不同梯度变化的寒邪对大鼠细胞因子影响之差异的实验研究

本研究是在临床统计研究的基础上,进而在实验室模拟相关气象因子,对健康大鼠进行刺激以研究寒邪梯度性变化对机体细胞因子的差异性影响.     

补肾安胎冲剂对流产大鼠细胞因子TNF-αI、L-4的影响

目的：研究补肾安胎冲剂对流产大鼠的保胎机理。方法：将孕鼠随机分为正常组（A组）、模型组、寿胎丸组、补肾安胎冲剂高剂量及低剂量组、黄体酮组（B～F组）6组别自妊娠第1天起灌服生理盐水、寿胎丸、补肾安胎冲剂高低剂量及肌注黄体酮,孕11天B～F组灌服米非司酮,A组灌服生理盐水,24小时后处死,观察各组大鼠的胚胎数、流产情况,检测腹主静脉血中TNF-αI、L-4的水平。结果：模型组大鼠流产率显著升高,TNF-α值升高I,L-4值降低;补肾安胎低、高剂量组可降低流产率,升高血中IL-4、降低TNF-α的水平。结论：补肾安胎冲剂的保胎作用可能与其纠正Th1/Th2免疫失衡状态及降低流产率有关。     

助孕3号方对肾虚黄体抑制流产大鼠母胎界面Th1/Th2细胞因子的影响研究

目的研究助孕3号方对大鼠母胎界面Th1/Th2型细胞因子的影响。方法将SD大鼠随机分为5组,每组8只。多力玛组以1.5 mg/(kg.d)剂量灌胃给药,模型组与空白对照组灌服等容积生理盐水,助孕3号方中、低剂量组分别以7.08,3.54 g/(kg.d)剂量灌胃给药。检测各组大鼠蜕膜组织Th1型(IL-2、IFN-γ)/Th2型(IL-4、IL-10)细胞因子mRNA的表达差异。结果助孕3号方具有纠正肾虚流产大鼠母胎界面中Th1/Th2平衡偏移的作用。结论助孕3号方可降低母体免疫排斥,增强母胎免疫保护,最终降低肾虚黄体抑制模型大鼠的流产率,使得妊娠得以正常发展。     

补肾安胎方对肾虚流产大鼠子宫蜕膜Th1/Th2细胞因子的影响

目的：研究补肾安胎方对肾虚流产模型大鼠子宫蜕膜上Th1/Th2型细胞因子的影响。方法：SPF级SD大鼠随机分为3组,每组15只。A组为肾虚流产模型组,用羟基脲加米非司酮灌服;B组为补肾安胎方干预组,用羟基脲加米非司酮加补肾安胎方水提液灌服;C组灌服生理盐水。酶联免疫法检测子宫蜕膜组织的Th1型细胞因子IL-2和Th2型细胞因子IL-10浓度。结果：3组子宫蜕膜IL-2、IL-10浓度和IL-2/IL-10比值比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;A、B组的IL-2显著高于C组（P均〈0.01）,A组与B组的IL-2比较差异无统计学意义（P〉0.05）;B组的IL-10显著低于C组（P〈0.01）,A组的IL-10显著高于C组（P〈0.01）,A组与C组的IL-10比较差异无统计学意义（P〉0.05）;IL-2/IL-10比值比较A组显著高于B组（P〈0.01）,与C组比较无显著差异（P〉0.05）。结论：补肾安胎方能促进大鼠子宫蜕膜Th2型细胞因子IL-10的分泌,扭转Th1/Th2细胞因子病理性失衡,降低肾虚流产大鼠模型的流产率。     

