低氧对鼠雪旺氏细胞增殖的影响

目的观察低氧对鼠雪旺氏细胞体外增殖的影响,为雪旺氏细胞扩增培养探索新方法。方法原代分离培养雪旺氏细胞并鉴定,将培养至第三代的细胞分为3组,分别为对照组,10%02组和3%O2组。对各组细胞记数;测定培养液中氧含量和乳酸浓度及各组细胞的增殖指数。结果随着环境氧浓度的下降,细胞培养液中的氧含量也逐渐下降（P〈0.05）,而乳酸浓度逐渐升高（P〈0.05）。低氧组雪旺氏细胞数目比常氧组明显增加,尤以10%O2组更为明显（P〈0.05）,3%O2组在低氧1d和2d时增殖指数低于常氧组,低氧4时,增殖指数增加;而10%O2组增殖指数一直高于常氧组（P〈0.05）。结论轻中度低氧有利于鼠雪旺氏细胞的体外增殖。     

低氧对鼠雪旺氏细胞增殖的影响

目的观察低氧对鼠雪旺氏细胞体外增殖的影响，为雪旺氏细胞扩增培养探索新方法。方法原代分离培养雪旺氏细胞并鉴定，将培养至第三代的细胞分为3组，分别为对照组，10组和3%O2组。对各组细胞记数；测定培养液中氧含量和乳酸浓度及各组细胞的增殖指数。结果随着环境氧浓度的下降，细胞培养液中的氧含量也逐渐下降（P〈0.05），而乳酸浓度逐渐升高（P〈0.05）。低氧组雪旺氏细胞数目比常氧组明显增加，尤以10%O2组更为明显（P〈0.05），3%O2组在低氧1d和2d时增殖指数低于常氧组，低氧4时，增殖指数增加；而10%O2组增殖指数一直高于常氧组（P〈0.05）。结论轻中度低氧有利于鼠雪旺氏细胞的体外增殖。     

兔坐骨神经电损伤后区域雪旺氏细胞增殖变化及分析

目的 比较成年兔坐骨神经分别受到75V电压损伤和横断伤后雪旺氏细胞增殖变化情况.方法 建立兔坐骨神经电损伤和横断伤实验模型,选择损伤后第3、7、10天作为观察点.应用双酶消化法分离神经受损区域神经雪旺氏细胞并计数.结果 75V电损伤后雪旺氏细胞数量明显要多于横断伤后的雪旺氏细胞数量.结论 75V电损伤不能损伤雪旺氏细胞正常功能,电损伤后坐骨神经Wallerian变性比较快而全面是雪旺氏细胞数量增多的原因.     

肿瘤坏死因子和干扰素对体外培养乳鼠雪旺氏细胞的增殖影响

目的 :探讨肿瘤坏死因子 (TNF -α)与干扰素 (IFN -γ)联合应用对体外乳鼠雪旺氏细胞增殖的抑制作用。方法 :建立体外乳鼠雪旺氏细胞培养体系 ;经分离、纯化、传代的雪旺氏细胞通过免疫组化、电镜鉴定后 ,纯度达到90 %以上后进行实验。实验分为空白组、对照组、TNF -α组、IFN -γ组及TNF -α +IFN -γ组 ,分别作用 72h后 ,应用四氮唑蓝 (MTT)比色法测定各组的OD值 ,计算其抑制率。结果 :TNF -α和IFN -γ对乳鼠雪旺氏细胞生长增殖均有直接抑制作用 ,其中TNF -α在 10 0～ 2 0 0 0U/ml浓度范围内对正常雪旺氏细胞增殖有抑制作用 ,呈剂量依赖关系 ,在10 0 0U/ml抑制率达到最大。联合用药能明显提高TNF -α对乳鼠雪旺氏细胞生长增殖的抑制效应。结论 :TNF -α对乳鼠雪旺氏细胞生长增殖起抑制作用 ,并呈剂量依赖性。IFN -γ与TNF -α联合用药有明显的协同抑制效应。     

脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞影响的观察

目的：了解脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞的影响。方法：酶消化法培养的雪旺氏细胞分烃 加脑组织提取液组,对细胞形态和数量进行观察比较。结果：体外培养的五氏细胞在加入脑组织提取液后细胞增殖加快,并出现细胞突出起细长（为对照组的２－３倍）,互相延伸等形态学改变。结论：雪旺氏细胞在接触脑组织提取液后,表现为细胞增殖加快,突起生长明显的功能活跃状态。     

蛋白激酶C激动剂及抑制剂对雪旺氏细胞增殖及表达NGF的影响

目的 :研究蛋白激酶C激动剂PMA及抑制剂H 7对大鼠坐骨神经雪旺氏细胞增殖及表达NGF的影响。方法 :采用双酶法 ,培养大鼠坐骨神经雪旺氏细胞 ,消化传代的雪旺氏细胞加入 10 -11mol/L、10 -10 mol/L、10 -9mol/L、10 -8mol/L、10 -7mol/LPMA及 10 0microMH 7共孵育 3～ 6天后 ,一部分台盼蓝染色计细胞数 ,一部分加入3 H TdR测摄取率 ,一部分固定后采用核酸原位杂交技术 (ISH)测雪旺氏细胞中NGFmRNA表达变化。结果 :不同浓度的PMA使雪旺氏细胞数及3 H TdR摄取率增加与对照组相比差异有显著意义 ,其中 10 -9mol/LPMA使细胞数增加及3 H TdR摄取率达到高峰为最适深度 ,而H 7显著抑制细胞数及3 H TdR摄取率 ,差异有显著意义 ,10 -10 mol/L、10 -9mol/L、10 -8mol/LPMA使雪旺氏细胞NGFmRNA光密度显著增加差异有显著意义 ,而H 7则抑制雪旺氏细胞NGFmRNA表达差异有显著意义。结论 :PKC可能参与了雪旺氏细胞增殖及表达NGFmRNA ,PMA起促进作用而H 7起抑制作用。     

β1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ影响雪旺氏细胞增殖的机制

目的探讨β1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ影响雪旺氏细胞增殖的机制.方法将不同浓度的β-1,4-GalT-Ⅰ表达质粒转染雪旺氏细胞,采用Westem blot方法检测增殖相关信号分子cyclin D1、p16INK4以及p27Kipl的表达水平,Northem blot方法检测p19ARF的表达变化.结果随着β-1,4-GalT-Ⅰ在雪旺氏细胞中的表达增加,cyclin D1表达降低,而p16INK4a和p19ARF呈现相反的变化;p27Kipl变化不明显.结论β-1,4-GalT-Ⅰ影响雪旺氏细胞增殖可能与cyclin D1、p16INK4a和p19ARF介导的信号传导途径有关.     

雪旺氏细胞源活性物质对周围神经再生影响的实验研究

采用１６４０培养液体外培养ＳＤ乳鼠雪旺氏细胞，吸取其培养液，内含雪旺氏细胞分泌的活性物质。以硅胶管桥接３组ＳＤ大白鼠２ｃｍ有神经缺损，第一组硅胶管内注入雪旺氏细胞培养液，第２组注入１６４０培养液，第３组空白对照，术后４个月第１组，第２组髓鞘直径，动作电位传导速率比较差异有极显著性（Ｐ〈０．０１），实验结果显示雪旺氏细胞泊活性物质对周围神经再生有益。     

人体正中神经雪旺氏细胞培养

目的：对引产的28周死亡胎儿的正中神经的雪旺氏细胞（Schwann Cell SC)培养，获得增殖的SC。方法：组织块反复种植法。结果：正中神经SC培养能良好的生长存活。结论：人体SC培养获得成功。     

