RIP140与TNF-α对心肌细胞能量代谢的调控作用

目的观察RIP140与TNF-α对心肌细胞能量代谢的影响。方法体外培养H9c2心肌细胞,分为空载病毒组、过表达RIP140组、空载病毒+TNF-α组、过表达RIP140+TNF-α组,荧光定量PCR检测PPAR-α、PPAR-β/δ、PDK4的mRNA表达水平。使用过表达RIP140的腺病毒感染H9c2细胞,Western blot分析细胞核p65蛋白水平、胞质IκB-α蛋白水平;荧光定量PCR检测TNF-α、IL-1β、IL-2的mRNA表达水平; TNF-α刺激心肌细胞,荧光定量PCR检测RIP140的mRNA表达水平,Western blot分析RIP140蛋白表达水平。结果与过表达RIP140组比较,过表达RIP140+TNF-α刺激组PPAR-β/δ和PDK4的mRNA表达下降。过表达RIP140的心肌细胞核内p65蛋白水平升高,胞质IκB-α蛋白水平下降,TNF-α、IL-1β、IL-2的mRNA表达升高; TNF-α刺激心肌细胞,使RIP140的mRNA和蛋白表达水平升高。结论RIP140与TNF-α可相互作用,介导心肌细胞炎症反应和能量代谢紊乱。     

转录辅抑制因子RIP140在代谢组织中的作用及机制

核受体超家族在调节能量平衡过程中扮演重要角色。转录辅助调节因子通过募集一系列DNA或组蛋白结构修饰酶,调节核受体介导的靶基因转录。受体相互作用蛋白140(receptor-interacting protein140,RIP140)是一种转录辅抑制因子,其与核受体结合后能够负向调节多种代谢组织中靶基因的转录,包括脂肪组织、肌肉组织以及肝脏等。基因沉默RIP140后,多种代谢途径相关基因表达上调,主要涉及糖酵解、甘油三酯合成、三羧酸循环、脂肪酸β氧化、线粒体电子传递以及氧化磷酸化等能量代谢过程。RIP140有望成为治疗代谢综合征的候选靶点。     

Ang Ⅱ 1型受体拮抗剂抗动脉粥样硬化作用研究进展

肾素血管紧张素系统与动脉粥样硬化的发展密切相关。血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂通过阻滞血管紧张素Ⅱ与AT1受体结合，能够抑制动脉粥样硬化形成过程中的炎症反应，减少自由基的生成，保护血管内皮，抑制血管平滑肌细胞的迁移和增殖，增加斑块的稳定性，从多方面阻止动脉粥样硬化的形成和发展，有希望成为一类新型的抗动脉粥样硬化药。     

益母草碱对心肌重构大鼠ACE2、AngⅡ及Ang1-7的影响研究

目的观察益母草碱对心肌重构大鼠血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)、血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)及血管紧张素1-7(angiotensin 1-7,Ang1-7)的影响,并探讨可能涉及的机制。方法以异丙肾上腺素(5 mg/kg/d)连续2周腹腔注射诱导大鼠心肌重构模型,在此基础上给予ACE2内源性激动剂乙酰甘氨酸重氮氨苯脒(diminazene aceturate,DIZE)(15 mg/kg/d)及低、中、高剂量益母草碱(7.5 mg/kg/d、15 mg/kg/d、30 mg/kg/d)干预治疗2周。治疗结束后以心脏超声检测各组实验动物左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic dimension,LVEDd)、左室收缩末期内径(left ventricular end systolic dimension,LVEDs)、左室短轴缩短率(fractional shortening,FS)、射血分数(ejection fraction,EF);酶联免疫吸附法(enzym...     

PGC-1α与线粒体O生成调控在心血管疾病中的作用

线粒体是一类高度活跃的细胞器,在细胞能量代谢等生命活动中具有重要的作用。线粒体生成,即线粒体的增殖以及线粒体系统合成和个体合成的过程。近年来研究提示,线粒体生成与线粒体的功能调节密切相关,而过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(peroxisome proliferator-ac-tivated receptor gamma co-activator,PGC-1α)可能是线粒体生成的关键调控因子。特别是在心血管系统中,PGC-1α信号途径调控的线粒体生成可能是维持和修复心肌细胞和血管内皮细胞等心血管系统细胞线粒体功能的主要机制之一,在心力衰竭、心肌肥大、糖尿病心血管并发症等心血管疾病的发生与发展过程中具有重要作用。PGC-1α作为心血管疾病疾病预防和治疗的潜在靶标,将有可能为心血管疾病的防治提供新的策略。     

