免疫印迹法检测梅毒患者血清中IgG抗体临床意义及方法学评价

目的 探讨免疫印迹法检测梅毒感染患者血清中IgG抗体检测的临床意义。方法 采用免疫印迹法对临床确诊为梅毒的患者血清标本59 、正常献血员血清标本25例及生物性假阳性标本20例等进行了检测，并与梅毒特异性抗体检测的标准方法荧光梅毒螺旋体抗体吸附实验（FTA－ABS）、酶联免疫吸附实验（ELISA）和梅毒螺旋体被动明胶颗粒凝集实验（TPPA）结果相比较。结果 44例未经治疗的梅毒患者和15例经过治疗后的梅毒患者血清梅毒特异性抗体均为阳性，正常献血员和生物性假阳性患者结果均为阴性。59例梅毒患者中，除2例梅毒治疗后患者未检测出针对17KD多肽抗原抗体外，均检测出针对分子量为47KD，17KD和14KD多肽抗原抗体。针对上述3种多肽抗原抗体阳性率分别为100％，96．6％和100％。而针对90，60，33，30，25，22，45KD等多肽抗原抗体，在所有梅毒患者血清中亦检测出不同程度的阳性率。在51例非梅毒患者中，均未检测出针对47KD，17KD和14KD多肽抗原抗体，5例分别检测出一种或多种针对分子量为90，60，33，30，25，22KD和45KD等多肽抗原抗体。四种方法检测治疗前后梅毒患者结果一致性分别为100％和92．8％，四种方法检测梅毒的敏感度分别为100％，98．3％，98．3％，100％，经卡方检验，四种方法检测敏感度差异无显著性意义（P＞0．05）。免疫印迹法检测梅毒特异性抗体敏感度（100％）等于或高于其它三种同类方法，特异性（100％）与ELISA和TPPA两种方法相同，但显著高于FTA－ABS法（92．2％）。结论 免疫印迹法敏感度高，特异性好，操作简单，不需特殊仪器设备，阴阳性结果界线分明，易于判断，适应于临床广泛开展。     

3种人体包虫病IgG抗体检测试剂盒的性能评价

目的对3种人体包虫病IgG抗体检测试剂盒的检验性能进行初步评价。方法收集四川大学华西医院包虫病确诊的112例患者血清标本作为包虫病组;收集60例非包虫病患者及体检者血清标本作为非包虫病组,同时用珠海海泰包虫病IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附法)、新疆贝斯明包虫病特异抗体检测试剂盒(胶体金法)、上海新吉而囊型/泡型包虫病抗体检测试剂盒(胶体金法)进行检测,计算3种试剂的灵敏度、特异度、Youden指数,评价3种试剂的灵敏度、特异度、Youden指数的差异,采用Kappa一致性检验,分析3种试剂检测结果与临床诊断的一致性。结果海泰、贝斯明、新吉而试剂盒的灵敏度分别为94.64%(106/112)、92.86%(104/112)、96.43%(108/112);特异度分别为100.00%(58/58)、91.38%(53/58)、93.10%(54/58)。3种试剂的灵敏度和特异度比较,差异无统计学意义(P0.05);Youden指数分别为0.965、0.924、0.953,Kappa值分别为0.923、0.832、0.895。结论 3种人体包虫病IgG抗体检测试剂盒均具有较好的灵敏度、特异度、准确度,与临床诊断一致性较高。     