雪旺氏细胞促进中枢神经系统修复和再生

<正>当周围神经(Peripheral Nerve,PN)损伤和再连接时,轴突可以成功地长入远侧残端,最终使神经功能在相当程度上得到恢复,而成年哺乳动物中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)的轴突损伤后的再生往往失败。     

被动吸烟与甲醛及通风不良对小白鼠影响的实验观察

目的分析三种有害室内因素:被动吸烟、甲醛及通风不良对小白鼠机体的影响。方法将32只小白鼠随机分为4组:被动吸烟组、甲醛组、通风不良组和空白对照组,每组8只,对前三组分别进行通香烟、通甲醛、不通风处理,空白组处于通风正常环境,实验持续4小时,过程中每隔1小时所有小鼠进行独木桥和通电迷宫试验及耐缺氧试验。结果t检验和方差分析显示,被动吸烟组过独木桥和穿行迷宫的时间比其他组显著延长,p<0.05,具有统计学意义。结论被动吸烟对中枢神经系统有严重的毒性作用。甲醛对中枢神经也有一定损伤作用。通风不良的环境,导致脑供氧不足而影响精神状态及平衡感下降。     

被动吸烟与甲醛及通风不良对小白鼠影响的实验观察

目的分析三种有害室内因素：被动吸烟、甲醛及通风不良对小白鼠机体的影响。方法将32只小白鼠随机分为4组：被动吸烟组、甲醛组、通风不良组和空白对照组，每组8只，对前三组分别进行通香烟、通甲醛、不通风处理，空白组处于通风正常环境，实验持续4小时，过程中每隔1小时所有小鼠进行独木桥和通电迷宫试验及耐缺氧试验。结果t检验和方差分析显示，被动吸烟组过独木桥和穿行迷宫的时间比其他组显著延长，p〈0.05，具有统计学意义。结论被动吸烟对中枢神经系统有严重的毒性作用。甲醛对中枢神经也有一定损伤作用。通风不良的环境，导致脑供氧不足而影响精神状态及平衡感下降。     

低氧对人骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的 探讨二氯化钴(CoCl2)诱导的化学性低氧对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)增殖的影响.方法 采用密度梯度离心法分离、培养hBMSC;用流式细胞仪检测其表面标志物;用CoCl2建立化学性缺氧模型,分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞仪检测hBMSC在不同CoCl2浓度(0、100、150、300 μmol/L)和不同时间(0,12 h及1、2、4、6、7 d)的增殖情况,0 μmol/L CoCl2组为常氧组,后3个浓度组为低氧组.结果 化学缺氧12 h内,hBMSC增殖被抑制;1、2、4 d时各低氧组细胞增殖均高于常氧组,但300 μmol/L CoCl2组与常氧组比差异无统计学意义(P＞0.05);而100μmol/L CoCl2组(0.139±0.003、0.178±0.005、0.224±0.005)和150 μmol/L CoCl2组(0.202±0.020、0.224±0.019、0.263±0.004)增殖明显高于常氧组(0.134±0.005、0.167±0.004、0.206±0.005),其中150μmol/L CoCl2组1 d时增殖最显著(均P＜0.05).6 d时100、150 μmol/LCoCl2组细胞增殖(0.258±0.020、0.264±0.008)仍高于常氧组(0.248±0.004),但优势逐渐减弱(P＜0.05).7 d时这种低氧促增殖的效应消失.结论 CoCl2诱导的化学性缺氧可以促进hBMSC增殖.     

