KHC3法测定血清总胆红素的方法学评价

目的应用美国临床和实验室标准化协会（CLSI）推荐的标准化评价方案对KHC3法测定血清总胆红素（TBIL）进行初步评价。方法对KHC3法测定血清总胆红素的精密度、准确度、线性范围、干扰因素及正常血清参考范围进行测定,并比较其与改良J-G法结果的相关性。结果 KHC3法测定TBIL具有良好的精密度（批内、批间、日间及总变异系数均小于5%）和准确度（回收率96.9%~103.7%,平均回收率100.7%。）;线性范围：0~513μmol/L;维生素C（VitC）≤0.5g/L、三酰甘油（TG）≤5.01mol/L和血红蛋白（Hb）≤1.5g/L时对KHC3法无干扰;KHC3法与改良J-G法相关性良好;KHC3法测定TBIL参考范围为：1.84~15.10μmol/L。结论 KHC3法测定TBIL具有准确度高、重复性好、线性范围宽、抗干扰能力强等特点,适用于实验室常规自动化分析。     

钒酸氧化法测定血清总胆红素的方法学评价

目的对钒酸氧化法、二氯苯胺法和改良J-G法测定血清胆红素进行方法学评价,探讨溶血、脂血对钒酸氧化法测定血清胆红素的干扰影响。方法用钒酸氧化法测定血清总胆红素,按NCCLS评价方案系统评价其重复性、回收率、线性范围和溶血、脂血对血清胆红素测定的干扰影响,并与二氯苯胺法和改良J-G法测定血清总胆红素结果进行比较。结果钒酸氧化法与二氯苯胺法和改良J-G法有良好的相关性(Y1=1.06X-0.32,r=0.94;Y2=0.93X 3.26,r=0.98);钒酸氧化法测定总胆红素的线性可达684μmol/L,批内变异为1.25%,日间变异为3.14%,回收率为102.5%;血红蛋白和甘油三酯浓度分别达6.0g/L和8.0mmol/L,无明显干扰。结论钒酸氧化法测定血清胆红素不仅简单、快速、稳定,而且线性范围宽,能抵抗溶血、脂血干扰,值得推广应用。     

酮胺氧化酶法测定血清糖化白蛋白

目的对检测血清糖化白蛋白(GSP)的含量的一种新方法———酮胺氧化酶法进行评价。方法分析该方法检测GSP的精密度,灵敏度及准确性,与NBT进行比较并进行回收试验及特异性测定。结果酶法测定GSP精密度高,批间CV=1.24%;试剂稳定4周以上;线性范围较宽,可达1845μmol/L;回收率为98.9%;葡萄糖浓度至45mmol/L,胆红素340μmol/L,甘油三脂36mmol/L,抗坏血酸500μmol/L,Hb在1.8g/L对本法无明显干扰。结论利用酮胺氧化酶法检测GSP具有特异、灵敏。线性范围宽,回收率高,抗干扰能力强,试剂稳定等特点,是临床检测GSP的首选方法。     

4种总胆红素常规检测方法的比较

[目的]对4种常规的总胆红素检测方法进行性能评价，选择测定血清胆红素的最佳方法。[方法]采用KHC3法、改良化学氧化法、钒酸氧化法和胆红素氧化酶法试剂盒同时测定标本中的总胆红素，比较每种方法的精密度、线性、抗干扰能力、回收率，以及评价各方法与改良J-G法的相关性。[结果]改良化学氧化法、钒酸氧化法、胆红素氧化酶法的批内精密度均小于3．0％；4种方法的回收率均在95．0％～105．0％之间；KHC3法、改良化学氧化法、钒酸氧化法和胆红素氧化酶法的线性范围分别是：0～424μmol／L、0-675μmol／L、0-629μmol／L、0-575μmol／L；胆红素氧化酶法和改良化学氧化法均有较强的抗干扰能力，和改良J-G法的测定结果有高度一致性。[结论]改良化学氧化法和胆红素氧化酶法精密度好，准确性高，抗干扰能力强，线性范围较宽，更适用于临床常规检测。     