ANO1抑制剂在AngⅡ诱导的VSMC增殖中的作用研究

目的研究钙激活氯通道蛋白1(ANO1)抑制剂在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用。方法研究时间为2019年7月至2022年6月。体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞A7r5细胞株, AngⅡ刺激A7r5细胞建立细胞增殖模型, 分别采用10 nmol/L、100 nmol/L、500 nmol/L不同浓度ANO1抑制剂(A01)干预, 同时设置对照组(以等量生理盐水干预), 采用Hoechst 33342荧光染色法观察ANO1抑制剂干预后AngⅡ诱导的VSMC形态学变化, 蛋白免疫印迹法检测ANO1抑制剂干预后AngⅡ诱导的VSMC细胞凋亡相关蛋白表达水平。多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用LSD-t检验。结果 Hoechst 33342荧光染色结果显示, 随着ANO1抑制剂浓度增加, 呈亮蓝色的细胞愈来愈多(染色质凝聚、出现凋亡小体), 即细胞凋亡数量越多。低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率分别为(17.60±1.36)%、(36.30±3.50)%、(61.25±6.33)%, 均高于对照组凋亡率(4.32±0.51)%, 组间差异均有统计学...     

丹参酮ⅡA对AngⅡ诱导的心肌肥大中c-fos、c-myc和c-jun mRNA表达的影响

目的在原代培养的新生大鼠心肌细胞上,观察丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡ,TSN)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡA,AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的影响。方法实验用新生大鼠,差数贴壁法体外分离培养大鼠心肌细胞。用血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大,丹参酮ⅡA和缬沙坦(valsartan)进行干预;采用相差显微镜测量细胞大小;测定心肌细胞3H-亮氨酸参入作为心肌细胞肥大的指标;用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌细胞原癌基因c-fos、c-myc和c-junmR-NA的表达;MTT法检测细胞活力。结果用MTT法检测发现,培养的心肌细胞中加入TSN(5~80μmol·L-1),24h后会产生微弱的细胞毒性,但心肌细胞单层在TSN存在的情况下可以继续同步收缩。在AngⅡ持续作用7d后,血管紧张素Ⅱ组心肌细胞直径增大(28·5±3·8)μm,与对照组(19·8±1·9)μm相比差异有显著性(P<0·05);TSN抑制AngⅡ介导的心肌细胞直径增大(21·3±2·5)μm,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0·05),AngⅡ作用24h后,心肌细胞合成速率AngⅡ组(1900±100)cpm较对照组(1205±129)cpm明显增加(P<0·01),TSN和valsartan本身对心肌细胞蛋白质的合成没有影响,但均能抑制AngⅡ刺激的心肌细胞蛋白质合成速率的增加(P<0·01)。在培养液中加入AngⅡ作用30min后,c-fos、c-myc和c-junmRNA的表达明显增强(P<0·01),预先加入TSN或valsartan作用30min,可阻断AngⅡ的作用(P<0·01),而TSN和valsartan本身对原癌基因c-fos、c-myc和c-junmRNA的表达无影响。结论TSN可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,这可能与其抑制了原癌基因c-fos、c-myc和c-jun的表达有关。     

西红花酸在AngⅡ诱导的大鼠肺成纤维细胞中的作用

目的:通过观察西红花酸(CRT)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肺成纤维细胞(LFB)增殖及转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、ERK1/2和P-ERK1/2基因蛋白水平的影响,探讨其抗肺纤维化的作用机制.方法:酶消化法提取原代LFB,采用四氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖,RT-PCR法相对定量检测TGF-β1和COL-Ⅰ mRNA表达,Western Blot法检测α-SMA、ERK1/2和P-ERK1/2蛋白的表达.结果:10-7、10-6 mol· L-1西红花酸可显著减少AngⅡ诱导的LFB细胞增殖,降低TGF-β1和COL-Ⅰ mRNA的表达,降低α-SMA和P-ERK1/2的蛋白表达.结论:西红花酸可显著减少AngⅡ诱导的LFB细胞增殖,并呈剂量依赖关系,其作用机制可能与调节TGF-β1-ERK1/2信号通路有关.     

