植入前遗传学诊断的新进展

植入前遗传学诊断作为产前诊断的一种形式，可在胎种植前进行诊断，从而防止遗传病的发生。其技术主要包括胚胎活检、聚合酶链反应及荧光原位杂交。现就这些技术在植入前遗传学诊断中的应用、存在的问题、解决及改进的方法进行综述。     

染色体易位携带者的胚胎植入前遗传学诊断研究进展

染色体易位是常见的染色体结构异常。应用荧光原位杂交技术，染色体易位携带者可在胚胎植入前遗传学诊断的帮助下增加正常妊娠的机会。现就相互易位减数分裂的情况进行综述，并讨论应用荧光原位杂交技术对染色体易位携带者进行胚胎植入前遗传学诊断的策略。     

应用全基因组扩增技术对β-地中海贫血进行胚胎植入前遗传学诊断

目的 探讨对β-地中海贫血进行胚胎植入前遗传学诊断的方法。方法 夫妇双方分别为β41-42(-TCTT)及IVS-I 654(C→T)突变杂合子，在本中心进行体外受精-胚胎移植和胚胎植入前遗传学诊断。结果 13个胚胎中共有11个胚胎经PCR分析后获得明确诊断，正常胚胎2个(18．1％)；杂合子胚胎6个(54．5％)；双重杂合子胚胎3个(27．3％)。共移植3个胚胎，其中2个正常胚胎、1个杂合子胚胎。在胚胎移植后5周B超示三胎妊娠，孕8周自然减一胎，并于孕20周时经产前诊断，证实均为健康胎儿。现已分娩双胎分别为正常和杂合子。结论 成功应用全基因组扩增技术对β-地中海贫血进行胚胎植入前遗传学诊断，并分娩健康双胎。     

染色体病在胚胎植入前遗传学诊断中的研究与发展

随着辅助生殖技术的发展,越来越多的不孕患者通过这项高科技技术得到了自己的后代,但临床发现一部分患者在进行数次辅助生殖助孕后,仍然无法受孕;有的患者即使具有良好的内膜容受性及形态优质的胚胎仍然会发生反复流产.上世纪80年代末,植入前遗传学诊断的出现,使人们认识到这些问题很可能与胚胎染色体异常有关,并运用于临床,大大提高了IVF的植入率及临床妊娠率,使具有遗传缺陷的夫妇能生育健康的后代.因此,本文从分子细胞遗传学角度综述导致植入前胚胎染色体异常的机理与影响因素,荧光原位杂交技术在植入前胚胎染色体异常检测中发挥的作用,以及植入前遗传学诊断在染色体异常方面的研究进展,及其对辅助生殖技术的影响.     

FISH技术在胚胎植入前遗传学诊断中的应用及前景

随着体外受精-胚胎移植技术的快速发展和进步，以及单细胞水平上基因诊断技术的成功，使得在体外受精过程中，胚胎移植入母体子宫前进行遗传学诊断成为可能。本文综述荧光原位杂交（FISH）技术在胚胎植入前遗传学诊断（PGD）中的应用和研究进展。     

植入前遗传学诊断的结局和安全性

植入前遗传学诊断（preimplantation genetic diagnosis, PGD）是目前辅助生殖技术的重要组成部分, 主要用于遗传高风险夫妇植入前胚胎的选择。自1990年第一个PGD婴儿诞生以来,PGD技术对临床结局及子代安全性的影响已成为目前众多学者所关心的问题。本文从不同活检时期、植入前遗传学筛查（preimplantation genetic screening, PGS）以及活检后胚胎冷冻等几个方面,详述了PGD的临床结局及后代安全性等问题。     

人类植入前胚胎单卵裂球性别鉴定的双色荧光原位杂交技术

目的为开展植入前遗传学诊断的临床应用，建立一套实用的植入前胚胎性别鉴定的技术。方法运用显微操作建立人类胚胎（３～１０细胞阶段）显微活检技术和制备单个细胞间期核标本技术，并运用双色荧光原位杂交技术对人胚单卵裂球进行性别鉴定。结果初步建立了人类胚胎（３～１０细胞阶段）显微活检技术和单个细胞间期核标本制备技术，并对人类早期胚胎单卵裂球进行了性别鉴定。结论本套技术具有快速诊断（６小时）、仅需微量标本（１个细胞）及不需细胞培养等特点，性别鉴定准确度高（１００％）。     

