热疗降低胶质瘤侵袭性的作用与肿瘤坏死因子受体亲和力的关系

目的探讨热疗降低胶质瘤侵袭性的作用与肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor,TNFR)亲和力的关系。方法免疫组织化学法观察肿瘤坏死因子受体在胶质瘤组织中的分布;免疫荧光法检测肿瘤坏死因子受体在热疗后胶质瘤组织中的分布;放射配基受体结合分析法测定胶质瘤细胞经热疗联合重组人肿瘤坏死因子(recombinant human tumor necrosis factor,rhTNF）作用后,胶质瘤细胞中rhTNF结合肿瘤坏死因子受体水平的改变;通过荧光分光光度计分析Caspase3/7的活性来检测胶质瘤细胞的凋亡水平;结晶紫染色法测定热疗后胶质瘤侵袭性的变化。结果TNFR存在于胶质瘤细胞和胶质瘤血管内皮细胞,但以TNFR1分布于胶质瘤细胞为主;热疗后的胶质瘤组织中TNFR1的表达明显高于TNFR2,且于热疗后的120 min时TNFR1的表达达到高峰;胶质瘤细胞经热疗联合rhTNF作用后,rhTNF与TNFR1的结合率和Caspase3/7的活性呈上升趋势,两者均于120 min时达高峰后下降,与此同时,胶质瘤侵袭性降至最低水平。结论 热疗后,rhTNF可能是通过增加胶质瘤细胞TNFR1的表达并与之结合,并增强了rhTNF与TNFR1的亲和力,进而引起胶质瘤细胞凋亡导致胶质瘤侵袭性降低的。     

热疗降低胶质瘤侵袭性及与HSP70和iNOS表达的关系

目的 探讨热疗与热休克蛋白70（heat shock protein70, HSP70）及诱导型一氧化氮合酶（induced nitric oxide synthase, iNOS）表达的关系,阐明热疗降低胶质瘤侵袭性的作用及其可能机制。方法 热处理C6胶质瘤细胞后,酶联免疫吸附法和Western blot法动态检测胶质瘤细胞中HSP70抗体滴度和iNOS的表达水平;Griess法测定胶质瘤细胞中NO浓度;结晶紫染色法检测胶质瘤侵袭性的改变。结果 C6细胞经热疗后,HSP70抗体滴度增加,于30 min时最多（86.52 ng/L）。C6细胞内iNOS的表达水平也在热疗后明显增加,并于热疗60 min达高峰（IDV=228.31）后逐渐减少。热疗后胶质瘤细胞内NO浓度于热疗120 min时达高峰（OD=168.42）,且NO浓度越高,胶质瘤侵袭性越低（n=8.21×10⁶）。结论 胶质瘤细胞经热疗后HSP70表达水平增加,增加的HSP70可能通过某种机制提高了iNOS的表达水平,进而增加了胶质瘤细胞内的NO浓度而引起胶质瘤侵袭性的下降。     

内源性谷氨酰胺合成酶对C6胶质瘤细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的建立稳定高表达和靶向干扰谷氨酰胺合成酶（GS）细胞株观察GS对C6胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法将已构建的GS- pEGFP-N3、GS-shRNA真核表达载体和空载体pEGFP-N3通过脂质体介导分别转染C6胶质瘤细胞株,G418持续筛选并用Western blot鉴定,MTS法和克隆形成实验观察GS对C6胶质瘤细胞增殖的影响,用MTS黏附实验、划痕损伤实验和transwell侵袭实验检测GS对细胞黏附、迁移和侵袭能力的影响。结果Western blot证实过表达细胞株有超量GS蛋白表达,而shRNA细胞株未检测到GS信号;GS过表达细胞增殖、克隆形成能力和侵袭性显著降低而黏附能力显著增强;shRNA细胞增殖和克隆形成能力无显著性变化,黏附能力显著降低,而侵袭性显著增强。结论成功建立GS稳定高表达和靶向干扰C6胶质瘤细胞株,并证实GS表达水平影响胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。     

