HPV与喉乳头状瘤及喉癌研究进展

近年来,由于基因工程技术的发展,人们已经可以直接从分子水平上对肿瘤的病毒病因机制进行研究,现已发现人类乳头状瘤病毒(Human PapillomaVirus,HPV) 作为致瘤病毒的一种与呼吸道和生殖道肿瘤密切相关。对于喉乳头状瘤和喉癌,研究发现肿瘤组织中亦具有HPV感染存在,说明HPV与喉肿瘤的发生具有一定联系,为阐明HPV与喉乳头状瘤及喉癌的关系,本文特将这方面研究进展综述如下。     

Survivin基因的克隆及其反义核酸对人喉癌细胞系的作用

目的:克隆survivin基因并鉴定,初步探讨survivin基因反义核酸(AS-ODN)对人喉癌细胞系的生长抑制作用.方法:从培养的人喉癌Hep-2细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得survivin基因;将该基因克隆到pGEM-T-Easy我体中,进行测序鉴定.以高表达survivin基因的人喉癌细胞系Hep-2为靶细胞、survivin基因AS-ODN为阻断剂,通过MTT试验观察AS-ODN对喉癌细胞的生长抑制作用,RT-PCR分析survivin基因AS-ODN对survivin基因表达的影响.结果:DNA测序结果证明,获得了survivin基因.其序列与GenBank中报道序列完全一致;MTT试验及RT-PCR分析表明,Hep-2在AS-ODN作用下,细胞数量明显减少,survivin基因AS-ODN明显抑制了喉癌细胞Hep-2的生长及其survivin基因的表达(P<0.05).结论:Survivin基因的克隆获得了成功,为进一步探讨survivin基因在喉癌及其他恶性肿瘤诊断和治疗中的应用奠定了基础.Survivin基因AS-ODN对人喉癌细胞的生长可能起十分重要的抑制作用,有望成为喉癌基因治疗的新靶点.     

喉癌中survivin基因的表达及其与高危型人乳头瘤病毒感染的相关性研究

目的:探讨凋亡抑制基因survivin在喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中的表达及其与人乳头状瘤病毒(HPV)16、18型感染之间的关系.方法:收集喉鳞状细胞癌标本46例,另收集声带息肉(VCP)组织20例,采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶法检测喉癌组织和声带息肉组织中survivin和HPV16/18-E6蛋白的表达.结果:喉鳞状细胞癌中survivin表达阳性率为71.74%(33/46),显著高于声带息肉组织(X2=28.696,P＜0.01).临床分期Ⅲ+Ⅳ期survivin阳性表达率显著高于Ⅰ+Ⅱ期(X2=4.193,P＜0.05);有淋巴结转移者的survivin阳性表达率高于无淋巴结转移者(X2=6.691,P＜0.05),survivin的表达还与病理学分级有关,高分化与中分化间差异具有显著性(X2=4.290,P＜0.05).喉癌中survivin基因的表达与HPV16/18-E6基因表达呈正相关(r=0.735,P＜0.05).结论:survivin基因与喉癌的发生、发展密切相关,有望成为喉癌诊断和基因治疗的新靶点.HPV16/18是喉癌发生的重要的因素,喉癌中survivin表达与HPV16/18感染呈正相关.     

喉鳞状细胞癌发生过程中Bak和Bcl-xl基因蛋白的参与排除与性别和吸烟关系

目的探讨促凋亡基因Bak和凋亡抑制基因Bcl-xl在喉鳞状细胞癌中的表达,及其与喉癌发生和预后的关系.方法取哈尔滨医科大学附属二院耳鼻咽喉-头颈外科2000-07/2002-04行手术切除的45块喉原发性喉鳞癌及25块正常喉黏膜石蜡标本.检测标本组织中Bak和Bcl-xl蛋白的表达,采用免疫组织化学染色方法分析患者性别、吸烟情况、临床分期及不同肿瘤病理分级和淋巴结转移与喉癌组织中Bak和Bcl-xl蛋白表达的关系.结果①正常喉黏膜Bak阳性表达显著高于原发性喉鳞癌[92%(23/25),44%(20/45),P＜0.01].②正常喉黏膜Bcl-xl阳性表达显著低于原发性喉鳞癌[16%(4/25),53%(24/45),P＜0.01].③喉癌组织中Bak和Bcl-xl蛋白的表达与患者的性别、吸烟情况及临床分期无关(P＞0.05),而与肿瘤病理分级和淋巴结转移显著相关(P＜0.005,P＜0.01).结论Bak在喉鳞癌中表达较正常喉黏膜明显减少,其表达下调与喉癌的发生密切相关.肿瘤分化越好,Bcl-xl的表达越强.Bak和Bcl-xl蛋白的表达与肿瘤病理分级和淋巴结转移显著相关,说明Bak蛋白表达对防止癌细胞转移、扩散具有积极意义,可作为对喉鳞癌预后判断的指标.     