酮氨酸氧化酶法测定糖化血清蛋白方法学研究

目的对酮氨酸氧化酶法全自动测定糖化血清蛋白(GSP)的方法进行评价。方法用日立7060全自动生化分析仪检测GSP,观察试剂稳定性、精密度、线性范围、抗干扰性、准确性、样品贮存温度和贮存时间,建立参考值范围。结果该方法180s达到反应终点,线性达到1266μmol/L(Y=0.9866X+0.134,r=0.9997);批内CV为1.54%,批间CV为3.20%;平均回收率为101.7%;当TG<9.8mmol/L、BIL<675μmol/L、Hb<200g/L、UA<3500μmol/L、Glu<100mmol/L时对测定结果无显著干扰。120例健康人血清GSP参考值范围(x±2s):110～220μmol/L。结论本方法线性范围宽、特异性强、精密度高,干扰因素少,是测定GSP的较好方法。     

三种直接胆红素检测系统的性能评价

目的对钒酸盐氧化法、改良J-G法和3,5-二氯苯重氮四氟硼酸盐法（3,5-DCB-4FB）检测直接胆红素（DBil）进行性能评价,探讨3,5-DCB-4FB法是否适用于DBil检测。方法用钒酸氧化法、改良J-G法和3,5-DCB-4FB法分别测定血清DBil,探讨3种方法的精密度、线性、敏感性、抗干扰性和回收率。并分别与Doumas法（手工）进行比较。结果 3种方法平均精密度均在1%～5%之间;平均回收率为103.28%、99.04%、100.69%;线性范围（敏感性）为1.06～335.10μmol/L（1.06）、1.01～310.00μmol/L（1.01）、0.76～310.00μmol/L（0.76）。钒酸盐氧化法抗血红蛋白（Hb）干扰能力优于后2种方法;3种方法与Doumas法进行比较具有良好相关性（r2〉0.975）,医学决定水平处的系统误差（SE）分别为-9%、-7%、-1.1%。结论 3,5-DCB-4FB法具有良好的精密度、敏感性、抗干扰能力、线性范围和相关性,与改良J-G法具有很好的一致性。3,5-DCB-4FB法适用于临床常规检测。     

肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐在CX9分析仪上的应用

目的建立肌氨酸氧化酶-PAP法测定血清肌酐的自动分析方法.方法根据测定条件的优化实验采用肌氨酸氧化酶法直接测定.结果本法300s达反应终点,线性达8840μmol/L(Y=0.9835X+0.124,r=0.9997),批内CV＜1.87%,日间CV＜3.56%,总CV＜4.19%,回收率平均100.3%,加入,BIL＜456μmol/k;Hb＜200g/L;抗坏血酸2.48mmol/L时无显著干扰.结论本法适合全自动分析.     

酶法测定直接胆红素的评价

目的根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案评价胆红素氧化酶（BOD）法直接胆红素（DBil）测定试剂盒,并观察其临床应用的可能性。方法采用BOD法测定血清DBil,并对其精密度、线性范围、干扰因素及相关性进行分析。结果低值与高值的批内精密度（CV）分别为0.9%、0.5%;批间精密度（CV）分别为1.27%、0.92%;线性范围至少可达844μmol/L。BOD法（Y）与日本关东化学株式会社试剂盒（X）的测定结果比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,相关方程为Y=0.976X-0.528,r=0.991。血红蛋白（Hb）≤5.0 g/L、维生素C≤500 mg/L、乳糜≤5 000单位对BOD法无干扰。不同厂家的试剂盒对DBil的测定灵敏度、特异性有所不同。结论采用BOD法测定DBil具有良好的分析特性,可在临床推广使用。     

酶联荧光分析法测定肌钙蛋白I的临床应用

目的 探讨酶联荧光分析(ELFA)法测定肌钙蛋白I(cTnI)的临床应用。方法 分别采用ELFA法和化学发光免疫分析(CLIA)法测定血清样品中cTnI的浓度,对ELFA法进行精密度试验、线性试验、回收试验和干扰试验;并对ELFA法与CLIA法测定cTnI的结果进行相关性分析。结果 ELFA法测定cTnI浓度,高值(30.00μg/L cTnI)和低值(0.12μg/L cTnI)的批内变异系数(CV)分别为2.81%和1.62%,批间CV分别为5.67%和3.52%。ELFA法检测cTnI的可信检测范围为0.00~30.00μg/L。当总胆红素浓度小于450μmol/L,血红蛋白浓度小于1.5g/L,三酰甘油浓度小于7.0mmol/L时,ELFA法测定cTnI无干扰。ELFA法与CLIA法测定cTnI浓度具有良好的相关性(r=0.971)。结论 ELFA法具有较好的精密度、回收率和线性范围,与CLIA法具有较好的相关性,且检测快速简便,适用于急诊检验,能满足临床要求。     