TNFR1与PDC-E2对胶质瘤细胞凋亡影响的相关性研究

目的:胶质瘤是一种最常见的中枢神经系统恶性肿瘤,生长迅速,恶性程度高.研究胶质瘤细胞凋亡过程中肿瘤坏死因子受体1(TNFRl)和丙酮酸脱氢酶复合物E2(PDC-E2)蛋白的表达变化,探讨TNFR1和PDC-E2在此过程中的作用.方法:培养TNFR1的小干扰细胞,将干扰掉TNFR1的质粒转染入U87MG细胞,检测TNFR1和PDC-E2对胶质瘤细胞凋亡的影响.通过免疫共沉淀方法检测TNFR1和PDC-E2在体外的相互作用;通过免疫荧光检测两者在U87MG细胞内的共定位;在转染干扰掉TNFR1的胶质瘤细胞中,检测TNFR1和PDC-E2的相互作用对凋亡标记物Caspase-3蛋白表达量的调节作用.结果:将TNFR1的小干扰质粒转染入U87MG细胞,结果显示未干扰掉的TNFR1对胶质瘤细胞凋亡有抑制作用,干扰掉TNFR1时对胶质瘤细胞凋亡的抑制作用减弱.体外HEK293T细胞及胶质瘤细胞中的免疫共沉淀以及免疫荧光显示TNFR1和PDC-E2存在相互作用;在胶质瘤细胞中检测到TNFR1和PDC-E2的相互作用协同促进Caspase-3的表达.结论:TNFR1和PDC-E2抑制胶质瘤细胞的凋亡,协同作用比单独对凋亡的影响更加明显;TNFR1和PDC-E2存在相互作用,两者协同作用更能增高作用底物Caspase-3的表达.     

紫杉醇联合紫草素对U87脑胶质瘤细胞的作用及机制初探

目的:探讨紫杉醇联合紫草素通过协同作用杀伤人脑胶质瘤的作用。方法:将不同浓度的紫杉醇与紫草素单药及两种药物半量联合作用于胶质瘤细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,用划痕实验和Transwell法检测细胞生物学行为（迁移与侵袭）的影响,流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率,Western-blot测定细胞外调节蛋白激酶（ERK）的蛋白表达。结果:紫杉醇与紫草素对胶质瘤细胞株U87细胞增殖具有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,并且发挥协同作用。紫杉醇与紫草素单独以及联合应用抑制U87细胞迁移与侵袭。两种药物联合应用促进U87细胞凋亡,紫草素组G1期的RNA含量增多,紫杉醇组及联合应用组的G2期RNA含量显著增高。Western-blot结果显示两者联合应用时,p-ERK蛋白表达降低。结论:与紫杉醇或紫草素单用组相比,两者半量联用通过协同作用能显著抑制U87胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期。紫杉醇与紫草素的协同效应机制与二者联合应用抑制p-ERK蛋白表达相关。     

CCL18通过与Nir1结合促进胶质瘤细胞侵袭的研究

背景与目的：Nir1是CCL18的跨膜受体,CCL18能与之特异性结合而促进乳腺癌细胞的侵袭与转移,但其在胶质瘤细胞中的作用尚不清楚。该文旨探讨Nir1在胶质瘤侵袭中的作用及分子机制。方法：应用蛋白［质］印迹法(Western blot)检测Nir1在不同胶质瘤细胞系中的表达;利用siRNA技术抑制U251细胞中Nir1的表达;采用Western blot检测转染后Nir1蛋白的表达和转染前后U251细胞中Akt磷酸化的情况;使用体外侵袭实验检测转染后细胞的运动和侵袭能力;采用F-actin聚合实验检测F-actin的聚合能力。结果：Nir1在各胶质瘤细胞中均呈高表达;小RNA干扰技术沉默Nir1基因后,U251细胞中Nir1的蛋白表达量明显下降,侵袭并穿透Matrigel胶的细胞数目明显比对照组少(P=0.00);在CCL18刺激后细胞内的F-actin聚合量比对照组减少;Akt磷酸化试验结果显示,对照组细胞在CCL18的刺激下Akt更易发生磷酸化,实验组细胞无论是否存在CCL18,Akt磷酸化都受到抑制。结论：在胶质瘤细胞中存在Nir1蛋白高表达,通过与细胞膜上CCL18特异性结合来调节胶质瘤细胞的F-actin聚合和Akt的磷酸化进而调控胶质瘤细胞的运动和侵袭能力。     

