evident in 118 patients (47%) and 18 had bilateral metastasis. For primary sites other than the tongue, metastasis developed initially in a node(s) in the first drainage group (level I or II) with progressive involvement of neighbouring nodes ('overflow'). Simultaneous bilateral metastases were seen in some tumours of the floor of mouth, tongue and oropharynx which involved the midline. An erratic distribution of metastases suggestive of 'fast-tracking' (skip lesions and peppering) was only seen in tongue tumours. The pattern of metastatic spread indicates that level IV nodes must be included in staging and therapeutic neck dissections in tongue cancer. Metastasis to 'accessory' lymph nodes (lingual, buccal) occurs infrequently but may explain some 'local' recurrences.