孕康口服液及其不同药效部位对肾虚流产大鼠外周血及Th1/Th2细胞因子的影响

目的:孕康口服液及其不同药效部位对肾虚流产大鼠外周血及Th1/Th2型细胞因子的影响。方法:采用羟基脲连续灌胃9天,第10,11天灌胃米非司酮制备肾虚流产孕鼠模型,计算孕鼠流产率,ELISA法观察孕鼠血清中β-HCG、P、E2表达,比较Th1/Th2细胞因子(TNF-α/IL-4和IL-2/IL-4)比值变化。结果:与模型组相比,孕康口服液12 ml/kg及其不同药效部位组(乙酸乙酯部位组,正丁醇部位组,水溶液部位组)12 ml/kg孕鼠流产率显著降低,血清中β-HCG、P、E2水平显著升高,TNF-α、IL-2表达明显降低,TNF-α/IL-4、IL-2/IL-4比值也明显降低,孕康口服液、乙酸乙酯组、水溶组孕鼠血清中IL-4表达明显升高。结论:孕康口服液及其不同药效部位对肾虚流产大鼠有显著的改善作用,其机制可能是通过调节Th1/Th2因子的动态平衡,达到抗流产作用。     

菟丝子总黄酮对大鼠流产模型血清P、PR、Th1／Th2细胞因子表达的影响

目的:探讨菟丝子总黄酮对大鼠流产模型蜕膜PR及Th1/Th2细胞因子表达的影响,同时观察血清P和PR的变化.方法:对溴隐亭致SD孕鼠流产模型,设菟丝子总黄酮高、低剂量治疗组、达芙通为阳性对照组,于孕12d处死各组大鼠,酶联免疫检测血清P和PRL的水平,免疫组化法检测蜕膜PR的表达,RT-PCR法检测蜕膜Th1/Th2 mRNA的表达.结果:模型组蜕膜IL4、IL-10 mRNA及PR蛋白表达明显低于正常妊娠组,TNF-α、IFN-γ mRNA表达明显高于正常妊娠组,差异有显著性(P<0.05),菟丝子总黄酮可上调流产大鼠蜕膜IL-4、IL-10、PR的表达,下调TNF-α、IFN-γ表达,同时可提高血清P的水平,其作用与孕激素达芙通相似.结论:菟丝子总黄酮可能通过调节母胎界面内分泌-免疫网络平衡而起到维持早孕的作用.     

黄芩汤对湿热型溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2细胞因子的影响

目的观察湿热型结肠炎中Th1/Th2的状态以及黄芩汤对Th1/Th2的影响,探讨其治疗湿热型结肠炎的免疫学机制。方法采用高脂、高糖饲料联合人工气候箱法造出大鼠湿热型体质,结合三硝基苯磺酸(TNBS)法建立湿热型结肠炎模型;将60只大鼠随机分为空白组、湿热+TNBS组、黄芩汤组、美沙拉嗪组;对大鼠进行临床活动度观察、结肠组织的宏观和微观观察、检测结肠长度重量、脾脏和胸腺的重量和髓过氧化物酶(MPO)的活性、采用酶联免疫吸附法(ELISA)分析大鼠血清和结肠组织中γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素10(IL-10)水平。结果黄芩汤能够有效缓解湿热型溃疡性结肠炎大鼠临床症状,降低大鼠血清及结肠组织Th1细胞因子INF-γ和IL-12并提高Th2细胞因子IL-4和IL-10的表达。结论黄芩汤可以改善湿热型溃疡性结肠炎的炎症反应,调节Th1/Th2细胞的平衡,这可能是其治疗湿热型溃疡性结肠炎的作用机制之一。     

补肾益气中药对溴隐亭致流产大鼠蜕膜Th1/Th2型细胞因子的影响

目的:探讨补肾益气中药对流产大鼠的保胎机理。方法:采用孕6、7、8天皮下注射溴隐亭0.125mg/d 诱发 SD 大鼠流产模型,以半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法测蜕膜 Th1/Th2型细胞因子的表达,观察中药治疗对以上指标的影响。结果:补肾益气中药可使溴隐亭致流产大鼠蜕膜 Th1/Th2型细胞因子平衡恢复正常。结论:中药可通过对母胎界面 Th1/Th2型细胞因子平衡的调控维持妊娠。     

