甘露糖结合凝集素遗传缺陷与非感染性疾病

甘露糖结合凝集素（mannose-binding lectin,MBL）是一种由肝脏合成的、存在于血清中的C型凝集素,过去曾被称为甘露糖结合蛋白,属补体系统的成分糖蛋白之一,具有免疫调理作用、补体活化作用、调节炎症反应及促进凋亡的作用。MBL的生理功能与血浆中MBL水平高低有关,而MBL血浆水平由MBL基因多态性决定,其中外显子1区＋223、＋230和＋239位点、启动子区-550和-221位点以及5’端非翻译区＋4位点的单核苷酸多态性有着至关重要的影响,这些位点变异可导致血浆蛋白水平降低,从而导致机体对某些感染性和非感染性疾病易感。MBL缺陷与感染性疾病的相关性研究,国内外都有相当多的报道,本人旨在MBL遗传缺陷与机体非感染性疾病相关性方面作一综述。     

MBL遗传缺陷与疾病相关性

甘露糖结合凝集素(MBL)是肝分泌的一种糖蛋白,是人类天然免疫中非常重要的一线抗感染分子,该物质通过与甘露糖结合凝集素相关性丝氨酸蛋白酶和病原微生物表面的单糖结合而激活补体,从而起到抗感染作用,除此之外还与自身免疫调节和细胞凋亡有关.如果血浆中MBL浓度过低,其生理功能将明显低下,结果导致机体对某些感染或非感染性疾病易感.血浆中MBL浓度由MBL基因控制,其中外显子1区 223、 230和 239位点、启动子区-550和-221位点以及5'端非翻译区 4位点的单核苷酸多态性对产物的影响重大,而不同人种中上述位点的基因多态性不同,结果导致不同人群对疾病的易感性不同.本文就MBL遗传缺陷及其与疾病的相关性作一综述.     

甘露糖结合凝集素与炎性肠病相关性的研究进展

甘露糖结合凝集素(MBL)属于凝集素家族,是机体先天性免疫的重要成分,有激活补体系统、调理吞噬等作用,并与许多免疫相关性疾病有关.炎性肠病包括溃疡性结肠炎和克罗恩病,目前普遍认为其发病机制与自身免疫损害密切相关.近年研究表明,MBL基因的多态性导致了其血清水平的个体差异,且与炎性肠病的发病率、临床症状、病程等具有相关性.文中综述了MBL及其与炎性肠病间相关性的研究进展.     

甘露聚糖结合凝集素补体途径与糖尿病肾病发病关系的研究进展

糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy，DN）是糖尿病重要的晚期并发症，可单独发生在15-40％的所有1型和2型糖尿病患者中。近年来许多证据阐明了甘露聚糖结合凝集素（mannose-binding lectin，MBL）及其补体激活与疾病的重要关系，尤其是与糖尿病以及糖尿病肾病的关系。本文综述了MBL的结构、功能、与各种疾病的联系，以及MBL补体途径激活与糖尿病肾病关系的研究进展。     

甘露聚糖结合凝集素的生物学功能及其临床意义

甘露聚糖结合凝集素 (MBL)是一种肝源性的血清蛋白 ,属Ca2 依赖型凝集素家族成员 ,在天然免疫中起重要作用。MBL具有调理功能 ,可选择性结合表面富含甘露寡糖的病原体 ,既可通过MBL途径活化补体 ,也可特异性结合细胞表面受体活化巨噬细胞。已发现MBL基因突变可致血清MBL水平低下和功能缺损。MBL缺损使个体易患某些感染性疾病和自身免疫病。     

甘露糖结合蛋白研究进展

甘露糖结合蛋白(MBP)是一种存在于血清中的C型凝集素。MBP通过结合病原生物表面的甘露糖等糖基受体发挥调理吞噬作用和(或)通过MBP途径激活补体,在机体的固有免疫应答过程中发挥重要作用。编码MBP的基因突变干扰了MBP的二级结构,产生无功能的蛋白,致使血清中MBP含量降低。研究表明,MBP基因突变与感染性疾病、自身免疫性疾病、肾脏疾病均有一定的相关性。     

