硅油眼并发性白内障晶状体上皮细胞超微结构观察

目的白内障是眼内硅油填充术后最常见的并发症,其具体的发病机制目前尚未完全明确。应用扫描电子显微镜及透射电子显微镜对硅油眼并发性白内障晶状体前囊膜及上皮细胞的超微结构进行观察分析,为其发病机制及病理改变的研究提供新的线索及依据。观察硅油填充眼并发性白内障晶状体前囊膜及晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)的超微结构改变,探讨硅油在并发性白内障的发生、发展中的作用。方法选取我科2006年5月至2007年10月行硅油取出术患者12例(12只眼),行白内障囊外(ECCE)或超声乳化(Phaco)联合硅油取出术,术中取晶状体前囊膜,浸入3%戊二醛固定液中固定后制作病理标本,分别在扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)下观察其超微结构改变。结果硅油眼并发性白内障在SEM下可观察到可见部分上皮细胞及ECM脱离前囊膜,晶状体前囊膜LECs游离面呈舌状或瓦片状,覆盖于相邻细胞顶部,并大片状缺失或脱离前囊膜。上皮细胞呈扁平立方形,细胞核呈圆形或椭圆形。TEM下观察晶状体前囊膜为均质的基底膜,前囊下LECs形态极不规则,呈长梭形或扁平状,相邻细胞结合也较疏松,可见大量大小不等空泡存在。LECs间以指状突紧密镶嵌或缝隙连接,线粒体肿胀,嵴消失。细胞核呈椭圆形,密度加深,核内染色质浓缩、边集、固缩呈典型的细胞凋亡表现。结论硅油可促进并发性白内障的发生、发展,硅油眼并发性白内障最终以LECs细胞凋亡为主要形式。     

核因子κB在年龄相关性白内障晶状体前囊膜的表达

目的研究核因子κB（NF-κB）在正常人、年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜上皮细胞中表达的差异,探讨NF-κB在年龄相关性白内障发病机制中的作用。方法收集白内障术中60例60眼年龄相关性白内障的前囊膜组织（白内障组）,选取正常供体5例10眼的透明晶状体前囊膜组织作为正常对照组。取白内障组30眼标本和正常对照组5眼标本用于免疫组织化学法检测NF-κBp65蛋白在晶状体前囊膜上皮细胞中的表达;另外白内障组30例标本及正常对照组的5例标本采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测NF-κBp65mRNA在晶状体前囊膜上皮细胞中的表达。结果正常晶状体前囊膜上皮细胞细胞质和细胞核中可见NF-κBp65蛋白的弱阳性表达,以细胞质为主;年龄相关性白内障晶状体前囊膜上皮细胞的细胞质和细胞核中NF-κBp65蛋白呈强阳性表达。白内障组NF-κBp65吸光度（A）值为0.1658±0.022,正常对照组为0.2889±0.043,差异有统计学意义（t=6.2109,P〈0.05）。白内障组NF-κBp65mRNA表达量为1.454±0.081,正常对照组为0.951±0.075,差异有统计学意义（t=12.9683,P〈0.05）。结论 NF-κB表达水平的升高与年龄相关性白内障的发病密切相关,其表达异常可能参与年龄相关性白内障的发生发展。     