中药对Th1/Th2细胞因子平衡调节作用的研究进展

概述中药对Thl/Th2平衡的调节作用,主要包括中药对自身免疫疾病Th1/Th2平衡的影响、对肿瘤Th1/Th2平衡的影响、对变态反应性疾病Th1/Th2平衡的影响以及对不同中医证型Th1/Th2平衡的影响等。     

蓝萼甲素对小鼠脾细胞Th1/Th2型5种细胞因子水平的影响

目的：探讨蓝萼甲素对小鼠脾细胞Th1/Th2型细胞因子水平的影响。方法：采用Cytometric Bead Array (CBA)法检测蓝萼甲素对小鼠脾细胞Th1/Th2型5种细胞因子(IL-2，IFN-γ，TNF-α，IL-4，IL-5)水平的影响。结果：蓝萼甲素对ConA诱导的Th1细胞来源的细胞因子(IL-2，IFN-γ，TNF-α) 和Th2细胞来源的细胞因子(IL-4，IL-5)的产生均有显著的抑制作用，且蓝萼甲素对Th1细胞来源的细胞因子的抑制作用要强于Th2细胞来源的；对未经ConA活化的小鼠脾细胞，蓝萼甲素对IL-2，IFN-γ和TNF-α的产生有抑制作用，而对IL-4，IL-5则有促进作用。结论：蓝萼甲素的免疫抑制作用可能与其对Th1/Th2型细胞因子的影响有关。     

阿胶对哮喘大鼠气道炎症及外周血Ⅰ型/Ⅱ型T辅助细胞因子的影响

目的 探讨阿胶对哮喘大鼠Th1／Th2细胞因子的影响及其防治哮喘的作用机制。方法60只Wistar大鼠随机分为生理盐水（NS）对照组（A），低剂量阿胶组（B），中剂量阿胶组（C），高剂量阿胶组（D），斯奇康组（E），哮喘对照组（F）。用酶联免疫吸附试验（EIASA）检测血液中自介素-4（IL-4）、γ干扰素（IFN-γ）水平的变化。HE染色观察肺组织病理学变化。结果与NS对照组比较，哮喘模型组血液中IFN-γ水平显著降低（P＜0．01）。与哮喘模型组比较，阿胶低、中剂量组和斯奇康组IL-4水平显著降低（P＜0．01），NS对照组、阿胶低、中剂量组和斯奇康组人鼠肺组织嗜酸性细胞浸润程度也明显减轻。结论哮喘大鼠存在Th2型细胞优势反应，而阿胶可能具有抑制哮喘Th2细胞优势反应的作用，从而调节Th1／Th2型细胞因子平衡，同时，可减轻哮喘大鼠肺组织嗜酸性细胞炎症反应。     

中药复肝液体外抗乙肝病毒及对Th1/Th2细胞平衡的调节作用

目的 探讨中药复肝液体外抗乙肝病毒作用及对Th1／Th2细胞平衡的调节作用。方法 观察不同浓度复肝液对HepG2．2．15细胞株HBV抗原、DNA表达及对Th1／Th2细胞平衡调节的影响。采用ELISA法测定HBsAg、HBeAg、INF-1及IL-4定量，采用荧光定量PCR法测定HBVDNA定量。结果 复肝液不同浓度组体外抗乙肝病毒存在显著差异，80μg／ml浓度复肝液可明显抑制培养HepG2．2．15细胞HBsAg、HBeAg表达及分泌HBVDNA，复肝液对各组（患者、正常对照PBMC）Th1／Th2平衡调节无显著差异。结论复肝液有明显的体外抗乙肝病毒活性作用，对Th1／Th2平衡无明显影响。     

益肺调血汤对变应性鼻炎大鼠血清Th1/Th2水平的影响

目的:观察自拟益肺调血汤对实验性变应性鼻炎(AR)大鼠血清Th1/Th2水平的影响.方法:采用二异氰酸甲苯酯(TDI)对大鼠进行实验性AR造模,50只大鼠,随机分为正常组、模型(AR)组、辛芩颗粒对照组及中药复方高、低剂量治疗组5组,每组10只.灌胃治疗2周后,处死,腹主动脉取血,检测血清中IFN-γ、IL-4水平的变化.结果:用药各组,Th1/Th2水平明显高于AR组,与正常组无明显差异.结论:益肺调血汤通过调节Th1和Th2细胞因子的表达,可纠正失衡的Th1/Th2的细胞因子网络而对AR产生治疗作用.     