MBL2与MASPs家族蛋白质相互作用的生物信息学分析

目的:通过生物信息学方法对甘露糖结合凝集素2(MBL2)蛋白与甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(MASPs)家族蛋白质的相互作用进行全面预测分析。方法:使用同源建模(Swiss-model)和折叠识别(Phyre2)分别来构建MBL2蛋白与MASPs家族蛋白质的结构,使用STRING数据库及ZDOCK3.02预测分析MBL2与MASP1、MASP2两个蛋白质的相互作用情况。结果:MBL2与MASP1和MASP2均存在直接相互作用,并且和COLEC11、COLEC10、FCN2、C4B等构成相互作用网络。MBL2与MASP1结合位点和MASP2的结合位点高度重叠。MBL2参与结合MASP1的残基,大部分(77%)也参与了与MASP2的结合,表明MBL2是通过同一个区域,分别与MASPs家族的蛋白质相互作用。结论:MBL2与MASPs家族蛋白质之间作用密切,从而可能在补体系统激活及机体免疫防御等方面发挥重要的作用。     

甘露糖结合凝集素基因点突变与风湿性心脏病易感性的关系

目的探讨风湿性心脏病易感性与甘露糖结合凝集素基因第一外显子点突变的关系.方法采用PCR和限制性片段长度多态性分析对36例慢性风湿性心脏病病人和39名正常人的甘露糖结合凝集素(MBL)等位基因分布情况进行分析.结果风湿性心脏病病人及正常人均未发现有MBL C和D等位基因的出现;11例病人为MBL A/B等位基因杂合子,1例病人为MBL B/B等位基因纯合子;15名正常人为MBL A/B等位基因杂合子,未发现有MBL B/B等位基因纯合子.携带B等位基因的风湿性心脏病病人平均症状出现年龄为30岁±14岁,AA纯合子病人的平均症状出现年龄为37岁±11岁,差异有显著意义(P<0.05).结论甘露糖结合凝集素基因的点突变所造成的甘露糖结合凝集素功能低下或血清浓度偏低,可能不是风湿性心脏病发病的主要原因,但会加速风湿性心脏病的进展,这与风湿性心脏病易感人群在青少年中最高是一致的.     

荧光差异电泳和质谱技术联合研究对比剂肾损伤尿液差异表达蛋白

目的 比较对比剂肾损伤发生前后尿液蛋白质组的差异,搜寻差异表达蛋白,为对比剂肾病发病机制的阐明和尿液标志蛋白的发现提供依据.方法 收集12例上海交通大学医学院附属仁济医院心内科接受冠状动脉造影或介入诊疗术患者手术前、后的尿液,用不同的荧光染料标记后行双向电泳,Decyder软件比较蛋白质谱的差异,对差异表达点用质谱技术进行蛋白质鉴定.结果 发现了56个差异表达蛋白点,其中39个点上调,17个点下调.其中,凝集素补体激活途径的关键蛋白-甘露糖结合凝集素和甘露糖结合凝集素相关的丝氨酸蛋白酶2均上调.结论 建立了基于荧光差异电泳和质谱分析技术的尿液蛋白质组学方法,搜寻了对比剂急性肾损伤发生前后的差异表达蛋白质,提示甘露糖结合凝集素补体激活途径可能参与了对比剂急性肾损伤的发病.

Abstract：

Objective To explore the differentially expressed proteins of contrast-induced nephropathy through a comparison of urinary proteome so as to further elucidate the pathogenesis and discover the disease biomarker.Methods The urine samples of 12 patients were collected before and after coronary angiography.Two dimensional electrophoresis was performed after the urine samples were labeled by different dyes.The differences of urine proteome were analyzed by Decyder software and the differentially expressed spots identified by mass spectrometry.Results A total of 56 differentially expressed spots were detected.Among them, 39 spots were up-regulated and 17 spots down-regulated.And mannose binding lectin and mannose binding lectin associated serine protease 2, key proteins in complement body activation, were both significantly up-regulated.Conclusion Urine proteomic study methods are constructed based on 2D-DIGE and mass spectrometry.The lectin pathway of complement body may be associated with contrast-induced acute kidney injury.     

