γ－32P标记反义核苷酸对HBV基因表达的封闭效应

人工构建特异性互补于ＨＢＶ基因ｍＲＮＡＳＰⅡ增强子区的１５－聚反义硫代脱氧核苷酸（１５Ｓ－ａｓＯＮ）并用ｌ－３２Ｐ进行末端标记，以２μＬｍｏ１／Ｌ剂量作用于ＨＢＶ基因转染的ＨｅｐＧ２细胞（２．２．１５细胞），培养２４ｈ及４８ｈ后检测掺入２．２．１５细胞的１５－Ｓ－ａｓＯＮ分别为６９．４ｎｍｏ１／Ｌ和７５．８ｎｍｏ１／Ｌ；对ＨＢ３ｓＡｇ的抑制率分别为５０％和７０％；斑点杂交检测ＨＢＶＤＮＡ，结果表明实验组与对照组无显著性差异，提示本实验所选用的反义核苷酸对ＨＢＶ基因的封闭环节可能发生在翻译水平。实验组与对照组的细胞形态及细胞计数结果表明：我们设计的反义核酸只特异性抑制ＨＢＶ基因表达，而对宿主细胞无明显毒害作用。     

HBs／CD3双特异性抗体介导LAK对HBVDNA转染细胞的细胞毒作用

应用化学偶联方法合成ＨＢｓ／ＣＤ３双特异性抗体，并观察其对ＬＡＫ细胞的细胞毒性作用的影响。用化学偶联剂ＳＰＤＰ将鼠源的ＣＤ３与ＨＢｓ单克隆抗体连接得到ＨＢｓ／ＣＤ３双特异性抗体；设ＨｅｐＧ－２和Ｋ５６２细胞对照组。实验显示，ＨＢｓ／ＣＤ３双特异性单克隆抗体能显著提高ＬＡＫ细胞与２．２．１５细胞结合率；应用１２５ＩＵｄＲ释放试验检测细胞毒性，发现双特异性抗体能增强ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞的细胞毒性，并与抗体浓度相关，ＢｓＡｂ浓度递增，细胞毒性作用随之增加。对细胞毒性作用的特异性研究表明：加入ＨＢｓ／ＣＤ３ＢｓＡｂ后，ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞毒性显著高于ＨｅｐＧ－２和Ｋ５６２细胞组。结果表明，ＨＢｓ／ＣＤ３双特异性抗体具有双向识别ＬＡＫ细胞和２．２．１５细胞的特性，特异地促进ＬＡＫ细胞与靶细胞结合，发挥选择性细胞毒性作用。     

受体导向药物L－HSA－AraAMP体外抗病毒效应的实验研究

以乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ转染的细胞株２．２．１５细胞培养上清液中ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ滴度及细胞内ＨＢＶＤＮＡ中间体的变化作为药物评价指标，应用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色分析法测定细胞毒性。结果表明：乳糖化人血清白蛋白单磷酸阿糖腺苷（Ｌ－ＨＳＡ－ＡｒａＡＭＰ简称交联物）与ＡｒａＡＭＰ具有相似的抗病毒效应。二者对ＨＢｓＡｇ最高抑制率分别为５０％，６３％，对ＨＢｅＡｓ最高抑制率分别为６２．６％，６７．２％，５００μｇ／ｍｌ交联物与１００μｇ／ｍＩＡｒａＡＭＰ对ＨＢＶＤＮＡ有相似的抑制作用。交联物无明显细胞毒性（ＣＤ５０＞２０００μｇ／ｍｌ），ＡｒａＡＭＰ有明显细胞毒性（ＣＤ为６５８．５±１８０μｇ／ｍｌ），对ＨＢｅＡｇ抑制的选择指数分别为＞４．８，１．７。展示了受体导向抗病毒药物的良好前景。     