热疗联合紫杉醇对卵巢癌A2780细胞增殖、侵袭及AKT磷酸化的影响

目的:探讨热疗联合紫杉醇（Paclitaxel）对卵巢癌A2780细胞增殖、侵袭及AKT磷酸化的影响。方法:将A2780细胞分为4组:热疗组(41℃加热90min)、紫杉醇组、热疗联合紫杉醇组及对照组(常规培养细胞)。用MTT法检测细胞增殖情况,测定紫杉醇联合热疗对A2780细胞体外增殖抑制的影响;Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力的变化,测定紫杉醇联合热疗对A2780细胞体外侵袭能力的影响;Western blot检测各组细胞中AKT磷酸化的变化。结果:热疗联合紫杉醇组细胞增殖率与其他各组比较均明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;热疗联合紫杉醇组细胞的侵袭能力同样明显减弱,差异有统计学意义（P＜0.05）;同时,热疗联合紫杉醇组细胞中AKT磷酸化水平与其他各组相比亦显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:热疗联合紫杉醇可通过降低A2780细胞中AKT的磷酸化水平从而明显抑制细胞的增殖及侵袭能力。     

HMGB1在脑胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞生物学功能的影响

目的:检测高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1,HMGB1)在胶质瘤组织和细胞中的表达情况,了解HMGB1对胶质瘤细胞增殖、侵袭迁移以及细胞周期的影响。方法:将HMGB1 siRNA真核表达质粒在脂质体介导下转染胶质瘤细胞U373、U87（HMGB1 siRNA组）,以转染无关序列siRNA质粒的细胞（negative control,NC）和未转染的胶质瘤细胞（Control,Con）作为对照。采用RT-PCR和Western blot检测HMGB1 mRNA和蛋白表达,通过CCK-8实验、Transwell实验和细胞划痕实验分别检测胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力,用流式细胞仪检测胶质瘤细胞周期的变化。结果:HMGB1 mRNA在胶质瘤组织和细胞水平上都较非肿瘤性脑组织和正常胶质细胞明显高表达,差异有统计学意义（P＜0.05）,CCK-8和划痕实验提示HMGB1 siRNA组细胞增殖和迁移能力受到明显抑制（P＜0.05）,Transwell实验显示HMGB1 siRNA组穿膜侵袭到基质胶的细胞数明显低于Con组和NC组,细胞侵袭能力减弱（P＜0.05）,流式细胞分析提示HMGB1 siRNA组位于S期细胞比例较Con和NC组明显减少（P＜0.05）,提示细胞周期发生S期阻滞。结论:应用RNAi能有效抑制HMGB1基因表达,HMGB1低表达后能抑制胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移,并使得细胞周期中进入S期的细胞比例明显减少,细胞周期发生阻滞,这可能为胶质瘤的基因治疗提供了新思路。     

STIP1在脑胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤细胞株增殖、凋亡、侵袭的影响

目的:检测磷酸化应激诱导蛋白1（stress-induced phosphoprotein 1,STIP1）在胶质瘤组织和正常脑组织中的表达差异,探讨STIP1对胶质瘤细胞株U87、U251细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法:运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、免疫组化及蛋白印迹检测胶质瘤组织和正常脑组织中STIP1的表达;小干扰RNA（STIP1-siRNA）转染U87、U251细胞株后,使用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪和Transwell小室观察细胞的增殖、凋亡和侵袭能力。结果:STIP1在胶质瘤Ⅳ级组织中的表达明显高于正常脑组织,但在胶质瘤Ⅱ、Ⅲ级中的表达与正常脑组织无明显差异。U87、U251细胞株转染STIP1-siRNA后,细胞增殖和侵袭能力明显受到抑制,而细胞凋亡率明显上升。结论:STIP1在胶质母细胞瘤组织中高表达,下调STIP1可以抑制胶质瘤细胞株U87和U251的增殖,阻滞细胞周期,促进其细胞凋亡,并可抑制其侵袭力。     

食管癌细胞株高侵袭力亚系的建立及其生物学特性研究

目的:建立具有不同转移潜能的高侵袭能力食管癌细胞株亚系并研究其生物特性.方法:利用Transwell侵袭小室从人食管鳞癌Eca-109细胞株筛选高侵袭能力食管癌亚系,HE染色比较细胞形态;四甲基偶氯唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力的变化;流式细胞术( FCM)检测细胞周期;蛋白质印迹法检测与侵袭能力相关基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白醇组织抑制因子-2(TIMP-2)蛋白表达.结果:利用Transwell侵袭小室从食管癌Eca-109细胞株中筛选出高侵袭能力食管癌细胞株亚系,命名为Eca-109 T4.2个细胞系细胞形态没有明显差异.MTT法检测显示,亚系Eca-109 T4增殖能力强.细胞周期显示,增殖指数(PI)高,PI=41.0％,且MMP-2蛋白表达相比增高,P=0.023;TIMP-2蛋白表达相比增高,但差异无统计学意义,P=0.392.结论:建立了不同转移潜能的高侵袭能力食管癌细胞株亚系,将可以用于探讨食管癌转移机制的研究.     