IgG抗体适体与16kD抗原联合检测血清结核抗体研究

目的研究结核患者IgG抗体适体与16 kD抗原组合在结核病血清学检测中的应用价值。方法 SELEX技术筛选得到结核患者IgG抗体适体,并将适体构建的混合ELISA体系用于少量血清标本的检测,初步鉴定适体的检测效果,然后将适体与16 kD抗原联合构建ELISA检测体系进行221份血清标本的分析。结果 SELEX筛选得到4个高亲和适体;单适体血清学检测结果显示,适体之间存在交叉互补性;适体两两组合检测效果显示,N1+N6组合的阳性平均值与阴性平均值的比值最高;221份血清标本检测结果显示,N1+N6适体组合、16 kD抗原以及N1+N6+16 kD组合3种检测体系的敏感性和特异性分别为47.31%和92.97%、49.46%和91.41%、51.61%和92.19%,N1+N6适体组合、16 kD抗原以及N1+N6+16 kD组合3种检测体系的结核病组和健康对照组之间的t检验结果依次为t=6.564,P<0.0001;t=5.279,P<0.0001;t=4.348,P<0.0001,结核病组和非结核疾病对照组之间的t检验结果依次为t=4.196,P<0.0001;t=3.014,P=0.0031;t=2.929,P=0.004,差异均具有统计学意义,三种检测方法之间卡方检验显示,差异无统计学意义(P>0.05);单独适体组合与单独抗原检测合并计算的敏感性、特异性为67.74%、84.38%,与N1+N6+16 kD组合检测结果的卡方检验显示,敏感性差异有统计学意义(χ2=8.52,P<0.05),特异性差异无统计学意义(χ2=2.04,P>0.05)。结论 SELEX技术筛选获得的特异性IgG抗体适体和16KD抗原联合具有良好的结核病血清学诊断价值,可用于结核病的实验室诊断。     

双抗体夹心酶联免疫吸附法检测IgG0的研究及应用

类风湿关节炎(RA)患者IgG分子糖链末端2个半乳糖缺失(称为IgG0 ) [1] ,缺失后,N 乙酰葡萄糖(GlcNAc)暴露。本研究用特异性识别GlcNAc的蘑菇凝集素(PVL) ,建立一种检测IgG0 的双抗体夹心酶联免疫吸附试剂(ELISA)检测法,并对正常人和RA患者进行检测。一、材料和方法1 标本来源:4 2份RA活动期患者血清采自1999年8月～2 0 0 1年12月本院就诊患者,(女33例,男9例,均符合1987年美国RA诊断标准)。对照组为12 6份志愿者血清,(女95名,男31名)。血清库( pool) :参照Tsuchiya法[2 ] 取4份活动期RA患者血清各2ml,混合成pool,用作参考血清,代…     

血清结核分枝杆菌IgG抗体诊断活动性肺结核的临床结果研究

目的探讨血清结核分枝杆菌免疫球蛋白G(IgG)抗体诊断活动性肺结核的临床结果。方法选取2016年3月至2018年4月该院收治的活动性肺结核患者(n=165)、非结核呼吸道疾病患者(n=75)为研究对象,并将活动性肺结核患者纳入观察组,非结核呼吸道疾病患者纳入对照组,分析结核杆菌IgG抗体对活动性肺结核的诊断结果。结果观察组中结核杆菌抗原检测阳性率为70.91%,显著高于对照组的29.33%(P0.05);观察组IgG、相对分子质量为3.8×10~4(38kD)、LAM同时检测阳性例数最多,阳性率为58.12%,对照组中单一抗体IgG检测阳性例数最多,阳性率为68.18%;诊断灵敏度为68.47%,特异度为65.49%,阳性预测值为86.28%,阴性预测值为41.21%。结论血清结核分枝杆菌IgG抗体在诊断活动性肺结核中有一定的辅助价值,有较高的阳性率和灵敏度,IgG、38kD、LAM联合检测可能会提高活动性肺结核的诊断阳性率。     

血清青霉素IgM和IgG抗体检测方法的建立及评价

青霉素是一种半抗原，进入血液后可刺激机体产生抗青霉素抗体（IgE、IgG和IgM等）。长期以来国内外对青霉素IgE抗体关注较多，而对青霉素IgG和IgM抗体缺乏足够重视。为全面评估人群中青霉素的免疫状况，本研究对人群中青霉素IgG和IgM抗体水平进行检测评价。但是，鉴于现行检测血清青霉素IgM和IgG抗体的间接抗人球蛋白试管法存在检测灵敏度较低、人为影响因素较大，操作繁琐等缺点，本研究特建立微柱凝胶抗人球蛋白法，并对住院患者和健康供血者血清青霉素IgG和IgM抗体进行检测分析，同时与间接抗人球蛋白试管法作对比研究，现报告如下。     

