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目的通过体外转录获得SARS冠状病毒RNA片段,为建立RT-PCR和荧光定量PCR诊断方法提供阳性对照.方法根据GenBank登录SARS冠状病毒Tor2株基因组序列,选择基因组中18138-18327nt作为目的扩增序列,并将其分解为首尾重叠的3个片段,人工合成对应的单链DNA序列,通过退火延伸获得全长dsDNA片段,PCR扩增该片段后,连接至载体pMD18T上,筛选含目的插入片段的阳性重组质粒pMD 18T-SARS,用BamH Ⅰ和HindⅢ切出目的片段,连接至线性化表达性质粒pGEM上;筛选阳性重组质粒pGEM-SARS,测序鉴定后,经HindⅢ酶切线性化,用T7 RNA聚合酶进行体外转录,得到含SARS冠状病毒目的序列的RNA片段,转录产物经电泳观察后,用RT-PCR验证.结果获得含SARS冠状病毒目的基因序列的RNA片段.结论该RNA片段可用于SARS冠状病毒RT-PCR和荧光定量RT-PCR诊断方法的阳性对照. 相似文献
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目的:观察板蓝根、双黄连、清开灵等8种中药注射剂的体外抗内毒素作用。方法:注射剂经稀释后取0.2mL与内毒素0.2mL(1EU/mL)温孵,然后利用鲎试剂定量测定内毒素含量,计算各注射剂对内毒素的清除率,比较不同注射剂的抗内毒素作用。结果:双黄连粉针剂、清开灵注射液、板蓝根注射液、穿琥宁注射液和鱼腥草注射液都有明显的体外抗内毒素作用,其中双黄连、清开灵和板蓝根的抗内毒素作用最强,稀释2500倍仍能够清除70%以上的内毒素;穿琥宁、鱼腥草和鱼金注射液其次;复方大青叶注射液和抗腮腺炎注射液的体外抗内毒素作用较弱。结论:在清热解毒中药中寻找抗内毒素作用的制剂将有一定的发展前景。 相似文献
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目的 研究不同加药方式下鬼针草提取物的抗肠道病毒71型(EV71)活性。方法 将人恶性胚胎横纹肌瘤细胞(RD)分为EV71对照组、正常RD细胞组、利巴韦林组、鬼针草提取物组(7.81、3.91、1.95、0.98、0.49、0.25 mg/mL,感染后加药方式加设0.13 mg/mL),鬼针草提取物分别按照感染前加药(鬼针草提取物处理后再加EV71)、感染后加药(EV71感染后加入鬼针草提取物)、病毒与药物同时加入(鬼针草提取物和EV71同时加入)三种加药方式进行加药,通过噻唑蓝(MTT)比色法测定鬼针草提取物对RD细胞的半数细胞毒性浓度(CC50)及三种加药方式下鬼针草提取物抗EV71的作用,计算选择指数(SI)。荧光定量PCR法检测鬼针草提取物在三种加药方式下对EV71 VP1基因表达水平的影响;以及EV71感染RD细胞后8 h内不同时序加药组EV71 VP1基因表达水平差异。结果 鬼针草提取物的CC50为8.83 mg/mL,当鬼针草提取物浓度为7.81 mg/mL时,细胞存活率为(72.79±2.69)%,因此选择7.81 mg/mL作为抗病毒实验给药浓度。感染前加药、感染后加... 相似文献
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四种板兰根提取物抗流感病毒作用实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】研究板蓝根中性、酸性、碱性和两性提取物抗流感病毒作用及其对机体免疫力的影响。【方法】用鸡胚培养法观察板蓝根提取物对流感病毒接种鸡胚的毒性抑制作用;以病毒滴鼻感染小鼠,建立病毒感染小鼠的模型,观察4种提取物对模型小鼠死亡率及脾T细胞、B淋巴细胞增殖的影响。【结果】鸡胚实验显示,板蓝根酸性提取物能显著阻滞病毒感染鸡胚。动物实验表明,经过酸性提取物治疗的小鼠死亡率明显降低,鼠脾T细胞、B淋巴细胞刺激指数增高,免疫功能增强,其它3种提取物均无上述作用。【结论】板蓝根酸性提取物具有较强的直接抑制流感病毒的作用。 相似文献
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千百年来,中药在防治病毒性传染性疾病中发挥着重要作用,尤其在非典、禽流感、新型冠状病毒肺炎的临床实践中,充分显示了中医药在抗病毒疾病方面具有独特的功效和优势。本文根据文献资料,重点阐述连翘、金银花、黄芩、板蓝根、黄芪等单味与复方制剂抗病毒的功效与其物质基础,并提出中药抗病毒的机理:一方面其中药活性成分可直接杀灭病毒、抑制病毒代谢,减轻病毒对细胞组织的损伤;另一方面其中药成分还可通过体内代谢过程调节免疫功能,增强机体抵御病毒的侵袭与损害,以达到扶正固本清瘟的作用。 相似文献
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补肾健脾方体外抗乙型肝炎病毒作用的初步研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:初步探讨补肾健脾方的抗乙型肝炎病毒(HBV)作用。方法:通过补肾健脾方作用于体外培养的2.2.15细胞,观察其对2.2.15细胞两抗原分泌的影响,初步评价其抗HBV作用。结果:补肾健脾方作用于2.2.15细胞10d后,药物对2.2.15细胞的半数毒性浓度为37.80g/L,对HBsAg、HBeAg的半数抑制浓度分别为19.05g/L和9.55g/L,治疗指数分别为1.98和3.96。结论:补肾健脾方在体外细胞培养中对HBeAg的分泌有较好的抑制作用。 相似文献
