一氧化氮合酶抑制剂对培养人分泌中期子宫内膜细胞内钙的影响

目的 观察已受雌、孕激素影响的人子宫内膜细胞在一氧化氮（NO）作用下的细胞生理变化。方法 取人分泌中期子宫内膜，体外原代培养24-48h，用钙荧光探剂Fluo-3-AM负荷钙离子，采用激光扫描共聚焦显微镜测定加入一氧化氮合酶抑制剂（L-NAME）后，子宫内膜细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2 ]i）的动态变化。结果 加入L-NAME后，腺上皮细胞和间质细胞[（Ca^2 ]i立即开始升高，400s后上升至高峰，900s时稍有下降，然后继续升高并保持在高水平，同时发现腺上皮细胞和基质细胞对L-NAME的反应不同。结论 在雌、孕激素作用的基础上，NO通过改变子宫内膜细胞[Ca^2 ]i进行信号转导，实现其生理效应。     

一氧化氮合酶抑制剂对培养的人分泌中期子宫内膜细胞内钙的影响

目的 观察已受雌、孕激素影响的人子宫内膜细胞在一氧化氮（NO）作用下的细胞生理变化。方法 取人分泌中期子宫内膜,体外原代培养24~48 h,用钙荧光探剂Fluo-3-AM 负荷钙离子,采用激光扫描共聚焦显微镜测定加入一氧化氮合酶抑制剂（L-NAME）后,子宫内膜细胞内游离钙离子浓度（［Ca2+］i）的动态变化。结果 加入L-NAME后,腺上皮细胞和间质细胞［Ca2+］i立即开始升高,400 s后上升至高峰,900 s时稍有下降,然后继续升高并保持在高水平。同时发现腺上皮细胞和基质细胞对L-NAME的反应不同。结论 在雌、孕激素作用的基础上,NO通过改变子宫内膜细胞［Ca2+］i进行信号转导,实现其生理效应。     

一氧化氮合酶在人子宫内膜和蜕膜的表达

为探讨一氧化氮（NO）在子宫内膜功能性活动中所发挥的作用,应用免疫组织化学技术检测人增生期,分泌期子宫内膜及早孕期蜕膜内皮型一氧化氮合酶（eNOS)和诱导型一氧化氮合(iNOS)的表达模式,结果发现,（1）增生期：仅内膜血管内皮细胞表达eNOS,iNOS不表达于内膜的任何组份,（2）分泌期：两种NOS都表达了子宫内膜的腺上皮和腔上皮,子宫内膜间质细胞未检测到NOS,（3）蜕膜组织,蜕膜组织腺上皮和腔上皮eNOS和iNOS的表达显增强,并且蜕间质细胞表达iNOS。分泌期子宫内膜和蜕膜表达eNOS和iNOS增加,表明此时NO的产量增多,而O又可能通过其扩张血管,松驰平滑肌和促凋亡的作用参与胚胎着床的发生和月红的形成。     

一氧化氮合酶在人子宫内膜和蜕膜的表达

为探讨一氧化氮(NO)在子宫内膜功能性活动中所发挥的作用,应用免疫组织化学技术检测人增生期、分泌期子宫内膜及早孕期蜕膜内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达模式.结果发现①增生期仅内膜血管内皮细胞表达eNOS,iNOS不表达于内膜的任何组份;②分泌期两种NOS都表达于子宫内膜的腺上皮和腔上皮.子宫内膜间质细胞未检测到NOS.③蜕膜组织蜕膜组织腺上皮和腔上皮eNOS和iNOS的表达明显增强,并且蜕膜间质细胞表达iNOS.分泌期子宫内膜和蜕膜组织表达eNOS和iNOS增加,表明此时NO的产量增多,而NO又可能通过其扩张血管、松弛平滑肌和促凋亡的作用参与胚胎着床的发生和月经的形成.     

L-NAME对肝硬化大鼠胃肠道中一氧化氮合酶亚型表达的影响

目的 研究一氧化氮合酶亚型（NOS1,NOS2,NOS3）在肝硬化大鼠胃肠道中的表达,并探讨NOS抑制剂左旋硝基精氨酸甲基酯（L-NAME）对其表达的影响。方法 制作大鼠四氯化碳中毒肝硬化模型,肝硬化模型大鼠随枘发为NO合酶（NOS）抑制剂治疗组和未治疗组,模型治疗组用L-NAME0.5mg.kg^-1.d^-1,胃内注入,每日1次,治疗10d,免疫组织化学染色显示胃肠道组织中型NOS的染色强度和分布,Western blot法检测胃肠道组织中各型NOS的表达。结果 模型组大鼠胃、小肠、结肠组织 的NOS染色强度显著弱于正常对照组和L-NAME治疗组大鼠。Western blot显示在肝硬化模型大鼠胃、小肠、结肠组织中的各型NOS表达均明显降低,L-NAME治疗后又恢复至接近正常。结论 肝硬化大鼠胃肠道组织中各型NOS的表达明显减少,L-NAME对其表达有调节作用。     