甘露糖结合凝集素的研究进展

甘露糖结合凝集素(MBL)是先天性免疫系统的重要成分之一,在免疫防御中发挥多重作用。MBL基因多态性与多种疾病易感性、严重程度以及预后密切相关。在免疫系统尚未成熟的儿童,或同时存在原发或继发免疫缺陷的患者,低表达MBL基因型与感染性疾病、自身免疫性疾病的相关性尤其显著。因此,MBL的检测和替代治疗即将应用于个体化医疗。作者就MBL在疾病和健康中的作用、检测方法学的进展及MBL相关的治疗作一综述。     

宁夏回族人群甘露糖结合凝集素基因多态性研究

目的 调查宁夏回族人群中甘露糖结合凝集素(MBL)基因多态性,为进一步研究MBL基因多态性与疾病关联性提供线索。 方法 应用PCR-RFLP方法检测117例宁夏回族健康人群的MBL基因的多态性分布,并与宁夏汉族及其他民族健康人群中MBL基因多态性的分布进行比较。结果 在宁夏回族人群中,只检测出两种等位基因: 野生型A和变异型B,未检出变异型C、D等位基因,获得等位基因分布频率显示宁夏回族健康人群与宁夏汉族健康人群MBL基因多态性分布差异无显著性,而宁夏汉族与广东汉族相比较,差异有显著性。结论 本研究证实了同一人种内部MBL等位基因分布存在地理差异,也进一步支持中国汉族人群可分为南北两类的假设。     

Toll-like receptors (TLRs) and mannan-binding lectin (MBL): on constant alert in a hostile environment

In the beginning were neither B cells nor T cells nor antibodies, but innate immune defense alone. The primary functional theme of innate immunity is the distinction between self and non-self, which is maintained by a vast number of cellular and subcellular components. In this context, the immense importance of the Toll-like receptors (TLRs) is well established. Positive (Darwinian) selection seems to be acting on the ligand-binding domains of these molecules, suggesting a selection pattern similar to that previously observed in the MHC proteins. In sharp contrast to TLRs, the biological significance of mannan-binding lectin (MBL) is controversial, and, concerning humans, it has been suggested that low concentration of MBL in serum represents a selective advantage. In this mini-review, based on a doctoral thesis, evolutionary aspects of TLRs and MBL are discussed.     

甘露聚糖结合凝集素对人中性粒细胞功能的影响

目的研究甘露聚糖结合凝集素（MBL）对人中性粒细胞（PMN）功能的影响。方法采用ELISA和Dot blot检测MBL与微
生物的结合;应用流式细胞术检测及荧光显微镜观察MBL对PMN吞噬功能的影响;用qPCR分析MBL对PMN表达IL-1β、
TNF-α和CD11b mRNA的影响,以ELISA检测MBL对PMN分泌TNF-α和IL-6的影响;应用NBT还原法检测MBL对PMN呼
吸爆发的影响。结果MBL与微生物结合并呈浓度依赖关系。无人血清时,MBL对PMN吞噬C. albicans 和E.coli 无明显影
响。存在MBL缺陷人混合血清时,MBL可促进PMN对C. albicans的吞噬且这种作用可被甘露聚糖所阻断,上调PMN IL-1β、
TNF-α、IL-6及CD11b表达水平,刺激PMN呼吸爆发。结论MBL以补体凝集素途径依赖方式增强PMN吞噬功能,并促进炎性
细胞因子分泌。
     

甘露糖结合凝集素与人类免疫缺陷病毒感染的关联性研究（英文）

目的探讨甘露糖结合凝集素（mannose-binding lectin,MBL）多态性与中国北方汉族人群HIV-1感染的关联。方法采用病例对照研究,以91例HIV感染者（北京佑安医院）和91例健康人（北京同仁医院）作为研究对象,用焦磷酸测序技术（pyrosequencing）检测病例组和对照组MBL ExonⅠ第52、54、57三个密码子的点突变和启动子＋4、-221、-550三个位点的多态性,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆MBL总浓度及血浆中有活性的MBL浓度,用流式细胞术检测HIV感染者的CD4＋T淋巴细胞计数,用bDNA法检测HIV感染者的病毒载量。结果等位基因B在HIV-1感染者中的分布频率显著高于健康对照组（0.18vs0.14）。HIV-1感染者的血浆MBL浓度（0.44）及血浆中活性MBL的浓度（0.61）比健康对照组的浓度要低。携带有A/B、A/C或者B/B基因型的HIV-1感染者与携带有A/A基因型的HIV-1感染者比较,血浆中MBL浓度、血浆中活性MBL浓度以及CD4＋T细胞数量均偏低,但病毒载量偏高。结论 MBL与中国汉族人群的HIV-1感染具有关联作用。携带有B等位基因型、低MBL浓度以及低MBL活性浓度的个体,更容易受到HIV-1病毒的感染。     