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目的 比较利巴韦林等五种药物对汉坦病毒(HV)的体外抑制作用。方法 利用HV76—118株感染传代培养的Vero—E6细胞,采用免疫荧光法分别评价五种药物的抗病毒效果。结果 五种药物均对汉坦病毒的入侵无阻断作用;利巴韦林对汉坦病毒增殖有明显的抑制作用,其最大无毒浓度(TD0)为500μg/ml、最小有效浓度(MTC)为31.2μg/ml,干扰素α-1b(赛若金)TD0为10万U/ml、MTC为0.5万U/ml,阿昔洛韦TD0为625μg/ml、MTC为156μg/ml,更昔洛韦、膦甲酸钠各浓度均未见对病毒增殖有抑制作用。结论 在一定浓度范围内利巴韦林、赛若金、阿昔洛韦对出血热病毒均具有抑制作用。 相似文献
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体外制备严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)类病毒细胞株,用不同浓度莪术油处理类病毒细胞株,观察检测细胞数和相对荧光值(RLU),计算其半数有效抑制浓度(IC50);临床纳入新型冠状病毒肺炎患者4例,对照组和试验组各2例,对照组常规治疗,试验组在常规治疗的基础上联用莪术油注射液,观察患者核酸转阴率、转阴时间、肺部影像学变化、退热时间、临床改善时间和不良事件发生情况等。体外实验,随着莪术油浓度增加,相对荧光值逐渐降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),IC50值为0.26μg/ml;体内研究:试验组病例1粪便新型冠状病毒核酸3 d转阴,病例2咳嗽症状明显缓解,观察肺部影像学有明显吸收;对照组咽拭子新型冠状病毒核酸转阴时间分别为5、7 d。试验组均无不良事件发生。莪术油体外对SARS-CoV-2类病毒具有较强抑制作用,且具有浓度依赖性。COVID-19在常规治疗的基础上联用莪术油注射液可改善患者因SARS-CoV-2感染引起的咳嗽、促进SARS-CoV-2转阴及肺部病灶吸收,降低肺损伤,且未产生明显的不良事件。 相似文献
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目的:研究抗感冲剂体外抗甲型流感病毒的作用。方法:在体外用MTT法和CPE法观察抗感冲剂体外对甲型流感病毒感染的预防作用、直接杀伤作用以及对流感病毒生物合成的抑制作用。结果:抗感冲剂对于阻断流感病毒侵入、直接杀伤病毒及抑制病毒穿入后增殖皆有效果,其治疗指数分别为12.76,10.29,7.95。结论:抗感冲剂有明显的抗甲型流感病毒作用,呈剂量效应关系。 相似文献
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《海南医学院学报》2019,(20)
目的:研究木芙蓉叶提取物的体外抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial viruses, RSV)作用机制。方法:以利巴韦林为对照药物,检测木芙蓉叶提取物抗RSV的活性。通过观察木芙蓉叶提取物不同给药方式的抗病毒作用,对木芙蓉叶提取物抗RSV的作用机制进行初探。结果:木芙蓉叶提取物能有效抑制RSV引起的细胞病变,具有显著的抗病毒作用,治疗指数(therapeutic index, TI)为86.24。木芙蓉叶提取物对病毒的直接灭活作用,同时具有预防和治疗的作用。结论:木芙蓉叶提取物在体外具有显著的抗RSV作用,且其抗病毒作用发生在病毒穿入细胞后的阶段。 相似文献
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4种药用植物提取物体外抗柯萨奇病毒B3作用的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
目的:研究三叶委陵菜、异叶蛇葡萄、蛇葡萄及细叶卷柏提取物对培养细胞的毒性、抗柯萨奇病毒 B3(CVB3)的作用及其机理。方法:通过观察药物毒性、病毒引起的细胞病变效应、MTT法检测细胞活性,判断药物毒性及药物抗病毒效应。结果:4种药物的半数毒性浓度(TC50)分别为7.2, 8.1, 8.7, 12.4μg·ml-1。三叶委陵菜、异叶蛇葡萄、细叶卷柏可直接杀伤病毒,半数抑制浓度(IC50)分别为0.52, 1.21, 0.53μg·ml-1,治疗指数(TI)分别为14, 6.7, 23;蛇葡萄、细叶卷柏可阻止病毒的吸附,IC50分别为0.56, 0.51μg·ml-1,TI分别为16, 23。药物不能抑制病毒的生物合成。结论:4种药物通过不同机制发挥抗CVB3的作用;但是同时对细胞也有一定的毒性作用,仍需进一步研究有效的抗病毒成份。 相似文献