尿液HIV-1抗体EIA-PRC法检测的临床应用

目的 对尿液HIV-1抗体EIA试剂盒进行特异性与敏感性的评价。方法 收集尿液标本进行HIV-1尿液EIA—PRC法检测，对比血液标本进行HIV(1 2)抗体EIA初筛检查(双抗原夹心法)。结果 在5000例所调查的正常人群中，有54例尿液HIV-1初检为阳性(54／5000)，复检为阴性结果。对48例AIDS患者的尿液标本进行尿液HIV-1检查，结果均为阳性(48／48)。结论 对尿液行HIV-1抗体的初筛检测，标本易得，且无创伤性，既减少了HIV交叉感染和传播的风险，又适宜于大批量的人群监测与普查工作．值得推广应用．     

电化学发光法检测单纯疱疹病毒2 IgG抗体应用评估

目的对电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测单纯疱疹病毒2(HSV-2)IgG抗体结果进行比较分析,评价ECLIA的性能及临床应用价值。方法应用罗氏诊断公司ECLIA与爱尔兰Trinity公司ELISA试剂分别检测400份血清标本中的HSV-2特异性IgG抗体,检测结果不一致的标本用欧蒙生物技术有限公司的抗HSV-2 IgG抗体检测试剂进行复核。结果 ELISA和ECLIA检测阳性率分别为39.0%、37.8%;以ELISA为参照,ECLIA假阴性率为1.3%,假阳性率为0.8%,相对敏感性为96.8%,相对特异性为98.8%,二者的符合率为98.0%。使用欧蒙生物技术有限公司试剂对13份检测结果不一致(包括2个不确定结果)的标本进行了复核,其中6份标本结果支持ECLIA,5份标本结果支持ELISA。结论 ECLIA和ELISA检测HSV-2 IgG抗体结果符合情况良好,罗氏"HSV-2 IgG抗体检测试剂(ECLIA)"是一种快速、准确、敏感性和特异性高的试剂,可以应用于临床。     

点免疫金渗滤法检测弓形虫IgG抗体

弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉ）是一种可寄生在细胞内的原虫，人群中有较高的感染率。人类和多种动物感染弓形虫后可引起弓形虫病，出现神经系统、眼部和多个脏器的损伤。孕妇感染可引起胎儿畸形，流产或死胎。由于检获弓形虫体比较困难，对弓形虫感染的诊断主...     

酶联免疫斑点试验快速诊断结核分枝杆菌感染的临床应用价值

目的探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测结核分枝杆菌特异抗原T淋巴细胞的频率，在快速诊断结核病中的临床应用价值。方法利用ELISPOT检测对结核菌特异抗原刺激反应，分泌γ干扰素的效应T淋巴细胞数量方法，测定30名健康体检者，24例丙肝患者，65例非结核呼吸道疾病患者和112例结核病患者外周血单个核细胞中结核菌抗原特异的T淋巴细胞的频率。结果112例结核病患者中，107例结核病患者结核抗原特异ELISPOT阳性，提示方法敏感度为95．5％，30名健康对照中，2名健康体检者阳性，其他健康体检者阴性，24例丙肝患者和65例非结核呼吸道疾病患者均为阴性，方法的特异度为93．3％。结论ELISPOT是较灵敏和特异的快速检测结核菌感染的方法，可用于结核病的快速诊断。     

探讨ELISA法检测血清结核杆菌抗原对肺结核病的诊断价值

目的探讨检测结核杆菌抗原对肺结核病的诊断价值。方法应用酶联免疫吸附试验检测血清中的结核杆菌分泌蛋白desA抗原。结果 139例活动性肺结核患者血清结核抗原的阳性检出率为84.1%;64例非结核性肺部疾病组结核抗原阳性率7.81%,29例健康对照者均为阴性。特异性为92.19%。结论检测血清中结核杆菌分泌蛋白desA抗原对诊断肺结核病有较高的应用价值。     

