外源性γ-氨基丁酸和舍曲林对急性应激抑郁大鼠海马神经元GABA受体的影响

目的 探讨外源性γ-氨基丁酸(GABA)和舍曲林对急性应激抑郁大鼠海马神经元GABAA(α)受体和GABAB受体的影响.方法 通过迷津试验筛选出认知功能无差异的雄性SD大鼠,随机分成对照组、模型组、GABA组、舍曲林组、GABA+舍曲林组5组.除对照组不做处理外,其他各组于造模前腹腔内分别注射双蒸水、GABA、舍曲林、GABA+舍曲林,并采用强迫游泳建立急性应激抑郁模型,测查各组大鼠的空间记忆保持功能;采用免疫组化法,观察各组大鼠海马CA1、CA3区及DG门区GABA免疫阳性细胞受体数的变化.结果 GABA+舍曲林预作用后,大鼠游泳中不动时间及迷宫中潜伏期较模型组明显缩短,差异有显著性(P<0.01);模型组海马CA1、CA3区,DG 门区的GABAA(α)和GABAB免疫阳性细胞受体数与对照组比较明显减少,差异有显著性(P<0.01);GABA仅增加大鼠海马CA3区GABAB阳性细胞受体数(P<0.01);舍曲林组免疫阳性细胞受体数明显多于模型组(P<0.01);GABA+舍曲林组GABAA(α)和GABAB免疫阳性细胞受体数分别为CAI区[(82.83±8.72)个、(78.08±5.67)个],CA3区[(92.83 ±9.35)个、(76.00±3.97)个],DG门区[(35.00±1.41)个、(33.33±4.36)个]高于其他各组,差异有显著性(P<0.05或0.01).结论 外源性的GABA预作用于急性应激抑郁大鼠,有增强舍曲林抗抑郁、改善认知的作用,其机制可能是通过增强海马GABAA(α)和GABAB阳性细胞受体数发挥作用.     

γ-氨基丁酸和舍曲林对急性应激抑郁大鼠认知功能的作用

目的 探究γ-氨基丁酸(GABA)和舍曲林对急性应激抑郁大鼠认知功能的影响.方法 对经Y-迷宫筛查出认知功能无差异的雄性SD大鼠进行强迫游泳,建立急性应激抑郁大鼠模型.观察未行应激的大鼠(对照组)、应激大鼠(模型组)、采用GABA预处理的应激大鼠(GABA组)及GABA+舍曲林预处理的应激大鼠(GABA+舍曲林组)在强迫游泳中的不动时间及其游泳后迷宫中的潜伏期.结果 随着GABA剂量的增加.在GABA≥0.5g/kg时大鼠游泳不动时间渐缩短[(432.33±187.64)s＞(332.50±217.23)s].与舍曲林(5mg/kg)+GABA(0.25 g/kg)作用[(316.67±353.83)s]相似,与模型组[(1404.33±129.46)s]比较差异有显著性(P＜0.01;P＜0.05),而大剂量GABA+舍曲林治疗组大鼠游泳不动时间[(1086.17±411.80)s]反而延长;模型组游泳后迷宫中潜伏期为[(179.17±8.54)s],高于对照组[(105.00±32.18)s],差异具有显著性(P＜0.05),10 mg/kg舍曲林及舍曲林+GABA联合治疗,大鼠游泳后迷宫中潜伏期分别为[(100.30±21.01)s]、[(69.83±16.89)s]、[(86.83±13.11)s],大鼠游泳后迷宫中潜伏期明显缩短,低于模型组,差异具有显著性(P＜0.05,0.01).结论 GABA有一定的抗抑郁作用;适量的GABA与舍曲林联合应用,不但可减少2种药物的使用剂量,较它们单独使用疗效更著;且可明显改善抑郁大鼠的学习记忆功能.     