阳江高本底地区居民中免疫水平与对病毒免疫反应的研究

探讨在天然高本底电离辐射作用下机体的免疫水平与对病毒的免疫反应。方法利用单克隆抗体ＡＰＡＡＰ法检测白细胞介素－２分泌细胞（ＩＬ－２ＳＣ）；利用间接免疫酶法检测抗ＥＢ病毒抗原抗体水平（ＶＣＡ／ＩｇＡ，ＶＣＡ／ＩｇＧ，ＥＡ／ＩｇＡ，ＥＡ／ＩｇＧ）；采用酶标免疫吸附沉淀法检测乙型肝炎（ＨＢＶ）表面抗原（ＨＢｓＡｇ），表面抗原抗体（ＨＢｓＡｂ）和核心抗体（ＨＢｃＡｂ）。结果高本底地区（ＨＢＲＡ）居民外周血淋巴细胞ＩＬ－２ＳＣ频数显著高于对照（ＣＡ）；ＶＣＡ／ＩｇＡ、ＶＣＡ／ＩｇＧ、ＥＡ／ＩｇＧ抗体水平均高于ＣＡ，但仅ＶＣＡ／ＩｇＧ抗体滴度水平存在差异显著性，两地区ＶＣＡ／ＩｇＡ≥１５阳性检出率均显著高于广东地区的平均水平；ＨＢＶ感染率与ＨＢｓＡｂ阳性率为ＨＢＲＡ高于ＣＡ（Ｐ＞０．０５）。结论提示长期低水平电离辐射作用机体免疫功能有增强的趋势。     

10到12岁玻俐维亚男孩的体格测重和肺功能

１０到１２岁玻俐维亚男孩的体格测重和肺功能［英１］／Ｖｉｌｌｅｎａ，Ｍ…／／ＩｎｔＪＳｐｏｒｔｓＭｅｄ．１９９４Ａｐｒ，１５Ｓｕｐｐｌ２．Ｓ７５－Ｂ．报告２３例ＨＡＨＳＥＳ，４４例ＨＡＬＳＥＳ，４３例ＬＡＨＳＥＳ和２８例ＬＡＬＳＥＳ男孩体格测量结果，...     

白细胞介素12真核表达载体对DNA疫苗诱导免疫应答的影响

目的 观察白细胞介素１２真核表达载体（ｐＷＲＧ３１６９）对ＨＢＶ－ＳＤＮＡ疫苗（ｐＣＲ３．１－Ｓ）诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠（Ｈ－２ｄ）的特异性细胞免疫应答及其对稳定表达ＨＢｓＡｇ的小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５细胞（Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ）成瘤性的影响。方法 肌肉注射ＤＮＡ疫苗主白细胞介素１２真核表达载体,背部皮下接种Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ细胞,观察成瘤情况,４ｈ＾５１Ｃｒ释放法检测小鼠脾细胞ＣＴＬ活性。结果：对     

HBsAg阴性应招飞行学员血清HBV-DNA检测研究

目的为控制ＨＢＶ慢性携带者进入航校提供对策，对应招飞行学员中ＨＢｓＡｇ阴性者的ＨＢＶ感染情况及对ＨＢＶ的免疫状态作一探讨。方法用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｅ，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果ＨＢｓＡｇ阴性应招飞行学员中抗－ＨＢｓ阳性２０６／９６２例（２７．６％），抗ＨＢｃ阳性２２９／９６２例（２２．８％），ＨＢｅＡｇ阳性０／４５０例，抗ＨＢｅ阳性３／４５０例（０．６７％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１５／２２８例（６．６％）。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性主要集中在单一抗ＨＢｃ阳性者中１４／７５例（１８．７％）。获得ＨＢＶ免疫者为３４．０％。结论在应招飞行学员中对单一抗ＨＢｃ阳性者应做ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，未获ＨＢＶ免疫者应接种乙肝疫苗     

聚合酶链反应对单—抗HBc阳性的飞行员血清HBV—DNA的检测

用聚合酶链反应对单－抗ＨＢｃ阳性的飞行员血清ＨＢＶ携带情况进行了调查，首先用ＥＬＩＳＡ法对１８９份血清检测了ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｓ和抗ＨＢｃ。ＨＢｓＡｇ阳性率为４．７６％（９／１８９），抗ＨＢｓ１７．９９％（３４／１８９），抗ＨＢｃ２４．８７％（４７／１８９），聚合酶链反应检测单－抗ＨＢｃ阳性血１９份，抗ＨＢｓ阳性／抗ＨＢｃ阳性血２０份。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３１．５８％（６／１９）和５％（１／     

反义核酸抑制荷瘤裸鼠乙肝病毒基因表达

应用２．２．１５细胞转种裸鼠，建立荷瘤裸鼠ＨＢＶ动物模型。受种裸鼠皮下可迅速长出移植瘤并分泌ＨＢＶ多项标志物至外周血液中。应用互补于ＨＢＶｍＲＮＡ ＳＰⅡ增强子区的１５聚反义硫代寡核苷酸以２０ｕｇ／ｇ鼠体重剂量连续治疗１０ｄ，结果治疗组荷瘤裸鼠血清中ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶ－ＤＮＡ均受到明显抑制。证明该反义核酸在动物体内同样具有良好的抗病毒效应，为从基因水平研制新一代抗乙肝病毒药物奠定了基础     