FOXP1在肿瘤发生和发展中的作用

FOXP1是FOXP亚家族(FOXP1-4)转录因子的成员,广泛表达于人心肌、肺、小肠、淋巴等组织细胞,具有多种生物学功能。FOXP1也表达于多种肿瘤细胞,在不同的肿瘤组织中FOXP1可能有不同的生物学作用。     

PTPL1: a large phosphatase with a split personality

Protein tyrosine phosphatase, PTPL1, (also known as PTPN13, FAP-1, PTP-BAS, PTP1E) is a non-receptor type PTP and, at 270 kDa, is the largest phosphatase within this group. In addition to the well-conserved PTP domain, PTPL1 contains at least 7 putative macromolecular interaction domains. This structural complexity indicates that PTPL1 may modulate diverse cellular functions, perhaps exerting both positive and negative effects. In accordance with this idea, while certain studies suggest that PTPL1 can act as a tumor-promoting gene other experimental studies have suggested that PTPL1 may function as a tumor suppressor. The role of PTPL1 in the cancer cell is therefore likely to be both complex and context dependent with possible roles including the modulation of growth, stress-response, and cytoskeletal remodeling pathways. Understanding the nature of molecular complexes containing PTPL1, its interaction partners, substrates, regulation and subcellular localization are key to unraveling the complex personality of this protein phosphatase.     

Prognostic impact of dimensional factors in pT1 gastric cancer

BackgroundThe significance of the dimensional factors (tumor diameter, area and volume) as the prognostic factor has not been precisely evaluated in pT1 gastric cancer.ObjectivesThis study aimed to identify the clinical impact and to confirm the clinical feasibility of the dimensional factors as prognostic factors in pT1 gastric cancer.MethodsWe analyzed prognostic factors for disease-specific survival (DSS), overall survival (OS) using clinicopathological factors by univariate and multivariate analyses and the pattern of recurrence in 2011 pT1 gastric cancer (mucosal and submucosal cancers) undergoing R0 gastrectomy. The cut-off values of each dimensional factor was decided by the ROC curve.ResultsCox proportional hazard regression model showed that older age (≥75) and more advanced pN stage were adverse independent prognostic factors for DSS, and revealed that older age (≥75), greater preoperative co-morbid diseases, proximal and total gastrectomy, operative method and Clavien-Dindo classification (≥grade III) were independent adverse factors for OS. Any dimensional factors were not independent prognostic factors for any survival.ConclusionsThe dimensional factors do not influence both OS and DSS in pT1 gastric cancer patients and so it is difficult to apply these dimensional factors for conducting therapeutic strategies.     

抗肿瘤治疗的新靶点—HMGB1

高迁移率蛋白B1（High-mobility group box-1,HMGB 1）是细胞内的非组蛋白染色体结合蛋白,在维持核小体稳定和DNA重组、复制、修复及基因转录中发挥着重要作用。而细胞外的HMGB 1 可作为一种“晚期炎症介质”,在炎症的晚期阶段启动着炎症反应。最近研究发现,HMGB 1 也高表达于多种肿瘤组织,与其受体结合后,对
肿瘤新生血管形成和肿瘤细胞的浸润、转移、增殖及凋亡等有着重要的影响。然而,HMGB 1 的表达和功能在某些肿瘤细胞中的表现可能并不一样。由于HMGB 1 与肿瘤细胞的多种生物学特性都密切相关,因此,以HMGB 1 为靶点有望成为抗肿瘤治疗的有效方法之一。尽管,当前人们通过抑制HMGB 1 的表达、分泌、释放、合成及信号传导等措施来进行抗炎症反应已取得了一定的成功,但是,很多措施还没有在抗肿瘤实验中得到应用,尚有待于体内外实验的进一步证实,然而,这些措施将有可能成为抗肿瘤治疗的有效手段。     