不同时段强迫游泳应激对大鼠空间学习记忆和海马神经元损伤的选择性作用

目的 探讨不同时段的强迫游泳应激对海马依赖性空间学习记忆和大鼠海马神经元损伤的选择性作用.方法 实验动物为成年雄性Sprague Dawley大鼠,随机分为5组:对照组、应激1次组、应激1周组、应激2周组和应激4周组,每组动物12只.应激模型为强迫游泳.应用Morris水迷宫(MWM)测试大鼠的空间学习记忆情况.采用改良Nissl染色方法 观察海马CA1区和CA3区锥体细胞的存活情况.结果MWM定位航行实验中,前6个和最后4个实验各组的逃避潜伏期(EL)各组比较均差异无显著性(P＞0.05);第7和第8个实验应激1周的大鼠EL[分别为(9.80±2.84)s和(9.78±4.64)s]显著少于其他4组[分别为(48.08±16.95)s和(42.65±19.22)s,(40.54±14.23)s和(29.44±14.36)s,(45.64±17.61)s和(45.28±15.07)s,(41.59±16.07)s和(37.77±13.14)s,P＜0.05],后4组的EL相互比较差异无显著性(P＞0.05).记忆保留实验中,应激1次[三次成绩分别为(37.86±24.82),(20.22±13.83),(18.95±14.77)]、1周[三次成绩分别为(19.26±15.74),(13.51±6.15),(11.16±6.70)]及2周[三次成绩分别为(48.39±16.96),(34.49±17.01),(33.26±23.42)]的大鼠EL与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);而应激4周的大鼠EL[三次成绩分别为(55.43±7.10),(44.03±13.58),(36.01±9.19)]显著大于对照组(P＜0.05).空间探索实验中,应激1周(3.22±1.17)的大鼠60s内穿越原平台位置的次数明显多于对照组(1.78±0.5)(P＜0.05),其他各应激组与对照组比较差异无显著性(P＞0.05).各组大鼠海马CA1区的锥体细胞计数差异无显著性(P＞0.05).应激4周的大鼠海马CA3区锥体细胞数量(34.00±5.77)显著低于其他各组(P＜0.01).结论 不同时段的应激对大鼠海马依赖性空间学习记忆具有选择性作用,慢性应激选择性损害海马CA3区神经元.     

醒脾解郁方对抑郁大鼠行为学及海马与骨骼肌线粒体超微结构的影响

目的探讨醒脾解郁方对抑郁模型大鼠行为学及海马与骨骼肌线粒体超微结构的影响。方法将Wister大鼠平均分成5组,即空白对照组、模型组、舍曲林组、醒脾解郁高、低剂量组。采用28 d慢性不可预见应激(CUS)建立抑郁模型,治疗各组给予相应药物灌胃,连续给药28 d。模型组、空白对照组以蒸馏水代替药液。以大鼠体重变化、糖水偏爱及旷场实验进行抑郁行为学评价,采用透射电镜观察大鼠海马神经元、骨骼肌细胞线粒体超微结构变化。结果与空白对照组相比,模型组大鼠体重增长缓慢、糖水偏爱率下降、旷场运动总路程减少(P0.01);与模型组相比,醒脾解郁高、低剂量组及舍曲林组大鼠体重、糖水偏爱率、旷场中运动总路程均明显增加(P0.05)。透射电镜观察结果:模型组海马神经元及骨骼肌细胞均出现线粒体数目减少、形态肿胀、空泡变性,内嵴排列紊乱甚至溶解消失。醒脾解郁高剂量组海马神经元及骨骼肌线粒体接近正常,未见肿胀及空泡变性;醒脾解郁低剂量组与舍曲林组海马神经元及骨骼肌的线粒体形态轻度肿胀,内嵴部分紊乱。结论慢性应激导致抑郁的发生中,海马与骨骼肌均会出现线粒体结构的损伤,这可能是抑郁症极度疲劳和多系统症状的关键因素之一;醒脾解郁方能改善大鼠抑郁行为学及线粒体结构损伤,其中高剂量组一定程度上比舍曲林组有效果更好的趋势。     

