肾上腺髓质素在新生大鼠缺氧缺血模型脑组织中含量变化及对脑细胞凋亡的影响

目的探讨ADM对新生大鼠缺氧缺血后脑细胞的含量变化及对脑细胞凋亡的影响。方法选用7日龄89只Wistar大鼠制成HIE模型后，将其中29只分为正常组、HIE组及ADM组。模型制备后48h断头处死，取左侧脑组织测ADM含量；将60只分6组，正常组、HIE组、ADM组（予ADM0．5nmol／kg、1．0nmol／kg、2.0nmol／kg3种剂量）、前列腺素E1组。于模型后即刻腹腔注射，模型制备后48h取脑组织，行TUNEL法及HE染色，测定细胞凋亡数、凋亡百分率、凋亡面密度及数密度，与正常组、HIE组进行比较分析。结果HIE组在凋亡细胞数、凋亡百分率、凋亡面密度及数密度明显高于正常组，差异有显著性（P〈0．01）；不同剂量组间比较差异无显著性。HIE组脑组织ADM含量明显高于正常组，差异有显著性（P〈0．01）。结论ADM在缺氧缺血后脑组织内含量明显升高，可降低脑细胞在缺氧缺血后的凋亡，对脑细胞有保护作用。     

新生儿缺氧缺血性脑病血浆肾上腺髓质素水平及其临床意义

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血浆肾上腺髓质素(ADM)水平的变化及临床意义。方法应用放射免疫法对60例HIE患儿和28例正常足月新生儿的血浆ADM水平进行动态观察。结果HIE患儿急性期血浆ADM水平较恢复期及正常对照组显著升高(P均<0.05);HIE恢复期与对照组无显著性差异(P>0.05);急性期重度HIE组明显高于对照组、轻度组及中度组,差异有显著性(P均<0.05);轻、中度HIE组与对照组无显著性差异(P均>0.05)。结论ADM参与了新生儿HIE的发病过程;ADM可作为重度HIE的早期标志物;ADM在HIE中可能具有一定的神经保护作用。     

二氧化硫预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠二氧化硫/天门冬氨酸氨基转移酶体系的影响

目的 探讨二氧化硫(SO2)预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及对心肌组织中SO2/天门冬氨酸氨基转移酶(AAT)体系的影响.方法　24只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(I/R组)、SO2预处理组(I/R+S组).结扎大鼠左侧冠状动脉30 min,再灌注120 min,制备心肌缺血再灌注模型;I/R+S组大鼠在缺血前10 min用1 μmoL·kg-1SO2颈外静脉注射预处理.采用全自动生化检测仪检测大鼠血浆CK和LDH水平,用高效液相色谱法测定其心肌组织中SO2水平,采用蛋白免疫印迹法检测其心肌组织AAT1和AAT2蛋白表达水平.结果 缺血再灌注后,I/R组及IR+S组血浆CK、LDH水平均较假手术组明显增高(P＜0.01,0.05),I/R+S组血浆CK、LDH水平较I/R组均明显降低(Pa＜0.05).与假手术组比较,I/R组大鼠心肌组织匀浆中SO2水平显著降低(P＜0.05),I/R+S组无明显变化;I/R+S组SO2水平较I/R组显著增高(P＜0.01).I/R组大鼠心肌组织AAT1蛋白表达较假手术组显著降低(P＜0.01),I/R+S组与假手术组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而I/R+S组AAT1蛋白表达则较I/R组显著增高(P＜0.01);AAT2蛋白表达在3组间的差异无统计学意义(P＞0.05).结论　SO2预处理可明显降低心肌缺血再灌注大鼠血浆中心肌酶活性,具有心肌保护作用,并对心肌组织中SO2/AAT体系具有上调作用.     