HAPC患者红细胞2,3—二磷酸甘油酸的变化和红细胞ATP酶的活性

目的：了解红细胞２，３－二磷酸甘油酸、红细胞膜ＡＴＰ酶在高原红细胞增多症（ＨＡＰＣ）的变化及二者关系。方法：ＨＡＰＣ患者２４例，正常对照１９例，分别测定红细胞２，３－二磷酸甘油酸，红细胞膜ＡＴＰ酶（Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶，Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性。结果：ＨＡＰＣ组及对照组红细胞２，３－二磷酸甘油分别为：３．２１ｍｍｏｌ／Ｌ±０．１３ｍｍｏｌ／Ｌ，４．８７ｍｍｏｌ／Ｌ±０．０７ｍｍｏｌ／Ｌ，（Ｐ＜０．０５）；Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性分别为：４．１±０．０１３λΒ／μｍｏｌ·ｈ－１·ｇ－１，７．４±０．１９λΒ／μｍｏｌ·ｈ－１·ｇ－１（Ｐ＜０．０１）；Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性分别为１５．１±１．７０λΒ／μｍｏｌ·ｈ－１·ｇ－１，２５．３±２．３１λΒμｍｏｌ·ｈ－１·ｇ－１（Ｐ＜０．０１）；相关分析显示：２，３－二磷酸甘油酸与Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶呈正相关（ｒ＋０．４８１７，Ｐ＜０．０１）与Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶呈正相关（ｒ＝０．４７８３，Ｐ＜０．０１）。结论：ＨＡＰＣ患者红细胞２，３－二磷酸甘油酸的减少，红细胞膜ＡＴＰ酶活力降低，反映机体缺氧状况，体细胞代谢异常     

半乳糖修饰的反义硫代寡核苷酸的肝细胞导向及抗乙型肝炎病毒活性研究

人工合成两种半乳糖多聚赖氨酸导向配体，与荧光素标记的互补于ＨＢＶｍＲＮＡ多聚腺苷酸信号部分的２１－聚反义硫代脱氧核苷酸（ＡＳＯＤＮ）电性结合，与２．２．１５细胞共同孵育，４０ｍｉｎ后配体组对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的抑制率为４１％～４７％和２８％～３１％，单纯ＡＳＯＤＮ组为１１％和５％；３ｄ后配体组为８８％～８９％和７１％～７４％，单纯组为６４％和５３％。经流式细胞分析，配体组使２．２．１５细胞荧光染色率达７５．３％和８３．８％；单纯组为２４．３％。结果表明，两种人工配体均具有良好的导向ＡＳＯＤＮ入肝细胞的功能，且可以明显提高ＡＳＯＤＮ抗ＨＢＶ的活性。     

高压氧治疗重型颅脑损伤后临床、脑电地形图、血浆内皮素、经颅多普勒超声的研究

目的研究高压氧（ＨＢＯ）治疗重型颅脑损伤（ＳＥＩ）的疗效及机制。方法治疗组３５例,对照组２０例,观察ＨＢＯ前后脑电地形图（ＢＥＡＭ）血浆内皮素（ＥＴ）及经颅多普勒超声（ＴＣＤ）查大脑中动脉收缩期流速,平均流速及搏动指数（ＭＣＡ－Ｖｓ,Ｖｍ,ＰＩ）等７项参数。结果治疗组的临床（ＧＣＳ）,ＢＥＡＭ,预后（ＧＯＳ）均明显迅速改善,与对照组有显著性差异。治疗组在ＨＢＯ１疗程后的ＥＴ值从（９１．２４±１２．１８）ｎｇ／Ｌ降到（６８．８８±１４．３７）ｎｇ／Ｌ（Ｐ＜０．０１）,与对照组相应时相比较,ＥＴ降至（８３．１２±１２．２２）ｎｇ／Ｌ,也有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。相应的ＴＣＤ的ＭＣＡ－Ｖｍ从（６４．２±４．８）ｃｍ／ｓ降至（５１．６±４．２）ｃｍ／ｓ（Ｐ＜０．０１）,ＭＣＡ－Ｖｓ,ＰＩ的下降同样有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论ＨＢＯ能迅速改善重型颅脑损伤者的意识状态、ＢＥＡＭ异常率及生存质量。研究表明与急性期血浆ＥＴ下降和ＭＣＡ血管痉挛缓解有关,表现在ＭＣＡ血流速度和血管阻力的改善,从而减轻脑缺血缺氧,降低颅压,这是ＨＢＯ改善预后的重要机制之一。     

