基于PCR-RDB法对陕西地区HCV基因型别的研究

目的探讨聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)-反向点杂交法(reverse dot blot,RDB)在陕西地区丙型肝炎病毒基因分型中的应用。方法选取陕西地区610例丙型肝炎患者,利用PCR-RDB法进行丙肝病毒基因型检测,并使用SPSS对检测结果进行统计学分析。结果 610例丙肝患者检出1b型273例(44.75%),2a型286例(46.89%),3a型30例(4.92%),3b型11例(1.80%),6a型10例(1.64%);各基因型间的患者性别比例的差异具有统计学意义(P<0.05);与其他基因型别相比,HCV 3a型患者年龄水平最低,差异显著(P<0.05)。结论陕西地区丙肝病毒以2a、1b型为主,患者性别及年龄与所感染HCV型别有关联性;PCR-RDB技术在丙型肝炎病毒基因分型中的应用有利于HCV分型在临床上的推广。     

宁波地区丙型肝炎病毒基因分型检测

目的:通过检测丙型肝炎病毒基因分型,探讨宁波地区HCV感染基因型流行株特征。方法:本文共收集231例HCV感染者的血清,采用基因芯片技术进行HCV基因分型。结果:231例丙型肝炎病毒基因分型1b型162例,占70.12%;2a型25例,占10.82%;1b+2a混合型15例,占6.49%;并有少数的3b3、a6、型和其它混合型,均占<5%。结论:宁波地区HCV感染基因型以lb型为主、其次为2a型。基因芯片法检测丙型肝炎病毒基因分型,具有微量、多位点、准确性好、灵敏度高、特异性强等特点。     

蒙古国人丙型肝炎患者HCV RNA检测及基因型的研究

目的通过检测丙型肝炎病毒基因分型,探讨蒙古国抗-HCV阳性患者血清中HCV基因型流行株特征。方法采用基因芯片法对蒙古国183例抗-HCV阳性患者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点和临床意义。结果 183例抗-HCV阳性患者中HCV RNA阳性134例(73.2%),其中基因1b型68例(50.7%),2a型59例(44.0%),并有少量的1a、3a、1b+2a和其它3例混合型。结论抗-HCV阳性并非HCV感染直接标志,蒙古国感染HCV患者的基因型以1b和2a型为主,比例基本相当;基因型在性别上人群分布差异无统计学意义。     

杭州地区丙型肝炎病毒基因分型及其临床意义的探究

目的研究杭州地区2015年-2018年丙型肝炎病毒基因型的分布情况及其临床意义。方法采用荧光PCR方法对423例丙型肝炎患者的血清进行基因分型。结果 423例HCV感染者进行基因分型,共检测到4种基因型,7种基因亚型,其中1b基因型240例,2a基因型43例,6a基因型36例,3b基因型32例,3a基因型26例,1a基因型2例,6n型1例;对HCV基因型与性别、年龄的关系分别进行了统计学分析,显示并无明显相关性;2015年-2018年杭州地区各基因亚型的患病率进行比较,显示3b患病率有所上升,而3a患病率则有显著下降,其他无显著变化。结论杭州地区丙肝病毒基因型存在多样化分布,其中以1b亚型为主,2a次之;HCV基因型分布与性别、年龄的差异无统计学意义;2015年-2018年杭州地区主要基因型的患病率无明显变化。     

PCR-反向点杂交检测武汉地区丙型肝炎病毒的基因分型

目的了解武汉地区慢性丙型肝炎患者的HCV基因分型,为合理选择治疗方案及疗效预测提供理论依据。方法用PCR-反向点杂交技术对82份HCV-RNA阳性的血清进行基因分型,并对PCR产物测序验证,同时分析患者的性别、丙型肝炎临床类型与基因型分布相关性。结果 82份HCV感染样本共检出4种基因型,分别为lb、2a、3b和6a型,其中1b占73.1%,2a占14.6%,3b占7.3%,6a型占5.0%,各型测序结果与GenBank相应序列一致,1b型患者中重度型丙型肝炎发病率显著高于其他各型(P<0.05),基因型分布差异与性别无关。结论武汉地区HCV基因型主要为1b型,其次为2a型,与中国其他地区HCV基因型分布相一致,1b型患者临床症状较其他类型重,输血是丙型肝炎传播的主要途径,PCR-反向点杂交技术检测丙型肝炎病毒基因分型结果准确可靠、操作简便,具有临床推广和应用价值。     

广东地区丙型肝炎患者几种常见HCV基因型的快速检测

目的快速准确检测广东地区广泛分布的主要HCV基因型，为HCV的临床诊断和治疗提供依据。方法收集53例HCV—RNA阳性血清标本，选取丙型肝炎病毒（HCV）基因组保守序列为扩增靶序列，设计通用引物和特异型别探针（1，2，3，6型），通过逆转录将RNA逆转录为cDNA后，利用通用引物对cDNA进行PCR扩增，将扩增产物利用反向点杂交（RDB）技术进行基因分型。结果HCVRNA阳性血清53例，共检出标本52例，4种基因型所占的比例为1b型32例占60．38％，2a型4例占7．55％，3b型8例占15．09％，6a型8例占15．09％。结论所测患者的HCV基因型分布以1b为主，6a和3b次之，2a相对较低；反向点杂交技术能对其进行快速分型，符合率高达98．11％。     