胚胎植入前诊断α-地中海贫血一例

目的对1例α-地中海贫血患者进行植入前胚胎遗传学诊断。方法应用单细胞跨越断裂点荧光聚合酶链反应（PCR）检测技术对1例夫妇双方均为α-地贫杂合子进行了胚胎植入前诊断（PGD）。结果9个胚胎进行PGD,经PCR分析,共获得2个正常胚胎,其中一个胚胎体外发育停滞;2个杂合子胚胎,2个重型地贫胚胎,2个胚胎未检出;移植了3个胚胎,获得临床妊娠。孕17周时经脐带血穿刺,分别证实为完全正常胚胎和杂合子胚胎,现已出生两名健康男婴。结论应用PGD技术可对α-地贫进行胚胎植入前遗传筛查,达到优生的目的。     

运用全染色体探针FISH技术进行罗伯逊易位携带者胚胎植入前诊断

目的运用全染色体探针荧光原位杂交技术(fluorescent in situ hybridization ,FISH)对14/21罗伯逊易位携带者的胚胎进行植入前遗传学诊断,达到优生目的.方法应用FITC、Texas标记的21/14全染色体探针对14/21罗伯逊易位携带者的胚胎活检后的单个卵裂球进行遗传学检测,选择正常信号或携带者信号核型胚胎进行移植.结果常规单精子显微注射-胚胎移植(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后获取胚胎12个,活检优质胚胎11个,杂交后有信号胚胎7个,其中1个正常胚胎,1个携带者胚胎;1个14单体胚胎,1个21单体胚胎,1个21三体胚胎,另2个胚胎活检后均为21号二体,无14号信号.结论运用14/21全染色体探针荧光原位杂交技术对14/21罗伯逊易位携带者的胚胎进行植入前遗传学诊断是能够将正常核型胚胎挑选出来进行移植,从而达到优生目的.     

植入前遗传学诊断的安全性和可靠性探讨

植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)是在胚胎植入前对配子或体外受精胚胎进行遗传学分析的一项诊断技术,目的在于从源头预防遗传性疾病的发生,从而改善有遗传性疾病高风险夫妇的妊娠结局.近年来,随着分子生物学技术的进步,越来越多遗传性疾病的发生机制被阐明,PGD的诊断范围逐渐扩展,其应用周期数也日益增多.新技术的开展如比较基因组杂交及其微阵列提高了PGD诊断的准确性.然而,这项技术的安全性问题也引起了人们高度重视.作者从透明带开孔技术、不同时期胚胎活检、胚胎活检细胞数目以及遗传分析技术的可靠性等方面对PGD的安全性进行了探讨.     

植入前遗传学诊断的安全性和可靠性探讨

植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)是在胚胎植入前对配子或体外受精胚胎进行遗传学分析的一项诊断技术,目的在于从源头预防遗传性疾病的发生,从而改善有遗传性疾病高风险夫妇的妊娠结局.近年来,随着分子生物学技术的进步,越来越多遗传性疾病的发生机制被阐明,PGD的诊断范围逐渐扩展,其应用周期数也日益增多.新技术的开展如比较基因组杂交及其微阵列提高了PGD诊断的准确性.然而,这项技术的安全性问题也引起了人们高度重视.作者从透明带开孔技术、不同时期胚胎活检、胚胎活检细胞数目以及遗传分析技术的可靠性等方面对PGD的安全性进行了探讨.     

单基因遗传病的植入前遗传学诊断研究进展

近十多年来，单基因遗传病的植入前遗传学诊断（PGD）已取得了显著的成绩，其基本技术包括胚胎活检，PCR和FISH。本文就PGD的研究概况，活检标本来源，以PCR技术为基础的各类诊断技术的研究进展，影响PGE准确性的原因及未来的发展作一综述。     

高育龄妇女胚胎植入前21号染色体非整倍体检测

目的运用荧光原位杂交技术(fluorescent in situ hybridization,FISH)对生育过21三体患儿的高育龄妇女的胚胎进行植入前遗传学诊断,达到优生目的.方法应用FITC标记的21号着丝粒探针对生育过21三体患儿的高育龄妇女的胚胎活检后单个卵裂球进行遗传学检测,选择正常信号或携带者信号核型胚胎进行移植.结果常规单精子显微注射-胚胎移植(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后获取胚胎4个,活检优质胚胎3个,杂交后每个卵裂球均出现3个21号染色体完整信号,认为3个胚胎均为21三体异常胚胎,故建议放弃移植,从而成功避免了21三体患儿的出生.结论运用21号染色体着丝粒探针荧光原位杂交技术对生育过21三体患儿的高育龄妇女的胚胎进行植入前遗传学诊断是可行的,同时也是必要的,是避免非整倍体患儿出生的重要途径.     

