糖皮质激素对人卵巢癌细胞系3A0增殖分化及对糖皮质激素受体表达的影响(英文)

目的:观察不同浓度地塞米松(Dex)对人卵巢癌细胞系(3AO)增殖及分化的影响及其对糖皮质激素受体(GR)的调节作用.方法:以不同浓度Dex处理3AO细胞,采用活细胞计数法观察细胞增殖,用氨基安替比林法测定碱性磷酸酶(AKP)活性;用酶联免疫法测定细胞标志抗原CA125水平的变化;用放射配体结合法测定GR的表达.结果:Dex对3AO细胞的增殖有抑制作用,同时伴有细胞形态的变化及AKP活性增高和CA125的表达下降.Dex对3AO细胞AKP活性的诱导作用可被RU486所阻断.在3AO细胞中存在糖皮质激素受体(GR),Dex对GR结合活性有下调作用.结论:Dex对3AO细胞有增殖抑制和诱导分化作用,这种作用是通过GR来介导的.     

人卵巢癌3AO细胞系增殖抑制作用研究综述

卵巢癌是妇科死亡率最高的恶性肿瘤，在我国有上升趋势。由于卵巢癌起病隐匿，不易早期发现，确诊晚，多数病人失去手术机会，而且对多种化疗药物又容易产生耐受。据报道卵巢癌5年存活率仅20％。虽然如此，由于化疗药物能达到全身治疗的效果，对提高卵巢癌的疗效可能起到积极作用，所以仍然是最有效的治疗方法。     

地塞米松对人羊膜上皮WISH细胞糖皮质激素受体α表达的影响

目的 观察地塞米松对体外培养人羊膜上皮WISH细胞糖皮质激素受体(GR)-α表达的调节.方法 将体外培养的WISH细胞分为不同浓度地塞米松(10-8、10-7、10-6、10-5、10-4 mol/L)作用48 h组,和单一浓度地塞米松作用不同时间组(终浓度10-6mol/L,培养24、48、72 h).两组均设空白对照组.采用RT-PCR方法检测各组细胞中GR-a mRNA的表达.结果 在不同浓度地塞米松作用48 h后,10-4mol/L组细胞GRα mRNA表达强于空白组,其余各组细胞GR-α mRNA表达均弱于与空白组(P＜0.01).在地塞米松作用不同时间组,各亚组细胞GR-α mRNA表达与空白组相比,均明显减弱(P＜0.01).结论 低浓度地塞米松可下调WISH细胞中GR-α mRNA表达;高浓度地塞米松可上调GRα mRNA的表达.GR-α mRNA表达不随地塞米松作用时间的延长而下降.临床上常规剂量和疗程应用地塞米松促胎肺成熟时,不会导致促分娩发动作用.     

重组人促红细胞生成素对卵巢癌细胞EPOR表达及肿瘤增殖的影响

目的通过检测卵巢癌细胞中的促红细胞生成素受体（EPOR）表达，以及r—HuEPO对卵巢癌细胞增值的影响，探讨r—HuEPO在癌性贫血治疗中的意义。方法RT—PCR方法检测人卵巢癌细胞株HO-8910EPOR mRNA的表达及卵巢癌细胞增值影响。结果卵巢癌细胞表面有EPOR的表达。r—HuEPO干预后卵巢癌细胞增值受到抑制（P〈0．01）。结论EPOR在卵巢癌细胞株HO8910有表达，r—HuEPO可抑制卵巢癌细胞的增值发生，提示r—HuEPO可用于卵巢癌伴发的贫血的治疗。     

