实时荧光PCR法、胶体金快速检测法及病毒分离培养法在甲型流感病毒检测中的临床应用分析

目的:评估三种常见甲型流感病毒检测方法临床应用领域。方法:采用实时荧光PCR法、胶体金快速检测法及病毒分离培养法同时对244份临床标本进行甲型流感病毒检测,进行统计分析,评估不同方法灵敏度、特异性差异。结果:实时荧光PCR法、胶体金快速检测法、病毒分离培养法检测阳性率分别为73.77%,59.02%,40.16%;与实时荧光PCR法相比,胶体金快速检测法灵敏度、特异度分别为68.33%,67.19%;病毒分离培养法分别为54.44%,100%;与病毒分离培养法相比,胶体金快速检测法灵敏度、特异度分别为92.86%,63.70%。结论:实时荧光PCR法灵敏度、特异度高,适于确诊;胶体金快速检测法灵敏度较低,特异度最低,适于初筛;病毒分离培养法灵敏度较低,特异度高,适于做深入抗原分析。     

胶体金快速法与酶联免疫吸附试验在人类免疫缺陷病毒抗体检测中的应用

目的 比较胶体金快速法与酶联免疫吸附试验在人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体检测中的应用价值.方法 选取2019年1—12月于都昌县疾病预防控制中心进行艾滋病咨询检测的58例疑似HIV感染患者作为研究对象,均采用胶体金快速法与酶联免疫吸附试验检测HIV抗体,以免疫印迹法的检测结果为金标准,比较上述两种方法的诊断效能.结果 ...     

胶体金法和化学发光法用于巨细胞病毒感染的诊断

目的 探讨化学发光法和胶体金法在巨细胞病毒感染诊断中的应用.方法 选取2020年7-11月在石河子妇幼保健院进行孕前健康检查的465名育龄期妇女,同时采用化学发光法和胶体金法检测巨细胞病毒IgM和IgG抗体,比较两种方法检测结果的差异和一致性.结果 胶体金法检测巨细胞病毒IgG、IgM的阳性率为分别是94.19％和2....     

胶体金法对淋病快速诊断的价值探讨

应用艾康生物技术(杭州)有限公司研发的淋病快速诊断试剂(胶体金法),对2001年1月～4月在我院STD门诊就诊的300例患者的分泌物进行了淋病检测,并同时进行淋球菌培养,以此来验证淋病快速诊断试剂(胶体金法)的特异性和敏感性.此外还对部分患者进行解脲支原体、人型支原体、沙眼衣原体的检测,以便观察其它病原体的存在对淋病快速诊断试剂的检测有无干扰作用.     

胶体金法与荧光定量聚合酶链反应法在流感样呼吸道感染病原体实验室检测的对比分析

目的：对比分析胶体金法与荧光定量聚合酶链反应（PCR）法在流感样呼吸道感染病原体实验室检测。方法：选取2023年4月本院收治的245例流感症状上呼吸道感染患者,以荧光定量PCR法检查结果为金标准,比较荧光定量PCR法、胶体金法的阳性检出率。结果：245例流感症状上呼吸道感染患者,用荧光定量PCR法检测出阳性165例,用胶体金法进行甲型流感病毒抗原检测出阳性96例,通过对比两种不同检测方法发现,荧光定量PCR法的检测灵敏度高于胶体金法,Kappa值为0.904。荧光定量PCR法对不同病毒类型的诊断阳性率均高于胶体金法。结论：荧光定量PCR检测具有检测速度快、准确度高、假阳性率低等优点,有利于提高医务人员对流感病毒的检测质量,对合理控制流感疫情具有积极的影响。     

胶体金法与分离法检测霍乱弧菌结果比较

2霍乱弧菌的检测目前以培养法为标准,该法可用于各种临床标本,而近几年发展起来的胶体金免疫快速检测法,是利用单克隆抗体胶体金标记技术和膜层析技术研制而成,用于定性检测标本中可能存在的霍乱弧菌群菌体抗原。该法操作简单,检测结果清晰,易于判断,巳广泛应用于临床和基层医疗单位对可疑霍乱标本的快速检测。为了探讨快速法在临床标本中的使用情况,我们对检测结果进行分析。     

流感实验室快速诊断方法

流感不仅要根据临床症状和体征进行诊断,还需要实验室检测作为其辅助诊断,实验室检测主要包括常规病毒培养法和快速诊断方法.由于多种呼吸道病毒感染引起的症状相似,导致流感诊断的困难,本文就流感病毒的免疫荧光法、免疫胶体金、核酸杂交、RT-PCR等诊断方法做一综述.     

