齐墩果酸对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

目的:研究齐墩果酸对宫颈癌Hela细胞增殖的影响;初步探讨齐墩果酸诱导Hela细胞凋亡的作用机制.为临床治疗宫颈癌提供实验和理论依据.方法:MTT法检测OA对宫颈癌Hela细胞增殖的影响.HE染色检测OA对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响.结果:OA以时间和剂量依赖性的特点抑制宫颈癌Hela细胞的增殖.不同程度地显示典型的...     

齐墩果酸诱导人结肠癌LoVo细胞凋亡作用研究

目的研究齐墩果酸（oleanolic acid,OA）诱导人结肠癌LoVo细胞株凋亡的机制。方法应用浓度为2.00～32.00 mg•L 1OA作用于人结肠癌LoVo细胞12～96 h后,采用噻唑蓝（MTT）法检测OA对LoVo细胞的抑制作用,采用流式细胞术、Western blot印迹法等检测细胞周期变化、凋亡及Bcl 2、Bax、p53、Caspase 3蛋白表达,在光镜及电镜下观察细胞形态学变化。结果OA呈时间 剂量依赖性抑制LoVo细胞增殖,能诱导LoVo细胞凋亡及阻滞细胞于G2/M期,OA作用LoVo细胞48 h后,各组的细胞凋亡率为10.32%～14.24%（P＜0.05),并出现Bcl 2蛋白表达抑制, p53、Bax及Caspase 3活性增强。结论OA可以促进人结肠癌LoVo细胞凋亡,其促凋亡机制与抑制Bcl 2表达及促进p53、Bax及Caspase 3表达有关。     

齐墩果酸诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及其作用机制研究

目的探讨齐墩果酸对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,并考察其作用机制。方法采用MTT法检测齐墩果酸对HepG2细胞增殖的影响,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双重染色法进行细胞形态学观察,流式细胞仪检测细胞凋亡、活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)的变化。结果随着齐墩果酸浓度的升高,抑制率显著增加,呈现明显的时间与剂量相关性;齐墩果酸在25.0、50.0、100.0μmol/L作用12 h时,细胞形态学发生改变,细胞的总凋亡率随着齐墩果酸浓度的增加而升高,细胞中ROS水平随着齐墩果酸浓度的增加而升高,细胞内的MMP水平随着齐墩果酸浓度的增加而降低。结论齐墩果酸通过调节ROS和MMP体外抑制人肝癌HepG2细胞的增殖和诱导其凋亡     

齐墩果酸对血小板功能的影响

本文研究了齐墩果酸对老龄小白鼠某些功能的影响。研究结果表明，老龄小白鼠灌胃给予齐墩果酸后可明显抑制胶原及ＡＤＰ诱导的血小板聚集，连续给药一周，其对血小板聚集的抑制作用明显优于一次给药的作用，剂量增加，作用加强；又可使血小板电泳迁移速率加快。     

齐墩果酸对人白血病HL-60细胞端粒酶活性的影响

目前研究表明,正常人体细胞中无端粒酶活性,而大部分肿瘤细胞和胚系细胞（如睾丸、卵巢）中端粒酶活性呈阳性[1]。齐墩果酸具有消炎、增强免疫、抑制血小板降集、降糖、抗氧化和利尿作用等多方面的临床药理作用,还具有护肝、抗高血脂、抗动脉粥样硬化及抗肿瘤等生物活性[2]。本实验旨在探讨齐墩果酸对人白血病HL-60细胞端粒酶活性的影响,为开发新的抗肿瘤药物提供实验依据。1材料与方法1.1材料人白血病HL-60细胞购自中国科学院上海细胞库。齐墩果酸（O leano lic A c id）购自中国药品生物制品检验检定所,溶于DM SO中,配制成浓度为80mM的原液,再用含10%胎牛血清的1640培养基稀释100倍,配制成终浓度为800μM的使用液。凯基TRAP-PCR银染法端粒酶活性检测试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司。     

齐墩果酸磷酸酯单钠的合成

本文首次报道了齐墩果酸磷酸酯单钠的合成。首先齐墩果酸与三氯氧磷作用生成其磷酸酯,然后转化成单钠盐。     

齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响

目的:研究齐墩果酸(Oleanic acid,OA)对人白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响。方法:OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达。结果:OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明显,出现凋亡小体,且PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达下调(P<0.01)。结论:OA可抑制HL-60细胞增殖,这可能与其下调HL-60细胞中PI3K、Akt、Cav-1的表达有关。     

齐墩果酸滴丸的质量标准研究

目的:建立齐墩果酸滴丸的质量标准。方法:鉴别制剂性状,检测制剂重量差异、溶散时限;采用超高效液相色谱法测定制剂中齐墩果酸的含量:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C_(18),流动相为乙腈-水(70∶30,V/V),流速为0.30 mL/min,检测波长为206 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。结果:制剂鉴别特征明显,丸重差异为37.62%~46.56%,溶散时间均为24 min。齐墩果酸检测质量浓度线性范围为0.006~0.06 mg/mL(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率为99.34%~100.40%(RSD=0.4%,n=6)。结论:该研究所建标准可用于齐墩果酸滴丸的质量控制。     