海口地区丙型肝炎病毒基因分型研究

目的 为制定治疗方案提供参考,了解海口地区丙型肝炎病毒基因分型的特征.方法 选择2010年1月～2011年1月某院经临床检测HCV-RNA阳性的72例患者血清,回顾分析HCV测序分型结果、套式PCR结果,对照分析不同HCV-RNA阳性人群HCV基因分型及不同基因型HCV-RNA定量检测值.结果 本组共72份血清标本,基因型构成比次序依次为:1b型构成比为62.5％ (45/72);2a型构成比为29.2％ (21/72); 3a型构成比为8.3％ (6/72).不同HCV-RNA阳性人群HCV基因分型结果对照显示,差异无统计学意义(P＞0.05).1b型HCV-RNA定量检测值显著高于2a型和3a型(P＜0.05),2a型HCV-RNA定量检测值显著高于3a型(P＜0.05).结论 海口地区丙型肝炎病毒基因分型和国内多数地区相同,以1b型为主,2a型次之,同时基因分型也有助于了解患者体内病毒复制情况,为治疗提供参考.     

宁夏地区丙型肝炎基因型别研究

目的了解宁夏地区丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)的毒株亚型和病毒在人群中的分布情况。方法采用ELISA方法对艾滋病哨点监测人群进行HCV抗体检测,抗体阳性样本进行实时荧光定量PCR检测,HCV RNA阳性样本采用反向点杂交法进行基因型别检测。结果检测各类人群13 200人次,HCV抗体阳性率为2.9%,HCV RNA阳性率为1.2%(159/13 200)。113例基因亚型检测,97例有基因分型结果,亚型检出率为85.8%。其中1b型24例(24.7%)、2a型9例(9.3%)、3a型29例(29.9%)、3b型6例(6.2%)、6a型18例(18.6%)、1b/2a混合型11例(11.3%),主要分布在吸毒和性乱人群中。采用点杂交法检测HCV分型与HCV RNA载量结果差异无统计学意义(P0.05)。结论推广在医院检测HCV基因型别及亚型,控制吸毒人群及桥梁人群仍然是宁夏HCV防治工作的重点。     

不同感染途径丙型肝炎患者HCV基因分型

目的探讨江苏省丙型肝炎病毒(HCV)基因型的分布及其与感染途径、肝功能等因素的关系。方法按照Simmonds分型方法对505例不同感染途径的丙型肝炎患者进行HCV基因型分型检测并分析年龄、性别、肝功能以及感染途径与HCV基因型的关系。结果505例HCV RNA阳性标本中,1a型8例(1.6%),1b型348例(68.9%),2型24例(4.8%),3型40例(7.9%),1b/2混合型67例(13.3%),1b/3混合型13例(2.6%),2/3混合型4例(0.8%),1a/1b混合型1例(0.2%);不同性别、年龄人群HCV基因型分布差异均无统计学意义(均P>0.05);不同HCV基因型人群丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)水平差异均无统计学意义(均P>0.05);不同感染途径人群HCV基因型分布差异有统计学意义(χ² =73.348,P <0.001)。结论江苏省丙型肝炎患者HCV基因型以1b型为主,1a型HCV在中国大陆地区流行程度有扩大趋势,HCV基因型与其感染途径有关。     

抗-HCV阳性血清HCV RNA检测与基因分型的研究

目的 检测抗-HCV阳件血清巾的HCV RNA并进行HCV基因分型.方法 采用荧光定量PCR法检测85例大连地区抗-HCV阳性患者血清中HCV RNA,应用型特异性引物逆转录套式PCR法对HCV RNA阳性样本进行基因分型.结果 85例的抗-HCV阳性患者中,HCV RNA阳性65例(76.5%),其中基因分型1b型32例(49.2%),2a型29例(44.6%),未分型4例(6.2%).结论 抗-HCV阳性并非HCV直接标志,大连地区HCV基冈1b型和2a型基本相等.     