白松片对抑郁模型大鼠海马脑源性神经营养因子和酪氨酸激酶B表达的影响

目的采用慢性应激复制抑郁大鼠模型,观测白松片对抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB表达的影响,探讨白松片的抗抑郁作用机制.方法将大鼠随机分为正常组、模型组、白松片组、氟西汀组,采用连续21 d慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型.运用免疫组化方法研究白松片对抑郁模型大鼠海马CA1、CA3区锥体细胞和齿状回颗粒细胞BDNF、TrkB蛋白表达的影响.结果与正常组相比,模型组大鼠海马CA1、CA3区和齿状回BDNF、TrkB免疫反应阳性神经元平均灰度值上升,分别为107.73±3.43、119.40±6.36、109.20±4.65;与模型组相比,白松片组大鼠海马CA1、CA3区和齿状回BDNF、TrkB免疫反应阳性神经元平均灰度值下降,分别为105.80±3.32、109.87±4.82、105.00±2.56.结论白松片增加抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB的表达,可能是其抗抑郁作用的分子机制之一.     

噻奈普汀对慢性应激大鼠海马 CA3区锥体细胞顶树突可塑性的效应

目的 探讨抗抑郁剂噻奈普汀对慢性应激大鼠海马CA3区锥体细胞顶树突形态的效应.方法 将45只雄性Sprague-Dawley大鼠(2月龄),随机分为对照组、应激组及应激给药组,每组15只.高尔基(Golgi)镀染法测定海马CA3区锥体细胞顶树突分支及一级树突直径,常规透射电镜观察树突细胞骨架特别是微管的改变.结果 应激给药组大鼠海马CA3区锥体细胞顶树突分支数目[(15.37±1.54)支]较应激组的分支数目[(13.06±1.28)支]明显增多,与对照组[(16.29±1.95)支]差异无显著性;一级树突直径[(5.74±0.87)μm]较应激组[(6.41±0.94)μm]明显变小,与对照组(5.67±0.83)μm无明显差别;与应激组比较,应激给药组树突骨架基本完整.结论 噻奈普汀可抑制慢性应激导致的大鼠海马CA3区锥体细胞顶树突可塑性的改变.     

γ-氨基丁酸对慢性应激抑郁大鼠认知功能的作用

0.01),GABA组除了潜伏期时间较模型组显著缩短(P＜0.05)外,其他各项指标均无明显改善.与对照组相比,模型组和GABA组大鼠的海马CA1、CA3区的GABAB免疫阳性细胞数较对照组明显减少(P＜0.01);舍曲林组和研究组的GABAB免疫阳性细胞数较模型组显著增多(P＜0.01),研究组的增多更显著.结论 GABA能改善抑郁伴发的认知功能,这种效用在使用抗抑郁剂基础上更为明显.     

阿魏酸钠对慢性应激抑郁模型大鼠抗抑郁作用的实验研究

目的 慢性不可预见性轻度应激大鼠抑郁模型检测阿魏酸钠的抗抑郁效果.方法 66只SD雄性大鼠(体质量220～280 g)随机分为对照组、慢性应激(模型)组、慢性应激+氟西汀(阳性对照)组和阿魏酸钠治疗(慢性应激+不同剂量阿魏酸钠)组,每组11只动物.长期不可预见性轻度应激+孤养复制大鼠慢性抑郁模型;阿魏酸钠腹腔注射(20mg·kg-1·d-1、40mg·kg-1·d-1、80mg·kg-1·d-1),持续28日.慢性应激期间测定动物的体质量和摄食量;开野、液体消耗试验检查动物行为;实验末行强迫游泳和组织病理学检查分析动物行为和海马组织形态学.结果 成功建立慢性应激大鼠抑郁模型.阿魏酸钠治疗能部分逆转应激引起的动物的抑郁样表现.实验第4周末,阿魏酸钠治疗组(80mg/kg)大鼠的体质量增加量、糖水消耗量、运动和探究能力[分别为(88.06±7.83)g,(66.33±3.03)g,(25.10±4.90)分,(6.60±1.20)分,]均明显高于模型组[分别为(77.15±14.66)g,(40.75±6.05)g,(18.20±2.00)分,(3.20±0.60)分],强迫游泳不动时间(117.30±7.22)s则短于模型组(148.10±8.25)s,差异有显著性(P值分别为0.0425,0.0087,0.0409,0.0317,0.0025);阿魏酸钠治疗还能部分逆转应激引起的动物海马区神经元轻度水肿、变性.结论 阿魏酸钠对慢性应激大鼠抑郁模型有明显的抗抑郁作用.     