喉癌手术患者生存质量影响因素及护理的研究进展

喉癌是头颈部最常见的恶性肿瘤,喉癌发病率在我国占全身肿瘤的1％ ～2％,占耳鼻喉恶性肿瘤的11％ ～22％,目前手术仍是治疗喉癌的主要手段之一[1].喉切除术是喉癌患者最主要的治疗方法之一,包括部分喉切除术和全喉切除术.喉切除术后患者往往出现如外形改变、嗅觉及味觉减退、发音功能丧失、永久性喉造口呼吸、焦虑、抑郁等一系列心理生理问题,患者虽然生存下来,但实际上在日常生活、社交活动、社会角色、行为方式以及社会心理等方面都发生了很大的变化,其生存质量受到很大影响.为了提高喉癌手术患者生存质量,国内外的学者做了大量的研究,并取得了较好的效果.现针对喉癌手术患者生存质量的影响因素及护理干预综述如下.     

人乳头瘤病毒与喉癌关系的研究进展

人乳头瘤病毒(HPV)感染作为喉癌高危因素一直受到关注和重视。该文对HPV的性质、结构和功能及与肿瘤的关系进行了介绍,并着重对喉癌与HPV的关系作一综述。     

抑癌基因p53与喉鳞癌

p53基因是已知肿瘤抑癌基因和癌基因中变异频率最高的基因.近年的研究表明p53基因突变在喉鳞癌的发生发展过程中可能起着重要作用.有关喉癌中p53基因突变率各家的报道相差较大,约在28%～80%不等.目前关于应用银染PCR-SSCP技术及DNA直接测序方法研究喉鳞癌新鲜组织中p53基因的文献报道较少,参考现有文献,本文将p53基因的研究新进展及其与喉癌的关系做一综述.     

Survivin在喉鳞癌的表达及其临床意义

目的:探讨survivin在喉鳞癌(LSCC)组织中的表达及与喉鳞癌的生物学行为的关系。方法:应用原位分子杂交方法,检测survivin mRNA在47例喉鳞癌组织、癌旁组织及14例正常喉组织中的表达。结果:(1)Survivin在正常喉组织中不表达;在喉癌组织、癌旁组织中阳性表达率分别为59.6%(28/47)、25.5%(12/47),其差异有显著性(P<0.05);组织分化程度越低、TNM分期越晚、淋巴结转移率越高,则survivin mRNA表达越强(均P<0.05)。结论:Survivin可能成为LSCC基因治疗的新靶点;其高表达预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后。     

MRI在喉癌诊断、分期及术后随访中的价值

目的:探讨MRI在喉癌诊断、分期及术后随访中的价值.方法:回顾性分析25例经病理证实的喉癌的术前及术后随访的MRI表现.13例先行放射治疗,6周后行手术切除,12例喉癌术后3～8周开始放疗.所有患者手术前或放疗前均行MR扫描,并在随访过程中行MR扫描.结果:治疗前喉癌MRI表现为声带增厚、喉内软组织肿块、喉深部间隙狭窄等.MRI对各期喉癌的准确率分别是T1:92.3％,T2:71.4％,T3:50％,T4:100％.MRI分期总准确率为80.0％.13例术前放疗肿瘤缩小10例,消失3例.12例术后放疗病灶MRI表现为局部不同程度水肿,9例3～ 10个月后水肿消退,1例表现为慢性水肿,2例为炎性肉芽肿.结论:喉癌的MRI表现有一定的特征性,MRI在喉癌的术前T分期中有重要价值.在术后MRI随访能鉴别喉癌放疗后出现的反应性水肿、慢性淋巴水肿、喉狭窄、原发肿瘤的改变和复发性喉癌.     