HDV/HBV感染树鼠句肝组织中Fas/Fas配体表达的初步研究

目前已有许多实验研究证据直接表明Ｆａｓ／Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）介导了细胞凋亡。采用免疫组化和原位杂交技术检测ＨＤＶ／ＨＢＶ感染树鼠句肝组织中ＨＤＡｇ、Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达;并采用免疫组化双重染色分析病毒抗原表达和Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达之间的关系。１　材料与方法１．１　标本来源　３０份ＨＤＶ／ＨＢＶ感染树鼠句肝组织,取自本院传染科ＨＤＶ／ＨＢＶ感染的树鼠句动物,经ＥＬＩＳＡ、免疫组化和原位杂交技术证实,ＨＤＶ在肝细胞中稳定复制、表达,伴ＡＬＴ升高。１．２　检测方法　①ＨＤＡｇ、Ｆａｓ／ＦａｓＬ检测：…     

吡啶-2,6(1H,3H)二酮生物碱对血小板聚集及血栓素B_2和6-酮-前列腺素_(Iα)的影响

观测ＳＨ１对ＡＤＰ，ＡＡ，Ｃｏｌａｇｅｎ诱导的兔血小板聚集及ＴＸＢ２和６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα生成的影响。用比浊法测定了透骨草提取的单体生物碱结晶ＳＨ１体外对兔血小板聚集的影响，用放免法测定ＴＸＢ２和６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα的含量。结果：ＳＨ１０．８～３．０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内明显抑制ＡＡ，ＡＤＰ，Ｃｏｌａｇｅｎ诱导的兔血小板聚集。ＳＨ１对三种诱导剂的最大抑制率分别为６２．１６％，４５．２５％，５３．６７％。大剂量组明显加快ＡＤＰ诱导的血小板聚集后的解聚速度，ＳＨ１显著延长Ｃｏｌａｇｅｎ的诱导起聚时间。其抑制作用有明显的量效关系，对ＡＡ诱导的ＴＸＢ２产生明显抑制作用，可使６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα的含量略有增加，但６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα／ＴＸＢ２比值显著增大     

戊型肝炎病毒F86株的某些生物学性状及分子生物学特征的鉴定

目的：对法国赠送的戊型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＥｖｉｒｕｓ,ＨＥＶ）Ｆ８６株进行生物学性状与基因特征的鉴定,并与我国分离的８７Ａ株病毒进行比较。方法：用常量法测定病毒的血凝滴度;微量滴定法测定在２ＢＳ、Ａ５４９、ＬＬＣ－ＭＫ２细胞中的病毒滴度;腹腔注射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,３周后取血清进行抗体检测;利用ＲＴ－ＰＣＲ方法从接种病毒的细胞培养液中直接检测病毒ＲＮＡ,ＰＣＲ阳性产物纯化回收后克隆并测序。结果：Ｆ８６株病毒血凝试验阴性;在２ＢＳ、Ａ５４９细胞中连传３代,病毒滴度稳定,在ＬＬＣ－ＭＫ２细胞中病毒滴度稍低;在接种Ｆ８６株病毒的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠中可检出特异性抗体;在其细胞培养物中检出ＨＥＶ聚合酶区一段核苷酸序列,测序结果与我国８７Ａ株的同源性为９８．７％。结论：Ｆ８６株病毒不能凝集人Ｏ型红细胞,对２ＢＳ、Ａ５４９及ＬＬＣ－ＭＫ２细胞均敏感,对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠不致病。部分序列的测定结果表明该株病毒确为ＨＥＶ,从而由国外实验室证实ＨＥＶ可用人源性细胞分离。     

HAV,HBV重叠感染34例分析

本文回顾了３４例ＨＡＶ和ＨＢＶ重叠感染者的临床经过和ＨＢＶ血清标志物改变。发现其甲肝的整个临床过程基本与一般甲肝一致；与ＨＡＶ感染前比较，ＨＡＶ感染恢复后１～２个月时ＨＢＶ血清标志物的阳性率（除ＨＢｓＡｇ和拉ＨＢｓ外）发生了明显改变：ＨＢｅＡｇ由７５％减至３５．３％，拉ＨＢｃ由８５．７％减至４１．２％，三项阳性者由６４．３％减至３５．３％，拉ＨＢｅ由３９．３％增至７６．５％，拉ＨＢｃ－ＩｇＭ由５４．３％减至２６．５％（均为Ｐ＜０．０１）。     