两种血清苯丙氨酸高效液相色谱测定法的比较

目的对两种血清苯丙氨酸高效液相色谱测定法进行比较。方法对高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)和高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD),从线性范围,检测限,精密度等参数上进行比较,用两种方法分别测定了正常儿童和一组PKU患儿血清phe值,对结果进行统计分析。结果HPLC-UV法和HPLC-FLD法的线性范围分别为6~1512μmol/L和12~1220μmol/L,最低检测限分别为0.75μmol/L和3μmol/L,平均回收率分别为98.6%和102.5%,批内CV均<5%,批间CV分别为4.01%和7.17%,正常儿童血清phe值分别为63.2±11.6μmol/L和92.8±21.3μmol/L(-x±s);两种方法同时测定PKU血清phe结果之间的差异有显著性的意义(P=0.019),HPLC-FLD法值较高但与HPLC-UV法值呈正相关(r=0.783)。结论两种HPLC方法均能灵敏,特异地测定血清phe,满足对pku筛查的需要,HPLC-UV法在精密度及缩短分析检测时间上略优于HPLC-FLD法。     

钒酸氧化法测定血清胆红素的实验评价

目的对钒酸氧化法测定血清胆红素进行方法学评价。方法收集40例高、中、低浓度的血清样本进行钒酸氧化法与重氮法的比对，分析钒酸氧化法的精密度、灵敏度、稳定性并做干扰实验。结果钒酸氧化法测定血清总胆红素（TBil）批内变异系数（CV）为1．58％，批间CV为2．94％；血清直接胆红素（DBil）批内CV为1．23％，批间CV为2．7％；平均回收率TBil为101．1％，DBil为100．1％。维生素C（Vit C）≤0．5g/L时对钒酸氧化法和重氮法均无干扰，三酰甘油≤6mmol／L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有明显干扰。血红蛋白浓度≤8g/L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有较大干扰。结论钒酸氧化法测定TBil和DBil是较理想的方法。     

酶法测定血清钠离子的评价

目的评价酶法测定钠离子的性能。方法评价血清钠离子酶法试剂的准确性、精密度、开盖稳定性、线性、与电极法的相关性、回收率及抗干扰性。结果酶法测定钠离子的变异系数(CV)<2%,定标周期能够维持5 d,准确度满足朗道质控品要求,线性范围达到100～160 mmol/L,与电极法具有很好的相关性[相关系数(r)=0.989 9],回收率为100.9%,在胆红素≤600μmol/L、甘油三酯≤20 mmol/L、维生素C≤0.5 g/L、血红蛋白≤10 g/L、铵离子≤25 mmol/L、钾离子≤10 mmol/L、镁离子≤5 mmol/L、钙离子≤5 mmol/L、锌离子≤50 mmol/L、铜离子≤50 mmol/L对钠离子测定无明显干扰。结论钠离子酶法试剂有较好的重复性、准确性和稳定性,线性良好,抗干扰能力强,能满足临床使用要求。     

酶转换法检测同型半胱氨酸的评价及其对冠心病的早期诊断价值

目的探讨酶转换法检测同型半胱氨酸(Hcy)的意义及其对冠心病的诊断价值。方法对酶转换法检测Hcy的精密度、线性试验、干扰试验、回收试验、灵敏度进行方法学评价,并与高效液相色谱法(HPLC)进行对比。采用酶转换法检测60例冠心病患者、54例血脂和血糖水平正常但有动脉粥样硬化疾病家族史的患者(患者对照组)及55名健康对照者的血浆Hcy,同时检测血糖(Glu)、总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)水平。结果酶转换法检测Hcy的批内不精密度(CV)分别为1.98%、2.34%;批间CV分别为2.13%、1.87%;日间CV分别为2.47%、1.33%;总CV分别为3.85%、2.41%。在2～80μmol/L范围内有良好的线性关系(r2=0.9874);TG<20 mmol/L、总胆红素(TBil)<300μmol/L、血红蛋白(Hb)<10 g/L对酶转换法检测Hcy无明显干扰(P均>0.05);回收率为98.9%～102.4%;分析灵敏度为0.27μmol/L。对2种方法进行直线回归分析,酶转换法与HPLC相关性较好(r=0.935 2),2种方法的结果差异无统计学意义(P>0.05)。Hcy与Glu、TG呈正相关(r分别为0.447、0.416,P<0.01),与TC无相关性(r=0.146,P>0.05)。冠心病组、患者对照组血浆Hcy水平均明显高于正常对照组(P均<0.01)。冠心病组TG、Glu水平高于患者对照组及正常对照组(P均<0.01)。结论酶转换法具有精密度良好、灵敏度较高、线性范围较宽、抗干扰能力强、结果准确等特点,适合基层临床实验室推广。血浆Hcy水平升高对于冠心病具有重要价值。     