结核分枝杆菌噬菌体快速检测方法的临床应用评价

目的评价噬菌体生物扩增法直接检测痰样本中结核分枝杆菌的临床效果。方法应用噬菌体生物扩增法、金胺O染色涂片镜检和快速培养法对530例临床痰样本进行检测。结果以快速培养法培养结果为参考标准进行评价。结果 530例痰样本中有270例快速培养法阳性,其中噬菌体生物扩增法有220例阳性,而260例快速培养法阴性的样本中有20例噬菌体生物扩增法阳性;噬菌体生物扩增法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为81.6%、92.3%、91.6%、82.8%。涂片联合噬菌体生物扩增法的检测敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为88.9%、80.8%、82.8%和87.5%。结论噬菌体生物扩增法具有较高的敏感性和特异性,以及快速、安全等优点,特别是对于痰涂片阴性的结核病患者具有较高的临床应用价值。     

三种结核抗体联合检测对活动性肺结核的诊断价值

目的 分析结核分枝杆菌免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)抗体及结核分支杆菌糖脂免疫球蛋白G(LAM-IgG)联合检测对活动性肺结核的诊断价值.方法 选取2019年3月至2020年7月新乡医学院附属第一医院收治的106例活动性肺结核患者作为观察组(根据患者病情变化分期分为三个亚组:进展期28例、好转期41例、...     

血清结核杆菌抗体检测在结核病的临床意义

目的：探讨血清结核杆菌抗体检测在住院患者结核病诊断中的临床价值。方法150例结核病患者,80例非结核病患者以及40例健康志愿者均应用以脂阿拉伯甘露糖（LAM）为抗原的 ELISA法进行抗体阳性率的检测。并应用痰涂片和PPD实验检查对150例结核患者进行检测。结果在150例肺结核患者中,结核杆菌抗体检测的阳性检出率为72．67％（109/150）,显著高于痰涂片的51．33％（77/150）和PPD实验的58．67％（88/150）,且差异均具有统计学意义（χ2＝14．49,6．52;P＜0．001,0．011）。结核病组抗体阳性率总数为72．67％（109/150）,显著高于非结核病组的17．50％（14/80）和健康对照组的10．00％（4/40）,且与二者比较,差异均具有统计学意义（χ2＝41．15,51．45;P＜0．001,0．001）。非结核疾病组与健康人群比较,抗体阳性率的差异无统计学意义（χ2＝1．18,P＝0．27）。结论结核抗体测定对结核病的阳性检出率较高,优于传统的痰涂片和PPD实验检测,临床上具有很大的应用价值。     

流行性乙型脑炎病毒IgG抗体捕获酶联免疫吸附试验检测方法的建立

目的利用流行性乙型脑炎(乙脑)病毒特异性单克隆抗体建立检测人血清中乙脑病毒IgG抗体的捕获ELISA方法。方法将乙脑病毒特异性单克隆抗体包被在固相载体上,加入灭活并经过纯化的乙脑病毒抗原,再加入待测血清,经洗涤、显色等判定最终检测结果。采用免疫荧光法作为对照。结果与免疫荧光法相比较,本方法的灵敏度为95.6%,特异度为85.7%,一致性为91.3%;本方法的灵敏度和特异度高于市售的两种检测试剂。结论本研究所建立的乙脑病毒IgG抗体捕获ELISA方法具有良好的检测性能,可以应用于正常人群血清中乙脑病毒IgG抗体的筛查。     