烟雾吸入伤后肺表面活性物质蛋白A含量的动态变化及意义

目的探讨烟雾吸入伤后肺表面活性物质蛋白Ａ（ＳＰ－Ａ）含量的变化、可能机理及其与肺表面活性物质（ＰＳ）活性抑制和肺功能损害的关系。方法采用大鼠烟雾吸入伤模型，分别检测正常对照及致伤２ｈ、６ｈ、１２ｈ和２４ｈ动物的动脉血气，肺水量，静态肺顺应性（Ｃｓｔ），支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）表面张力特性，ＢＡＬＦ中ＳＰ－Ａ、丙二醛（ＭＤＡ）、总蛋白（ＴＰ）含量及弹性蛋白酶（Ｅｌａ）活性。结果动物伤后出现急性呼吸衰竭和肺水肿，Ｃｓｔ显著降低；ＢＡＬＦ的最小表面张力（ＳＴｍｉｎ）升高，滞后环面积下降；ＢＡＬＦ中ＳＰ－Ａ、ＭＤＡ、ＴＰ含量及Ｅｌａ活性明显升高，但ＳＰＡ－Ａ的相对含量（％ＴＰ）降低，且与Ｅｌａ、Ｃｓｔ和ＳＴｍｉｎ的变化相关显著。结论烟雾吸入伤早期ＳＰ－Ａ相对含量减少，可能是导致肺表面活性物质活性抑制及肺功能障碍的主要原因之一。氧化及Ｅｌａ可能是引起ＳＰ－Ａ含量和（或）功能异常的重要因素。     

用PCR及Southern杂交方法对HBsAg阴性献血员HBV感染的检测

用ＰＣＲ与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交（ＳＢＨ）方法对７８例ＨＢｓＡｇ阴性献血员进行ＨＢＶ感染检测，结果２份标本经ＰＣＲ后直接在２５４ｎｍ紫外灯下观察就可见到特异扩增带，另有１２份标本经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转膜杂交后可观察到特异扩增带，总阳性率较原来ＨＢｓＡｇ检测提高１７．９％，说明ＰＣＲ－ＳＢＨ可以区分ＨＢｓＡｇ阴性但仍然存在ＨＢＶ潜伏感染的献血员，使用ＰＣＲ－ＳＢＨ方法检测的ＨＢＶ可以提高输血的安全性。     

半乳糖修饰的反义硫代寡核苷酸的肝细胞导向及抗乙型肝炎病毒…

人工合成两种半乳糖多聚赖氨酸导向配体，与荧光素标记的互补于ＨＢＶｍＲＮＡ多聚腺苷酸信号部分的２１－聚反义硫代脱氧核苷酸（ＡＳＯＤＮ）电性结合，与２．２．１５细胞共同孵育，４０ｍｉｎ后配体组对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的抑制率为４１％～４７％和２８％～３１％，单纯ＡＳＯＤＮ组为１１％和５％，３ｄ后配体组为８８％～８９％和７１％～７４％，单纯组为６４％和５３％，经流式细胞分析，配体组使２．２．１５细胞荧光     

以HEV合成多肽为抗原制备抗－HEV免疫血清

用对应于戊型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＥｖｉｒｕｓ，ＨＥＶ）开读框架ＯＲＦ１、ＯＲＦ２和ＯＲＦ３部分氨基酸序列的三段多肽为抗原，以鼠伤寒沙门菌体为载体，经静脉免疫家兔和经腹腔免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备出抗－ＨＥＶ免疫血清。两次加强免疫后，经本室研制的抗－ＨＥＶ　ＩｇＧＥＬＩＳＡ试剂盒检测，１：１０稀释血清Ａ值达１．５０～２．００。用沙门菌和ＨＥＶ多肽分别做中和试验，ＨＥＶ多肽的中和抑制率大于５０％，而沙门菌不能中和血清中的抗体。用此免疫血清与抗－ＨＥＶＩｇＣ阳性的病人血清做阻断试验，阻断率大于５０％。上述结果证明家兔和小鼠产生的抗体为特异性抗－ＨＥＶ抗体。