通络止痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠Th1/Th2的调节作用

目的从分子水平研究通络止痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠Th1/Th2的调节作用。方法按随机原则将50只Wistar大鼠分为正常组、模型组,以及通络止痛胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组10只。用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测大鼠外周血细胞因子IFN-γ和IL-4的表达情况。结果与正常组比较,模型组Th1明显升高(P<0.01)、Th2明显降低(P<0.01),Th1/Th2显著升高(P<0.01);通络止痛胶囊治疗组Th1细胞数较模型组明显降低,Th2细胞数明显升高,Th1/Th2显著降低,均以高剂量组最为显著。结论通络止痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠外周血Th1、Th2细胞数及其比值的调节保持Th1/Th2平衡,从而起到治疗佐剂性关节炎的作用。     

补肾宁心方对小鼠绝经后骨质疏松的影响

目的 探讨补肾宁心方防治绝经后骨质疏松的作用.方法 建立BALB/c小鼠绝经后骨质疏松模型,灌服补肾宁心方浓缩液（简称补肾方组）,并以17 β-雌二醇为阳性对照（简称E2组）,以生理盐水为阴性对照（简称模型组）.12周后处死,取血测Th1/Th2型细胞因子;取椎骨（L3-4）和左股骨测骨密度（BMD）;取右股骨行骨组织形态计量分析;胫骨提取总RNA,半定量RT-PCR分析护骨素（OPG）的mRNA表达.计算子宫对体重的比值,并行子宫组织切片观察.结果 补肾方组的IFN-γ水平较模型组明显升高（P＜0.01）,而IL-4水平低于模型组（P＜0.05）.补肾方组与E2组小鼠的BMD均改善,骨小梁面积增加,OPG mRNA表达增加;但补肾方组小鼠的子宫明显小于E2组（P＜0.05）,与模型组比较差异无显著性.结论 补肾方能够选择性地防治绝经后骨质疏松,对子宫无或仅有轻微的刺激作用.其机制可能与调节Th1/Th2的偏移及提高OPG的表达,抑制破骨细胞的活性有关.     

补肾宁心方对小鼠绝经后骨质疏松的选择性作用

目的:探讨补肾宁心方防治绝经后骨质疏松的作用。方法:建立BALB/c小鼠绝经后骨质疏松模型,灌服补肾宁心方浓缩液(简称补肾方),并以17β-雌二醇为阳性对照(简称E2组),以生理盐水为阴性对照(简称模型组)。12周后处死,取血测Th1/Th2型细胞因子;取椎骨(L3-4)和左股骨测骨密度(BMD);取右股骨行骨组织形态计量分析;胫骨提取总RNA,半定量RT-PCR分析护骨素(OPG)的mR-NA表达。计算子宫对体重的比值,并行子宫组织切片观察。结果:补肾方组的IFNγ-水平较模型组明显升高(P<0.01);而IL-4水平低于模型组(P<0.05)。补肾方组与E2组均可改善小鼠的BMD,增加骨小梁面积,使OPG mRNA表达增加。补肾方组的子宫与模型组比较无显著性差异。结论:补肾方能够选择性地防治绝经后骨质疏松,对子宫无或仅有轻微的刺激作用。其机制与调节Th1/Th2的偏离及提高OPG的表达,抑制破骨细胞的活性有关。     