测定隐血的胶体金法与化学法的比较

胶体金试纸测定隐血,方法简便,快捷,并取得了较满意的结果。但在实际工作中,有些标本用胶体金法检测,结果常与临床不符,所以我们用化学法(尿隐血试纸,邻联甲苯胺法)与胶体金法测定隐血结果作如下比较。1　材料与方法11　标本　54例经临床确诊为上消化道出血病人的“柏油”样便,18份经镜检证实含RBC的痰液标本。12　方法121　3种方法　胶体金法隐血试纸条,邻联甲苯胺法及10A尿隐血试验(四甲基联苯胺法)。122　“柏油”样便的检测　分别用3种方法检测,胶体金法阴性标本分别作稀释后再次检测,稀释比例:1∶50,1∶100,1∶200,1∶400,1∶600。12…     

胶体金法在人类免疫缺陷病毒抗体检测中的假阴性现象与解决办法

按人类免疫缺陷病毒 (HIV)抗体检测规范 ,初筛中心实验室对初筛阳性血清的复测需用两种不同原理或不同厂家的试剂。在日常复检工作中我们发现 ,ELISA高吸光度 (A)值的阳性血清用胶体金法复测时经常会发生很难判断的弱阳性和少数阴性 ,该现象应引起有关实验室的重视。以下我们用 5份ELISA检测A值 >2 0的强阳性血清作对照 ,并提出解决办法 ,以供参考。材料与方法 :(1) 5份HIV抗体阳性血清均经浙江省HIV抗体确认实验室确认 ,A值均在 2 0以上 ;(2 )ELISA双抗原夹心法试剂盒由法国梅里埃公司生产 ,批号A4 4HC ;(3)胶体金检测试剂由…     

流感病毒咽拭子处理方式对其病毒分离率影响的研究

目的 通过采用咽拭子中加入青链霉素混合液或使用过滤器直接过滤标本的方式,对比两种处理方法对流感病毒分离率的影响。 方法 选择2017年10月1日至12月31日贵阳市哨点医院及各区、市、县疾控中心采集的流感样病例(ILI)咽拭子中PCR核酸检测阳性的标本200份,将同一份标本分为两份,一份加入青链霉素混合液（双抗）4℃过夜,另一份使用0.22μm的过滤器直接过滤标本,采用 MDCK 细胞进行流感病毒的分离培养,通过观察CPE（细胞病变效应）确定病毒收获时间进行HA（血凝）试验,并对病毒液进行无菌试验。 结果 （1）200份标本经两种方法分别处理后,双抗组病毒液受细菌污染数为37瓶,病毒液污染率为18.5%;过滤膜处理组病毒液受细菌污染数为4瓶,病毒液污染率为2%,双抗处理组污染率高于过滤膜处理组,差异有统计学意义（〖XC小五号.EPS;P〗=29.594, P=0.000<0.05）;（2）去除污染的毒株后,双抗处理组分离流感病毒97株,分离率为48.5%;过滤膜处理组成功分离流感病毒102株,则病毒分离率为51.0%,滤膜处理组病毒分离率与双抗处理组比较,差异无统计学意义（〖XC小五号.EPS;P〗=0.250,P=0.617>0.05）。 结论 两种方法处理流感病毒咽拭子标本后,病毒分离率无明显差异,但使用过滤器直接过滤标本的方式可显著降低病毒分离期间被细菌污染的风险。     

3种甲型流感快速检测试剂的性能评价

目的比较3种甲型流感快速检测试剂的灵敏度。方法利用病毒分离培养液和入境人群的鼻咽拭子标本考查试剂盒的检测灵敏度。结果甲型流感抗原快速检测试剂（FluA-DOT）对8份病毒分离培养液的检测灵敏度达到10^-2HA,明显高于其他两种检测试剂;FluA-DOT对入境人群鼻咽拭子标本的检出率为91.67%,也远远高于其他两种检测试剂。结论甲型流感抗原快速检测试剂（FluA-DOT）的检测时间短、灵敏度高,适用于口岸现场的甲型流感快速筛查。     

广西2005～2006年流感监测结果分析

目的对广西流感监测网络下属的4家医院送检的咽拭子进行检测,探讨流感病毒优势株的变化,了解广西流感流行规律,为流感防制提供科学依据。方法选择广西区妇幼保健院、隆安县人民医院、南宁市妇幼保健院和南宁市第一人民医院作为监测点,对流感样病例进行逐日统计,对符合采样条件的流感样病例进行采样,采用细胞培养法分离鉴定流感病毒。结果2005、2006年广西流感监测医院的流感样病例春、夏季高峰明显,4家流感监测医院的流感样病例数占门诊总病例数的百分比为10.04%～26.30%。2005年分离到125株流感病毒,其中B型63株(占50.40%),H3N2亚型46株(占36.80%),H1N1亚型16株(占12.80%),2006年分离到191株流感病毒,其中B型78株(占40.84%),H3N2亚型3株(占1.57%),H1N1亚型110株(占57.59%)。结论2005、2006两年广西流感监测医院的流感样病例全年均有发生,春、夏季为高发季节,2005年的流行株为B型流感毒株,2006年流行株为H1N1型流感毒株。     

