不同工艺提取的龙血竭中龙血素A、B的含量的测定

目的：测定不同提取工艺提取的龙血竭中龙素A和龙血素B的含量。方法：采用HPLC法，以C18反相键合硅胶为固定相，乙腈－1％冰醋酸（34：66）为流动相，检测波长为280nm，用外标法定量。结果：龙血素A在98－490ng范围有良好线性关系，r=0.9996，方法平均回收率为97.45%，RSD为1.82%。龙血素B在43.2-259.2ng范围有良好线性关系，r=0.9993，方法平均回收率为96.92%，RSD为1.57%。免加热工艺提取的龙血竭中龙血素A和龙血素B含量匀高于传统工艺提取的血竭，结论：免加热工艺为一种独创的、提取率高的新技术，具有推广价值。     

不同品牌国产血竭与进口血竭质量分析及比较

对３个品牌５批国产血竭和３个品牌４批进口血竭等进行检测。薄层色谱和紫外光谱显示国产血竭与进口血竭成分完全不同；醇不溶物、炽灼残渣前者明显低于后者，说明国产血竭的杂质控制优于进口血竭。５批国产血竭的薄层色谱和紫外光谱一致，说明不同品牌的国产血竭成分基本相同，但其中１批的吸收度低于规定值。４批进口血竭中有１批为伪品，另有１批吸收度低于规定值     

复方龙血竭凝胶剂制备工艺研究

目的：优选复方龙血竭凝胶剂最佳制备工艺并进行初步质量考察.方法：采用单因素考察方法,以凝胶剂外观评价作为考察指标,筛选优化处方,制备复方龙血竭凝胶剂.采用离心试验、耐寒耐热试验及体外透皮吸收试验对复方龙血竭凝胶剂进行初步质量考察.结果：优化处方为：复方龙血竭组方药物：3%卡波姆：吐温-80：甘油：乙醇=0.3：20：0.2：2：1;按该处方制得的凝胶外观好,离心及耐寒耐热试验显示凝胶无分层现象及颜色变化,稳定性好;体外透皮吸收试验显示,龙血素A和龙血素B在3小时之内累积释药率达到99%.结论：该制备工艺操作简单,所得凝胶稳定性好,释放速率高.     

基于薄层色谱法和超高效液相色谱法对龙血竭的质量评价研究

目的：建立龙血竭药材的薄层色谱、超高效液相色谱指纹图谱和含量测定方法,为其质量标准的制定提供依据。方法：采用薄层色谱（TLC）法,以龙血竭对照药材、龙血素A及龙血素B为对照进行18批样品的定性鉴别;采用超高效液相色谱（UPLC）法同时建立龙血竭的指纹图谱和含量测定方法;使用聚类分析、主成分分析进行化学计量学的分析,建立综合评分方法,评价云南省不同产地样品的质量。结果：开发的TLC方法操作简单,能高效鉴定龙血竭药材;通过对18批样品的指纹图谱分析,识别了16个共有峰,确证了白藜芦醇、7,4’-二羟基黄酮、龙血素A、龙血素B、紫檀茋5个化学成分,并对5个成分进行定量分析,回收率在98.64%～100.89%之间;通过聚类分析,发现样品大致可分为三类,与产地因素具有一定的相关性;通过主成分分析与综合得分F结果表明整体质量最好的为第Ⅱ类。结论：建立龙血竭的薄层色谱、含量测定及指纹图谱与化学计量学相结合的方法,为龙血竭的质量评价提供新的思路,对质量标准的研究提供参考。     

剑叶龙血树根、茎、叶中血竭成分分析

目的通过对比剑叶龙血树根、茎、叶成分与龙血竭成分间的异同及对剑叶龙血树根、茎、叶中龙血素A、B的测定,寻找龙血竭原料的可能来源。方法薄层色谱法及高效液相色谱技术。结果剑叶龙血树根、茎、叶中均含有微量的龙血素A,分别为:58、53、15μg/g;叶中还含有微量的龙血素B,为2μg/g,而根、茎样品中未能检测到龙血素B。结论从色谱峰的积分面积及保留时间来看,剑叶龙血树根、茎、叶成分与血竭原料有少许的相关性,但差异显著;根、茎、叶3者间的化学组成成分也存在着显著差异,剑叶龙血树根、茎、叶中龙血素量都较低,不能直接用作生产血竭的原料。     

不同来源国产血竭的薄层色谱和紫外光谱鉴别

目的：比较6种不同来源国产血竭的质量差异。方法：以剑叶龙血树含皮及木质部为原料，采用回流提取、索氏提取，超声提取，低温膨化提取，并与市售的通过传统工艺提取的云南血竭和海南血竭为对照，对它们进行薄层层析和紫外光谱鉴别。结果：薄层对应斑点基本相同，紫外光谱基本一致。结论：6种不同来源的国产血竭的成分基本一致，而以龙血素C作为评价指标，其质量存在一定差异。     