促红细胞生成素对低氧状态下神经干细胞增殖、分化的影响

目的:探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对低氧状态下神经干细胞(neural stem cell,NSC)增殖、分化的影响。方法:采用10%低氧环境中无血清悬浮培养胚鼠脑源性NSC;加入EPO,观察和计数NSC克隆形成率,MTT法检测NSC的生长情况;胎牛血清诱导细胞分化,神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)和神经胶质原纤维酸性蛋白(gliafibrillary acidic protein,GFAP)免疫荧光染色检测NSC的分化情况。结果:培养的细胞经鉴定呈Nestin阳性,分化后部分细胞呈NSE阳性,部分细胞呈GFAP阳性。常氧和低氧组NSC的克隆形成率分别为(32.26±3.26)%和(48.93±4.34)%。低氧+EPO组NSC的克隆形成率比低氧组增加了17.26%;分化后,NSE阳性细胞数目增多。结论:低氧可促进NSC增殖,促进其向神经元方向分化;EPO能进一步促进NSC增殖及向神经元方向分化。     

Transwell小室共培养条件下缺氧时视网膜色素上皮细胞对内皮细胞增殖的影响

目的 研究在Transwell小室共培养系统中,缺氧时视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)对血管内皮细胞增殖的影响.方法 培养并鉴定RPE细胞和人脐静脉血管内皮细胞,利用200 μmol/LCoC12造成细胞缺氧、Transwell小室建立细胞共培养模型.实验分为4组:对照...     

壳寡糖对施万细胞增殖能力影响的研究

目的:研究壳寡糖(chitooligosaccharides,COS)对大鼠施万细胞活力和增殖能力的影响,探讨其促神经再生的机制。方法:体外培养并纯化大鼠施万细胞,S100β免疫荧光细胞化学染色和流式细胞仪对细胞纯度进行鉴定。四甲基偶氮唑盐比色法(methyl-thiazol-tetrazolium,MTT)观察不同质量浓度COS(0.25、0.5、1.0 mg/mL)作用24 h和48 h对施万细胞活力的影响。Hochest33342标记细胞,采用细胞计数法,绘制壳寡糖作用的施万细胞生长曲线。5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU)标记观察COS作用48 h对施万细胞增殖的影响。结果:免疫荧光细胞化学染色和流式细胞仪结果显示施万细胞纯度可达95%以上。MTT结果显示培养48 h后,中、高剂量的COS组(0.5、1.0 mg/mL)可使施万细胞活力增加。生长曲线显示,与对照组相比,COS可促进施万细胞增殖。BrdU标记结果显示,COS可显著增加BrdU阳性细胞数。结论:COS可促进施万细胞的活力和增殖能力。     

低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞中Gax基因表达及细胞增殖的影响

目的探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中生长终止特异性同源盒(growth arrest-spec ific homeobox,Gax)基因表达及细胞增殖的影响。方法以RT-PCR法、免疫细胞化学法和W estern blot法测定经低氧处理后的大鼠PASMCs中Gax mRNA和蛋白表达3。H-TdR掺入法观察低氧处理后PASMCs增殖情况。结果RT-PCR、免疫细胞化学和W estern blot检测证实低氧(2.5%O2)处理后的PASMCs中Gax mRNA和蛋白的表达逐渐降低;与常氧组比较,低氧组Gax mRNA和蛋白的表达显著下降3。H-TdR掺入法测定结果示PASMCs3H-TdR掺入量在低氧6 h开始增加,随着低氧时间延长,3H-TdR掺入量逐渐增加,至低氧24 h时3H-TdR掺入量最高。结论低氧可下调大鼠PASMCs中Gax mRNA和蛋白的表达并诱导PASMCs增殖,提示Gax基因在低氧性PASMCs增殖过程中可能起着重要作用。     

施万细胞对共培养的神经干细胞增殖与分化的影响

目的：探讨施万细胞诱导神经干细胞增殖与分化的影响因素。方法：大鼠胚胎神经干细胞单独培养及与新生SD大鼠施万细胞共培养，观察神经干细胞的形态变化，并分别检测特异性标志蛋白S-100、NF和GFAP的表达。结果：相差显微镜下可见共培养组大部分神经干细胞伸出多个细长突起；与单独培养组相比，免疫荧光染色显示共培养组NF表达阳性细胞数多；GFAP表达阳性细胞数少。结论：施万细胞可促进共培养的神经干细胞增殖，并可诱导神经干细胞向神经元方向分化。