趋化因子受体CXCR-4在卵巢癌增殖及转移中的作用

目的观察CAOV-3和HO8910卵巢癌细胞株趋化因子受体(CXCR-4)表达及对其增殖、迁移的作用。方法流式细胞术分析CAOV-3及HO8910细胞黏附分子表达;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CXCR-4转录,观察不同浓度基质蛋白衍生因子(SDF)-1α对CAOV-3和HO8910细胞增殖、迁移及其表面黏附分子表达的影响,并采用激光共聚焦显微镜观察经SDF-1α作用后,CAOV-3细胞表面黏附分子分布变化与其移行能力变化的相关性。结果流式细胞术检测提示二株细胞均表达CD44(98.8%和97.7%)、CD29分子(67.8%和73.5%)和CD49d(45.8%vs37.2%),但不表达CD62e(4.2%vs3.2%);CAOV-3细胞尚表达CXCR-4分子,SDF-1α上调CAOV-3细胞CD29分子(67.8%vs93.2%)的表达,尤其是可显著上调CD49e的表达(25.8%vs82.2%,P<0.05),并可促进其细胞增殖和移行,CAOV-3细胞移行与其细胞表面黏附分子重分布有关。结论SDF-1α可促进CAOV-3细胞增殖和移行,上调CD49e和CD29的表达和重分布,在肿瘤的转移中具有重要作用。     

糖皮质激素治疗对哮喘患者胰岛素及其受体表达的影响

目的 分析糖皮质激素治疗对哮喘患者胰岛素及其受体的表达的影响。方法 选取南阳市第一人民医院收治的支气管哮喘患者30例,设为观察组,给予患者连续1个月糖皮质激素治疗,测定治疗前后患者空腹血糖含量和血清内胰岛素含量,并采用酶联免疫吸附法对患者血清内可溶性胰岛素受体含量进行测定,并与同期收治的健康体检者(对照组)进行对比。结果 治疗前哮喘患者血清胰岛素含量和胰岛素受体含量均高于健康人,经1个月的糖皮质激素治疗,血清胰岛素含量和胰岛素受体含量明显降低,与治疗前相比差异有统计意义(P<0.05)。结论 糖皮质激素可有效改善哮喘患者肺功能,调节其胰岛素及胰岛素受体表达。     

对多发性骨髓瘤细胞株KM_3的糖皮质激素受体的研究

笔者用放射配体结合测定法对培养的人骨髓瘤细胞株KM_3的糖皮质激素受体(GR)进行了检测,数量为(24674±1631)位点/细胞,平衡解离常数(d)为(3.82±1.21)nmol/L。研究发现地塞米松抑制KM_3细胞株的增殖,起着直接的杀伤作用。     

地塞米松对ALI/ARDS大鼠的保护作用及对糖皮质激素受体表达的影响

目的探讨小剂量地塞米松对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠的保护作用及对糖皮质激素受体表达的影响。方法油酸复制ALI/ARDS大鼠模型。随机将18只SD大鼠分为三组:对照组(A1)、ARDS组(A2)、地塞米松组(A3),每组6只。测各组大鼠动脉氧分压,肺组织病理切片,ELISA法测各组大鼠血液中TNF-α,免疫组化法测肺组织NF-ΚBp65,荧光定量RCR测各组糖皮质激素受体(GR)表达量。结果各组之间病理改变有明显差异,以下各指标:氧分压,TNF-α,肺组织NF-κBp65含量,糖皮质激素受体(GR)表达量,各组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论小剂量地塞米松对ARDS大鼠肺组织有保护作用,其作用机制可能与对糖皮质激素受体起到正向调节作用有关。     

再生障碍性贫血患者糖皮质激素受体及糖皮质激素变化的研究

目的 :为探讨再障患者糖皮质激素受体及为糖皮质激素治疗再障提供理论依据。方法 :采用放射配体结合测定法及放免法检测 42例再障患者外周血白细胞糖皮质激素受体及血浆皮质醇水平 ,同时 40例正常人作为对照。结果 :①慢性再障糖皮质激素受体结合活性较正常对照及急性祟障减低 ;②急性再障糖皮质激素受体与正常对照无显著性差异 ;③再障患者糖皮质激素受体水平与血浆糖皮质激素无相关关系。结论 :结果有助于解释糖皮质激素类药物治疗急性再障疗效好于慢性再障 ,对再障的治疗有指导价值     

