喉癌组织中凋亡相关基因Survivin蛋白表达的临床意义

目的:探讨Survivin蛋白在喉癌组织中的表达与患者术后生存期的关系。方法:采用免疫组织化学 (SP法)染色技术对40例喉癌组织(喉癌组)和5例正常喉黏膜组织(对照组)石蜡标本进行Survivin蛋白表达的 检测,并采用图像分析对表达结果进行定量分析。结果:Survivin在喉癌组中的阳性表达显著高于对照组(P< 0.01);在有淋巴结转移的喉癌组织中Survivin蛋白的表达高于无淋巴结转移的喉癌组织(P<0.05);不同性别、 年龄的患者喉癌组织中Survivin蛋白的表达差异均无统计学意义(均P>0.05);Survivin蛋白的表达与喉癌的 TNM分期有关(P<0.05),与患者生存期呈负相关关系(r=-0.646,P<0.01)。结论:喉癌组织Survivin蛋 白的表达与TNM分期、淋巴结转移和预后有密切关系,它的高表达提示肿瘤患者预后不良;Survivin基因在喉癌 组织中表达上调,提示该基因在喉癌的发生、发展中起重要作用     

STAT3在喉癌中的表达特征及其与Survivin表达的关系

目的探讨信号传导与转录激活因子3（STAT3）在喉癌中的表达特征及其与Survivin表达的关系。方法采用免疫组织化学方法检测40例喉鳞状细胞癌组织和12例喉正常黏膜组织中STAT3、磷酸化STAT3（p-STAT3）蛋白和Survivin蛋白的表达;运用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测上述组织中STAT3 mRNA和Survivin mRNA的表达。结合病例资料进行统计学处理,采用χ2、t检验。结果喉癌组织中STAT3、p-STAT3和Survivin蛋白及STAT3 mRNA和Survivin mRNA的阳性表达率均明显高于正常喉黏膜（P＜0.01）; STAT3、p-STAT3蛋白和STAT3 mRNA在喉癌中的表达均与喉癌的临床分期相关（分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01）;Survivin蛋白和 Survivin mRNA在喉癌中的表达与临床分期及淋巴结转移相关（P＜0.01,P＜0.01）STAT3和Survivin的表达呈正相关。结论STAT3的过量表达可能在喉癌的发生、发展中起重要作用,它的异常激活也可能通过上调Survivin基因的表达,延长喉癌细胞生存时间。     

CD44v和nm23—H1基因蛋白在喉癌中的表达及其临床意义

目的 探讨ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在喉癌的表达及其临床意义。方法 采用１９９６年１０月￣１９９８年８月我科住院患者喉鳞癌手术新鲜标本６０例（其中男５２例,女８例,年龄４１￣７７岁）,癌旁组织２０例,喉正常粘膜１２例。采用流式细胞术（ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ）测定了ＣＤ４４ＶＴ ＮＭ２３－Ｈ１蛋白在喉癌的定量表达。结果 ①ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在喉癌组织中的定量表达均高于喉     

喉咽癌患者多药耐药相关蛋白基因的表达及 …

目的 研究多药耐药基因及其产物Ｐ－糖蛋白、多药耐药相关蛋白基因的表达与喉咽癌２临床病理特征之间的关系。方法 应用逆转录－多聚酶链式反应技术,检测了２５例晚期喉咽癌患者ＭＤＲ－１ｍＲＮＡＭＲＰｍＲＮＡ基因的表达;采用免疫组化ＳＡＢＣ法对６０例患者喉咽癌标本ＭＤＲ－１基因产物Ｐ－ｇｐ进行检测。结果 初治喉问罪 癌组织中ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ及Ｐ－ｇｐ的阳性表达率分别为４８％和３８．３％,在ＲＴ－ＰＣＲ检测     

喉癌多药耐药基因1表达沉默后紫杉醇诱导凋亡的研究

目的研究喉癌耐药细胞系(LSC-1/TAX)中MDR1基因表达被沉默后肿瘤细胞对紫杉醇凋亡诱导作用的反应变化。方法表达MDR1 shRNA的慢病毒颗粒转染喉癌耐药细胞系LSC-1/TAX,观察干扰前后紫杉醇诱导喉癌细胞的凋亡改变。采用琼脂糖凝胶电泳进行凋亡定性实验;Giemsa染色观察凋亡细胞的形态学改变;Annexin V-APC/7-AAD双染后,流式细胞仪对凋亡细胞进行定量。结果药敏组细胞发生早期凋亡百分比为(50.95±4.47)%,实验组为(51.04±3.96)%,耐药组为(8.60±1.25)%,对照组为(9.05±1.57)%。实验组与耐药组差异有统计学意义(P<0.05)。喉癌耐药细胞系中MDR1表达被沉默后,细胞对紫杉醇的敏感性提高,凋亡增加。结论表达MDR1 shRNA的慢病毒颗粒可有效地干扰喉癌耐药细胞系中MDR1基因表达,提高喉癌细胞对紫杉醇的凋亡敏感性。     