葡萄膜炎并发白内障患者晶状体前囊膜中NLRP3炎症小体相关蛋白的表达和前囊膜超微结构改变

目的探究葡萄膜炎并发白内障患者晶状体前囊膜中NLRP3炎症小体相关蛋白的表达和前囊膜超微结构改变。方法随机选取2018年8月至2019年6月在我院诊治的葡萄膜炎并发白内障患者17例(22眼)作为试验组;老年性白内障患者10例(18眼)作为对照组。均于白内障超声乳化手术中环形撕囊获取前囊膜。采用免疫组织化学法检测两组患者晶状体前囊膜NLRP3炎症小体的三个组成结构NLRP3、Caspase-1和接头蛋白ASC的蛋白表达,并对前囊膜进行电镜观察。结果两组患者晶状体前囊膜中均有NLRP3炎症小体相关蛋白的表达;试验组晶状体前囊膜中NLRP3、Caspase-1及接头蛋白ASC(光密度值分别为0.383±0.067、0.313±0.058、0.335±0.035)表达水平均明显高于对照组(光密度值分别为0.330±0.085、0.271±0.039、0.268±0.036)(均为P<0.05)。试验组患者前囊膜的晶状体上皮细胞可见明显的细胞核固缩,染色质浓缩边集,细胞核膜皱褶、轻度增宽,线粒体形态基本正常、部分线粒体嵴突消失,细胞质中可见典型的凋亡小体。对照组有轻度凋亡改变。结论 NLR...     

盖玻片辅助人晶状体上皮细胞原代培养法

目的：建立人晶状体上皮细胞原代培养的简便方法并比较不同来源人品状体上皮细胞的生物学特性。方法：取胎龄20周合法引产胚胎眼晶状体囊膜、中山眼科中心眼库眼晶状体囊膜和白内障患者术中撕取的前囊膜，分别在培养皿中铺平，加10乩10％DMEM培养液润湿后加盖盖玻片防止卷曲并促进粘贴．添加培养液浸没盖玻片，37℃培养。同时取相同来源的囊膜按照组织块法培养。观察细胞增殖情况并比较原代人晶状体上皮细胞与人晶状体上皮细胞系SRA01／0413晶体蛋白的表达差异。结果：在盖玻片辅助下，胚胎眼晶状体囊膜第2天即可见明显的增殖细胞由囊膜缘长出，眼库眼囊膜和白内障患者术中撕取的囊膜在3～4d的潜伏期后亦可见增殖细胞长出；组织块法培养出现部分组织块漂浮，且胚胎眼囊膜潜伏期延长至3-4d，眼库眼囊膜和白内障患者晶状体囊膜潜伏期延长至4-5d。结论：盖玻片辅助的改良组织块培养法能尽快获得体外培养的原代晶状体上皮细胞，且操作简便，值得推广应用于品状体病的研究。     

硅油并发性白内障和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中凋亡因子的表达差异

目的:分析硅油并发性白内障和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中凋亡因子的表达差异.方法:将我院2014-03/2016-03收治的硅油并发性白内障患者50例50眼作为研究组,另选同期收治年龄相关性白内障患者50例50眼作为对照组,两组患者均已如实掌握此次研究方案具体内容并签署知情同意书后对其晶状体上皮细胞中凋亡因子的表达进行测定和比较.结果:研究组Bcl-2蛋白表达阳性率92％、Bax蛋白表达阳性率100％、Caspase-3蛋白表达阳性率100％,而同期对照组Bcl-2蛋白表达阳性率80％、Bax蛋白表达阳性率84％、Caspase-3蛋白表达阳性率82％,组间差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:硅油并发性白内障晶状体上皮细胞中凋亡因子的表达显著高于年龄相关性白内障,提示晶状体上皮细胞中部分凋亡因子全程参与硅油并发性白内障的发生发展过程.     

老年性和糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构改变

目的 观察正常人，老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的超微结构，探讨细胞凋亡在白内障发生中的作用。方法 收集正常人、老年性白内障、糖尿病性白内障晶状体前囊膜送透射电镜扫描，取老年性白内障和糖尿病性白内障前囊膜各15例，用脱氧核苷酸末端转移酶缺口标记原位细胞检测法，检测晶状体上皮细胞的凋亡细胞。结果 老年性和糖尿病性白内障晶状体上细胞的超微结构在形态上为扁平状，胞浆出现空泡变性，胞核出现固缩，染色质边聚，浓缩等改变。糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的胞浆空泡变性更加严重。在光镜下老年性和糖尿病性白内障的晶状体上皮均有凋亡细胞。结论 老年性白内障和糖尿病性白内障的发生与晶状体上皮的细胞凋亡密切相关。     

