实验性哮喘豚鼠延髓内神经激肽A免疫反应的定量分析

应用免疫组织化学ABC法结合显微图像定量分析,研究了神经激肽A免疫反应在哮喘豚鼠延髓中的分布及其变化.结果表明:神经激肽A免疫反应细胞纤维或终末分布于豚鼠的延髓的弧束核区.腹外侧面浅表区,三叉神经脊束核区及网状结构等区域.此外,哮喘豚鼠延髓孤束核及腹外侧部浅表区内神经激肽A阳性免疫反应物的平均密度分别为49.2%和41.6%;它们的平均灰度值分别为129.6和110.5,与对照组(平均密度31.7%和28.8%;平均灰度值:183.7和165.2)比较均有显著性差异(P相似文献   

慢性吸烟对哮喘豚鼠肺内神经激肽A含量及基因表达的影响研究

目的：研究慢性吸烟对哮喘豚鼠肺组织中神经激肽A（NKA）含量及NKA mRNA表达的影响，探讨慢性吸烟对哮喘肺组织中NKA含量影响的机制。方法： 用卵蛋白超声雾化法复制豚鼠哮喘模型；随机分成：①诱喘前吸烟2周组，②诱喘后吸烟2周组，③诱喘后2周对照组（非吸烟），④常规诱喘组（非吸烟），⑤正常对照组。用酶联免疫法检测各组肺组织中NKA含量；用RT-PCR方法检测各组肺组织中NKA mRNA的相对含量。结果： ①哮喘豚鼠肺组织中NKA含量及NKA mRNA表达均明显高于正常豚鼠（均P<0.01）；②诱喘前吸烟2周豚鼠，诱喘后其肺组织中NKA含量及NKA mRNA表达均明显高于非吸烟诱喘豚鼠（均P<0.01）；③诱喘后吸烟2周豚鼠，其肺组织中NKA含量及NKA mRNA表达均显著高于诱喘后2周对照豚鼠（均P<0.01）。结论： 结果提示：①NKA可能参与了卵蛋白诱发的豚鼠哮喘发病机制；②慢性吸烟刺激可能增加哮喘豚鼠肺组织中NKA含量； ③慢性吸烟刺激可能具有在转录水平上调NKA mRNA表达的作用而导致肺内NKA蛋白含量增多。     

实验性哮喘时神经生长因子对神经激肽A的上调作用

目的:探讨实验性哮喘时神经生长因子(NGF)对神经激肽A(NKA)的调节机制。方法: 应用放射免疫分析方法检测了NGF缺失时(鼻腔吸入NGF抗体)哮喘豚鼠下呼吸道和内脏感觉传入部位NKA含量的变化。结果:NGF缺失时哮喘豚鼠气管、支气管、肺C₇-T₅段脊神经节及相应节段脊髓后角、结状神经节和孤束核区NKA含量明显低于哮喘组和对照组(P＜0.01)。 结论: 实验性哮喘时NGF可上调下呼吸道和感觉神经节等内脏感觉传入部位的神经激肽A水平,二者可能参与支气管哮喘的发病过程。     

实验性哮喘下呼吸道和血液中神经激肽A含量的变化

应用放射免疫分析方法,测定了16只哮喘豚鼠下呼吸道各部和循环血液中神经激肽A(NKA)的水平,与健康对照组(气管含量为44.56±20.86,支气管53.78±32.12,左肺上叶63.15±20.52Pg/g,血液81.49±32.56pg/ml,(?)±SD)相比,哮喘豚鼠下呼吸道和血液中NKA的水平(气管59.90±19.36 P<0.05,支气管70.51±16.60 P<0.05,左肺上叶78.83±19.08Pg/g P<0.05,血液119.37±16.24pg/ml P<0.001,(?)±SD)显著升高。结果提示,NKA可能参与哮喘发作的病理生理过程,可能是其发作的因素之一。     

哮喘豚鼠结状神经节,脊神经节和中枢内神经激肽A含量变化

应用放射免疫分析方法，检测16只哮喘豚鼠一级传入系统和中枢内神经激肽A（NKA）的水平。与正常对照组（结状神经节62．82±11.09pg/gw.w，C7～C8段脊神经节53．78±12．63，T1～T2段脊神经节54．23±19．08，T3~T5段脊神经节50．53±14．23pg／gw．w;C7～T5段脊髓后角45．86±19．56，孤束核55．27±19．68pg/gw．w．和延髓腹侧浅层37.36±18．29pg/gw．w．）相比，哮喘豚鼠一级传入系统和中枢内（结状神经节83．81±15．23pg/gw．w．C7～C8段脊神经节72．11±17．16．T1～T2段脊神经节73．95±23．76，T3～T5段脊神经节70.53±14．23pg／gw．w，C7~T5段脊髓后角60.25±21．38pg／gww．孤束核71．36±18．76pg／gw．w和延髓腹侧线层49．58±20．19pg／gw．w．）NKA水平明显升高（P＜0．05）．这些结果提示，一级传入系统和中枢内的NKA可能参与哮喘的发病机制。     