齐墩果酸对OATP1B1介导药物转运功能的关联性影响

目的 探讨齐墩果酸对有机阴离子转运多肽1B1（organic anion transporting polypetide1B1,OATP1B1）转运功能的关联性影响。方法 利用稳定表达人OATP1B1的人胚胎肾293（hunan embyonic kindney293,HEK293）细胞株,以氟伐他汀为底物进行OATP1B1摄取反应,观察齐墩果酸对OATP1B1摄取功能的影响。结果 齐墩果酸对OATP1B1摄取氟伐他汀的功能有竞争性抑制作用,抑制常数Ki值为（20.3±2.1）mmol·L^-1。结论 齐墩果酸对肝脏药物转运体OATP1B1转运抑制作用可诱导中西药相互作用。     

齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt表达的影响

目的研究齐墩果酸(Oleanic acid,OA)对人白血病HL-60细胞PI3K、Akt表达的影响。方法 OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PI3K、Akt的mRNA表达。结果 OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明显,出现凋亡小体,且PI3K、Akt的mRNA表达下调(P<0.01)。结论 OA可抑制HL-60细胞增殖,这可能与其下调HL-60细胞中PI3K、Akt的表达有关。     

Effects of oleanolic acid and maslinic acid on hyperlipidemia

In the present study, we examined the therapeutic effects of pentacyclic triterpenes, oleanolic acid (OA) and maslinic acid (MA), on hyperlipidemia in a high‐cholesterol diet model. Hyperlipidemia was induced in male Sprague‐Dawley rats by feeding with a high‐cholesterol diet (HCD) for 30 days. MA and OA were supplemented (100 mg/kg body wt/day) during the last 15 days. The levels of serum total cholesterol (TC), triglyceride (TG), high‐density lipoprotein‐cholesterol (HDL‐C), and low‐density lipoprotein‐cholesterol (LDL‐C) increased in hyperlipidemic rats. An apparent increase in the expression of Acyl‐CoA cholesterol acyltransferase (ACAT) mRNA was seen in HCD‐fed rats. The activities of hepatic marker enzymes that serve as indices of cellular injury were also altered in HCD‐fed rats. Treatment with triterpenes modulated the abnormalities induced by hyperlipidimia. Lipid accumulation was decreased in histological findings. Elevated hepatic glycogen content (P<0.05) in triterpene groups was observed compared with HCD‐fed groups. Furthermore, ACAT gene expression was suppressed compared with hyperlipidemia‐induced groups without triterpenes. It can be concluded that triterpene treatment possesses therapeutic effects on diet‐induced hyperlipidemia by inhibiting the intestinal absorption and storage of cholesterol. Drug Dev Res 68:261–266, 2007. © 2007 Wiley‐Liss, Inc.     

丹参多酚对缺血心肌细胞凋亡及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1表达的影响

目的探讨丹参多酚对缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)表达的影响。方法对心肌细胞H9C2进行缺氧复氧处理构建体外心肌细胞凋亡模型,并分为模型组与丹参多酚组,其中丹参多酚组用丹参多酚进行预处理,模型组不做处理,另设对照组细胞不进行缺氧复氧处理。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测各个活性物质含量变化,蛋白质印迹法检测PARP-1的表达。结果丹参多酚组细胞存活率、细胞凋亡率与对照组差异无统计学意义,并且显著高于模型组(P<0.001),SOD的表达明显高于模型组(P<0.05),LDH、MDA的表达明显低于模型组(P<0.05),模型组PARP-1蛋白相对表量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.001)。丹参多酚组PARP-1表达显著低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论丹参多酚能够抑制缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡,这种调控作用可能与其对PARP-1表达的抑制作用有关。     

紫花牡荆素对卵巢癌CoC1 细胞凋亡和Mcl-1 表达的影响

目的研究紫花牡荆素（casticin）诱导人卵巢癌CoC1细胞凋亡作用。方法用不同浓度的casticin处理体外培养的CoC1细胞,碘化丙啶（PI）染色流式细胞术（FCM）分析细胞凋亡率,比色法测定细胞caspase-3活性,Western Blot分析Mcl-1蛋白表达水平。结果紫花牡荆素以浓度依赖方式增高CoC1细胞凋亡率和激活caspase-3（P〈0.05）。1.0μmoL·L-1casticin以时间依赖方式降低Mcl-1蛋白表达水平（P〈0.05）。结论 casticin诱导CoC1细胞凋亡与其抑制Mcl-1蛋白表达相关。     

HPLC-PAD法测定齐墩果酸原料及片剂中的齐墩果酸含量

目的建立反相高效液相色谱法测定齐墩果酸原料及片剂中齐墩果酸含量的方法,同时利用二极管阵列检测器建立了齐墩果酸峰纯度的鉴定方法. 方法色谱柱为Nova-Pak C18,流动相为乙睛-水(65∶ 35),流速0.8 ml·min-1,检测波长210 nm,柱温25℃.结果齐墩果酸在3.48～17.40 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),检出限为0.3 mg·L-1 (3σ),平均回收率为99.5%. 结论该方法简便,准确,线性范围宽,重现性好,适于对含有该成分的药物进行质量评价.     