高效液相色谱法测量患儿血清甲氨蝶呤浓度

目的：建立测定患儿血清中甲氨蝶呤浓度的方法,用于临床患儿血药浓度监测。方法色谱柱采用岛津原装柱（250 mm×4．6 mm,5μm）,流动相为0．025 mol/L 磷酸二氢钠溶液（pH 为5．41）-甲醇（76∶24,V/V）,流速1．0 mL/min,检测波长313 nm,柱温35℃,样品经10％高氯酸沉淀蛋白后,取上清液130μL 加10μL 1 mol/L NaOH 后直接进样。结果血浆中甲氨蝶呤的浓度在0．00～4．84μmol/L 和4．84～10．00μmol/L 范围内与峰面积线性关系良好,r 1＝1,r2＝1,平均回收率分别为61．67％和71．83％,日内及日间精密度的 RSD 小于10％和12％（n＝3）。结论所用方法简便快速、准确可靠、灵敏度高、重现性好、线性范围宽和成本低,适于甲氨蝶呤的血药浓度监测。     

参照CLSI EP文件评价两种类风湿因子测定试剂的优劣

目的参照美国临床实验室标准化协会EP文件评价两种类风湿因子(RF)测定试剂的优劣,建立实验室可用的同类试剂评价方案,便于择优选用。方法针对两种不同方法的血清RF测定试剂进行初步评价。分析两种方法测定血清RF的精密度、功能灵敏度、测定范围和干扰因素。结果胶乳增强免疫比浊和免疫比浊测定RF的精密度分别为4.58%(低值)、2.83%(高值)和7.19%(低值)、2.90%(高值);功能灵敏度为2 U/mL和9U/mL,测定范围分别为:2～140U/mL和0～300U/mL;抗干扰能力分别为胆红素:≤342μmol/L和≤500μmol/L,血红蛋白:≤10g/L和≤5g/L,三酰甘油:≤11.3mmol/L和≤6.75mmol/L;试剂开瓶后多批次反复测定CV分别为:4.35%(高值)、4.89%(低值)和4.45%(高值)和7.39%(低值)。结论胶乳增强免疫比浊法是测定血清RF较好的方法,快速、准确、灵敏度和精密度高,且结果准确,相对免疫比浊法在功能灵敏度、精密度、抗干扰能力方面更佳,但测定范围低于免疫比浊法。     

ICP-AES法测定全血锰的方法学评价

目的对电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定血锰进行方法学评价,并应用于日常检测工作。方法全血样本经1 mol/L硝酸处理后吸取上清液,采用ICP-AES在279.544 nm处测定样本,评价其精密度、回收率、灵敏度及抗干扰能力;同时采用ICP-AES测定1 027名健康体检儿童的全血锰浓度,确定正常参考范围。结果 ICP-AES测定血锰的批内变异系数(CV)为6.2%～6.6%,批间CV为7.1%～7.6%,总CV为7.2%～7.8%,相对偏差(RSD)为1.66%～2.36%,加标回收率为95.0%～96.9%,线性方程为Y=7 035.6X+759.02,r=0.999 7;在水空白和100μg/L锰标准储备液中按1∶1分别加入25 mg/L钾、钠、氯、钙、镁标准溶液和2 mg/L铁标准溶液后未检测出锰浓度有明显变化。1 027名健康体检儿童的全血锰正常参考范围为(4.89±2.67)μg/L。结论 ICP-AES检测全血锰未发现明显系统误差,且精密度高、准确度好,可作为检测全血锰的常规方法。     

