斑贞1号、川芎嗪和5-氟尿嘧啶联合对人胃癌细胞肺耐药蛋白基因表达影响

目的探讨斑贞1号、川芎嗪（TMP）和5-氟尿嘧啶（5-FU）联合逆转人胃癌细胞系SGC-7901/ADR与LRP表达的相关性。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）比较人胃癌细胞SGC-7901/ADR细胞在单纯5-FU和5-FU联合斑贞1号及TMP处理组肺耐药蛋白（LRP）mRNA的表达情况。结果 5-FU组与阴性对照组比较,LRPmRNA表达差异无统计学意义（P〉0.05）;而5-FU联合斑贞1号及TMP处理组LRP mRNA表达量明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论斑贞1号、TMP和5-FU联合逆转SGC-7901/ADR细胞耐药性可能与LRP基因相关,为当前胃癌的治疗提供了新的理论依据。     

班贞1号和TMP逆转胃癌细胞SGC-7901，ADR对5-FU耐药性机制研究

目的：探讨班贞1号和川芎嗪（TMP）联合逆转人胃癌细胞系SGC-7901／ADR对5一FU耐药性与bcl-2表达的相关性。方法：采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）比较SGC-7901／ADR细胞在单纯5-FU和5-FU联合中药班贞1号及TMP处理组bcl-2mRNA的表达情况。结果：5-FU组与阴性对照组相比,bcl-2mRNA表达无显著性差异（P〉0．05）,而5-Fu联合中药班贞1号及TMP处理组bcl-2mRNA表达量明显降低（P〈0．05）。结论：班贞1号和TMP联合逆转人胃癌细胞对5-FU耐药性可能与抗调亡分子bcl-2相关,为中西药联合治疗胃癌奠定一定的理论基础。     

斑贞1号、TMP和5-FU联合对人胃癌细胞ERCC1表达的影响

目的 探讨斑贞1号、川芎嗪(TMP)和五氟尿嘧啶(5-FU)联合逆转人胃癌细胞系SGC-7901/ADR与ERCC1表达的影响。方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),监测人胃癌细胞SGC-7901/ADR细胞在5-FU组、斑贞1号组、斑贞1号+5-FU组、斑贞1号+5-FU+TMP组切除修复交叉互补基因1(ERCC1)m RNA的表达情况。结果 5-FU组与阴性对照组比较,ERCC1 m RNA表达差异无统计学意义(P0.05),而5-FU联合中药斑贞1号及TMP处理组ERCC1m RNA表达量明显升高(P0.05)。结论 斑贞1号、TMP和5-FU联合逆转SGC-7901/ADR细胞耐药性可能与ERCC1基因相关,为当前胃癌的治疗提供了新的理论依据。     

中西药联合对胃癌SGC-7901/ADR细胞LRP、MRP基因表达的影响

目的:探讨中西药联合(班贞1号+5-FU+TMP)对胃癌SGC-7901/ADR细胞MRP、LRP基因表达的影响。方法:以胃癌多药耐药细胞株SGC-7901/ADR为靶细胞,以不加药组为阴性对照组,5-氟尿嘧啶(5-FU)组、班贞1号组、班贞1号+5-FU组、中西药联合组为实验组,采用半定量RT-PCR法检测SGC-7901/ADR细胞在不同药物作用下MRP、LRP mRNA的表达。结果:5-FU组与阴性对照组相比,MRP、LRP mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。中西药联合组MRP、LRP mRNA表达明显降低,与阴性对照组及其他实验组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:中西药联合能够抑制SGC-7901/ADR细胞MRP、LRP mRNA表达,逆转了SGC-7901/ADR细胞的耐药性,其机制可能与下调MRP、LRP基因表达有关。     

5-FU/DDP化疗联合中药完全缓解老年胃癌1例

患者男性,80岁.14 a前因上腹部烧灼痛外院胃镜检查示胃溃疡.2 a前出现心悸、气短.心电图示:异位心律,心房纤颤.长期口服倍他乐克.2 a前出现柏油样便3次,共约500 ml,无呕血及晕厥.2002年6月11日来中日友好医院住院.     