白松片对抑郁模型大鼠海马脑源性神经营养因子和酪氨酸激酶B表达的影响

目的采用慢性应激复制抑郁大鼠模型,观测白松片对抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB表达的影响,探讨白松片的抗抑郁作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、白松片组、氟西汀组,采用连续21d慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型。运用免疫组化方法研究白松片对抑郁模型大鼠海马CA1、CA3区锥体细胞和齿状回颗粒细胞BDNF、TrkB蛋白表达的影响。结果与正常组相比,模型组大鼠海马CA1、CA3区和齿状回BDNF、TrkB免疫反应阳性神经元平均灰度值上升,分别为107. 73±3. 43、119. 40±6. 36、109. 20±4. 65;与模型组相比,白松片组大鼠海马CA1、CA3区和齿状回BDNF、TrkB免疫反应阳性神经元平均灰度值下降,分别为105. 80±3. 32、109. 87±4. 82、105. 00±2. 56。结论白松片增加抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB的表达,可能是其抗抑郁作用的分子机制之一。     

天敌应激对大鼠海马CA3区锥体细胞的损害作用

目的探讨天敌应激对大鼠海马CA3区神经元的损害作用及其神经病理学机制.方法以猫为天敌应激源,将28只SD大鼠分为4组:单次应激组、2周持续应激组、4周持续应激组及对照组.采用Nissl、Golgi染色法及透射电镜,观察CA3区锥体细胞数量及形态变化;采用TUNEL法观察凋亡神经元.结果单次、2周、4周应激组的CA3区锥体细胞数(62.17±8.16,44.33±12.45,43.17±4.49)均较对照组(75.33±14.19)显著减少(P＜0.01).应激组大鼠CA3区锥体细胞树突长度变短,分支节点数减少.应激组的TdT平均灰度均较对照组显著下降(P＜0.01),而平均面密度明显升高(P＜0.01).应激组锥体细胞超微结构发生凋亡特征性改变.结论天敌应激可导致大鼠海马CA3区锥体细胞树突萎缩和神经元丢失;神经元凋亡是锥体细胞受损的神经病理学发生机制之一.     

慢性综合应激对大鼠海马CA3区nNOS和BDNF表达及行为学表现的影响

目的：观察慢性综合应激引起的大鼠海马CA3区的病理变化及相应的行为学改变，探讨抑郁的发病机制。方法：观察在应激的不同时程内，Wistar大鼠海马CA3区神经元型一氧化氮合成酶(nNOS)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的动态变化，同时观察大鼠行为学改变。结果：经慢性应激11d，海马CA3区nNOS蛋白表达增加，BDNF蛋白表达减少，探究行为减少，修饰行为受到抑制，排便量增加；应激21d，nNOS蛋白表达有逐渐降低的趋势，BDNF蛋白表达几乎消失，大鼠表现为抑郁状态。结论：慢性综合应激可能通过损伤大鼠海马引起大鼠的抑郁状态，提示脑损伤可能在抑郁发病机制中起重要作用，保护脑组织应成为抑郁新的治疗靶。     

慢性捆绑应激致大鼠海马CA3区锥体细胞超微结构的变化

目的 观察慢性捆绑应激紧张对大鼠海马神经元超微结构的影响。方法 实验组采用捆绑器每天捆绑6h，21d后用透射电镜观察海马CA3区锥体细胞超微结构的变化。结果 实验组海马CA3区锥体细胞细胞器减少，粗面内质网局部扩张井脱颗粒；线粒体肿胀，嵴数量减少；脂褐素增加；核膜内陷，核内外有空泡。结论 慢性捆绑应激导致大鼠海马CA3区锥体细胞退化。     