溶血血清标本中血红蛋白浓度自动化分析方法的建立

目的建立一种检测溶血血清标本中血红蛋白浓度的自动化分析方法。方法利用血红蛋白具有类过氧化物酶活性的特性,根据四甲基联苯胺(TMB)的呈色原理,用以TMB为色原的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒的剩余A液(含过氧化氢)、B液(含TMB)作为显色剂,在一定范围内其颜色的深浅与血红蛋白的浓度呈正比,在660nm的波长下测定其吸光度的变化,进而计算出血红蛋白的浓度。并确定此法的精密度、线性范围、回收率及其干扰情况。结果该法测定3个不同溶血程度的血清标本的血红蛋白浓度,其批内平均CV值为1.96%,批间平均CV值为3.29%;当血红蛋白浓度为1～25g/L时,其相关系数(r)=0.999;3个不同溶血程度的血清标本其血红蛋白浓度的平均回收率为101.59%;终浓度为134μmol/L的胆红素标准液对3个样本的血红蛋白浓度检测的平均相对误差为2.34%,三酰甘油为5.08mmol/L的脂血标本对3个样本的血红蛋白浓度检测的平均相对误差为2.68%。结论本法重复性好,线性范围宽,结果准确,抗干扰能力强,可用于自动化分析,试剂无致癌作用、成本低、来源广,易于推广。     

改良缺血修饰白蛋白测定方法（白蛋白-钴结合试验）的建立

目的建立改良的缺血修饰白蛋白（IMA）测定方法[白蛋白-钴结合（ACB）试验]。方法以1-亚硝基-2-萘酚（NN）代替二硫苏糖醇（DTT）作为显色剂,确定试验的基本条件（最佳波长、反应时间、试剂稳定性等）,并对该试验的精密度、敏感性、线性等进行评价。测定急性心肌梗死（AMI）和胸痛患者的IMA值并进行统计学分析。结果改良ACB试验最佳吸收波长为410 nm,反应体系0～25 min时吸光度值变化稳定,试剂在室温和4℃30 d内性能稳定,反应体系线性良好。批内变异系数（CV）为2.67%,批间CV为5.44%。应用显色剂NN对钴离子（Co2＋）的最低检出限为0.488 mg/L,应用DTT为7.812 mg/L。三酰甘油（TG）〈2.02 mmol/L、血红蛋白（Hb）〈6.9 g/L、总胆红素（TBil）〈66.0μmol/L时无干扰。AMI组为（1.195±0.320）吸光度单位（ABSU）,胸痛组为（0.855±0.068）ABSU,二者差异有统计学意义（P〈0.01）。结论以NN作为显色剂测定IMA的ACB试验灵敏、方便、简单,适合批量测定。     

血清葡萄糖及1，5-脱水葡萄糖醇双项同测的建立

目的建立新全酶终点法同时测定血清中1，5-脱水葡萄糖醇（1，5-AG）和葡萄糖（Glu）。方法用葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）偶联系统使血清中Glu彻底转化为不与呋喃糖氧化酶（PROD）反应的6-磷酸葡萄糖酸内酯（6-PGA），以其吸光度变化计算出Glu浓度；以PROD氧化1，5-AG，生成1，5-脱水果糖和H2O2，用Trinders反应比色测定出1，5-AG的浓度。结果1，5-AG在550μmol／L（Y=0．001X＋0．0658，r=0．999）以内，Glu浓度在40mmol／L（Y=0．051X＋0．128，r=0．9989）以内线性良好。Glu和1，5-AG的平均批内变异系数（CV）分别为0．88％和1．05％，批间CV分别为1．40％和1．94％。Glu和1，5-AG的平均回收率分别为100．2％和101．6％。三酰甘油（TG）≤8．9mmol／L、血红蛋白（Hb）≤4g／L、总胆红素≤350μmol／L时不影响Glu和1，5-AG的测定。本法测定l，5-AG与Lana微柱法及GK法与HK法测定Glu相关性均良好（r^2=0．999）。Glu与1，5-AG的95％参考值范围分别为3．7—5．7mmol／L和83．1～240．7μmol／L。结论本法简便快速、灵敏、准确和稳定，可自动化双项同测Glu和1，5-AG，为糖尿病的检测与治疗监控提供了新的方法。