中国北方汉族人群甘露糖结合凝集素与HIV易感性的研究

目的 研究中国北方汉族人群甘露糖结合凝集素(MBL)启动子多态性及血浆MBL浓度对HIV易感性的影响.方法 采用病例对照研究,病例组为115例北京佑安医院确诊为HIV感染的患者,对照组为115例非HIV感染的健康人,用焦磷酸测序法检测样本MBL基因启动子-550(H/L)和-221(Y/X)两个位点的单核苷酸多态性,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测样本血浆MBL浓度.结果 基凶型LY/LY、LY/LX、HY/LY、HY/HY和LX/LX在病例组中分别检测到66 例(57.40%)、25例(21.70%)、17例(14.80%)、5例(4.30%)和2例(1.70%),在对照组中分别检测到77例(67.00%)、23例(20.00%)、12例(10.40%)、0例(0.00%)、和3例(2.60%);单倍型LY、HY、LX在HIV感染组中出现的频率分别为75.70%、11.70%和12.60%,在健康对照组中出现的频率分别为82.20%、5.20%和12.60%,病例组和对照组单倍型分布的差异有统计学意义(P=0.041).病例组血浆MBL浓度平均值为(1775.14±786.31)μg/L,对照组血浆MBL浓度平均值为(3672.21±597.13)μg/L,两组血浆MBL浓度的差异有显著的统计学意义(P=0.001).结论 中国北方汉族人群MBL基因启动子的单倍型以LY和HY为主,基因型以LY/LY和LY/LX为主,病例组血浆MBL浓度平均值只有对照组血浆MBL浓度的50%.故我们推测中国北方汉族人群MBL基因启动子的多态性及血浆MBL浓度的高低可能与HIV的易感性相关,血浆MBL浓度低的个体易于感染HIV.     

Bal b/c小鼠甘露聚糖结合凝集素-C基因的克隆与鉴定

目的获得小鼠甘露聚糖结合凝集素-C(MBL-C)基因的全长编码区cDNA。方法利用RT-PCR方法,从Balb/c小鼠的肝细胞中分离出MBL-C基因cDNA片段,将其克隆入pUC-T载体并测序,对基因结构及其与人MBL基因的同源性进行比较分析。结果扩增得到的Balb/c小鼠MBL-C基因cDNA全长735 bp,编码245个氨基酸残基,包含了完整的编码区基因序列。经核苷酸序列比较分析发现,扩增得到的Balb/c小鼠MBL-C基因与Genbank中发表的序列具有100%的同源性,与人的MBL基因的同源性为71.4%。结论成功地克隆到完整的Balb/c小鼠MBL-C编码区基因,为进一步在整体水平研究MBL分子的天然免疫功能提供了必要的条件。     

甘露糖结合凝集素基因多态性与中枢神经系统脱髓鞘疾病的关系研究简

目的 探讨甘露糖凝集素（mannosebinding lectin,MBL）基因多态性与中枢神经系统脱髓鞘疾病的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）法检测45例中枢神经系统脱髓鞘疾病和60例健康人的MBL基因多态性的分布.结果 45例中枢神经系统脱髓鞘疾病患者甘露糖凝集素基因Exon Ⅰ54位密码子点突变中,野生型（GGC/GGC）为34例,占75.56％;突变杂合子型（GGC/GAC）为10例,占22.22％;突变纯合子型（GAC/GAC）为1例,占2.22％.基因频率：GGC为86.67％,GAC为13.33％.对照组野生型（GGC/GGC）为30例,占50.00％;突变杂合子型（GGC/GAC）为28例,占46.67％;突变纯合子型（GAC/GAC）为2例,占3.33％.基因频率：GGC为73.33％,GAC为26.67％.中枢神经系统脱髓鞘疾病患者GGC/GGC基因型频率增高,而GGC/GAC基因型频率降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;中枢神经系统脱髓鞘疾病患者GGC等位基因频率高于健康对照组,而GAC等位基因频率低于健康对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 MBL基因突变可能是中枢神经系统脱髓鞘疾病发病的危险因素.