龙血竭胶囊中龙血素B的含量测定及比较

目的用HPLC法测定龙血竭胶囊中龙血素B的含量,简化前处理,并对市售不同品牌的龙血竭胶囊中龙血素B的含量进行比较。方法选用色谱柱Eclipse XDB-C18(5μm,4.6 mm×150 mm,Agilent),乙腈-0.4%磷酸溶液(35∶65)为流动相,流速为1 ml/min,柱温30℃,检测波长275 nm。结果龙血素B在6.2~31.5μg/ml范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 99,n=5),龙血素B的加样回收率99.66%(RSD=1.48%)。结论该方法简便,准确,可靠,便于日常生产时制剂的含量控制,且市售中不同品牌的龙血竭胶囊中龙血素B的含量均符合国家标准(不低于0.6 mg/粒)。     

龙血竭高效液相色谱特征研究

目的：用HPLC法对龙血竭指纹图谱进行研究。方法：采用色谱条件Eclipse XDB-ODS柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)；流动相乙腈-水,梯度洗脱进行色谱分离；检测波长为275 nm；流速为1.0 mL·min^-1；柱温为40 ℃,以龙血素B作为参照物。结果：初步建立了龙血竭的HPLC指纹图谱,并进行相似度评价。结论：方法简单可行,能够有效地控制龙血竭的内在质量。     

龙血竭缓释滴丸的质量标准研究

目的：确定龙血竭缓释滴丸质量标准。方法：通过薄层鉴别方法对处方中龙血竭进行定性鉴别。运用高效液相色谱法对龙血竭中的龙血素B进行含量测定。结果：定性鉴别能从样品中检出相应的斑点;含量测定龙血素B的量在0．12～0．96μg有良好的线性关系,回收率99．09％,RSD1．87％。结论：该制剂有明显的缓释作用,且所建立的方法可靠,能准确地进行定性、定量检测,可用于该制剂的质量控制。     

龙血竭小鼠灌胃给药后血中移行成分的分析

目的 对龙血竭进行中药血清药物化学研究,为确定龙血竭的药效成分奠定基础.方法 在建立龙血竭高效液相色谱指纹图谱的基础上,通过比较龙血竭提取物、含药血清和空白血清的HPLC指纹图谱,结合LC-MS/MS检测技术确定龙血竭给药后的血中移行成分.结果 在龙血竭含药血清中发现6个人血成分,其中5个都属原型成分,分别为3,4'-二羟基-5-甲氧基二苯乙烯、剑叶龙血素B、4'-羟基-4,2'-二甲氧基一二氢查耳酮(新化合物)、剑叶龙血素A和龙血素B;1个可能为原型成分或代谢产物.结论 6个人血成分是龙血竭在体内主要直接作用物质,有助于阐明龙血竭的药效物质基础.     

乳康酊的薄层鉴别及丹皮酚的含量测定

目的:建立乳康酊薄层鉴别和含量测定的方法。方法:采用薄层色谱法对乳康酊中徐长卿、龙血竭进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中丹皮酚的含量。结果:在薄层色谱中可检出徐长卿和龙血竭;丹皮酚在0.03～0.27 g.L-1与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为99.01%,RSD 2.22%(n=6)。结论:所建立的方法简便、准确、可靠,可用于该制剂的质量控制。     

设计空间法研究龙血竭酚类提取物的精制工艺

运用质量源于设计(Qb D)理念,采用"设计空间"方法优化龙血竭酚类提取物的精制工艺。首先将龙血素B、7,4'-二羟基黄酮含量及其转移率、总干膏收率等5个指标做为关键质量属性(CQA),采用Plackett-Burman设计实验,发现关键工艺参数(CPP)为碱浓度、碱倍量和碱溶温度。再采用Box-Behnken设计建立CQA和CPP间的数学模型,方差分析显示模型P均小于0.05,失拟值均大于0.05,可以较好的描述CQA和CPP之间的关系。设定龙血素B、7,4'-二羟基黄酮含量及其转移率、总干膏收率5个指标的控制限度,通过Monte Carlo仿真法计算获得基于概率的设计空间并验证。结果表明,优化后的纯化方法能够保证龙血竭酚类提取物精制工艺稳定,有助于提高酚类提取物批次间质量均一性,为生产自动化控制提供数据支撑。     

基于电子鼻技术的国产血竭与进口血竭快速鉴别研究

目的：鉴别进口血竭与国产血竭。方法：通过电子鼻检测国产血竭和进口血竭气味在传感器上的响应值,并采用判别因子（Discriminant Factorial Analysis,DFA）进行分析。结果：进口血竭和国产血竭气味差异明显。结论：电子鼻技术对进口血竭和国产血竭气味的判别与传统经验鉴别一致,电子鼻技术结合数学模型可以作为中药质量快速鉴别的方法。     