子宫内膜癌组织一氧化氮及一氧化氮合酶的检测及其意义

目的 检测子宫内膜癌、增生过长子宫内膜及正常子宫内膜组织中一氧化氮(NO)的浓度及一氧化氮合酶（NOS）的活性,探讨NO及NOS与子宫内膜癌之间的关系。方法 对25例子宫内膜癌患者进行NO、NOS测定并与对照组、正常组进行比较。结果 子宫内膜癌组织中NO浓度及NOS活性明显高于对照组（P<0.01）,且随分化程度的降低,NOS活性增强（P<0.001）,与恶性程度呈正相关。结论 NO浓度增高及NOS活性增强可能参与了子宫内膜癌发生及生长过程,与分化程度有关。子宫内膜癌组织中NOS活性增强是NO增多的重要原因之一。     

一氧化氮合酶抑制剂对近视眼视网膜的影响

为研究一氧化氮合酶（NOS）抑制剂对形觉剥夺性近视视网膜的影响,将出生6d的小鸡随机分组,分别于左眼玻璃体内注射30μl生理盐水或不同浓度的L－精氨酸甲酯（L－NAME）,缝合左眼。6d后,剪开缝线,检影验光后摘除眼球,进行光、电镜检查。结果显示：眼球缝合诱导小鸡形成近视,视网膜RPE细胞胞质内含有外节膜盘片断的吞噬体明显减少;注射高浓度L-NAME减轻了上述改变。结果表明,玻璃体内注射L－NAME对鸡眼近视网膜改变具有抑制作用。     

子宫内膜癌腹水中一氧化氮及一氧化氮合酶检测意义的初探

目的　检测子宫内膜癌及子宫肌瘤患者腹水中一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)的活性 ,探讨腹水中NO及NOS含量与子宫内膜癌之间的关系。方法　对 2 2例子宫内膜癌患者腹水进行NO及NOS测定并与子宫肌瘤组患者腹水进行比较。结果　子宫内膜癌患者腹水中NO浓度及NOS活性明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,且随子宫内膜癌手术病理分期的增加 ,NO浓度及NOS活性增高 (P <0 .0 0 1) ,并与肿瘤恶性程度呈正相关。结论　NO浓度及NOS活性的增加可能参与了子宫内膜癌发生及肿瘤发展、生长过程 ,与手术病理分期有关。子宫内膜癌组织及腹水中NOS活性增高是NO合成增多的重要原因之一。     

三氧化二砷对人肺腺癌Anip973细胞内[Ca2+]i的影响

目的研究三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌Anip973细胞内游离[Ca2+]i的影响.方法培养人肺腺癌Anip973细胞,用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察As2O3对人肺腺癌Anip973细胞内游离[Ca2+]i的影响;用生长曲线法测药物对肿瘤细胞增殖的影响.结果①LSCM显示As2O3 作用后的人肺腺癌细胞Anip973细胞内[Ca2+]i显著升高(P<0.001).②As2O3 对人肺腺癌细胞株Anip973细胞内[Ca2+]i升高作用具有剂量依赖性.③As2O3 能明显抑制人肺腺癌Anip973细胞的增殖.结论 As2O3 可能是通过升高人肺腺癌细胞内[Ca2+]i 来启动细胞凋亡机制,诱导肺癌细胞凋亡,从而抑制其增殖.     

一氧化氮合酶在卵巢异位内膜组织中的表达

目的:研究一氧化氮合酶(NOS)在正常卵巢组织和子宫内膜异位症卵巢异位内膜组织中的表达,以探讨NOS与子宫内膜异位症病因与病理生理之间的关系。方法:采用免疫组化SABC法检测了19例子宫内膜异位症卵巢异位内膜组织中诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,并选择17例健康妇女正常卵巢组织作对照,以计算机图像分析系统的光密度值(OD)及面密度值(AD)为判断指标,比较两者NOS的表达水平。结果:正常卵巢组织中iNOS、eNOS弱表达(iNOS平均OD值、面密度分别为0.178 6±0.013 80、.053 9±0.008 4,eNOS平均OD值、面密度分别为0.118 7±0.006 20、.021 5±0.006 9),而子宫内膜异位症卵巢异位内膜组织中两型一氧化氮合酶呈高水平表达(iNOS平均OD值、面密度分别为0.290 7±0.014 50、.256 4±0.017 3,eNOS平均OD值、面密度分别为0.288 9±0.012 1、0.248 3±0.015 7)。两者之间比较P<0.01,差异有显著性。结论:子宫内膜异位症患者卵巢异位内膜组织中NOS表达水平明显高于正常健康妇女正常卵巢组织,NOS可能在子宫内膜异位症的发生发展中起一定作用。     

