产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌相关耐药基因研究

目的 了解常州地区大肠埃希菌耐药状况及β-内酰胺类耐药基因.方法 用琼脂稀释法检测氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头抱噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和亚胺培南对大肠埃希菌的最低抑菌浓度,用聚合酶链反应(PCR)检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌TEM、SHV等17种耐药基因,并用DNA测序仪测序.结果 80株大肠埃希菌ESBLs检出率为46.3%,37株大肠埃希菌检出TEM、SHV、CTX-M-1群、OXA-1群和DHA 5种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为81.1%、78.4%、21.6%、10.8%、5.4%;37株菌中有36株至少检出1种β-内酰胺酶基因,24株同时检出>2种β-内酰胺酶基因,1株菌最多同时检出4种β-内酰胺酶基因,只有1株未检出β-内酰胺酶基因.结论 大肠埃希菌已携带多种β-内酰胺酶耐药基因,成为对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因之一.     

耐药大肠埃希菌β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白基因研究

目的 调查大肠埃希菌中β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白ompC基因的存在及变异情况.方法 收集医院2009年6月-2010年6月临床分离的耐药大肠埃希菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR),分析A、B、C、D等4类β-内酰胺酶24种基因和膜孔蛋白ompC基因.结果 20株耐药大肠埃希菌共检出TEM、CTX-M-1群和OXA-1群等3种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为45.0％、40.0％和10.0％,其余21种基因均未检出;20株耐药大肠埃希菌共检测到19株占95.0％,膜孔蛋白编码基因ompC,经测序比对除11号株外,其余18株占90.0％均存在突变.结论 20株耐药大肠埃希菌对β-内酰胺类药物耐药为产β-内酰胺酶和膜孔蛋白变异的共同结果.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌β-内酰胺酶基因研究

目的检测20株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的β-内酰胺酶基因,以便了解该20株产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因亚型携带存在状况。方法收集医院2013年分离到的20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)方法分析16种A类β-内酰胺酶基因、6种C类β-内酰胺酶基因、3种D类β-内酰胺酶基因。结果 20株产ESBLs大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟的耐药率均为100.0%;共检出4种A类β-内酰胺酶基因,其中检出blaTEM16株、blaSHV1株、blaCTX-M-1 cluster 3株、blaCTX-M-9 cluster 14株,检出率分别为80.0%、5.0%、15.0%、70.0%,C类β-内酰胺酶基因检出blaDHA2株,检出率为10.0%,D类β-内酰胺酶基因检出blaOXA-1 cluster 3株,检出率为15.0%;20株产ESBLs大肠埃希菌每一株均有β-内酰胺酶基因检出,少者检出1种,多者同时检出2⁴种,且该组菌株blaCTX-M总检出率85.0%。结论产β-内酰胺酶基因是该组大肠埃希菌对β-酰胺类抗菌药物产生耐药的重要原因。     

产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因检测与耐药性分析

目的 了解临床分离的产ESBLs大肠埃希菌耐药基因存在状况和菌株的耐药性关系.方法 自临床分离20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER.结果 20株大肠埃希菌中β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER阳性率分别为75.0%、20.0%、95.0%、15.0%、70.0%、5.0%、85.0%、70.0%,β-内酰胺类药物及含酶抑制剂药物的耐药率较高.结论 临床分离的产ESBLs大肠埃希菌TEM、LEN、CTX-M-9、GES、PER基因携带率高,β-内酰胺类药物耐药率较高可能与细菌携带β-内酰胺酶耐药基因有关,产ESBLs大肠埃希菌可导致克隆传播医院感染,并存在暴发性流行.     