顺铂与5-氟尿嘧啶对体外人胃癌细胞影响的研究

[目的]研究顺铂（DDP）与5-氟尿嘧啶（5-FU ）在合并用药前后对体外培养的人胃癌细胞的影响.[方法]采用MTT法观察体外培养的人胃癌细胞系SGC-7901在DDP与5-FU合并用药前后细胞存活率的差异,并通过流式细胞仪检测细胞周期变化, 透射电镜观察细胞超微结构变化.[结果]DDP与5-FU合用与单独应用化疗药相比细胞存活率明显下降,其增效倍数为单独用药的2.73～4.48倍（P＜0.01）, 细胞生长停止在S期,S期数分数为0.51,有效抑制了细胞有丝分裂及DNA合成, 细胞超微结构显示：联合用药后,细胞核固缩、空泡形成、微绒毛减少、线粒体及内质网肿胀.[结论]结果表明顺铂与小剂量化疗药合用,可获得强于化疗药单独用药的疗效,5-氟尿嘧啶增加了化疗药物对肿瘤细胞的毒性,增加了细胞对药物的敏感性,降低了药物的副作用.     

ONECUT2高表达介导胃癌复发患者5-FU化疗耐药

目的:探究One cut结构域家族成员2(ONECUT2)是否可以作为对5-FU耐药的胃癌复发患者的治疗靶点。方法:利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析ONECUT2基因在胃癌患者及胃癌复发患者的表达情况。利用基因集富集分析(GSEA)评估TCGA数据库中ONECUT2表达量与药物代谢相关生物学过程的相关性。利用CCK-8细胞毒性实验评估胃癌细胞敲低或过表达ONECUT2对5-FU的耐药情况。分析30例胃癌术后复发患者ONECUT2表达量与5-FU治疗效果的相关性。结果:TCGA数据库分析显示,在经受过化疗且复发的胃癌患者中,ONECUT2高表达的患者无病间隔期(disease-free interval, DFI)更短。GSEA分析结果表明,ONECUT2高表达与异生药物代谢通路呈正相关,这提示可能与胃癌患者的耐药相关。体外实验中,敲低ONECUT2降低胃癌细胞对5-FU的半数抑制浓度(IC₅₀)值;反之,过表达ONECUT2增加细胞对5-FU的IC₅₀值。30例胃癌复发患者对5-FU的药物敏感性与ONECUT2表达量相关。结论:胃癌复...     

5-FU对SW480细胞Musashi-1基因表达的影响

目的:观察5-氟尿嘧啶(5-FU)对人结直肠癌细胞株SW480的作用与Musashi-1基因表达变化的关系.方法:用MTT法检测不同时间5-FU对SW480细胞增殖的影响,流式细胞术检测侧群(SP)细胞和CD34 CD44 细胞比例,RT-PCR半定量检测Musashi-1基因表达.结果:5-FU作用于SW480细胞24、48、72 h的半数抑制率依次为32.12、16.2和6.8 mg·L-1,SP细胞比例、CD34 CD44 细胞以及Musashi-1 mRNA表达在5-FU作用后均增加.结论:正常肠道干细胞标记物Musashi-1有可能成为结直肠癌干细胞样肿瘤细胞特异性标记,CD34、CD44可能具有类似的潜力.     

黄芪多糖联合5-FU对肝癌HepG2细胞EMT转化的影响

目的 探讨黄芪多糖(APS)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对肝癌HepG2细胞上皮细胞间质转型(EMT)作用的分子机制.方法 噻唑蓝(MTT)、Transwell法分别检测黄芪多糖与5-FU单独或联合使用对HepG2细胞增殖、侵袭的影响;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测...     

胃癌多药耐药基因1表达及其与生物学行为的关系

目的了解胃癌多药耐药基因1(mdr1)的表达及其与生物学行为的关系。方法应用现代信息技术,收集有关文献进行综合分析。结果正常和病理胃均可表达mdr1,胃癌的mdr1表达水平最高。胃癌的mdr1表达和胃癌对抗肿瘤药物敏感性及病人的生存期、生存率呈负相关,和组织分化、肿瘤浸润、分期及转移的关系不肯定,和肿瘤发生部位、大小、组织类型、患者年龄、性别之间无相关性。结论胃癌mdr1基因表达和生物学行为相关。     