苦参碱对人黑素瘤细胞系增殖抑制的体外研究

目的：研究苦参碱(Matrine，Mat)对人黑素瘤细胞系生长的抑制效应，并探讨其作用机制。方法：用不同浓度的Mat加人体外培养人黑不经瘤(LiBr)细胞中，观察加药后细胞生长数量及其形态的变化；用MTT法检测Mat的细胞毒作用；用Hoechest33342和PI双荧光染色法检测细胞凋亡比率。结果：Mat明显抑制LiBr细胞生长；IC50值为0．8mg／ml；其抑制率与药物浓度呈剂量依赖关系；凋亡细胞的比例与药物浓度及作用时间呈正相关。结论：Mat能有效抑制LiBr细胞的增殖。     

青蒿琥酯对人卵巢癌细胞株增殖及p38通路的影响

目的:探讨青蒿琥酯(Art)抑制卵巢癌细胞株(CAOV3)增殖及p38通路的影响及机制。方法:培养卵巢癌细胞株(CAOV3),以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法及克隆形成实验测定Art抑制卵巢癌细胞株CAOV3增殖的作用。免疫印记法测定p-p38、Cyclin D1及p21waf/cip1表达。免疫沉淀法纯化蛋白并p38试剂盒测定p38活性。结果:MTT实验及克隆分析法均显示Art明显抑制CAOV3细胞增殖,Art抑制p-p38表达及活性、下调Cyclin D1表达,同时上调p21waf/cip1表达。结论:青蒿琥酯可以抑制卵巢癌细胞株(CAOV3)增殖,其机制与影响p38通路及下游Cyclin D1、p21waf/cip1表达有关。     

岩大戟内酯B对人卵巢癌Skov3细胞的增殖抑制作用

目的探讨岩大戟内酯B(JB)对人卵巢癌Skov3细胞的增殖抑制作用及可能机制。方法采用不同浓度的JB处理卵巢癌Skov3细胞48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Skov3细胞的增殖抑制率,Hoechst法检测Skov3细胞凋亡指数,Western blot检测Akt、P-Akt(Ser473)、Bax、Caspase-3和Bcl-2蛋白水平。结果 0.1,1.0,5.0,10.0,20.0,50.0μmol/L的JB可呈剂量依赖的方式抑制Skov3细胞的增殖,IC50为5.28μmol/L;20.0μmol/L JB和30.0μmol/L LY294002(PI3K抑制剂)均可增加Skov3细胞凋亡指数,降低P-Akt(Ser473)/Akt水平,增加促凋亡基因(Bax、Caspase-3)的蛋白水平,降低抑制凋亡基因(Bcl-2)的蛋白水平,且均与对照组有显著差异;而LY294002可增强JB的效应,且与JB组有显著差异。结论 JB可抑制人卵巢癌Skov3细胞的增殖,促进细胞凋亡,可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路和诱导死亡受体表达来发挥抗肿瘤作用的。     

短发夹RNA沉默YAP表达对肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响

目的本实验通过短发夹RNA(shRNA)抑制Yes相关蛋白(YAP)基因的表达,并观察其对肝癌细胞SMMC-7721的增殖、凋亡和周期影响。方法以人YAP mRNA编码区中的4条序列作为RNA干扰靶点,分别构建4个真核表达载体质粒YAP-shRNA-1、YAP-shRNA-2、YAP-shRNA-3、YAP-shRNA-4,用阳离子聚合物转染法瞬时转染,筛选出2个干扰效果较好的质粒,将它们瞬时转染肝癌细胞SMMC-7721,应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法检测SMMC-7721细胞中YAP在mRNA和蛋白水平表达的变化。噻唑蓝(MTT)法检测转染后细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的变化。结果转染后293T细胞中shRNA-YAP-2组与shRNA-YAP-4组YAP mRNA表达明显降低,在SMMC-7721中shRNA-YAP-2组与shRNAYAP-4组的YAP mRNA及蛋白表达水平分别为(0.871±0.081,0.106±0.013)和(1.010±0.097,0.192±0.013),与未转染组(2.399±0.148,0.372±0.007)比较差异有统计学意义(P<0.01)。MTT显示,shRNA-YAP-2、shRNA-YAP-4组细胞生长明显抑制,但未出现阻滞;流式细胞仪分析显示,shRNA-YAP-2组和shRNA-YAP-4组细胞凋亡率分别为(12.0±0.81)%和(5.03±1.01)%,明显高于空质粒组的(2.89±0.08)%(P<0.01)。细胞被阻滞在G2期,G0/G1期出现DNA亚二倍体峰。结论运用shRNA干扰技术,可以有效地干扰肝癌SMMC-7721细胞YAP的表达并能降低YAP的生成,抑制SMMC-7721细胞的增殖和促进细胞的凋亡。     