缺氧缺血性脑病新生儿血浆肾上腺髓质素及一氧化氮水平变化

目的 探讨缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血浆肾上腺髓质素(ADM)和一氧化氮(NO)水平的变化及临床意义.方法 分别测定51例HIE患儿和15例正常对照组足月新生儿血浆ADM和NO的水平.结果 (1)HIE组患儿血浆ADM和NO水平较正常对照组明显升高,差异有非常显著性(P<0.01);轻度、中度和重度HIE组血浆ADM和NO水平升高,两两比较差异有非常显著性(P<0.01).(2)HIE组患儿血浆ADM和NO的含量呈正相关关系(r=0.82,P<0.01).(3)与头部CT正常组比较,头部CT异常组血浆ADM和NO水平明显升高,差异有非常显著性(P<0.01).结论 ADM和NO都参与了新生儿HIE的病理生理过程,可以作为判断HIE病情严重程度的早期标志物;ADM在新生儿HIE中可能具有一定的神经保护作用.而NO对脑组织的损伤则是双向的.     

缺氧缺血再灌注脑损伤新生大鼠早期核因子κB信号通路的变化

目的 探讨缺氧缺血再灌注脑损伤(HIRBD)新生大鼠早期核因子κB(NF-κB)信号通路相关基因的表达变化.方法 24只7口龄新生SD大鼠,雌雄各半,随机分成3组:正常对照组(A组)、缺氧缺血再灌注2 h组(B组)及缺氧缺血再灌注4 h组(C组),每组8只.断头取其脑海马,抽提总RNA.运用基因芯片及生物信息分析技术检测NF-κB信号通路中相关信号分子的表达.结果 与A组比较,B组单核细胞趋化蛋白2、双特异性磷酸酶1、FBJ成骨肉瘤癌基因(Fos)和Toll样受体9(Tlr9)基因表达上调,半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶1、8(Caspase-1、8)、促分裂原活化蛋白激酶激酶6、细胞外信号调节蛋白激酶和Ras基因同源基因家族成员a基因表达下调.C组Fos、IL-1β和Tlr6基因表达均上调,Caspase-1、细胞外基质蛋白1、溶血磷脂酸相关的G蛋白偶联受体、黏膜相关淋巴样组织转运蛋白1、NF-κB抑制因子激酶epsilon和Ras基因同源基因家族成员c基因表达均下调.结论 在新生大鼠HIRBD早期阶段,主要通过Tlrs诱导NF-κB激活,从而调控下游炎性反应、细胞凋亡及细胞增殖相关基因的表达,参与HIRBD的病理生理过程.     

缺血再灌注损伤大鼠脑组织脑红蛋白表达的变化

目的探讨脑缺血再灌注损伤大鼠脑红蛋白(NGB)表达的变化与再灌注损伤时间的关系。方法建立大鼠脑缺血再灌注损伤动物模型,测定缺血再灌注损伤1h、4h、8h、16h、32h、64h、128h大脑皮质NGB表达的变化,对实验动物进行神经行为功能测试,并与假手术对照组进行比较。结果缺血再灌注损伤组与假手术组各时点比较,大脑皮层NGB阳性神经元呈现先上升后下降的趋势;而脑非缺氧性损伤侧神经元NGB阳性表达不随时间变化而改变。缺血再灌注损伤组缺血侧大脑皮层呈现延缓性脑梗死过程,各时间点组织切片显示缺血中心部位(纹状体和皮层外侧区)神经元损伤发生在缺血后8h,随着缺血时间的延长逐渐向半暗带区扩展,脑梗死灶逐渐扩大。再灌注1～128h,缺血侧缺血半暗带皮层NGB阳性神经元呈现先上升后下降的趋势,而非缺血侧对称区域皮层NGB阳性表达不随时间变化。缺血再灌注损伤后1h,缺血侧扣带皮层NGB阳性神经元数量无明显改变;再灌注损伤8～64h,在同一只大鼠脑组织缺血侧皮层NGB的表达与对侧NGB的表达存在显著差异:损伤8h,NGB阳性神经元数量开始增加(A=0.04±0.004P<0.05),损伤16h,NGB阳性神经元数量显著增加(A=0.06±0.003P<0.01),损伤32h达高峰(A=0.07±0.006P<0.05)。损伤64h,NGB阳性神经元数量显著减少(A=0.03±0.007P<0.05);损伤128h,缺血侧与非缺血侧扣带皮层NGB阳性神经元数量基本相当(A=0.04±0.006P>0.05),而脑非缺血侧脑组织NGB阳性细胞表达变化不大,各组间差异比较无统计学意义(P>0.05)。结论脑缺血再灌注损伤大鼠神经元NGB的表达变化呈现时间规律性,提示NGB对缺氧缺血性脑损伤有保护作用。     