黄芪多糖对1型糖尿病小鼠胰腺β细胞总质量的影响

目的:研究黄芪多糖对1型糖尿病小鼠胰腺β细胞总质量的影响.方法:以低剂量链脲菌素(STZ)多次腹腔注射,建立1型糖尿病小鼠模型,每天分别用黄芪多糖(APS)100,200,400 mg·kg-1或生理盐水腹腔注射,15,30 d时将小鼠处死.以免疫组织化学染色并复染观察胰岛炎性细胞浸润,以间接荧光免疫双标法检测Insulin/Ki67(Hoechst33258复染)、Insulin/Cleaved caspase-3的表达,观察胰腺细胞(包括β细胞)增生、β细胞新生、β细胞凋亡和β细胞总质量的变化,以半定量RT-PCR检验胰腺再生蛋白1 mRNA的表达水平,以ELISA法检测脾细胞IFN-γ和IL-4的分泌.结果:与对照组比较,APS处理组胰岛炎症减轻、β细胞总质量增加、新生胰岛增多、β细胞凋亡减少、Th1/Th2分泌因子比值下调,所有这些均与APS的剂量和使用持续时间密切相关.但关于胰腺的细胞增殖和β细胞增殖,APS处理组与对照组没有明显差别.结论:APS通过改善1型糖尿病小鼠的免疫功能增加胰腺β细胞总质量.     

流式微球技术检测参芪扶正注射液对化疗小鼠Th1/Th2平衡状态的影响

目的:研究参芪扶正注射液对化疗小鼠Th1/Th2平衡状态的影响。方法:57只荷瘤小鼠随机分成5组,分别为荷瘤对照组、环磷酰胺组、参芪扶正注射液高剂量组(8g·kg^-1组)、临床等效剂量组(4g·kg^-1组)和低剂量组(2g·kg^-1组)。后4组给予环磷酰胺ip2次造模。荷瘤对照组及环磷酰胺组ip生理盐水,1次/d,其他3组ip相应剂量参芪扶正注射液。9d后摘小鼠眼球取血约0.5mL进行流式微球(CBA)检测,再脱颈处死小鼠,称取肿瘤重量,计算肿瘤系数。结果:参芪扶正注射液临床等效剂量组(4g·kg^-1)可显著降低化疗小鼠的肿瘤重量和肿瘤系数(P<0.01),提高化疗小鼠的TNF-α及IL-2的浓度(P<0.01～0.05)。结论:参芪扶正注射液4g·kg^-1可诱导化疗小鼠的Th1/Th2平衡向Th1细胞占优势的方向转化。     

针灸对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2免疫平衡的影响

目的:探讨针灸对溃疡性结肠炎(UC)大鼠Th 1/Th 2免疫平衡的影响。方法:SD大鼠随机分为模型组、隔药灸组、电针组,每组10只,并另选10只正常大鼠作为对照组。采用免疫学方法并加局部刺激建立大鼠UC模型。隔药灸组、电针组选取"天枢"(双)和"气海"进行隔药灸或电针治疗,连续治疗14d。采用定量PCR法检测结肠组织中干扰素(INF)-γ、白介素(IL)-12、IL-4和IL-10mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附法检测结肠组织中INF-γ、IL-12、IL-4和IL-10的含量;采用流式细胞术分析结肠组织细胞中CD4~+INF-γ~+/CD 4~+IL-4~+的比值。结果:与对照组比较,模型组大鼠结肠组织中INF-γ、IL-12mRNA和含量显著升高(P0.05),IL-4、IL-10mRNA和含量显著下降(P0.05);隔药灸组和电针组大鼠结肠组织INF-γ、IL-12mRNA和含量显著低于模型组(P0.05),IL-4、IL-10mRNA和含量显著高于模型组(P0.05)。模型组结肠组织中CD 4~+INF-γ~+/CD 4~+IL-4~+的比值显著高于对照组(P0.05);与模型组比较,隔药灸组和电针组CD4~+INF-γ~+/CD 4~+IL-4~+比值显著下降(P0.05)。隔药灸组和电针组的各项指标比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:隔药灸和电针均能显著改善UC模型大鼠炎性反应,通过下调结肠组织中INF-γ和IL-12水平,上调IL-4和IL-10水平从而保持Th 1/Th 2细胞间平衡,进而改善免疫功能。