慢性脑低灌注大鼠海马神经元损伤的机制研究

目的 探究慢性脑低灌注大鼠海马神经元损伤的机制.方法 双侧颈总动脉结扎(2VO)制备慢性脑低灌注大鼠模型,2VO术后8周取材,分别进行HE染色、电镜、流式细胞术以及Western Blotting检测.结果 HE结果显示2VO组的海马神经元排列稍紊乱,且数量与假手术对照相比有不同程度减少[CA2区:(34.75±3.40)个,(49.25±9.67)个,P＜0.05;DG区:(73.50±9.26)个,(90.75±4.35)个,P＜0.05];电镜观察发现2VO组大鼠海马区部分神经元胞核中略有固缩,出现异染色质边集,胞浆则出现水肿,以线粒体与内质网尤甚;流式细胞术结果表明2VO组海马神经元早期凋亡率[(9.117±2.540)%]高于假手术对照组[(4.750±3.481)%],差异有统计学意义(P＜0.05);Western Blotting检测发现procaspase-3在2VO组大鼠海马的表达与假手术对照组差异无显著性(P＞0.05).结论 慢性脑低灌注大鼠海马神经元的损伤主要由凋亡造成.

Abstract：

Objective To explore the the cellular damage of hippocampus neuron in a rat model of chronic cerebral hypoperfusion. Methods Rat model of chronic cerebral hypoperfusion was established by permanent bilateral common carotid arteries occlusion (2VO). Eight weeks after the operation,the brains were removed and examined with histological stains, electron microscope, flow cytometer and Western Blotting. Results Compared with the control group,the arrangement of hippocampus neurons in 2VO rats appeared to be more irregular, and the number of the neurons decreased partly ( CA2: ( 34.75 ± 3.40) vs (49.25 ± 9.67 ), P ＜ 0. 05; DG: ( 73.50 ± 9.26)vs ( 90.75 ± 4.35 ), P ＜ 0. 05 ). By electron microscopic study of hippocampus neurons in 2VO rats, the nuclei became smaller and the heterochromatin assembled in the border of the nuclei in some neurons, while cytoplasm swelled,especially in mitochondria and endoplasmic reticulum. The rate of apoptosis of hippocampus neurons in 2VO rats( (9. 117 ±2. 540)% ) ,detected by the flow cytometer,was higher than that of sham group( (4. 750 ±3.481 ) % ) (P ＜ 0. 05 ). The expression of pro-caspase-3 in hippocampus of 2 VO rats was not altered significantly compared with the control group(P ＞ 0. 05 ). Conclusion The cellular damage of hippocampus neuron in 2VO rats was mainly caused by apoptosis.     

睡眠剥夺对慢性应激抑郁模型大鼠海马Bcl-xl表达的影响

目的 探讨睡眠剥夺通过影响海马区Bcl-xl含量及活性而产生的快速抗抑郁机制.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、抑郁模型组、睡眠剥夺组和水环境对照组.用改良多平台睡眠剥夺法(MMPM)对用慢性不可预见性应激抑郁模型方法建立的抑郁大鼠模型进行睡眠剥夺.用旷场实验测试其行为变化,以及用免疫组化法测试海马CAI、CA3、DG区Bcl-xl的平均光密度值.结果 (1)睡眠剥夺组大鼠与抑郁模型组相比旷场实验的水平得分[(35.30±18.77)分,(81.30±18.41)分,P＜0.01]与垂直得分[(20.50±4.84)分,(27.70±8.19)分,P＜0.05]均明显升高,潜伏期明显缩短[(4.60±1.35)s,(2.20±1.55)s,P＜0.01].(2)海马CAI、CA3、DG区Bcl-xl平均光密度值比较中,抑郁模型组均显著低于正常对照组(0.1356±0.0224,0.1389±0.0250,0.1457±0.0162;0.1725±0.0327,0.1734±0.0261,0.1768±0.0271;P＜0.01),睡眠剥夺组均显著高于抑郁模型组(0.1621±0.0128,0.1603±0.0137,0.1625±0.0192;0.1356±0.0224,0.1389±0.0250,0.1457±0.0162;P＜0.05).结论 睡眠剥夺可明显改善抑郁大鼠的抑郁样行为;海马部位Bcl-xl含量及活性的增高可能参与了睡眠剥夺的快速抗抑郁作用.     