丹参酮ⅡA抑制心肌肥厚的机制研究

目的 在原代培养的新生大鼠心肌细胞上，观察丹参酮ⅡA（ranshinone ⅡA，TSN）对血管紧张素Ⅱ（angiotensin ⅡA，AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大的影响及可能机制。方法 采用流式细胞仪测定心肌细胞总蛋白含量作为心肌细胞肥大的指标；用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测心肌细胞原癌基因c—fos mRNA的表达，并用显微荧光分光光度仪测定[Ca^2＋]Ⅰ。结果 TSN能抑制AngⅡ诱导的心肌细胞蛋白质含量的显著增加（P〈0．05），心肌细胞原癌基因c—fos mRNA表达的增强（P〈0．05）及[Ca^2＋]Ⅰ的增加，其效果与AngⅡ受体阻滞剂缬沙坦（valsartan，Val）相似。结论 TSN可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大及原癌基因c-fos的表达，这与其抑制AngⅡ诱导的心肌细胞[Ca^2＋]Ⅰ的增加有关。     

槲皮素通过PGC-1α通路对创伤性脑损伤的脑保护作用

目的 研究槲皮素通过PGC-1α通路对创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）后神经细胞凋亡的影响。方法 选取48只ICR小鼠,随机分为4组,每组12只：假手术组,TBI组,TBI+溶剂组和TBI+槲皮素组。建立小鼠自由落体撞击脑损伤模型,TBI后30 min给予腹腔注射槲皮素。TBI 24 h后检测小鼠神经学功能评分和脑水肿情况;采用尼氏染色检测TBI后神经细胞凋亡情况; Western blotting检测小鼠神经细胞内外的PGC-1α及Bax、Bcl-2等凋亡相关蛋白的表达情况;采用免疫组化法进一步验证TBI后神经细胞PGC-1α的表达情况。结果 与假手术组相比,TBI组脑水肿与神经细胞凋亡明显增加（P < 0.01）; PGC-1α与Bax表达明显增加,而Bcl-2表达明显减少（P < 0.01）。与TBI+溶剂组相比,TBI+槲皮素组脑水肿及神经凋亡明显减轻（P < 0.05）,Bax表达明显减少,PGC-1α和Bcl-2表达明显增加（P < 0.05）。结论 槲皮素可通过激活PGC-1α途径减轻TBI后神经细胞凋亡,起到有效的脑保护作用。     

黄芪甲苷对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌细胞PGC-1α和NRF-1表达的影响

目的探讨黄芪甲苷(ASIV)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌细胞能量代谢及线粒体合成的影响。方法50只6周龄的SD大鼠,分为5组,每组10只,分别是空白组、模型组、ASIV 10、20、40 mg·kg-1组。除空白组,其余40只尾静脉注射STZ(35 mg·kg-1)建立Ⅰ型糖尿病心肌病模型。连续给药16周后,检测其左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张期末压(LVEDP)、左心室最大上升/下降速率(±dp/dtmax),苏木精-伊红(HE)染色观察心肌病理切片。ELISA检测心肌组织中ATP、ADP、AMP的含量。Western blot法检测心肌组织中过氧化体增殖物激活型受体γ共激活因子1α(PGC-1α)和核呼吸因子(NRF-1)蛋白表达,RTPCR检测心肌组织中PGC-1α和NRF-1 m RNA的表达。结果与空白组相比,模型组大鼠的LVEDP上升,LVSP、±dp/dtmax下降,ATP/ADP、ATP/AMP比值均下降。与模型组相比,黄芪甲苷低剂量组变化不明显,中、高剂量组LVEDP下降,LVSP、±dp/dtmax上升,ATP/ADP、ATP/AMP比值均上升,PGC-1α与NRF-1的蛋白表达和m RNA表达均增加,有一定的剂量依赖性。结论黄芪甲苷通过提高PGC-1α和NRF-1的表达促进Ⅰ型糖尿病大鼠心肌细胞内线粒体的生物合成,提高能量代谢。     

氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞核酸、蛋白质及c-fos基因表达抑制作用的研究

目的　观察氯沙坦（ｌｏｓａｒｔａｎ,ＬＴ）对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞核酸、蛋白质及ｃ ｆｏｓ基因表达的抑制作用。方法　应用培养乳鼠心肌细胞,观察血管紧张素Ⅱ亚型受体拮抗剂 ＬＴ对血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）诱导的心肌细胞肥大的抑制作用。结果　ＬＴ２×１０－６ｍｏｌ·Ｌ－１能明显抑制ＡｎｇⅡ对心肌细胞核酸及蛋白质合成的促进作用及ｃ ｆｏｓｍＲＮＡ表达。结论　心肌细胞膜表面的ＡＴ受体亚型介导了ＡｎｇⅡ促心肌细胞肥大作用。ｃ ｆｏｓ基因激活是ＡｎｇⅡ诱导心肌细胞肥大的重要机制之一。ＬＴ从受体水平阻断了ＡｎｇⅡ的作用,此类药物应是更具选择性的肾素 血管紧张素系统拮抗剂。     

Omapatrilat对AngⅡ致人血管内皮细胞损伤的保护作用研究

目的观察Omapatrilat对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用。方法体外培养HUVECs,随机分为4组:空白对照组,AngⅡ组,Omapatrilat组和AngⅡ+Omapatrilat组。分光光度计测定培养的HUVECs乳酸脱氢酶(LDH)的漏出,流式细胞仪技术检测细胞周期,硝酸还原酶法和放射免疫分析技术分别测定HUVECs上清液中一氧化氮(NO)和内皮素(ET1)含量。结果10-7mol·L-1AngⅡ可增加HUVECsLDH漏出和ET1释放,Omapatrilat(10-6mol·L-1)对此具有明显抑制作用,同时它可促进HUVECs增殖和NO释放。结论Omapatrilat可减弱AngⅡ导致的体外培养HUVECs损伤,对内皮细胞具有保护作用。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大反应中磷酸化细胞外信号调节激酶1/2的作用

目的从细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)激活角度研究丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinoneⅡ Asulfonate,STS)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌肥大反应中的作用。方法培养新生大鼠心肌细胞,考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量、[3H]-亮氨酸参入法测定蛋白合成速率作为心肌肥大指标;用免疫荧光标记法和Western blot测定磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达。结果(1)AngⅡ(1μmol·L-1)处理24h,心肌细胞[3H]-亮氨酸参入率、蛋白含量明显增加,STS能明显抑制AngⅡ介导心肌细胞[3H]-亮氨酸参入率、蛋白含量的增加;(2)AngⅡ刺激心肌细胞可见胞核内出现磷酸化ERK1/2荧光染色,丹参酮ⅡA可阻断AngⅡ引起的ERK1/2活化、入核过程;(3)用AngⅡ(1μmol·L-1)处理心肌细胞5min,磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达即开始增加,10min左右时最明显。以AngⅡ(1μmol·L-1)处理心肌细胞10min,磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达为标准,预先以STS(2,10,50μmol·L-1)处理心肌细胞30min,发现STS可明显抑制AngⅡ诱导的心肌细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达;(4)预先以不同浓度STS处理心肌细胞30min,发现STS对AngⅡ诱导的心肌细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达的抑制作用存在剂量依赖性。结论STS可以抑制AngⅡ诱导的心肌肥厚,其机制与抑制磷酸化ERK1/2表达有关。     

TRV027在血管紧张素Ⅱ下调心肌细胞缝隙连接蛋白43表达中的作用

目的 探讨TRV027是否通过影响AngⅡ并激活β-arrestin蛋白,从而影响心肌细胞Cx43的表达。方法 通过培养大鼠心肌细胞（H9C2细胞）,将其分为四组：对照组（无药物干预）、AngⅡ组（1×10-5mol/L AngⅡ干预48h）、TRV027组（1×10-8mol/L TRV027干预24h）、AngⅡ+TRV027组（1×10-5mol/L AngⅡ干预24h后,1×10-8mol/L TRV027干预24h）。采用蛋白质印迹（WB）法检测Cx43和β-arrestin的蛋白表达水平,PCR法检测Cx43和β-arrestin的mRNA表达水平,免疫荧光法观察上述两种蛋白在细胞内的表达情况。应用ImageJ分析图像,SPSS 22.0软件进行统计学分析。结果 WB结果显示,与对照组相比,AngⅡ组H9C2细胞Cx43和β-arrestin的蛋白表达量明显降低（P<0.01）;与AngⅡ组相比,AngⅡ+TRV027组和TRV027组H9C2细胞Cx43和β-arrestin的蛋白表达量明显升高（P<0.01）。PCR结果显示,与对照组相比,AngⅡ组H9C2...     