波形纤维蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达

目的观察波形纤维蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞的变化.方法用卵白素-生物素过氧化物酶法对22例老年性白内障患者晶状体前囊膜上皮细胞进行波形纤维蛋白染色,采用包埋前免疫酶电镜技术处理6个晶状体前囊膜标本,并观察其超微结构;利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳及Westemnblot法分析4个晶状体表层组织(前囊膜、上皮细胞和表层皮质)中的波形纤维蛋白.结果老年性白内障晶状体上皮细胞的波形纤维蛋白表达减弱,与对照组比较差异有显著性(t=2.0948,P<     

水通道蛋白1在老年性白内障及透明晶状体前囊膜上皮细胞的表达

目的明确水通道蛋白1(aquaporin1,AQP1)在透明晶状体及老年性白内障晶状体上皮细胞及前囊膜的表达及分布,并初步探讨AQP1在老年性白内障发病中的重要作用。方法收集52例老年性白内障及10例正常透明晶状体前囊膜,通过HE染色和免疫组化方法检测AQP1的表达。结果老年性白内障及正常透明晶状体上皮细胞中均可见AQP1的表达,透明晶状体组中AQP1的阳性细胞表达率(100%)显著高于老年性白内障组(53.8%)(P<0.05)。而在晶状体纤维中未见表达。结论晶状体上皮细胞是晶状体代谢最活跃的部位,终身进行有丝分裂,并移行至赤道部分化成晶状体纤维。晶状体上皮细胞有AQP1的活性表达,这对于维持晶状体上皮细胞一定的增殖潜能,保证晶状体的生理动态平衡和晶状体的透明性起到了重要的作用。提示AQP1在老年性白内障晶状体前囊膜及上皮细胞中的异常表达与老年性白内障的发生密切相关,具体调控机制有待进一步研究。     

晶状体囊膜HSP 70的表达与年龄相关性白内障

目的 探讨年龄相关性白内障的发生与晶状体前囊膜中热休克蛋白70（HSP70）表达之间的相关性。方法 选取年龄为43—51岁的成年尸眼透明晶状体6例，取前囊膜；选择年龄相关性白内障患者6例，年龄为40～50岁，白内障手术时撕取前囊膜；行SDS—PAGE、Western—blot法检测样品中HSP70蛋白，并进行分析比较。结果 白内障患者晶状体囊膜中HSP70含量较正常人明显减少。结论 HSP70表达量的下降与年龄相关性白内障的发生有关。     

凋亡相关蛋白TFAR19在老年性白内障晶状体上皮细胞中的表达与定位

目的 探讨凋亡相关蛋白TFAR19在老年性白内障晶状体上皮细胞中的表达。方法 以TFAR19蛋白的单克隆抗体为工具，利用过氧化酶标定的链霉卵白素染色试剂盒对老年性白内障晶状体上皮细胞行免疫组化染色，观察TFAR19蛋白在晶状体上皮细胞中的表达及定位。结果 发现正常人晶状体上皮细胞中有TFAR19蛋白低水平的表达，老年性白内障晶状体上皮细胞中有3种高表达的细胞；一种为少部分细胞呈胞浆高表达，胞核不表达；另一种为偶见胞核，胞浆均高表达；第3种为凋亡晚期的细胞仅在凋亡小体上有表达。结论 老年性白内障晶状体上皮细胞中有凋亡相关蛋白TFAR19的特征性表达，该结果对进一步揭示细胞凋亡是否参与白内障的发病有着重要意义。     

Deposition of silicone oil droplets in the residual anterior lens capsule after vitrectomy and lensectomy in rabbits