CD44v和nm23-H1基因蛋白在喉癌中的表达及其临床意义

目的　探讨CD4 4v和nm2 3 H1蛋白在喉癌的表达及其临床意义。方法　采用 1996年10月～ 1998年 8月我科住院患者喉鳞癌手术新鲜标本 60例 (其中男 5 2例 ,女 8例 ,年龄 4 1～ 77岁 ) ,癌旁组织 2 0例 ,喉正常粘膜 12例。采用流式细胞术 (flowcytometry,FCM)测定了CD4 4v和nm2 3 H1蛋白在喉癌的定量表达。结果　①CD4 4v和nm2 3 H1蛋白在喉癌组织中的定量表达均高于喉正常粘膜的表达。②CD4 4v蛋白的表达与喉癌转移、临床分期和病理学分级呈正相关 ,与性别、年龄、肿瘤大小、病程、T分级及喉癌分型无关。③nm2 3 H1蛋白的表达与喉癌转移、临床分期呈负相关 ;与年龄、肿瘤大小有关 ,而与性别、病理学分级、T分级、喉癌分型和病程无关。④两基因蛋白的表达呈负相关。结论　CD4 4v和nm2 3 H1基因在喉癌转移过程中可能起着共同调控作用 ,但作用相反     

喉癌eIF4E基因的体外转录

目的 克隆喉癌eIF4E基因编码区的cDNA序列,并构建其体外转录载体,获得eIF4E基因编码区mRNA,以便进一步的体外实验研究.方法 利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法,以喉癌Hep-2细胞mRNA为模板,扩增获得全长eIF4E编码区eDNA,与pMD18T连接作全自动测序,并利用基因重组技术构建eIF4E基因mRNA体外转录载体pGEM-7 zf eIF4E.用内切酶XhoI将含有eIF4E基因mRNA的pGEM-7 zf eIF4E质粒消化成线性,以此为模板体外转录出用[a-32P]UTP标记的靶eID4E基因编码区mRNA.结果 经测序证实获得的eIF4E基因cDNA序列与Gene Bank一致,并成功构建了体外转录质粒pGEM-7 zf eIF4E.结论 成功构建了体外转录质粒pGEM-7 zf eIF4E,为进一步研究eIF4E的功能奠定了基础.     

iNOS在喉癌中的表达及其临床意义

目的探讨诱生型一氧化氮合酶(iNOS)在喉癌中的表达及其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测40例不同病理分化程度、临床分期的喉鳞癌组织、癌旁组织及10例喉乳头状瘤、7例正常喉黏膜中诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达。结果喉癌组织iNOSmRNA阳性表达率为85.00%,较对照组癌旁组织(20.00%)、良性肿瘤组(40.00%)、正常人组(0/7)明显增高(P<0.0001,P<0.005,P<0.0001),有淋巴结转移组(19/19)显著高于无淋巴结转移组(71.42%)(P<0.05),iNOSmRNA阳性表达与肿瘤原发部位及T分级无关,与细胞分化程度呈负相关。结论喉癌组织中存在iNOS,它可能通过合成一氧化氮(NO)在分子水平参与了喉癌的发生、发展。     

喉及下咽鳞状细胞癌的ras基因突变热点的研究

目的 :研究 ras基因 ( N-ras,K-ras,H-ras)第 1 2密码子在喉及下咽癌组织中的突变情况。方法 :采取多聚酶链延伸反应 -限制性片段长度多态性分析 ( polymerase chain reaction-restricted fragmentlength polymorphism,PCR-RFLP)方法 ,对 3 7例喉癌、下咽癌手术标本进行三种 ras基因测定。结果 :三种 ras基因的 1 2位密码子在喉癌及下咽癌组织中的突变率为 3 5.1 % ,其中 N-ras基因的 1 2密码子突变率为 1 6.2 % ( 6/3 7) ,K-ras变突率为 1 3 .5% ( 5/3 7) ,H-ras基因的突变率为 5.4 % ( 2 /3 7)。其突变率与喉癌、下咽癌组织分化类型和分化程度无明显相关性。结论 :ras基因第 1 2密码子是喉癌、下咽癌的突变热点。     

Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义,进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制.方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者,术中从肿瘤中心部位取癌组织(实验组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取癌旁正常组织(对照组).应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平,冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达;经半定量分析,stathmin mRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平(t=9.655,P＜0.05).免疫组织化学发现,stathmin蛋白在26例(26/38,68.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在13例(13/38,34.2%)患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达;stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率(x2=8.901,P＜0.05).同时发现,stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组(t=6.284,x2=5.810,P＜0.05),有颈部淋巴转移组明显高于无转移组(t=9.350,x2=6.923,P＜0.05).结论 stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织,在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌,并且与颈淋巴转移有关.stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系,并可能与喉癌的预后有关.     