苦参碱联合5-FU诱导人胃癌细胞凋亡的机制

目的探讨苦参碱和5-氟尿嘧啶(5-FU)联用诱导人胃癌细胞SGC7901凋亡的机制。方法1.0mg/mL苦参碱联合20mg/L5FU作用于SGC7901细胞48h,RTPCR和免疫细胞化学检测bcl-2、bax、Fas、Fas-L的mRNA和蛋白表达;免疫细胞化学、酶联免疫吸附试验和Westernblot检测活性caspase3的表达,并与空白对照组和单独苦参碱或5-FU用药组比较。结果联合用药组bcl2下调,bax、Fas上调,与空白对照组有显著差异(P<0.05),与单独用药组相比无显著性差异(P>0.05);联合用药组活性caspase-3表达显著增高,与各组比较均有显著差异(P<0.01)。结论苦参碱和5FU联用通过上调bax、下调bcl2/Fax,显著提高活性caspase3的表达,从而协同诱导胃癌细胞SGC7901的凋亡。     

shRNA沉默DNA-PKcs表达对肝癌耐药细胞BEL7402/5-FU耐药性的影响

目的观察shDNA-PKcs沉默DNA-PKcs基因对肝癌耐药细胞Bel7402/5-FU耐药性的影响。方法采用双酶切、测序分析鉴定shDNA-PKcs干扰质粒;用阳离子脂质体法将shDNA-PKcs质粒转染BEL7402/5-FU细胞,根据荧光细胞数计算转染率,Real-time PCR及Western blot检测沉默效率;MTT法检测细胞药物敏感性;Real-time PCR和Western blot检测P-gp mRNA和蛋白表达。结果双酶切鉴定结果显示质粒约为6300bp,测序结果显示插入序列为shDNA-PKcs序列。荧光细胞计数显示质粒的转染率为62.2%。Real time PCR及Western blot检测结果显示DNA-PKcs mRNA及蛋白水平的沉默效率分别为82.6%、71.8%;MTT检测结果显示shDNA-PKcs实验组的ADM和5-FU的IC50值比对照组ADM、5-FU低（P〈0.05）,DDP和MMC的IC50值与对照组比无统计学意义（P〉0.05）。Real time PCR和Western blot检测结果显示实验组P-gp mRNA、蛋白表达水平均比对照组低（P〈0.01）。结论 shDNA-PKcs干扰质粒能够有效抑制BEL7402/5-FU细胞中DNA-PKcs表达,增加细胞对化疗药物的敏感性,其机制可能与P-gp蛋白的下调有关。     

胃、肠癌及癌旁组织MDR1基因表达的研究

目的：探讨胃、肠癌的原发耐药性及多药耐药基因（ｍ ｄｒ１）的肿瘤特异性。方法：以未接受肿瘤化疗的 ３１ 例胃癌和 ２４ 例结、直肠癌患者的癌及癌旁组织为研究对象,以逆转录 Ｐ Ｃ Ｒ 技术和 Ｄｏｔ ｂｌｏｔ 技术进行 ｍ ｄｒ１ 基因 ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达的研究。结果：①未接受化学治疗的胃癌患者的癌组织ｍ ｄｒ１ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 呈阳性表达者占 ４８３９％ （１５／３１）,肠癌为 ５４１７％ （１３／２４）。②癌组织ｍ ｄｒｌ基因ｍ Ｒ Ｎ Ａ 高表达,癌旁组织的表达强度显著低于癌组织。结论：检测癌手术标本ｍ ｄｒ１ 基因可发现原发性耐药,对术后制定化疗方案有重要的参考价值。     

周剂量紫杉醇联合低剂量5-FU持续输注二线治疗晚期胃癌

[目的]探讨周剂量紫杉醇联合低剂量5-氟尿嘧啶（5-FU）持续输注二线治疗晚期胃癌的疗效和毒性反应。[方法]经病理确诊的晚期胃癌20例,均为一线治疗后失败或复发者,应用PTX 60 mg/m^2,d1、8、15,静脉滴注3 h;5-FU300 mg/d,便携式微量泵持续24 h静脉滴注,连续14 d;DDP5 mg/d,第1-5天,第7-12天,静脉滴注,21-28 d为1周期,中位化疗周期为3周期,共完成64周期化疗。[结果]20例患者均可评价疗效,CR 1例,PR 7例,SD 5例,PD 7例,RR 40%,TCR 65%;中位无进展时间5个月（3-24个月）,中位生存时间8个月（5-30个月）。化疗相关毒性反应主要为骨髓毒性、恶心呕吐、脱发、口腔黏膜炎和神经毒性。[结论]周剂量紫杉醇联合低剂量5-FU持续输注二线治疗晚期胃癌疗效较好,毒性反应轻微,患者能够耐受,值得在临床中进一步研究使用。     