外源性褪黑素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠血浆促肾上腺皮质激素和皮质酮的影响

目的 探讨外源性褪黑素(MT)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮的影响.方法 选取出生7 d内新生SD大鼠144只,随机分为治疗组、模型组、假手术组、正常对照组,每组36只,每组6个时间点各6只,采用80 mL/L氮氧混合气的密闭常压低氧舱建立HIBD模型.治疗组腹腔注射MT 10 mg/kg;模型和假手术组注射乙醇载体溶液(0.05 g/L)10 mg/kg;正常对照组不作任何干预,各组分别于HIBD完成后第2.4、8、12、24、48 h 6个时间点暴露心脏,右心室采血.采用放射免疫分析法(RIA)检测各组血浆ACTH和皮质酮水平的变化.采用SPSS 12.0软件进行多个样本均数间的显著性分析.结果 治疗组和模型组HIBD应激反应发生后2 h血浆ACTH和皮质酮水平显著升高,显著高于正常对照组(Pa＜0.01),4 h达高峰;治疗组24 h已基本恢复正常水平(Pa＞0.05),模型组48 h与正常对照组比较仍有显著性差异(Pa＜0.01).治疗组ACTH和皮质酮在2、4、8、24、48 h均明显高于假手术组,差异有显著性意义(Pa＜0.05);假手术组血浆ACTH和皮质酮水平4 h已恢复正常水平,与正常对照组相比无显著性差异(Pa＞0.05).结论 外源性MT通过降低血浆ACTH和皮质酮水平,抑制垂体,肾上腺皮质系统的兴奋性,减轻HIBD过度应激反应.     

慢性心力衰竭患儿血浆肾上腺髓质素和C型利钠肽的变化

目的 探讨慢性心力衰竭(CHF)患儿血浆肾上腺髓质素(ADM)和C型利钠肽(CNP)水平变化及其临床意义.方法 42例CHF患儿心功能按修订Ross和Reithman评分系统,心功能Ⅱ级(3～6分)16例、Ⅲ级(7～9分)14例、Ⅳ级(10～12分)12例,对照组11例.采用同位素放射免疫分析法测定血浆ADM和CNP水平,超声心动图测定左心室射血分数(LVEF)及E/A值.结果 1.对照组血浆ADM为(74.39±53.99)ng/L,CNP为(92.59±59.46)ng/L;CHF组血浆ADM为(218.27±106.53)ng/L,CNP为(190.27±108.38)ng/L,两组比较均有显著差异(P均=0).2.血浆ADM水平与CHF严重程度呈正相关,不同心功能级别患儿血浆ADM水平排序为Ⅱ级＜Ⅲ级＜Ⅳ级,分别与对照组比较显著差异性(P均＜0.05).心功能Ⅳ级和Ⅱ、Ⅲ,Ⅲ、Ⅳ级和对照组血浆CNP水平比较有显著差异(P均＜0.05);而心功能Ⅱ级和对照组、Ⅱ和Ⅲ级血浆CNP水平比较差异均无显著意义(P均＞0.05).3.血浆ADM水平升高与LVEF呈负相关(r=-0.69 P＜0.001),与E/A呈正相关(r=0.34P＜0.01);血浆CNP水平升高与LVEF呈负相关(r=-0.48 P＜0.001),与E/A无相关(r=0.27 P＞0.05).结论 ADM和CNP在CHF时发挥防御和代偿作用.ADM有可能成为评估小儿CHF严重程度和预测CHF预后新的生化指标.     

L-Arg和L-NAME对窒息新生鼠血浆ET及NO的影响

探讨一氧化氮(NO)的前体L-精氨酸(L-Arg)和NO合成酶(NOS)抑制剂L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对围产期窒息新生大鼠血浆内皮素(ET)及NO的影响.应用方法检测窒息新生大鼠及窒息前应用L-Arg或L-NAME预处理的新生鼠血浆ET及NO的水平,并设正常对照.结果显示窒息组血浆ET水平较对照组显著升高(P＜0.01),血浆NO虽较正常对照组升高,但无统计学意义(P＞0.05);L-Arg组血浆ET水平较窒息组显著下降(P＜0.01);而血浆NO则显著升高(P＜0.01);L-NAME组血浆ET水平较对照组和L-Arg组显著上升(P＜0.01),NO浓度较窒息组无显著下降(P＞0.05).可以认为,L-Arg不仅使内源性NO水平显著升高,而且能有效地降低窒息新生大鼠血浆ET的水平;L-NAME则作用相反,NO合成抑制可增加ET水平.     