83株产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶耐药基因检测与药敏结果分析

目的:了解产ESBLs大肠埃希菌耐药基因携带状况和菌株的耐药现状,以指导临床医师合理使用抗菌药物。方法:用K-B法测定自临床分离的83株产ESBLs大肠埃希菌对氨曲南等18种抗菌药物的敏感性,用PCR法检测TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-3、CTX-M-9基因型分布情况。结果:83株大肠埃希菌中β-内酰胺酶基因TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-3、CTX-M-9阳性率分别为85.5%、36.1%、22.9%、32.5%、13.3%,对丁胺卡那霉素、厄它培南、头孢替坦、亚胺培南完全敏感,对部分β-内酰胺类药物及含酶抑制剂药物的耐药率较高。结论:临床分离的产ESBLs大肠埃希菌TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-3基因携带率较高,β-内酰胺类药物耐药率较高可能与细菌携带β-内酰胺酶耐药基因有关,临床应结合菌株的药物敏感试验选择最佳的抗菌药物。     

产超广谱β-内酰胺酶临床分离株的耐药性及基因分型研究

目的了解深圳地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法采用纸片扩散法及E-test法检测产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性;多重聚合酶链反应(Multiple-PCR)检测ESBLs基因并进行初步分型。结果大肠埃希菌产ESBLs阳性率为24.14%,肺炎克雷伯菌为34.55%;对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类抗菌药的多重耐药率高达70%以上,未发现亚胺培南耐药株,对头孢西丁及β-内酰胺酶抑制剂复合物多数敏感。ESBLs基因型以CTX-M型最为常见,占84.62%;30.77%检出了TEM或SHV型基因;未定型菌占3.85%。结论深圳地区产ESBLs菌对亚胺培南、头孢西丁及β-内酰胺酶抑制剂复合物较敏感;ESBLs基因以CTX-M型为主。     

大肠埃希菌的耐药特点与产超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的 探讨大肠埃希菌的耐药特点和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型分布.方法 对2009年1月-2010年12月临床分离的231株大肠埃希菌进行耐药性统计和ESBLs基因分析.结果 尿液、痰液为最主要标本来源,占43.29％、22.08％;大肠埃希菌对氨苄西林(耐药率85.28％)等多数β-内酰胺类、环丙沙星(75.76％)等氟喹诺酮类、庆大霉素(52.38％)等氨基糖苷类耐药率较高,对美罗培南(4.33％)等碳青霉烯类、头孢哌酮/他唑巴坦(6.93％)等含他唑巴坦β-内酰胺类抗菌药物耐药率低;CTX-M型、TEM型、SHV型耐药基因均可见,CTX-M型多见,可见复合基因.结论 大肠埃希菌耐药率高,应根据药敏及耐药基因合理使用抗菌药物.     

大肠埃希菌β-内酰胺酶、质粒AmpC酶与Ⅰ类整合酶基因研究

目的探讨大肠埃希菌β-内酰胺酶、质粒AmpC酶与Ⅰ类整合酶基因的存在状况。方法采用M-H药敏平板对40株临床分离的大肠埃希菌进行抗菌药物敏感试验,PCR方法检测8种β-内酰胺酶基因、2种质粒AmpC酶与Ⅰ类整合酶基因。结果40株大肠埃希菌呈多重耐药,β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER阳性率分别为55.0%、7.5%、55.0%、12.5%、45.0%、5.0%、45.0%、35.0%,质粒AmpC酶基因ACT-1、DHA阳性率分别为57.5%、40.0%,Ⅰ类整合酶基因intⅠ1阳性率为47.5%。结论临床分离的大肠埃希菌多重耐药严重,β-内酰胺酶基因、质粒AmpC酶基因、Ⅰ类整合酶基因携带率高。     