2014―2018年广西柳州市HCV的基因型和1b亚型NS5B区的序列特征

目的  分析2014―2018年广西柳州市丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）的基因型分布和HCV 1b亚型NS5B区的序列特征。 方法  收集慢性丙型病毒性肝炎患者血清,提取HCV RNA,反转录后用巢式PCR扩增NS5B区序列,测序后构建进化树分析HCV基因型和基因亲缘关系。用聚类分析法对比HCV 1b本地群、非本地群和参照株NS5B区基因和蛋白序列的差异。 结果  广西柳州市HCV流行的基因型包括1a、1b、2a/c、3a、3b、6a、6c/d和未分型（NT）,分别占3.39%、43.01%、0.42%、13.98%、6.99%、28.81%、3.18%和0.21%;HCV 1b亚型中61.6%的病毒与各参照株进化距离均较远,其比例在2014―2018年分别占HCV 1b亚型的69.8%、78.6%、43.3%、47.6%和59.6%;该群HCV的NS5B基因有15个经常性突变位点,可导致NS5B蛋白I2682V和S2755N发生经常性变异。 结论  广西柳州市HCV流行的主导基因型依次为1b、6a和3a;HCV 1b亚型中的大部分属于本地亲缘性群,该群HCV的NS5B蛋白存在特征性的变异位点并可能影响直接抗病毒药的作用。     

测序仪对乙型肝炎病毒耐药突变基因的检测与分析

目的:研究测序仪对乙型肝炎病毒耐药突变基因的检测结果。方法:从2017年1月~2018年12月,本院收治的患者中选择连续服用拉米夫定、阿德福韦酯等核苷酸类药物2年以上,临床表现为病毒学突破,且HBVDNA>3×10~3IU/mL的慢乙肝患者中选取104例参与研究,进行乙肝病毒突变基因检测,分析突变位点,并对病毒进行基因分型。结果:研究组患者的104例慢性乙型肝炎血清当中,使用测序法进行检验有B型和C型两种基因型。两种基因型数量分别为11例和93例,所占比重分别为10.58%和89.42%。测序法能够检出12个突变位点,主要耐药的药物为拉米夫定。结论:测序仪能够很好的检验乙型肝炎病毒耐药突变基因。     

丙型肝炎病毒逆向点杂交基因分型方法的建立及初步应用

目的 利用逆向点杂交技术建立丙型肝炎病毒(HCV)基因分型新方法。方法在HCV5’端非编码区(5’UTR)设计引物与分型探针，将活性氨基标记的分型探针依次固定在尼龙膜上，制成HCV基因分型逆向点杂交检测膜条。分离纯化血清中的HCV RNA，经逆转录反应和生物素标记引物聚合酶链反应(PCR)巢式扩增后，将扩增产物与检测膜条杂交，过氧化物酶和四甲基联苯胺显色，判断基因分型结果。最后，通过与基因测序结果比较确定新方法的有效性。从佛山地区丙型肝炎患者中随机抽取60份经荧光定量PCR方法对HCV RNA进行过定量分析的血清，用新建方法进行HCV基因分型检测。结果新建HCV逆向点杂交基因分型方法可对所有60份HCV RNA拷贝数在10。～10。／ml之间的抽检血清进行基因分型，发现1b型50例，占83．3％；1a型2例，占3．3％；2a型2例，占3．3％；1a、1b混合型5例，占8．0％；1b、2a混合型1例，占1．7％；未发现2b、3a和3b型。新方法基因分型结果与测序分型结果一致。结论PCR一逆向点杂交技术可以准确有效和简便经济地进行HCV基因分型．适用于临床检测与流行病学研究。在佛山地区人群中感染的HCV以1b型为主。     

武汉市美沙酮门诊治疗者丙型肝炎病毒基因分型

目的 探讨武汉市美沙酮门诊治疗者丙型肝炎病毒(HCV)及不同基因型感染状况.方法 用酶标记免疫(ELISA)法检测抗-HCV抗体,在86份抗-HCV抗体阳性的血清标本中,分别提取HCV RNA,通过逆转录巢式聚合酶链反应(RT-nested PCR)扩增C基因的羧基至E1基因的氨基端长度为474 bp的片段,测定其核苷酸序列,与GenBank中已知的HCV序列进行系谱分析,确定HCV基因型.结果 武汉市美沙酮门诊332名治疗者中抗-HCV IgG阳性率为94.3%;其中86份血清的HCV序列通过系谱显示6a型71例,占82.5%;3b 7例,占8.2%;1a 5例,占5.8%;1b 3例,占3.5%.结论 武汉市美沙酮门诊入组的吸毒者HCV感染以6a型为优势株,其次为3b,吸毒者中HCV感染率较高,且基因亚型呈现多样性.     

艾滋病毒和丙型肝炎病毒合并感染的相关分析

目的 探讨HIV/HCV合并感染者HCV的基因型分布情况及感染途径.方法 收集昆明市第三人民院2008年7月至2009年3月收治的52例HIV/HCV合并感染者血清,对HCV RNA阳性的28例患者采用型特异性探针杂交法进行HCV基因分型.结果 在28例HCV RNA阳性合并感染者中,共检出4种HCV基因亚型,分别为3b型9例(32.1%),3a型8例(28.6%),1b型7例(25.0%),6a型3例(10.7%),1例未测出(3.6%).静脉吸毒感染共23例,占82.14%,非静脉吸毒感染5例.结论 HIV/HCV合并感染者的HCV基因型以3b、3a、1b型为主要基因,并以静脉吸毒为主要感染方式.