幼年应激致成年大鼠应激敏感性增加的突触形态学变化

目的 观察幼年应激对成年大鼠应激敏感性的影响及神经机制.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为应激组(30只)和非应激组(30)只,应激方式为强迫游泳.应激前及应激结束8周后两次以提尾实验评定大鼠的情绪性行为以观察大鼠的应激敏感性.行为评定完毕后光镜下观察左侧海马CA3区锥体细胞数目,电镜下拍摄左侧海马CA3区突触照片,然后在全自动图像分析仪下分析突触的形态学变化.结果 (1)应激前后应激组大鼠情绪性行为得分增加数[(1.20±0.60)分]大于非应激组[(-0.13±0.83)分](P<0.05).(2)应激组大鼠左侧海马CA3区锥体细胞数[(36.34±1.23)个]小于非应激组大鼠[(42.24±1.48)个](P<0.05).(3)应激组大鼠左侧海马CA3区突触数密度[(1.01±0.15)N/μm3]、面密度[(0.20±0.04)μm2/μm3]、圆盘面积[(0.05±0.02)μm2]、活性区长度[(314.78±46.32)nm]、曲率(1.02±0.04)、突触后致密物质厚度[(46.35±6.81)nm]小于非应激组数密度[(1.16±0.21)N/μm3]、面密度[(0.29±0.06)μm2/μm3]、圆盘面积[(0.07±0.02)μm2]、活性区长度[(339.83±55.16)nm]、曲率(1.11±0.06)、突触后致密物质厚度[(71.32±9.55)nm].结论 幼年应激会增加成年大鼠的应激敏感性;神经可塑性的降低可能是其机制.     

二十二碳六烯酸抗抑郁作用及其对海马神经元caspase-3表达的影响

目的 观察二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）对抑郁症的治疗作用及其对海马神经元caspase-3表达的影响.方法 50只SD大鼠随机分为5组（空白对照组,抑郁模型组,氟西汀组,DHA组,氟西汀与DHA联合用药组）,每组10只,连续21 d每天给予不同刺激,建立慢性应激不可预见抑郁大鼠模型.21 d后强迫游泳实验进行行为学检测,HE染色检测海马CA1、CA2、CA3区锥体细胞的形态学变化.荧光实时定量PCR和Western Blot检测海马神经元caspase-3的变化.结果 行为学检测显示,抑郁模型组、DHA组、DHA联合氟西汀组大鼠在水中的游泳不动时间分别为（113.33±9.50）s、（81.67±7.68）s和（73.00±8.54）s.与抑郁模型组相比,DHA组和DHA联合氟西汀组大鼠在水中游泳不动时间减少（t=8.164,9.855,P＜0.01）.HE染色切片可见DHA使大鼠海马CA1、CA2、CA3区神经元数量部分恢复,排列致密,可减少海马神经元凋亡.qPCR和WB结果显示DHA单独或联合氟西汀可抑制海马神经元caspase-3 mRNA和蛋白的表达.结论 DHA对慢性应激不可预见抑郁模型大鼠有治疗及辅助治疗作用,其机制与DHA减少海马神经元凋亡、下调caspase-3有关.     

慢性染铅大鼠海马脑源性神经营养因子的改变

Objective: To investigate the changes of brain derived neurotrophic factor(BDNF) in hippocampus of chronic lead exposed rats. Methods: Wistar rats were exposed to lead by drinking 0.02%、0.2% lead acetate solution for three months, respectively. Investigate the changes of learning and memory ability by Y-labyrinth experiment, study the changes of BDNF positive neuron in CA1, CA3 and dentate gyrus in hippocampus of rats by immunohistochemistry. Results: BDNF positive neurons distribute everywhere in the hippocampus under normal condition. Compared with the contral group, the number of BDNF positive neurons in the hippocampus subregions were decreased significantly of two different dosage (0.02%, 0.2% ) chronic lead exposed groups( P ＜ 0. 05). Conclusion: These results suggest that the reduction of BDNF positive neuron in hippocampus might be related to the impact of lead on learning and memory.