ＨＭＧＢ１与肿瘤相关性的研究进展

高迁移率族蛋白Ｂ１（ＨＭＧＢ１）是存在于真核生物细胞内典型的一类非组蛋白染色体结合蛋白,参与基因转录、ＤＮＡ修复、Ｖ（Ｄ）Ｊ重组、细胞分化及细胞外信号转导。近年来的研究表明,ＨＭＧＢ１参与核小体结构的构建及稳定,并可在特定情况下释放于细胞外,发挥着广泛的生物学效应,如细胞的增殖、分化、迁移及凋亡,与肿瘤的发生、生长、转移和浸润等均有密切的关系。本文就近年来关于ＨＭＧＢ１与肿瘤相关性的研究进展作一综述。     

缺氧诱导因子-1在肿瘤中作用的研究进展

<正>缺氧是实体瘤的基本特征。一般情况下,缺氧细胞可能产生应激性损伤如DNA氧化损伤、DNA链断裂以及遗传性畸变,从而抑制细胞增殖并最终引起细胞死亡。在缺氧环境中,细胞内糖酵解、血管生成、侵袭、造血等方面基因转录诱导的活跃,与肿瘤细胞生物学特性的改变密切相关。早在20世纪90年代,就有研究小组证实,促红细胞生成素(EPO)的缺氧诱导性转录活跃与其基因3’端缺氧反应元件(HRE)相     

ELAM －1在肿瘤靶向治疗中的应用进展

E选择素（Endothelial leukocyte adhesion molecule －1,ELAM－1）是细胞黏附分子家族中的一类,研究表明,ELAM－1与其配体sLe（ x）和sLe（ a）的相互作用,在肿瘤远处转移的过程中扮演着重要的角色。近年来,将ELAM－1运用于肿瘤靶向治疗的研究,逐渐成为一个新的热点。众多研究成果表明,通过对ELAM－1生物学作用的调控,如ELAM－1及其配体抑制剂、单克隆抗体、靶向基因,以及其他介导等路径阻断疗法等,从而抑制或阻断肿瘤的远处转移,达到治疗肿瘤、改善预后的目的。因此,ELAM－1有望在肿瘤靶向治疗方面发挥重要作用。本文就ELAM－1在肿瘤相关靶向治疗中的应用价值做一综述。     

Caveolin-1 in tumor progression: the good, the bad and the ugly

Caveolin-1 (Cav1) is a multifunctional scaffolding protein with multiple binding partners that is associated with cell surface caveolae and the regulation of lipid raft domains. Cav1 regulates multiple cancer-associated processes including cellular transformation, tumor growth, cell migration and metastasis, cell death and survival, multidrug resistance and angiogenesis. However, Cav1 has been reported to impact both positively and negatively on various aspects of tumor progression and while reported to function as a tumor suppressor, it has also been identified as a poor prognostic factor in various human cancers. In this review, we survey the functional roles of Cav1 in cancer and argue that Cav1 function is interdependent on tumor stage and the expression of molecular effectors that impact on its role during tumor progression. Goetz and Lajoie contributed equally to this paper.     

整合素α5β1与肿瘤发生、发展相关性的研究进展

整合素是细胞表面的一种重要粘附分子,在肿瘤的粘附、增殖、分化、转移、凋亡等过程中发挥重要的调控作用。整合素α5β1是整合素家族的重要成员之一,也是纤连蛋白的一个重要受体。整合素α5β1有望成为多种肿瘤诊断、预后预测的重要指标及治疗靶点。本文就整合素α5β1与肿瘤发生、发展的关系作一综述。     

肿瘤患者血清TNF—α、SAPO—1／Fas测定及意义

目的　探讨肿瘤患者血清SAPO 1/Fas表达水平。方法　采用ELISA法 ,对 10 7例肿瘤患者及 2 2例健康人进行了SAPO 1/Fas的检测 ,其中部分进行了TNF a测定。结果　肿瘤患者血清SAPO 1/Fas表达水平明显高于健康对照组 (P <0 .0 0 1) ,且与肿瘤种类无关 ;17例化疗患者病情缓解前后SAPO 1/Fas表达水平相差显著 (P <0 .0 5 )。SAPO 1/Fas的分泌 ,为解释肿瘤细胞逃避免疫监视及白血病的发生提供一个可能机理。结论　肿瘤患者血清TNF a显著升高 ,并与SAPO 1/Fas呈正相关 (r =0 .76 ,P <0 .0 5 )。