AIM: To examine the histology of preserved anterior lens capsule in vitrectomised and lensectomised rabbit eyes with and without silicone oil tamponade. METHODS: Forty adult Japanese albino rabbits received two port vitrectomy and lensectomy with or without silicone oil tamponade in one eye under both general and topical anaesthesia. Anterior lens capsule was preserved during operation. After healing intervals residual anterior capsule was histologically observed under light or electron microscopy. RESULTS: Immediately after operation, cuboidal lens epithelial cells were observed on the posterior surface of the preserved anterior capsule. During healing intervals in eyes with or without silicone oil tamponade, regenerated lens structure of Sommerring's ring and fibrous tissue formed in the peripheral and central areas of the residual capsule, respectively. Ultrastructural observation revealed the presence of many vacuoles amid matrix accumulation on the posterior capsular surface, suggesting the deposition of emulsified silicone oil droplets. CONCLUSION: Lens epithelial cells produce regenerated lenticular structure and fibrous tissue on the residual capsule following vitrectomy and lensectomy in rabbits. Silicone oil droplets formed by its emulsification deposit in extracellular matrix accumulated on the posterior surface of the anterior capsule. Emulsified silicone may potentially enhance opacification of residual anterior capsule following pars plana vitrectomy by silicone oil deposition and subsequent activation of lens epithelial cells.     

胰蛋白酶预防后发性白内障的实验研究

目的 探讨应用晶状体上皮细胞清除的方法预防后发性白内障。方法 老年性白内障手术中前囊连续环形撕囊后取得人晶状体前囊，应用不同浓度胰蛋白酶对前囊进行消化处理。观察上皮细胞的清除情况。结果 0.25%，0.2%胰蛋白酶溶液处理的晶状体前囊，晶状体上皮细胞可以完全脱落，0.1%胰蛋白酶溶液处理晶状体前囊，上皮细胞部分脱落，结论 该结果可为临床应用胰蛋白酶清除晶状体上皮细胞防治后发生白内障提供理论依据。     

Ultrastructure of the anterior lens capsule after vitrectomy with silicone oil injection

To clarify the mechanical difficulties experienced when performing anterior capsulorhexis in vitrectomized eyes filled with silicone oil. Five anterior lens capsules removed from eyes with a silicone oil history were submitted to light and electron microscopic analysis and then compared to two capsules from eyes with trauma history and seven capsules from eyes without silicone oil or trauma history. Comparable abnormalities of the inner and outer surface of the anterior lens capsule were consistently observed after silicone oil fill of the vitreous cavity or after traumatic impact to the lens: patches of multilayer epithelial cells with interspersed capsule material and connective tissue were observed on the posterior surface of the anterior lens capsule. The development of this anterior subcapsular tissue plaque is obviously influenced not only by the PVR process or by side effects of the surgical procedure but also by the silicone oil tamponade or a trauma history. The plaque can be considered primarily responsible for the increased mechanical resistance of the lens capsule in all eyes with silicone oil/trauma history examined in this study.This study was supported by Aktion Kampf der Erblindung (AKDE).     

miR-181调控人晶状体上皮细胞凋亡的机制研究

目的：探讨 miR-181在白内障晶状体组织中的表达情况,及其对人晶状体上皮细胞凋亡的调控机制。
　　方法：利用Real time q-PCR方法,检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜和人晶状体上皮细胞凋亡模型中miR-181的表达情况;利用Lipofectamine 2000瞬时转染miR-181 mimic 和 inhibitor 调节人晶状体上皮细胞中miR-181的表达,利用Real time q-PCR方法验证转染效率,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。
　　结果：与对照组相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组和人晶状体上皮细胞凋亡模型组,miR-181的表达显著升高;miR-181 mimic转染组,miR-181的表达显著升高,细胞凋亡率显著升高;miR-181 inhibitor转染组, miR-181的表达显著降低,细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。
　　结论：miR-181在年龄相关性白内障晶状体组织中呈高表达,miR-181能够促进人晶状体上皮细胞凋亡,从而可能在年龄相关性白内障的发病过程中发挥一定作用,miR-181可能成为白内障非手术治疗的一种新途径,但具体机制有待进一步研究。     