不同稳定剂种类对齐墩果酸纳米混悬剂溶出度的影响

目的:制备齐墩果酸纳米混悬剂(OLA-NS),考察不同稳定剂种类对其溶出度的影响。方法:采用高压均质法,制备不同稳定剂、粒径相同的齐墩果酸纳米混悬剂,以溶出度为评价指标比较其体外释放行为,并利用傅立叶变换红外光谱(FT-IR)进行表征。结果:不同稳定剂制备得到的OLA-NS粒径为约330 nm,以甘露醇为冻干保护剂冷冻干燥后粒径为约350 nm,不同稳定剂的溶出速率为NS-HPMC E5>NS-PVP VA64>NS-PVP K30>NS-Soluplus。结论:稳定剂种类对齐墩果酸纳米混悬剂的体外溶出行为有显著影响。     

Anti-inflammatory activities of oleanolic acid on HMGB1 activated HUVECs

As a late mediator of inflammation, high mobility group box 1 (HMGB1) protein up-regulates pro-inflammatory cytokines in several inflammatory diseases. Further, high plasma levels of HMGB1 correlate with poor prognosis and increased mortality in patients with severe inflammation. Oleanolic acid (OA), a triterpenoid known for its anti-inflammatory and anti-cancer properties, is commonly present in several medicinal plants but the effects of OA on HMGB1-mediated pro-inflammatory responses of human endothelial cells is not well-studied. In this study, we investigated this question by monitoring the effect of OA on lipopolysaccharide (LPS)-mediated release of HMGB1 and the HMGB1-mediated modulation of inflammatory responses in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). OA potently inhibited the release of HMGB1 by HUVECs as well as down-regulated HMGB1-dependent adhesion and migration of the monocytic cell line THP-1 to activated HUVECs. OA also down-regulated the cell surface expression of the receptor of HMGB1, thereby inhibiting HMGB1-dependent pro-inflammatory responses by inhibiting activation of nuclear factor-κB (NF-κB) and production of tumor necrosis factor-α (TNF-α) by HMGB1. Given these results, OA showed anti-inflammatory activities and could be a candidate as a therapeutic agent for various inflammatory diseases through the inhibition of the HMGB1 signaling pathway.     

齐墩果酸对兔耳增生性瘢痕的治疗作用

目的研究齐墩果酸（oleanolicacid）对兔耳增生性瘢痕的治疗作用。方法用打孔器产生创面建立兔耳增生性瘢痕模型。齐墩果酸（2．5％、5％、10％）外用给药,1次／d,连续22d。给药结束后切除瘢痕组织进行组织学检测并且测定I型和Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶．1（MMP-1）和生长转化因子βl（TGF-βl）的水平以及瘢痕增生指数（scarelevationindex,SEI）。结果用不同质量浓度的齐墩果酸给药22d后发现其对兔耳肥厚性瘢痕有显著的治疗作用,TGF-βl、I型和Ⅲ型胶原水平显著降低,MMP-1在瘢痕组织中显著增加,SEI明显降低。组织形态观察结果显示齐墩果酸对瘢痕有明显的改善作用。结论齐墩果酸对兔耳增生性瘢痕有治疗作用,可能成为治疗人类增生性瘢痕的活性药物。     

外源性干扰 PVT1表达对结直肠癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的：外源性干扰PVT1表达对结直肠癌（CRC）细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法体外转染小干扰RNA（siRNA）干扰RKO和HCT116细胞PVT1表达（si‐PVT1组）;另设阴性对照siRNA（si‐NC）组。MTT实验和克隆形成实验检测 RKO和 HCT116细胞增殖力,Transwell实验检测RKO和HCT116细胞侵袭力,qRT‐PCR及Western blot检测相关抑癌基因SMAD4的表达。结果与si‐NC组相比,si‐PVT1组RKO和HCT116细胞增殖力抑制（P＜0．05或P＜0．01）,细胞克隆数减少（P＜0．01）,细胞侵袭数目减少（P＜0．05或P＜0．01）,且SMAD4 mRNA和蛋白表达水平均升高（P＜0．05）。结论 PVT1能促进CRC细胞增殖和侵袭,抑制CRC细胞凋亡。