喉癌外科治疗——患者需求与医师的思考碰撞

外科手术是喉癌患者的有效治疗方式,如何在不影响患者生存率的前提下,安全切除肿瘤的同时进行喉功能重建,保留喉功能是医师的追求,亦是患者的需要。对此,笔者从保留喉功能在喉癌治疗中理念的转变、拟定喉全切除术者选择上径路的优点、肿瘤切除与可能喉功能重建(包括甲状软骨外膜修复、残留会厌修复、喉环状软骨上部分切除-环舌骨吻合术或环舌骨会厌吻合术、环咽吻合术及喉近全切除发音管重建术)等方面进行阐述,旨在强化保留喉功能的理念,在规范化治疗的基础上,根据需要实施必要的辅助与综合治疗,最终实现治疗方案的个体化。     

喉癌喉部分切除术中切缘病理检查的意义

目的 探讨喉癌喉部分切除术中切缘冷冻切片病理检查的临床意义。方法 以我院2000年1月～2003年10月间60例喉部分切除的喉癌声门型病人为观察对象;全部病例术前病理诊断为鳞状细胞癌。行喉裂开患侧声带、室带切除17例,行垂直半喉切除40例,行垂直半喉加额侧切除3例,同期行颈淋巴结清扫11例。术中在距肿瘤边缘3、5mm切缘处分别选多点切取组织600份标本行快速冷冻切片病理检查。结果 肿瘤切除后,距肿瘤3mm处切取的标本冷冻切片发现上切缘累及者2例,下切缘累及者1例,健侧声带前端累及者3例。距肿瘤5mm处切取的标本均无癌残留。两组之间比较差异有显著性（χ^2=6．06,P〈0．05）。随访5年生存率为76．7％。结论 在喉癌病人手术中,多点切取切缘快速冷冻切片病理检查指导喉部分切除,可以保证在彻底切除肿瘤的基础上最大程度地保留和重建病人喉的功能。手术切除范围至少应以包括距肿瘤边界5mm以内的癌旁组织作为安全切缘的参考标准是较为适宜的。     

喉癌放疗后MR复查的临床价值

目的：探讨喉癌放疗后MR复查的临床价值。材料和方法：回顾性分析37例经病理证实的喉癌放疗后MR复查的表现。结果：18例单纯放射治疗、17例喉癌术后6～8周开始放疗、2例术后2年发现复发而行放疗。放疗后第6周MR示局部不同程度水肿,3～6个月后水肿消退,肿瘤范围也渐缩小或消失,但其中4例分别于1年、1年半、3年和6年MR复查示慢性水肿;单纯放射治疗后复发2例,术后放疗后复发5例,喉部分切除术后放疗后喉狭窄合并感染1例。结论：MR复查能观察喉癌放疗后出现的反应性水肿、慢性淋巴水肿、喉狭窄、原发肿瘤的好转和复发性喉癌。     

喉癌组织中CDK4基因表达及其扩增的意义

目的:探讨喉癌组织中CDK4基因表达特点及其扩增的临床意义。方法:利用免疫组化的方法对CDK4在111例喉癌组织及29例声带息肉组织中的表达进行了检测,同时利用原位杂交的方法检测了其中的62例喉癌组织中CDK4的DNA扩增。结果:CDK4蛋白在喉鳞状细胞癌组织和声带息肉组织中的阳性表达率分别为62.2%、58.6%(P>0.05)。在原发部位上CDK4基因蛋白的表达在声门癌与声门上癌之间差异有显著性(P=0.042)。CDK4蛋白表达与肿瘤分期有关(P=0.018),与临床分期及有无颈淋巴结转移无关(P>0.05)。CDK4 DNA在喉鳞状细胞癌中的扩增阳性率为30.6%,与喉癌的分型、淋巴结转移及病理分化程度无关(P>0.05),即与喉癌的生物学行为无关,与喉癌预后也无关(P>0.05)。结论:CDK4的过度表达可能在喉鳞状细胞癌的进展中发挥了重要作用,喉癌组织中CDK4基因有扩增,但仍存在有CDK4 mRNA的过表达,或者CDK4虽有DNA扩增,但mRNA表达不足或未表达而造成CDK4蛋白未测出。此外,是否在喉癌的发生发展中CDK4的异常还表现在基因突变、缺失等其他基因改变尚有待进一步实验的证实。     

微波手术治疗早期声门型喉癌6例观察体会

目的 观察支撑喉镜下微波治疗早期声门型喉癌的效果.方法 采用微波治疗仪在支撑喉镜下对6例早期声门型喉癌患者进行显微手术治疗.6例均在全身麻醉下进行.术前、术后经电子喉镜检查声带,评估声带功能.结果 6例患者术后3个月,6个月,12个月门诊电子喉镜复查均无肿瘤复发.6例患者均保留了喉发声功能.结论 微波手术治疗早期声门癌创伤小、恢复快、手术及住院时间短,喉发生功能保护较好.     