Histopathology of anterior lens capsules in vitrectomized eyes with tamponade by silicone oil

Histopathologic examination and immunohistochemistry for collagen type V were performed on residual anterior lens capsules of vitrectomized eyes (2 patients) that had been tamponaded with silicone oil. Many spaces, presumably occupied by oil droplets, were observed in connective tissue accumulations beneath the capsules. Immunoreactivity in the extracellular matrix for collagen type V was most marked adjacent to these spaces. These silicone droplets may delay capsule healing as collagen type V indicates immature connective tissue.     

年龄相关性白内障基因异常表达的研究

目的比较年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(LEC)基因表达与正常人的差异,探讨白内障发病的分子机制。方法术中撕取晶状体前囊36眼,其中单纯核性年龄相关性白内障10眼,成熟期年龄相关性白内障19眼,角膜移植供体眼及外伤性晶状体脱位7眼(正常对照)。3组晶状体囊膜分别提取总RNA,将合格的各组RNA样品做差异显示(DD-RT-PCR),寻找差异表达基因,再将其分离、扩增、测序,最后选取与白内障形成密切相关的胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP-5)及溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)基因进行验证。结果各组RNA纯度达到要求,总RNA完整,经差异显示,年龄相关性白内障组比正常人组低表达的条带有5条,高表达条带15条。对6条明亮条带测序后,其中3个片段分别与IGFBP-5、LAMP-2及小核糖体蛋白10(rps10)有很高的同源性,其他3个片段均为新近克隆未知功能的基因或基因组序列。验证表明,年龄相关性白内障IGFBP-5表达水平低于正常对照(P<0.01),而年龄相关性核性白内障LAMP-2表达水平高于正常对照。结论IGFBP-5和LAMP-2是年龄相关性白内障相关基因,差异显示技术在研究年龄相关性白内障发生中有重要意义。     

老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡及相关基因蛋白的表达

目的 探讨老年性白内障与晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法透射电镜下观察老年性白内障晶状体上皮细胞的超微结构；Tunel法检测凋亡细胞百分率；并对其晶状体上皮细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳；免疫组化法检测P53、bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达。结果 透射电镜下发现老年性白内障晶状体上皮细胞中有凋亡细胞；凋亡细胞百分率为8．4％～37．8％，琼脂糖凝胶电泳出现梯状条带；P53在老年白内障晶状体上皮细胞中蛋白表达率为16．9％～19．1％，bcl-2无蛋白表达。结论 老年性白内障的发生可能与其晶状体上皮细胞凋亡有关。     

晶状体玻璃体切除联合硅油填充术中晶状体囊的处理

目的探讨晶状体玻璃体切除联合眼内硅油填充术中保留前囊或后囊的作用。方法用晶状体玻璃体切除联合硅油填充治疗30例30眼伴增生性玻璃体视网膜病变的视网膜脱离患者，根据白内障手术方式不同分2组。保留后囊组：13眼术前检查为非外伤性白内障行超声乳化吸出保留后囊；保留前囊组：17眼采用经睫状体平坦部晶状体切除，并保留前囊。8眼行二期后房型人工晶状体植入。结果保留后囊组：13眼均保留了完整的晶状体后囊；保留前囊组：17眼中除3眼原有晶状体前囊小破口外，14眼保留了完整的晶状体前囊。术后随访6～24月，平均9月，无1眼发生角膜变性，近期一过性高眼压3眼，8眼二期后房型人工晶状体植入位置良好。结论晶状体玻璃体切除联合硅油填充术中保留前囊或后囊可减少角膜变性、继发青光眼的发生率，并有利于二期后房型人工晶状体植入。[眼科新进展2005；25（5）：442—443]