E2F-1过表达对胃癌细胞中癌基因和抑癌基因表达的影响

目的：了解E2F-1过表达对胃癌细胞中癌基因和抑癌基因表达的影响,探讨E2F—1影响胃癌细胞侵袭能力的作用机制。方法：从胃癌细胞MGC-803和MGC803／E2F-1中提取总RNA,纯化mRNA,逆转录将Cy3和Cy5两种荧光素标记到两组逆转录合成的第一链cDNA。与22K人类基因组寡核苷酸芯片进行杂交,采用LuxScan 10K／A双通道激光扫描仪扫描芯片上两种荧光信号,应用LuxScan3．0图像分析软件对图像处理分析,筛选出差异基因。结果：在21522条基因中,MGC-803／E2F-1和MGC-803细胞差异表达的癌基因和抑癌基因有39条,其中上调基因19条（49%）,下调基因20条（51%）。结论：过表达E2F-1在胃癌细胞MGC803中影响了众多癌基因和抑癌基因的表达变化,表明胃癌侵袭能力的变化是多基因相互作用,多种信号传导途径相互影响的结果。     

三氧化二砷对胃癌耐药细胞P-gP、GST-s表达的抑制

目的 研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对胃癌细胞多药耐药细胞的P-糖蛋白(p-glucoprotein,P-gp)、谷胱甘肽s转移酶(glutathione-s transferring enzyme,GST-s)抑制作用.方法 逐渐递增长春新碱(vincristine,VCR)浓度诱导胃癌细胞株SGC7901产生耐药性SGC7901/VCR.MTT法测定诱导前后VCR、5-氟尿嘧啶(fluorouacil,5-Fu)、表阿霉素等抗癌药对肿瘤细胞的杀伤作用,从而明确SGC7901/VCR是否对多种化疗药物产生耐药-即具有多药耐药性;Western blot测定肿瘤细胞内P-gp、GST-s表达.结果 胃癌SGC7901/VCR细胞对VCR、5-Fu、表阿霉素的耐药倍数分别为16.56倍、2.69倍及13.05倍.经As2O3预处理24 h后,VCR、5-Fu、表阿霉素对SGC7901/VCR的耐药倍数显著下降(P<0.05).SGC7901/VCR在静息时细胞内P-gP、GST-s8蛋白表达显著高于SGC7901.而As2O3可使SGC7901/VCR细胞内P-gP、GST-s蛋白表达显著下降.结论 三氧化二砷可以抑制P-gP、GST-s蛋白的表达,从而降低细胞的耐药性.     

TRF2 siRNA抑制多药耐药胃癌细胞Rapl表达

目的应用RNA干扰技术抑制多药耐药衍生胃癌细胞系TRF2表达,观察其对Rapl表达的影响。方法根据pSilencer3．1-H1载体要求构建TRF2siRNA真核表达载体,分别转染SGC7901／ADR和SGC7901／VCR细胞,免疫荧光技术和Westernblot方法检测Rapl表达。结果成功构建TRF2 siRNA真核表达载体能显著抑制耐药细胞TRF2表达,siRNA转染细胞中Rapl表达明显降低。结论TRF2调控Rapl表达。     

华蟾素调控HIF-1α/VEGF通路逆转结肠癌HCT15/5-FU细胞耐药的体外研究

目的 探讨华蟾素(CINO)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人源结肠癌(CRC)耐药细胞株HCT15/5-FU的逆转作用,明确缺氧诱导因子(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)通路在逆转结肠癌化疗耐药中的调控作用。方法 MTT法检测细胞耐药性及耐药指数的变化,流式细胞术评价细胞凋亡的情况,划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力的变化。Western blot检测上皮间充质转化(EMT)相关蛋白及HIF-1α/VEGF通路相关蛋白的表达。结果 与HCT15细胞相比,HCT15/5-FU的耐药指数约为8.720。CINO联合5-FU作用后,能够明显提升HCT15/5-FU细胞的药物敏感性,降低耐药指数,剂量依赖性地上调细胞凋亡水平、抑制细胞迁移和侵袭能力;Western blot结果显示CINO联合5-FU作用后能够抑制EMT及HIF-1α/VEGF通路的活性。结论 体外研究显示,华蟾素具有逆转结肠癌5-FU耐药的作用,其机制可能与调节HIF-1α/VEGF通路抑制EMT、血管生成有关。