携带rmtB基因的大肠埃希菌β-内酰胺酶基因研究

目的调查一组携带rmtB基因的大肠埃希菌中β-内酰胺酶基因与可移动遗传元件的存在状况,了解该组菌株之间的亲缘关系。方法收集2016年1-10月湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院住院患者痰液标本分离到的20株携带rmtB基因的大肠埃希菌,采用K-B法测定9种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析法分析16种β-内酰胺酶基因和7种可移动遗传元件遗传标记;阳性耐药基因测序后直接作BLAST比对,耐药基因检测结果作样本聚类分析(UPGMA法)。结果 20株携带rmtB基因的大肠埃希菌对头孢类、氨基糖苷类、喹诺酮类均耐药,但对碳青霉烯类均敏感;20株菌均检出β-内酰胺酶基因及可移动遗传元件遗传标记;20株菌共检出5种β-内酰胺酶基因和7种可移动遗传元件遗传标记,且阳性率较高;样本聚类分析显示20株菌有明显的聚集性,分A与B二个群,并有4个克隆传播。结论本组20株携带rmtB基因的大肠埃希菌同时携带了β-内酰胺酶基因和可移动遗传元件遗传标记,是对头孢类和氨基糖苷类产生耐药的重要原因;本组菌检出的4个克隆高度疑似医院感染,同一克隆菌株携带相同基因。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌blaCTX-M基因分型及耐药特征研究

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌blaCTX-M基因分型及相应耐药特征,以指导临床抗菌药物的合理应用。方法选取2014年1月到2016年1月医院细菌室分离出的大肠埃希菌69株;对上述菌株进行产超广谱β-内酰胺酶表型及耐药特征的检测;统计产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌检出率及其基因型的分布;对比不同基因型的产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药率。结果 69株菌株中,37株为产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌,其中36株为blaCTX-M型基因,占97.30%;单独检出blaCTX-M-1有10株,占27.78%,单独检出blaCTX-M-9有24株,占66.67%,同时检出blaCTX-M-1和blaCTX-M-9有2株,占5.56%。CTX-M-1菌株和CTX-M-9菌株对亚胺培南的耐药率均为0,对头孢噻肟、头孢曲松、头孢唑林的耐药率均为100%。CTX-M-1菌株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南的耐药率均显著高于CTX-M-9菌株(P<0.05)。结论 blaCTX-M是产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌最常见的基因型,且以blaCTX-M-9型为主。blaCTX-M-1型菌株对头孢他啶、头孢吡肟以及氨曲南的耐药性显著高于blaCTX-M-9型菌株。     

Bacteriophages and diffusion of beta-lactamase genes

We evaluated the presence of various Beta-lactamase genes within the bacteriophages in sewage. Results showed the occurrence of phage particles carrying sequences of bla(OXA-2), bla(PSE-1) or bla(PSE-4) and bla(PSE)-type genes. Phages may contribute to the spread of some Beta-lactamase genes.     

多重耐药菌中β-内酰胺酶基因监测

目的了解多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中β-内酰胺酶基因的分布情况。方法采用聚合酶联链反应(PCR)检测78株多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中的TEM、SHV和CTX—M等3种β-内酰胺酶基因,并进行DNA测序。结果 50株铜绿假单胞菌中37株TEM基因阳性(74.0%),未检出SHV和CTX—M基因,28株鲍曼不动杆菌中25株TEM基因阳性(89.3%),2株SHV阳性(7.1%),未检出CTX—M基因。结论多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中的β-内酰胺酶基因类型以TEM型较为流行。     

Genetic background of Escherichia coli and extended-spectrum beta-lactamase type

To assess the implication of the genetic background of Escherichia coli strains in the emergence of extended-spectrum-Beta -lactamases (ESBL), 55 TEM-, 52 CTX-M-, and 22 SHV-type ESBL-producing clinical isolates involved in various extraintestinal infections or colonization were studied in terms of phylogenetic group, virulence factor (VF) content (pap, sfa/foc, hly, and aer genes), and fluoroquinolone resistance. A factorial analysis of correspondence showed that SHV type, and to a lesser extent TEM type, were preferentially observed in B2 phylogenetic group strains that exhibited numerous VFs but were fluoroquinolone-susceptible, whereas the newly emerged CTX-M type was associated with the D phylogenetic group strains that lacked VF but were fluoroquinolone-resistant. Thus, the emergence of ESBL-producing E. coli seems to be the result of complex interactions between the type of ESBL, genetic background of the strain, and selective pressures in ecologic niches.