血管紧张素Ⅱ及其受体在肿瘤中作用的研究进展

血管紧张素Ⅱ作为肾素-血管紧张素系统中的主要效应分子,除了收缩血管,调节血压功能外,还参与肿瘤的发生发展、炎症反应以及血管形成转移,并且发挥重要作用。该文就血管紧张素Ⅱ及其受体在肿瘤中的表达及信号传通路研究进展做一综述。     

血管紧张素Ⅱ受体对血管紧张素-(1-7)作用的影响

目的：探讨血管紧张素-（1-7）[Ang-（1-7）1对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导大鼠系膜细胞（GMC）增殖及血管紧张素Ⅱ受体对血管紧张素-（1-7）作用的影响。方法：选择对数生长期GMC,分为对照组、AngⅡ组、Ang-（1-7）组、[Sar^1,Ile^8]-AngⅡ＋Ang-（1-7）组、、PD123319＋Ang-（1-7）组,通过[^3H]-Thymidine及[^3H]-Leucine掺入分别测定GMC的DNA、蛋白质合成;结晶紫染色检测细胞数日,观察系膜细胞增殖情况,探讨Ang-（1-7）是否通过AngⅡ受体发挥作用。结果：Ang-（1—7）可抑制AngⅡ诱导GMC的DNA、蛋白质合成及细胞数日增加;[Sar^1,Ile^8]-AngⅡ和PD123319不影响Ang-（1—7）的上述作用。结论：Ang-（1—7）能抑制基础和AngⅡ诱导的GMC增殖,其作用的发挥不通过AngⅡ的AT1和AT2受体介导。     

萘哌地尔衍生物YMⅢ抗AngⅡ诱导SHR血管平滑肌细胞增殖的作用

目的观察萘哌地尔衍生物YMⅢ对血管紧张Ⅱ(AngⅡ)诱导的自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,并初探其作用机制。方法以组织块贴壁法培养SHR VSMC,应用MTT比色法、3[H]-TdR参入法、流式细胞技术、电镜技术和real time RT-PCR分别观察VSMC在AngⅡ刺激下的细胞增殖、DNA合成、细胞周期、细胞超微结构和Agt、c-myc基因表达的变化,及观察YMⅢ对上述指标的影响。结果 AngⅡ1μmol.L-1明显促进VSMC增殖和DNA合成;而YMⅢ0.01、0.05、0.10μmol.L-1可呈浓度依赖性地抑制AngⅡ所致VSMC增殖活性、DNA合成、细胞周期增殖指数的升高,改善细胞超微结构,并使AngⅡ升高的Agt、c-myc mRNA表达下调。结论 YMⅢ可明显抑制AngⅡ诱导的SHR VSMC增殖,作用机制可能与其抑制Agt、c-myc mRNA表达,从而抑制细胞DNA合成和细胞周期的进展有关。     

血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗药的认知保护作用研究进展

目的:为血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗药(ARB)的认知保护作用研究提供参考。方法:以"血管紧张素""突触""淀粉样蛋白""炎症""凋亡""缺血""神经发生""认知""Angiotensin""Synaptic""Amyloid""Inflammation""Apoptosis""Ischemia""Neurogenesis""Cognitive"等为关键词,组合查询1990年1月-2016年7月在Pub Med、中国知网、万方、维普等数据库中的相关文献,对ARB作用的生理基础与机制、ARB的认知保护作用及机制进行综述。结果与结论:共检索到相关文献301篇,其中有效文献29篇。ARB系肾素-血管紧张素系统(RAS)抑制剂,通过选择性作用于血管紧张素受体,阻滞其下游通路的生物效应。除了循环系统的RAS外,脑内也存在局部组织的RAS。ARB的认知保护作用包括改善脑缺血,保护血脑屏障,减少神经元的损伤;促进神经发生,保护海马功能;同时还具有抑制β-淀粉样蛋白产生、抗炎、抗凋亡等作用。ARB有许多制剂,虽然同属一类,但不同制剂在认知保护的作用上存在差异。ARB在拮抗血管紧张素Ⅱ1型受体的时候,血管紧张素Ⅱ的前体、一些重要的代谢产物如多肽会出现变化,血管紧张素Ⅱ2型受体通路代偿性激活,而人们对这些多肽及AT2R通路对认知保护的作用机制尚不明确。高血压患者在经历特殊的病理过程时(如创伤、手术或合并糖尿病等),常常加重认知损害,关于ARB对其认知保护的研究较少。