周期性张应变对椎间盘纤维环细胞内游离钙离子浓度的影响

目的探讨周期性张应变对培养的大鼠椎间盘纤维环细胞内Ca2 浓度([Ca2 ])的影响及其可能机制.方法采用激光扫描共聚焦显微镜和Fluo-3/AM荧光探针标记技术,测定周期性张应变对纤维环细胞内[Ca2 ]的影响,并分析了EGTA、维拉帕米和氯化钆预处理对此作用的影响.结果应变为10%、频率为1 Hz的周期性张应变1 min使细胞内[Ca2 ]增加1.13倍;EGTA可以阻断此作用;而维拉帕米和氯化钆仅可部分阻断.结论周期性张应变使纤维环细胞内[Ca2 ]升高,细胞外钙内流起主要作用,且有不同的钙离子通道参与.     

内皮型一氧化氮合酶在卵巢异位子宫内膜组织中的表达和意义

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在异位子宫内膜腺上皮细胞中的表达及其在卵巢子宫内膜异位症中的作用。方法应用免疫组织化学SP法检测eNOS在30例卵巢异位子宫内膜和30例正常子宫内膜中的表达。结果eNOS在正常子宫内膜腺上皮细胞表达较弱或不表达,异位子宫内膜中eNOS有高强度的表达,明显高于正常子宫内膜(P<0.05)。结论eNOS在异位子宫内膜中呈持续性增强表达,提示eNOS可能与卵巢子宫内膜异位症的发生及进展有关。     

柴胡止血液、逍遥丸、归脾丸对人子宫内膜螺旋动脉内皮细胞一氧化氮合酶的影响

目的探讨柴胡止血液与逍遥丸、归脾丸治疗血证作用机制的差异。方法采用匀浆和酶消化法进行分离培养人子宫内膜螺旋动脉内皮细胞并测定其分泌的一氧化氮合酶（cNOS）的含量。结果柴胡止血液能降低内皮细胞分泌cNOS的含量（P〈0．05）;归脾丸和逍遥丸对子宫内膜螺旋动脉内皮细胞分泡cNOS的影响无统计学差异（P〉0．05）。结论柴胡止血液重在调肝止血,其作用机制和疗效与归脾丸和逍遥丸不尽相同。     

一氧化氮合酶在子宫内膜癌组织中的检测及意义

[目的]检测正常子宫内膜、增生过长子宫内膜及子宫内膜癌组织中一氧化氮合酶(NOS)的活性比,探讨NOS与子宫内膜癌间的关系.[方法]NOS活性及蛋白含量均用美国BACKMAN公司的核酸及蛋白分析仪检测.[结果]子宫内膜癌组织中一氧化氮合酶含量显著增高(P＜0.01),而增生过长子宫内膜和正常子宫内膜相比NOS含量无显著差异(P＞0.05),子宫内膜癌组织中,随分化程度的降低,NOS含量增多(P＜0.001),与恶性程度呈正相关.[结论]一氧化氮合酶含量的增多可能是子宫内膜癌发生及生长过程中的一个值得注意的因素.子宫内膜癌组织中NOS增高可能是NO合成增多的原因之一.     

新型一氧化氮合酶抑制剂对败血性休克大鼠升压作用的研究

观察一种新型一氧化氮合酶抑制剂对败血性休克大鼠血压的影响。结果表明该化合物有明显增加败血休克大鼠血压的作用,且优越必硝基精氨酸,可能开发出新的ＮＯＳ抑制剂。     

芳香化酶抑制剂治疗子宫内膜异位症的新进展

子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)是雌激素依赖性疾病,芳香化酶是雌激素合成的关键酶。近年来,越来越多的研究表明,芳香化酶抑制剂(Aromatase inhibitors,AIs)不论在治疗育龄期还是绝经后在子宫内膜异位症中均起作用。现就芳香化酶抑制剂的作用机理、治疗女性不同阶段子宫内膜异位症的临床应用及副作用方面进行综述。     