实验性哮喘豚鼠下呼吸道和血液中神经激肽B含量的变化

应用放射免疫分析方法，测定了１６只哮喘豚鼠下呼吸道各部组织和循环血液中神经激肽Ｂ（ＮＫＢ）的水平。与正常对照组（气管２６．４４±８．９３，主支气管３５．３３±９．３６，左肺上叶４３．８３±１０．３７ｐｇ／ｇ，血液５０．８３±１２．２４ｐｇ／ｍｌ）相比，哮喘豚鼠下呼吸道和血液中ＮＫＢ的水平（气管３９．６０±９．８４，主支气管４９．５８±１１．５２，左肺上叶５９．１４±６．８９ｐｇ／ｍｌ，血液６２．３７±１５．５７ｐｇ／ｍｌ）显著升高（Ｐ＜０．０５）。电刺激坐骨神经对照组下呼吸道各部组织和血液中ＮＫＢ的含量与正常对照组相当，未见明显差异。这些结果提示，ＮＫＢ可能参与哮喘发作的病理生理机制。     

实验性哮喘下呼吸道神经激肽B免疫反应纤维

用免疫组织化学方法研究了神经激肽B免疫反应纤维在实验性哮喘豚鼠下呼吸道的变化。在气管和支气管,实验组一抗最佳稀释浓度为1:1500,对照组为1:1000,当两组的一抗浓度均为1:1500时,两者的神经激肽B免疫反应纤维见于平滑肌层,上皮内、上皮和平滑肌交界处以及外膜层,实验组的纤维数量明显多于对照组。在肺组织,实验组一抗最佳稀释浓度为1:2000,对照组为1:1500,当一抗稀释浓度均为1:2000时,两组的神经激肽B免疫反应纤维主要见于肺内各级支气管平滑肌层、血管壁平滑肌层、血管周围结缔组织和肺泡隔内,但实验组的阳性纤维数量明显比对照组多。     

哮喘豚鼠脊髓内CGRP免疫反应的定量分析

应用免疫组织化学和显微图像分析方法，对１６ 只哮喘豚鼠Ｃ７～Ｔ５ 节段脊髓后角内的ＣＧＲＰ免疫反应产物进行了定量研究。结果表明，哮喘豚鼠Ｃ７～Ｔ５ 节段脊髓后角内ＣＧＲＰ阳性反应纤维的密度大大高于正常对照组和实验对照组（Ｐ＜ ０．０１），平均灰度值明显低于正常对照组和实验对照组（Ｐ＜ ０．０１）。本研究结果提示，Ｃ７ ～Ｔ５ 节段脊髓后角内的ＣＧＲＰ可能参与支气管哮喘发病的病理生理过程。本实验结果为进一步探讨哮喘发病的中枢机制提供了一定的形态学依据。     

神经激肽A在大鼠胃发育中的定性定量分析

本研究用免疫组织化学PAP法和图像分析系统研究大鼠胚胎13d至成年胃中神经激肽A(NKA)的表达及变化。结果显示:胚胎14d,胃的肌间丛出现NKA免疫阳性反应,随发育相继在环肌、纵肌、粘膜下层、固有膜、粘膜肌及粘膜丛内出现NKA的表达,生后30d时NKA在胃的表达已具备成年鼠的分布特征。结果提示, (1)NKA在胃的表达变化主要在生前1周~生后4周内,其表达变化有两个关键时期,即生前1周~生后1周和生后1月末; (2)NKA对大鼠胃的发育可能具有重要的作用,可能与胃功能的建立密切相关。     

神经激肽A在大鼠空肠发育中的定性定量分析

目的：探讨神经激肽A(NKA)在大鼠空肠发育中的表达及变化。方法：应用免疫组织化学PAP法和图像分析系统研究大鼠胚胎13d至成年空肠中NKA的表达情况。结果：(1)在空肠,首先于胚胎15d的肌间丛处出现NKA-IR的表达,随发育相继出现的纵肌、环肌、绒毛、小肠腺周、粘膜下层、深肌丛,生后30d已具备成年组的分布特征;(2)NKA-IR细胞具有典型的肠道内分泌细胞的形态特征和分布特征。结论：(1)NKA在空肠的发生发育主要在生前1周～生后4周内;(2)NKA在空肠的发生发育有2个关键时期,即生前1周～生后1周和生后1月末;(3)NKA-IR细胞可能是肠道内分泌NKA的内分泌细胞。     

实验性哮喘豚鼠内脏感觉传入部位SP免疫反应的研究

用免疫组织化学方法结合显微图像分析 ,观察哮喘豚鼠脊神经节、结状神经节、脊髓和孤束核内 P物质的变化。正常豚鼠 C7～ T5 脊神经节及结状神经节内存在 SP阳性反应细胞 ,其细胞质内充满棕色阳性反应颗粒 ,并可见大量的阳性反应纤维。 P物质免疫反应也见于 C7～ T5 脊髓后角板层 、板层 、中间带外侧核 ,呈点状分布 ,偶见阳性纤维。孤束核内可见大量的 P物质阳性反应。哮喘豚鼠结状神经节、C7～ T5 脊神经节和相应节段脊髓后角、孤束核内 P物质阳性反应的密度明显增多而平均灰度值却明显地低于对照组。上述结果表明 ,哮喘豚鼠内脏感觉传入部位 P物质表达增强 ,提示这些部位的 P物质可能参与哮喘的发病过程     