胚胎植入前非整倍体筛查

染色体非整倍体改变在体外受精胚胎中十分多见，是导致人类辅助生殖失败的常见原因。胚胎细胞染色体的非整倍体筛查，已成为胚胎植入前遗传学诊断的主要内容。体外受精后胚胎活检，进行荧光原位杂交，避免非整倍体胚胎移入母体官腔，能起到显著提高着床率和改善受孕率的效果。     

植入前诊断罗伯逊易位一例

目的　对 1例罗伯逊易位患者进行植入前胚胎遗传学诊断。方法　应用 Vysis L SI13q14 ,Tel Vysion14 q探针对卵裂球对进行荧光原位杂交分析。结果　荧光原位杂交结果显示 1个胚胎的染色体正常或为携带者 ;7个胚胎染色体异常 ,其中 1个 14三体 ,4个 14三体 13单体 ,2个 13三体 14单体 ;2个胚胎未见明确信号。移植 1个染色体正常或平衡易位的胚胎后 ,孕 10周复查 B超示胎儿发育良好。结论　罗伯逊易位的植入前胚胎遗传学诊断方法有效。     

X-连锁慢性肉芽肿病的植入前遗传学检测

目的 采用多重置换扩增结合单体型分析及致病基因检测进行X-连锁慢性肉芽肿病的植入前遗传学检测。方法 利用位于CYBB基因两侧的16个短串联重复序列位点对一个X-连锁慢性肉芽肿病的家系构建单体型进行分析。活检的胚胎细胞通过多重置换扩增技术进行全基因组扩增，利用扩增产物检测具有多态性的STR位点与CYBB基因，同时采用位点Amel进行性别诊断。结果 对一个家系共进行了2个周期的PGT，家系分析结果显示7个STR位点具有多态性。共对16个胚胎进行了诊断，均获得诊断结果，诊断效率为100%，其中8个为正常胚胎，1个为携带者，7个为异常胚胎。全基因组扩增成功率100%，后续PCR成功率为99.3%(143/144),ADO率为14.0%(6/43)。先后进行了三次胚胎移植，末次移植后获得单胎妊娠，最终足月顺产一个不携带致病基因的健康男婴。结论 基于多重置换扩增产物对短串联重复序列进行连锁分析结合致病基因检测可对X连锁慢性肉芽肿病进行准确且有效的植入前遗传学检测。     

外周血性染色体异常患者精子染色体分析及植入前遗传学诊断

目的探讨外周血性染色体异常患者的精子染色体组成，评估其胚胎性染色体异常的风险，为胚胎植入前遗传学诊断（preimplantation genetic diagnosis，PGD）的应用提供客观依据。方法应用三色荧光原位杂交技术fluorescence in situ hybridization，FISH）对3例性染色体异常的患者（例1为46，XY／47，XXY，例2为45，XO／46，X，Yqh-，例3为47，XYY）进行精子X、Y和18号染色体分析，并对例2进行PGD。结果例2的X18：Y18精子的比例为2．05：1，总异常精子比例达29．71％，其中XY18、O18和XO均明显高于其它组。例3总异常精子比例占4．91％，XY18占1．87％。对例2进行PGD，移植1个XX1818胚胎。结论通过FISH检测性染色体异常患者的精子，有助于评估其胚胎性染色体异常的风险，从而选择性应用胚胎植入前遗传学诊断。     

单基因遗传病的植入前遗传学诊断研究进展

近十多年来 ,单基因遗传病的植入前遗传学诊断 (PGD)已取得了显著的成绩 ,其基本技术包括胚胎活检、PCR和FISH。本文就 PGD的研究概况、活检标本来源、以 PCR技术为基础的各类诊断技术的研究进展、影响 PGD准确性的原因及未来的发展作一综述     

Klinefelter综合征患者胚胎着床前遗传学诊断的临床应用

目的探讨着床前遗传学诊断技术在Klinefeher综合征中的临床应用。方法对3例存在生精功能的Klinefeher综合征患者的21枚胚胎进行着床前遗传学诊断,选择正常核型的胚胎移植。结果3对夫妇中2对夫妇获得妊娠,分娩了4个健康子代。结论胚胎着床前遗传学诊断技术可以为Klinefelter综合征患者获得健康子代提供帮助。     

一例致病机制不明甲型血友病家系的植入前检测

目的对一致病机制不明的甲型血友病家系进行胚胎植入前遗传学检测,以降低该家系生育患儿的风险。方法应用测序、F8基因的1号和22内含子倒位检测及MLPA检测等手段检测已生育甲型血友病患儿的女性。应用植入前检测的方法选择染色体正常的女性胚胎植入并进行产前诊断及随访。结果在已生育甲型血友病患儿的女性外周血样本中检测到F8基因意义未明突变,其它检测未见异常。根据胚胎植入前检测结果,为该女性移植一枚染色体正常的女性胚胎,产前诊断及生后随访确认胎儿为非甲型血友病女性。结论本研究未能明确该家系致病位点,但由于甲型血友病为X连锁隐性遗传病,在对患者充分知情告知并同意后,可应用植入前检测的方法选择女性胚胎移植,以最大限度降低后代患病风险。