P73基因在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨P73基因在喉鳞癌中的表达。方法用原位杂交方法检测49例喉鳞癌组织、19例声带息肉、12例癌旁组织及8例非典型增生组织中P73的表达。结果喉鳞癌组织P73阳性表达26例定位于胞浆，9例定位于腺体，5例定位于胞核，9例未表达。P73阳性表达率在喉鳞癌组织、声带息肉、癌旁组织及非典型增生组织中分别为53．06％(26／49)，36．84％(7／19)，41．67％(5／12)，37．5％(3／8)，P73与喉鳞癌的临床分型、分期无相关性。结论P73基因可能并非喉癌癌变过程中的靶基因，在喉癌的发生发展中可能不发挥重要作用。     

整合素连接激酶mRNA的表达与喉鳞状细胞癌相关性研究

目的:探讨整合素连接激酶(ILK)与喉鳞状细胞癌(LSCC)发生、发展的关系。方法:应用RT-PCR方法,检测64例LSCC标本(LSCC组)和10例正常喉黏膜组织(对照组)中ILK mRNA的表达。结果:LSCC组ILK mRNA表达(0.644±0.098)明显高于对照组(0.032±0.026),差异有统计学意义(P<0.05);ILK mRNA在有淋巴结转移组织中的表达(0.867±0.247)明显高于无淋巴结转移组织(0.389±0.199),差异有统计学意义(P<0.05)。随着LSCC临床T分期的发展,ILK mRNA的表达均相应升高,但相邻两组间差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:ILK的高表达对LSCC的形成和发展起重要作用;ILK mRNA高表达与LSCC淋巴结转移密切相关,提示ILK可能成为预测LSCC转移和预后的生物学指标。     

nm23基因表达与喉鳞癌发展相关性研究

应用免疫级组织化学方法对３６例喉鳞癌患者的ｎｍ２３基因产物／核苷二磷酸激酶进行检测。结果：喉鳞癌中ｎｍｎ２３／ＮＤＰＫ表达的阳性率为６９．４％；随着肿瘤的增大及淋巴结转移的出现，ｎｍ２３表达程度降低，Ｔ１－２病变高于Ｔ３－４病变，Ⅰ－Ⅱ期喉癌高于Ⅲ－Ⅳ期喉癌。     

喉鳞癌组织Fas和FasL蛋白表达及临床意义

目的 :探讨Fas、FasL蛋白在喉鳞癌 (LSCC)组织中的表达及意义。方法 :采用SABC免疫组化法检测 4 2例LSCC及 2 0例手术切缘正常组织中Fas及FasL ,并与LSCC病理分级、临床分期及颈淋巴结转移相比较。结果 :Fas及FasL在LSCC中阳性率分别为 4 7.6 %和 6 4 .3% ,与在正常喉组织阳性率 90 .0 %和 2 0 .0 %相比 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。Fas阳性率与肿瘤分级分期无显著相关性 (P >0 .0 5 ) ,与肿瘤转移有关 (P <0 .0 5 ) ;FasL阳性率与肿瘤分级、分期及转移密切相关 (P <0 .0 5 )。Fas与FasL的表达无显著相关性。结论 :Fas及FasL表达异常可能参与喉鳞癌的发生和发展 ;检测Fas与FasL可望作为判定喉鳞癌预后的潜在指标。     

Survivin基因在喉癌中的表达及意义

目的 研究凋亡抑制蛋白Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的表达,探讨其在喉癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学技术,研究42例喉癌标本、20例癌旁组织、20例喉角化症、10例正常喉黏膜中Survivin 蛋白的表达情况;并用RT-PCR技术检测喉癌细胞株Hep-2中Survivin mRNA的表达。结果 正常喉黏膜中无Survivin表达, 喉癌组织中Survivin 蛋白的表达 (66.6 %) 明显高于癌旁组织 (40.0 %)和喉角化症(35.0 %)(P<0.001),喉癌组织中Survivin表达与临床分期、病理分级及有无颈淋巴结转移无明显相关性(P > 0.05)。喉癌细胞株Hep - 2中有较强Survivin mRNA的表达。结论 Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的高表达可能与喉癌的发生关系密切,具体机制有待于进一步研究。     

喉鳞状细胞癌中人类错配修复蛋白2与多药耐药蛋白表达及相关性

目的研究人类错配修复蛋白2（human muts homolog 2,hMSH2）在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）中的表达及与多药耐药基因蛋白P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达的相关性,两者表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化En-ViSion法检测喉鳞癌及声带息肉组织中hMSH2和P-gp的表达情况,同时检测hMSH2阳性表达和阴性表达组中P-gp的表达情况。结果 hMSH2蛋白在喉鳞癌组织中阳性表达率为59%,明显低于声带息肉90%（χ2=12.741,P〈0.05）,P-gp在喉鳞癌中阳性表达率为76%,显著高于声带息肉阳性表达率45%（χ2=13.260,P〈0.05）。hMSH2阳性的喉鳞癌中P-gp阳性率为69%,hMSH2阴性的喉鳞癌中P-gp阳性率为87%,差异有统计学意义（χ2=4.479,P〈0.05）。hMSH2表达与喉鳞癌分化程度、临床分期、淋巴结转移相关。P-gp表达与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移及T分级相关。结论 hMSH2与P-gp在喉鳞癌发生及恶性演进中起一定作用,hMSH2可能通过影响P-gp表达导致喉鳞癌多药耐药的产生。