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大黄蒽醌类化合物体外抗流感病毒作用的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨大黄蒽醌类化合物(RAA)在细胞培养中抗流感病毒的作用。方法:采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照药,比较观察大黄蒽醌类化合物对流感病毒引起的细胞病变(CPE)的抑制作用。结果:大黄蒽醌类化合物半数中毒浓度(TC50)为226.1μg/m l,其抗流感病毒的半数有效浓度(IC50)为122.4μg/m l,治疗指数(T I)为1.9,且对流感病毒抑制作用存在明显的量效反应关系。结论:大黄蒽醌类化合物在M DCK细胞中对流感病毒有抑制作用。 相似文献
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目的:对三叉苦水提物、黄皮叶水提物、路边青水提物、裸花紫珠水提物、胆木醇提物、胆木水提物、角花胡颓子醇提物、角花胡颓子水提物和竹叶椒醇提物共9种传统中药提取成分体外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)效果进行研究。方法:通过细胞培养技术评估药物对细胞的毒性作用,利用CCK-8法测定细胞存活率,选择细胞存活率大于50%的药物浓度,通过体外细胞感染模型评估药物抗HRSV的效果。结果:路边青水提物、裸花紫珠水提物和角花胡颓子水提物半数有效浓度(EC50)分别为0.05 mg/mL、0.03 mg/mL和0.05 mg/mL,治疗指数(therapeutic index,TI)分别为18.60、21.67和56.80。结论:路边青水提物、裸花紫珠水提物和角花胡颓子水提物具有较好的抗人呼吸道合胞病毒效果。 相似文献
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目的:观察白头翁提取物体外对结核杆菌的作用.方法:采用新鲜的人型结核分枝杆菌标准菌株(H37RV)、多药耐药以及速生结核菌株,分别接种于含有不同浓度白头翁正丁醇提取物、空白对照和阳性对照的结核菌培养基,观察结核分枝杆菌的生长情况.结果:空白对照组菌落生长情况正常,白头翁提取物组(1:10-1:20)均对新鲜结核菌和速生菌生长有抑制作用,其中白头翁提取物1:10对多药耐药菌株到培养终止期(40 d)仍无细菌生长.经恢复培养40 d均无结核菌生长.结论:一定浓度的白头翁提取物在体外有抗结核菌的作用,且有不可恢复的杀灭作用. 相似文献
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目的:观察毒热平注射液体外抗流感病毒的作用.方法:采用结晶紫粢色法测定毒热平注射液不同加药方式对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的体外抑制作用及其作用24、36、48、72h的抗病毒效率.结果:毒热平注射液能明显阻止病毒吸附于细胞,并抑制细胞内病毒的复制增殖,在高浓度(≥0.18mg/mL)时有直接杀病毒作用.抗病毒效率在48h达高峰,且随时间延长在高浓度(≥0.27mg/mL)时基本不变,而在低浓度时有下降趋势.结论:毒热平注射液具有明显的体外抗流感病毒作用. 相似文献
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苦瓜提取液体外抗腺病毒的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
苦瓜提取液体外抗腺病毒的作用@幸建华$武汉大学期刊社!武汉430072
@杨占秋$武汉大学医学院病毒学研究所!武汉430071
@邱国福$武汉大学药学院!武汉430072
@肖红$武汉大学医学院病毒学研究所!武汉430071~~~~1 朱照静,钟炽昌,罗泽渊,等。苦瓜子有效成分研究。药学学报,1991,25(12):893
2 Miura T.ltoh C,Iwamoto N,et al.Hypogly7cemic activity of the frtit of the Momordica Charantia in type 2 diabetic mice.J Nutr Sci Vitaminol,2001,47(5):340
3 吴强,刘福强,韩维田,a-苦瓜子蛋白对人绒细胞培养液及小… 相似文献
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四妙解毒汤体外抵制人巨细胞病毒作用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
人巨细胞病毒(HCMV)感染播及广泛,它可引起肺炎、肝炎、胃肠炎、新生儿疾病等,近年来对HCMV在动脉硬化性疾病中的发病意义逐渐受到重视。Melnick等以电镜和免疫荧光技术在冠心病患者动脉粥样硬化斑块中检出了 HCMV DNA,阳性率高达90%以上,另外器官移植患者感染HCMV后可在短期内发生动脉粥样硬化,从而提出动脉粥样硬化的病毒感染学说[1]。目前尚无特效药物能够预防和控制其感染[2]。笔者在临床经验基础上,应用四妙解毒汤治疗动脉硬化性闭塞症取得满意效果,并通过体外实验证实其确有明显抑制HC… 相似文献