对比研究ELISPOT与QFT—GIT对于结核病诊断的应用价值

目的比较ELISPOT和Quanti—FERON—TBGoldIn-Tube（QFT-GIT）试剂盒,探讨ELISPOT方法在活动性肺结核诊断中的意义。方法应用ELISPOT和Quanti-FERON—TBGoldIn-Tube（QFT-GIT）对105份活动性结核患者（A组）和60份非结核呼吸系统疾病对照组（B组）进行检测。结果ELISPOT与QFT—GIT方法的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为85．71％、86．67％、91．84％及77．61％和83．81％、76．67％、86．27％及73．02％,且两种方法差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论应于ESAT-6／CFP-10融合蛋白技术的ELISPOT检测方法能够诊断活动性肺结核,并对结核感染诊断提供一定的依据。     

结核T细胞酶联免疫斑点试验快速诊断肺外结核感染的应用价值

目的 探讨结核T细胞酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）诊断肺外结核分枝杆菌（MTB）感染的临床应用价值.方法 选择肺外MTB感染者37例（肺外MTB感染组）及非结核病对照者30例（非结核病对照组）,应用T-SPOT.TB法检测外周血单个核细胞（PMBCs）经结核特异蛋白6KD早期分泌靶向抗原（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP-10）刺激产生γ干扰素（IFN-γ）的T淋巴细胞数,并与结核菌素皮肤试验（TB-PPD）法比较.结果 （1）T-SPOT.TB法在肺外MTB感染组的阳性率91.89％ （34/37）,显著高于非结核病对照组6.67％（2/30）,差异有统计学意义（x^2=48.403,P＜0.001）.（2） T-SPOT.TB诊断肺外MTB感染的敏感性为91.89％,特异性为93.33％,阳性预则值为94.44％,阴性预测值为90.32％,优于TB-PPD法（67.57％、56.67％、65.79％、58.62％）,差异有统计学意义（x^2=6.773、10.756、9.392、8.031,P=0.009、0.001、0.002、0.005）;两方法间一致性较弱（Kappa=0.311,x^2=6.801,P=0.009）.结论 T-SPOT.TB技术快速辅助诊断肺外MTB感染作用明显,其较高的阴性预测值在排除感染方面意义重大.     

牛奶过敏单组分特异性IgG4抗体光激化学发光定量检测方法的建立和评价

目的建立并评价基于光激化学发光分析(LICA)平台的牛奶过敏单组分(Bos d 5)特异性IgG_4抗体(sIgG_4)定量检测方法(sIgG_4-LICA)。方法以生物素标记的Bos d 5抗原、待检血清、抗人IgG_4抗体包被的发光微球和链霉亲合素包被的感光微球组成分析体系,基于LICA平台,采用间接法模式,建立Bos d 5 sIgG_4抗体定量检测方法(sIgG_4-LICA),并对其进行条件优化和性能评价。结果 sIgG_4-LICA方法的批内精密度、日间精密度和批间精密度分别为1.78%～3.13%、6.65%～8.41%和7.94%～12.30%,功能灵敏度为4.71 ng/mL,线性范围为28.13～1 800 ng/mL,线性回归方程为Y=0.98X-1.31(r~2=0.997),最大稀释度为1∶64,血红蛋白、三酰甘油、总胆红素、抗坏血酸及生物素的干扰率为-6.38%～8.60%。结论本研究建立的Bos d 5 sIgG_4抗体定量检测方法性能良好,可满足临床监测sIgG_4抗体的需要。     

定量测定硫酸软骨素的双抗体夹心ELISA的建立

目的建立定量测定硫酸软骨素（CS）的双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）,并对其应用价值进行初步评价。方法以CS为抗原分别免疫Balb/c小鼠和日本大耳白兔,制备2种动物的多克隆抗体。用鼠抗体包被微孔板,兔抗体为第2抗体,辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗兔抗体为标记抗体,建立双抗体夹心ELISA,并对线性范围、精密度、回收率和方法学比较进行了评价。结果本研究建立的ELISA线性范围为2～500 mg/L,批内和批间精密度分别为4.48%和5.97%,回收率在99.52%～101.77%之间,与间苯三酚分光光度法测定结果具有良好的相关性（r=0.999 0,P〈0.05）。结论建立的定量测定CS的双抗体夹心ELISA具有敏感性高、重现性好等优点,适合检测应用。