深圳市福田区2009—2011年流感监测结果分析

目的对深圳市福田区2009—2011年流感监测结果进行分析,了解流感的流行趋势,为流感防治提供科学依据。方法采集2009—2011年监测点流感样病例（ILI）或流感局部暴发病人的咽拭子样本,以狗肾传代细胞（MDCK）分离流感病毒并进行型别鉴定。结果2009—2011年监测点采集流感样病例咽拭子样本1035份,经病毒分离和鉴定确认的流感病毒330株,分离率31．88％。2009年共分离到流感病毒202株,分离率42．00％;2010年共分离到流感病毒89株,分离率32．48％;2011年共分离到流感病毒39株,分离率13．93％。3年暴发疫情累计发病例数1684例,分离培养流感病毒552株,分离率32．78％。15～岁年龄组的流感病毒分离率高达52．78％。结论流感病毒分离阳性率逐年下降,流感活动强度逐渐降低,加强流感病毒监测,有效控制流感疫情。     

A practical influenza neutralization assay to simultaneously quantify hemagglutinin and neuraminidase-inhibiting antibody responses

Influenza vaccine immunogenicity is commonly assessed by determining hemagglutination inhibition (HAI) titers in serum samples. HAI titers have been used to predict vaccine efficacy, but this often fails when live attenuated vaccines are evaluated, because it does not encompass all immune mediators of protection. Although antibodies that inhibit viral neuraminidase (NA) also contribute to protection against disease, there is currently no routine assessment of NA inhibition titers. A serological method with the capacity to measure functional inhibition of both HA and NA would be valuable. We developed a high-throughput virus neutralization assay that uses viral NA activity to quantify influenza replication (the AVINA assay), and showed its capacity to identify antivirals with a broad range of target specificities. In this report we demonstrate that antibodies with specificity for either HA or NA are detected in this assay, whereas a commonly used virus neutralization assay only detects those with HA-specificity. We also compared human responses to seasonal influenza vaccines measured by HAI, micro-neutralization, NA inhibition and AVINA assays. The response rates to both trivalent inactivated and live attenuated vaccines were greater when measured by the AVINA than the other assays, reflecting the dual antigen reactivity and increased sensitivity of the assay. The potential of this single assay to predict protection against influenza-induced tachypnea was demonstrated in vaccinated cotton rats. The AVINA assay is therefore a practical, comprehensive method to determine influenza vaccine immunogenicity and potential efficacy.     

Performance characteristics of qualified cell lines for isolation and propagation of influenza viruses for vaccine manufacturing

Cell culture is now available as a method for the production of influenza vaccines in addition to eggs. In accordance with currently accepted practice, viruses recommended as candidates for vaccine manufacture are isolated and propagated exclusively in hens’ eggs prior to distribution to manufacturers. Candidate vaccine viruses isolated in cell culture are not available to support vaccine manufacturing in mammalian cell bioreactors so egg-derived viruses have to be used. Recently influenza A (H3N2) viruses have been difficult to isolate directly in eggs. As mitigation against this difficulty, and the possibility of no suitable egg-isolated candidate viruses being available, it is proposed to consider using mammalian cell lines for primary isolation of influenza viruses as candidates for vaccine production in egg and cell platforms.     

Preparation,characterization, and immunogenicity in mice of a recombinant influenza H5 hemagglutinin vaccine against the avian H5N1 A/Vietnam/1203/2004 influenza virus

Production of influenza vaccines requires a minimum of 6 months after the circulating strain is isolated and the use of infectious viruses. The hemagglutinin (protective antigen) of circulating influenza viruses mutates rapidly requiring reformulation of the vaccines. Our goal is to eliminate the risk of working with infectious virus and reduce significantly the production time.     

2006～2007年北京市流感监测结果分析

目的分析2006～2007年北京市流感流行特征,为控制流感提供科学依据。方法收集北京市流感样病例监测资料、病原学资料和集中发热疫情资料进行分析。结果2006。2007年北京市流感活动平稳,流行高峰集中在2007年元旦前后,流行优势毒株为H3N2亚型,进入12月以后H1N1和B型流感病毒活动强度有所增加。集中发热疫情主要集中在中小学校（90％）,疫情高发时间和病原学检测结果均与监测情况一致。结论采用同一标准开展流感样病例监测和病原学监测工作,对于掌握该市流感流行规律有着重要意义。     

摇床吸附法微量细胞板短期培养快速检测流感病毒

目的：为在流感样疫情的调查中能够快速准确地查清流感病原，提高公共卫生突发性应急事件的快速反应能力。方法：摇床吸附微量细胞板短期培养法的荧光抗体染色用于快速检测流感病毒并与常规的病毒分离方法作比较。结果：对83份流感疑似病人含漱液的快速检测结果与常规的细胞培养法病毒分离结果相比较，在病毒分离阳性的45份标本中，快速检测法也有34份阳性，阳性符合率为75％，敏感性测定达到了能够检测出0．01个血凝单位浓度的流感病毒。结论：微量细胞板荧光染色法检测流感病毒的敏感性要优于一般市售的快速诊断试剂盒。检测时间约在24h内，达到了快速准确的目的。