一氧化氮合酶抑制剂对大鼠创伤性休克的干预作用

目的 评价选择性诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂氨基胍(AG)和非选择性一氧化氮合酶抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对创伤性休克的治疗效果。方法 用44只SD大鼠制作创伤性休克动物模型。双侧股骨干砸伤后并经股动脉放血至平均动脉压(MAP)35～45mmHg(4．67～6．00kPa)，维持30min，然后回输失血和等量的林格氏液。随机分为休克组(10只)、AG组(根据复苏时静脉注射AG含量为2、8、60mg／kg．b．w．则分为AGⅠ、AGⅡ、AGⅢ组，各8只)、L-NAME组(10只，复苏时静脉注射L-NAME 8mg／kg．b．w．)，观察休克前后血浆NO浓度的动态变化及24h大鼠存活率。并留取肺、肝、肾、小肠组织，观察病理改变。结果 大鼠创伤性休克后，血浆NO水平明显高于休克前；AG各组动物复苏后血浆NO的水平明显降低，各脏器的病理损害亦显著减轻，存活率明显提高，并且AGⅢ组效果最好；L-NAME组动物复苏后血浆NO的水平也明显降低，各脏器的病理损害无明显变化，存活率无明显提高。结论 NO在创伤性休克的病理发展过程中起着重要作用，应用AG有助于创伤性休克的改善；而L-NAME能降低NO的水平，但对休克的预后无明显改善。     

17β-雌二醇诱导内皮型一氧化氮合酶活性增高及其与细胞内钙的关系

目的　研究 17β -雌二醇 (E2 )对新生小牛主动脉血管内皮细胞 (BAECs)中内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)活性的长期基因效应 ,并进一步探讨胞内钙信号途径在其中的作用。方法　采用培养的BAECs,同位素法测定eNOS的活性 ;Westernblot检测eNOS蛋白表达 ;荧光分光光度计法检测E2 对细胞内钙的影响。结果　 (1)E2 (0 .0 0 1,0 0 1,0 .1,1μmol/L)作用于BAECs 4 8h ,使eNOS活性分别增加 130 %± 2 7% ,178%± 19% ,14 2 %± 2 0 % ,14 4 %± 2 7%。E2 激活eNOS活性的作用被雌激素受体拮抗剂Tamoxifen(0 .1μmol/L)所阻断 ;(2 ) 0 .0 1μmol/LE2 作用于BAECs 1h对eNOS蛋白表达无明显影响 ,而作用 2 4h和 4 8h分别使eNOS蛋白表达增加了 2 76 %± 36 %和374 %± 2 0 % ;Tamoxifen明显抑制E2 处理 4 8h后诱导的eNOS蛋白表达 ,抑制率为 6 6 5 %± 7 4 % ;(3) 0 .0 1μmol/LE2 作用BAECs 4 8h ,分别使静息 [Ca2 + ]i增加了 70 .3± 2 1.5nmol/L ,使 10mmol/LATP诱导的BAECs[Ca2 + ]i峰值增加了 2 4 0 .2± 6 8 2nmol/L ,ATP诱导的 [Ca2 + ]i增加值 (峰值与静息值之差 )增加了 170 .5± 4 8.9nmol/L。结论　雌激素可通过长期基因效应而激活eNOS ,至少部分通过核ER介导 ,并与胞内钙动员有关     

诱导型一氧化氮合酶选择性抑制剂对大鼠免疫性肝损伤的影响

目的探讨大鼠免疫性肝损伤模型中一氧化氮（ＮＯ）的作用及诱生规律,诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）选择性抑制剂的作用机制。方法采用原位ＰＣＲ法对免疫损伤性肝细胞ＮＯＳ基因表达进行原位检测,并观察细胞培养上清中ＮＯ生成量及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性的变化。结果用卡介苗（ＢＣＧ,１５、３０、５０ｍｇ／只静脉注射）单独投与或与炎性细胞因子配伍（ＣＭ,含白细胞介素１β,干扰素γ,肿瘤坏死因子α及细菌脂多糖）可引起培养上清ＮＯ浓度及ＬＤＨ活性明显升高（均Ｐ＜０．０５）,ＮＯ生成量与肝损伤程度成正比,而与ＢＣＧ剂量成反比;大鼠免疫损伤性肝实质细胞ＮＯＳ基因表达以可溶性胞浆型ｉＮＯＳ为主;ｉＮＯＳ选择性抑制剂氨基胍在明显抑制细胞培养上清中ＮＯ生成（８３．４％,Ｐ＜０．０５）的同时,减轻肝细胞损伤的程度（３６．０％,Ｐ＜０．０５）;而转录抑制剂放线菌素Ｄ则加重肝损伤（增加２５．５％,Ｐ＜０．０５）。结论在免疫刺激条件下诱导生成的ＮＯ主要参与肝损伤机制