纤维喉镜或支撑喉镜下微波治疗喉肿瘤40例

目的 寻找治疗喉部肿瘤的新方法。方法 在纤维喉镜或支撑下用向波治疗喉乳头状瘤、喉血管瘤、喉息肉和喉癌共４０例。全部得到随访,随访最长３．５年,最短１年。结果 除１例喉乳头状瘤恶变复发外,余均无复发,喉癌１年无瘤生存率１００％（１６／１６）,３年生存率１００％（８／８）。结论 在纤维喉镜或支撑喉镜下用微波治疗喉息肉、喉乳头状瘤和早期喉癌是一种有效的治疗方法。     

喉癌、喉良性病变及声带息肉组织HPV-DNA及P16蛋白的表达差异

目的:检测喉癌、喉良性病变组织及声带息肉组织中HPV-DNA及P16蛋白的表达水平,探讨HPV感染与喉癌发生的相关性。方法:收集2011年5月至2015年7月就诊于复旦大学附属金山医院耳鼻咽喉-头颈外科的256例患者,其中喉鳞状细胞癌34例、喉良性病变(非声带息肉)15例、声带息肉207例,男性184例、女性72例,中位年龄56岁。采用实时荧光PCR法检测喉鳞状细胞癌组织和喉良性病变组织HPV-DNA水平。采用免疫组化法观察喉癌组织、喉良性病变及声带息肉中P16蛋白的表达。结果:实时荧光PCR检测发现34例喉鳞状细胞癌组织中HPV-DNA阳性率为8.8%(3/34),喉良性病变均为阴性(0/15),两组间HPV-DNA阳性率差异无统计学意义。免疫组化染色显示喉鳞状细胞癌、喉良性病变、声带息肉组织P16蛋白阳性表达率分别为32.4%(11/34)、46.7%(7/15)和47.8%(99/207),其中声带息肉组织P16蛋白阳性率高于喉癌组织,差异有统计学意义(P=0.046)。结论:喉癌组织HPV-DNA阳性率略高于喉良性病变;P16蛋白在喉癌组织的表达略低于喉良性病变,明显低于声带息肉。     

神经生长因子受体TrkA在喉癌中的表达及意义

目的:探讨神经生长因子受体TrkA在人喉鳞状细胞癌(喉癌)中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学方法,检测34例喉癌组织、11例癌旁黏膜、6例喉乳头状瘤及8例正常声带黏膜组织中TrkA的表达.结果:34例喉癌组织中TrkA受体蛋白均有阳性表达,喉癌、癌旁黏膜及喉乳头状瘤中TrkA的表达均高于正常声带黏膜;喉癌伴随颈部淋巴结转移的病例组中TrkA表达的强阳性率明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05).结论:TrkA的高表达与喉癌的恶性进展及淋巴结转移有相关性,这为临床诊断及治疗喉癌提供了新的途径.     

喉癌部分喉切除术后复发的挽救治疗效果分析

目的探讨喉癌部分喉切除术后复发患者的有效治疗方法。方法回顾分析我院1999年1月~2005年10月收治的喉癌部分喉切除术后肿瘤复发并行挽救治疗的26例临床资料。结果 26例首次术后至复发时间平均22个月,均行挽救治疗,术式包括全喉切除、根治性颈淋巴结清扫、支撑喉镜复发癌局部切除、喉次全切除加选择性颈淋巴结清扫、发声重建术等,11例同时行术后放疗,3例单纯行放疗。治疗后有4例再复发,均行第3次手术,其中1例行第4次手术。随访5年,挽救治疗后总体3年生存率57.69%(15/26),5年生存率34.62%(9/26)。结论喉癌部分喉切除术后复发患者以局部复发为主,目前挽救性治疗仍以全喉切除为主,患者预后差。     

喉癌全喉切除术后患者生活质量调查研究

目的:探讨喉癌全喉切除术后患者的生活质量,分析其影响因素.方法:对36例喉癌全喉切除患者进行问卷调查.结果:本组全喉切除患者生活质量总体评分仅为54.97分.生活质量影响因素主要是年龄、婚姻状况、文化程度、自理能力、发音状况、经济收入、是否参加社会活动等.结论:护理人员应针对患者的实际情况,加强对喉癌全喉切除患者的随访和支持,以改善患者的生活质量.     

喉癌组织中抗凋亡基因检测与患者术后生活质量相关性研究

目的检测了40例喉癌及喉正常声带组织的抗凋亡基因bcl-2,探讨其与术后生活质量相关性。方法采用免疫组化多重PAP方法进行检测。结果40例喉癌组织中15例bcl-2阳性,占37.5%。阳性反应主要位于喉癌细胞中,呈棕黄色细颗粒状。6例喉正常组织中1例阳性,阳性反应于腺体中。bcl-2表达阳性组比阴性组生存曲线明显下降,死亡危险度提前1～4年。结论bcl-2表达与喉癌患者术后生活质量和预后生存率有关。