实验性哮喘豚鼠初级传入系统和中枢内NKB的变化(英文)

本文应用放射免疫分析方法，测定了16只哮喘豚鼠初级传入系统和中枢内神经激肽β（NKB）的水平。结果表明，与正常对照组（结状神经书3228±11．89，C7～C8段脊神经节23．63±13．26，T1～T2段脊神经节24．25±1819，T3～T5段脊神经节25．53±12．34，C7～T5段脊髓后角28．65±16．59，孤束核26．34±18．36Pg／gwettissue）相比较，哮喘豚鼠初级传入系统和中枢内（结状神经节43．26±12．35，C7～C段脊神经节32．53±17．63，T1～T2段神经书32.25±20．65，T3～T5段脊神经节34．36±15．33，C7～T5段脊髓后角39．53±2028，孤束核3662±17．85Pg／gwettissue）NKB的含量明显高于对照组（P＜0．05）。结合NKB在呼吸道的作用，这些结果提示，初级传入系统和中枢内的NKB可能参与哮喘发病的病理生理机制。     

降钙素基因相关肽在哮喘豚鼠内脏传入系统的定量分析

本文应用放射免疫分析方法研究了实验性哮喘豚鼠与下呼吸道有关的内脏传入系统内降钙素基因相关肽含量的变化 ,藉以探讨降钙素基因相关肽在哮喘发病时的作用机制。结果表明 ,哮喘豚鼠与下呼吸道有关的内脏传入系统 (结状神经节、C7～T5 节段脊神经节和脊髓后角、孤束核等处 )中的降钙素基因相关肽含量明显高于各对照组 ( P<0 .0 5)。本研究提示 ,下呼吸道和肺的内脏传入成分中的降钙素基因相关肽可能参与哮喘发病的病理生理过程。     

NGF在哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液细胞中的表达

为了通过对神经生长因子和支气管肺泡灌洗液细胞在哮喘发病中的作用的研究进而探讨哮喘的神经免疫调节机制 ,本研究应用免疫组织化学方法研究了哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液细胞中神经生长因子的表达变化。结果发现 ,哮喘豚鼠神经生长因子阳性嗜酸细胞和淋巴细胞百分率明显增加 ( P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ;肺泡巨噬细胞绝对数量增加 ,神经生长因子表达也明显上调 ( P<0 .0 1) ,且呈 NGF阳性反应的小型肺泡巨噬细胞数量大大多于大型肺泡巨噬细胞。提示 ,气道炎症细胞内的神经生长因子可能参与哮喘发病的病理生理过程     

地塞米松对哮喘豚鼠肺内脏感觉传入部位TrkA表达的抑制作用

为了探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)TrkA表达的影响,我们利用免疫组织化学和Westernblot方法,研究了哮喘豚鼠C7T5脊神经节及对应的脊髓后角TrkA的免疫反应变化。结果显示:哮喘组豚鼠C7T5脊神经节及对应的脊髓后角TrkA表达明显高于对照组(P<0.01),而地塞米松组则明显低于哮喘组(P<0.01)。结果提示TrkA可能参与哮喘的发病过程,地塞米松抑制哮喘豚鼠TrkA的表达可能是其治疗哮喘的作用机制之一。     

含P物质神经纤维和细胞在大鼠脊髓背外侧索核区的定量分析

用免疫细胞化学法和计算机图像分析仪,定量分析大鼠脊髓背外侧索核(NDLF)区含P物质(SP)的纤维和神经元。在光镜下,脊髓全长的NDLF区,有SP阳性纤维和细胞呈三角形或楔形分布的密集区。用计算机图像分析仪测量该区轮廓所得面积,命名为参考面积,对输入图像做交互式分割处理后,选择最佳图像灰度,所得NDLF区内SP阳性纤维和细胞面积之和,命名为场面积,并计算了场面积对参考面积的比。颈髓的参考面积平均为47931.38μm~2,场面积平均为21995.25μm~2,场面积对参考面积之比为45.89％,胸髓分别为31575.15μm~2,7646.85μm~2和24.22％,腰、骶髓分别为26889.89μm~2,8470.66μm~2和31.50％。总之,SP阳性纤维和细胞在颈髓分布面积较大,密度较高,腰、骶髓次之,胸髓较小,密度较稀疏,尤以T_8～T_(10)分布最少。     

神经激肽B受体在猫三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓内的分布

目的 了解神经激肽Ｂ受体（ＮＫ３受体）与伤害性信息的传递和调制的可能关系，调查ＮＫ３受体在三叉神经尾介亚核和脊髓内的分布状况。方法 免疫组织化学技术。结果 ＮＫ３受体样免疫反应产物在三叉神经尾侧亚核和脊髓内的分布基本一致。致密的免疫反应产物分布Ⅱ内层（ｉｎｎｅｒ ｐａｒｔ），而Ⅰ层和Ⅱ外层染色浅谈。