白藜芦醇对大鼠肠缺血再灌注致肠黏膜通透性改变的影响

目的 探讨白藜芦醇(RES)对肠缺血再灌注致肠黏膜损伤大鼠的保护作用及其可能机制.方法 成年雄性SD大鼠24只随机分为假手术组、缺血再灌注损伤组、RES治疗组.假手术组仅分离肠系膜上动脉(SMA)而根部不夹闭.肠缺血再灌注损伤组和RES治疗组均用无损伤血管夹夹闭SMA根部,分别立即经阴茎背静脉注射9g·L-1盐水、RES( 20 mg·kg-1),45 min后放松血管夹形成再灌注.各组大鼠均于制模后6h采集静脉血和回肠标本.检测血清二胺氧化酶(DAO)及小肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)水平,应用原位末端转移酶标记法检测肠黏膜上皮细胞凋亡率,HE染色法观察肠组织病理损伤情况.结果 肠缺血再灌注6h后,RES治疗组DAO及IFABP水平与肠缺血再灌注损伤组比较显著减少[DAO:(1 650±1 150)U·L-1vs(2920±1 520)U·L-1;IFABP:(845.12±123.86) μg·L-1vs(1 443.76±174.62) μg·L-1,Pa＜0.05],但二组较假手术组[(630±150)U·L-1,(26.76±4.86)μg·L-1)]均显著增加(Pa＜0.05).假手术组大鼠肠绒毛顶部、固有层和黏膜下层只有少量散在分布的凋亡细胞,缺血再灌注损伤组大鼠肠黏膜凋亡阳性细胞数量较假手术组明显增加[(66.63±1.71)％ vs (9.60±1.76)％,P＜0.05],分布范围从绒毛顶部扩大到中、底部,固有层和黏膜下层,细胞凋亡亦明显加重;RES组大鼠肠黏膜细胞凋亡率[(46.72±1.50)％]明显低于缺血再灌注损伤组(P＜0.05).结论 RES对肠缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与其抑制肠黏膜上皮细胞凋亡有关.     

Brain death

Death is a natural process, but the definition of death varies depending on the cultural and religious background, all over the world. The historical development of the concept and the current criteria in the determination of brain death must be well understood. Termination of life support measures in a brain dead child should be undertaken after due consideration of moral, ethical, psychosocial and legal issues.     

选择性头部亚低温对新生儿缺氧缺血性脑损伤的治疗作用

目的 探讨选择性头部亚低温对足月新生儿窒息后缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）的神经保护作用及其安全性。方法 将２２例重度窒息足月新生儿随机分为治疗组（１１例）和对照组（１１例）。治疗组采用选择性头部降温方法,维持鼻咽温度为（３４．０±０．２）℃,持续７２ ｈ;对照组不进行降温治疗。两组均于治疗后６４～７２ ｈ测脑脊液神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）,血ＣＫ－ＭＢ,尿β２微球蛋白（β２－ＭＧ）等。于治疗前、生后１０ ｄ和３个月进行常规１６导ＥＥＧ检测,并采用新生儿神经行为评分（ＮＢＮＡ）、婴幼儿发育量表（ＣＤＣＣ）进行神经行为发育评价。结果 治疗组脑脊液ＮＳＥ为（１９．５±２．２）μｇ／Ｌ,明显低于对照组[（２４．６±５．３）μｇ／Ｌ］（Ｐ ＜ ０．０１）;生后２８ ｄ治疗组ＮＢＮＡ评分为（３６±３）分,低于对照组[（３２±２）分］（Ｐ＜０．０１）。治疗前两组ＥＥＧ均异常,生后１０ｄ,３个月治疗组ＥＥＧ均正常,对照组２例持续重度异常。两组患儿血ＣＫ－ＭＢ及尿β２－ＭＧ差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论 选择性头部亚低温对足月新生儿窒息后ＨＩＢＤ可能具有神经保护作用,临床上具有安全性。