补骨胶囊薄层色谱鉴别法研究

采用薄层色谱法对补骨胶囊中的人参、黄芪、血竭进行了定性鉴别。方法简便,具重现性和专属性,且无阴性干扰,对样品的质量控制有重要意义。     

生肌中药对组织工程皮肤移植后VEGF表达的影响

目的:探讨乳没生肌散、龙血竭对组织工程皮肤移植后VEGF表达的影响。方法:利用人成纤维细胞、角质形成细胞构建组织工程皮肤,并植入裸鼠皮肤缺损创面,实验动物随机分为乳没生肌散外敷组、龙血竭外敷组、龙血竭内服组、龙血竭外敷并内服组5组,并以不用药组为对照组。术后9d取材,冰冻切片,行HE染色,免疫荧光双标检测VEGF的表达。结果:术后9d,各组创面愈合,表皮层较厚,真皮层致密,生肌中药治疗后毛细血管增生明显,VEGF阳性表达增强,龙血竭外敷并内服组表达最强。结论:生肌中药能促进组织工程皮肤移植后VEGF的表达,有利于再血管化。     

比色法测定龙血竭总黄酮含量

目的:对龙血竭总黄酮的比色测定方法进行研究.方法:利用龙血竭总黄酮可与各种不同的显色试剂作用并产生颜色的特性,比较显色后的吸收曲线变化差异.结果:龙血竭用HCl-Mg粉显色后在475 nm处产生一个大的吸收峰,且此处的干扰较小,在6h内稳定性良好,在0.012 ～0.12 g·L-1呈良好的线性关系(r=0.9993);用其他显色剂显色后吸收峰均无太大变化.结论:总黄酮测定常用的AlCl3,NaNO2-Al(NO3)3-NaOH比色法不适合龙血竭总黄酮的测定,HCl-Mg粉可作比色法测定龙血竭总黄酮的显色剂,但仍需寻找合适的对照品.     

龙血竭有效部位对胎鼠皮肤成纤维细胞生长的作用

目的:探讨龙血竭不同有效部位对体外培养的胎鼠皮肤成纤维细胞生长及分泌的影响。方法:孕龄12.5~14.5d昆明小鼠胚胎,无菌条件下将躯干部皮肤制成匀浆,接种于25cm2塑料培养瓶,体积分数10%FBS的高糖DMEM培养基培养传代,P3代细胞以8×106个/L接种于96孔板,细胞饥饿24h后进行实验。采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇等极性递增溶剂依次萃取龙血竭中的各种有效部位,均选用0.125g/L、0.25g/L、0.5g/L、1g/L、2g/L、4g/L五个浓度梯度作用于96孔板中的细胞(DMSO助溶),24h后MTT法检测不同条件下细胞的生长曲线,免疫组化检测细胞分泌Ln、Ⅰ型胶原的变化。10%FBS的高糖DMEM培养条件为空白对照,1%DMSO的高糖DMEM培养条件为实验对照。结果:龙血竭乙酸乙酯有效部位在低浓度对胎鼠成纤维细胞的生长有轻度抑制作用,随浓度增加促生长作用增强,1g/L龙血竭乙酸乙酯有效部位对胎鼠皮肤成纤维细胞的促生长作用最佳,并促进Ln、Ⅰ型胶原的分泌。龙血竭其它有效部位对胎鼠成纤维细胞均无刺激生长的作用。结论:龙血竭乙酸乙酯有效部位能促进胎鼠皮肤成纤维细胞的生长和分泌。     

胡桐泪的生药学研究

对胡杨(Populus euphratica)分泌树脂“胡桐泪”进行了药材性状、显微鉴别、紫外光谱、红外光谱、薄层层析及其扫描的研究;并在紫外光谱和薄层层析与胡杨叶做了对比。     

龙血竭提取物对正常及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的影响

目的研究了龙血竭提取物对正常及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的影响。方法采用正常小鼠和四氧嘧啶糖尿病模型小鼠,用葡萄糖氧化酶法测定血糖,用放射免疫法测血清胰岛素,用高效液相色谱(HPLC)分析小鼠的血清。结果龙血竭提取物对正常小鼠空腹血糖无明显降低作用,能降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的空腹血糖水平,能改善小鼠对蔗糖的耐受力,增加正常小鼠的胰岛素分泌,血清样本中有药物成分检出。结论龙血竭提取物对糖尿病小鼠有较好的治疗作用,可升高血清胰岛素水平,其部分组分能够被动物体内吸收并进入血液发挥作用。