黄芪对喉癌细胞增殖和凋亡的影响

目的体外观察黄芪对人喉癌细胞系Hep-2的抑制增殖和诱导凋亡作用并探讨其作用机制。方法用20、100、200μg/mL的黄芪作用于Hep-2细胞24 h,MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,光学显微镜观察细胞形态学变化。结果 MTT结果显示,黄芪可显著抑制Hep-2细胞增殖且存在剂量依赖性;流式细胞仪检测发现,细胞凋亡率随着黄芪浓度增高逐渐升高,各实验组之间及其与对照组之间比较差异有统计学意义(P<0.05);用药后光镜观察细胞数量减少,荧光显微镜观察可见典型细胞凋亡。结论黄芪可调控喉癌细胞周期,形成G2/M期阻滞,通过抑制增殖和促进凋亡发挥其抗癌作用。     

卵泡刺激素及其受体对卵巢癌细胞株的增殖作用

目的研究卵泡刺激素(FSH)对卵巢癌细胞株的增殖作用,探讨FSH在卵巢上皮性肿瘤(OET)发生、发展过程中的潜在生物学作用机制。方法用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液培养HO8910细胞及SKOV3细胞;采用免疫荧光法检测HO8910细胞及SKOV3细胞卵泡刺激素受体(FSHR)的表达;以0 IU/L的FSH作为对照组,不同浓度FSH分别培养HO8910细胞和SKOV3细胞不同时间后,M TT比色法测定各组吸光度值A,并比较各实验组的增殖指数(增殖指数=实验组吸光度(A)/对照组吸光度(A)×100%);以最佳FSH浓度为实验组,等量培养液替代作为对照组,分别培养最佳时间,用流式细胞仪分别检测实验组及对照组细胞周期分布。结果 1HO8910细胞FSHR表达阳性,特异性位于细胞核周及细胞质内;SKOV3细胞FSHR表达阴性;2不同浓度FSH作用于HO8910细胞24 h、48 h、72 h时,其A值均较对照组明显升高,其增殖程度与FSH呈浓度依赖效应,40 IU/L FSH培养48 h时,细胞增殖指数最高(P<0.05),随着FSH浓度升高(直至160 IU/L),该细胞株的增殖并未继续增加。SKOV3细胞各实验组A值均较对照组略有升高,40 IU/L FSH培养48 h时,细胞增殖指数最高(P<0.05),但未表现出明显的FSH浓度依赖效应;3FSH浓度为40 IU/L时,培养HO8910细胞及SKOV3细胞48 h,两种细胞G0/G1期比例均减少,S期及G2/M期比例均增加(P<0.05)。而且FSH对HO8910促进细胞分裂作用较SKOV3更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过建立FSH作用于HO8910和SKOV3两种细胞模型,证实FSH与FSHR均与卵巢癌的增殖相关;FSH对FSHR表达阳性的卵巢癌细胞作用呈剂量效应;FSH通过促进细胞周期时相变化促进卵巢癌细胞增殖,且当FSHR阳性时,细胞周期变化更明显。     

莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的影响。方法 水蒸气蒸馏法提取黔产莪术挥发油,配制成40、80、120、160、200、240、280 mg/L浓度梯度,干预SW1463细胞24、48、72 h,MTT法检测莪术油对SW1463细胞的增殖抑制率;Giemsa染色法观察莪术油对SW1463细胞凋亡形态的影响;蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Capase-3、Bax与Bcl-2蛋白表达。结果 莪术油对SW1463细胞的增殖有明显抑制作用,并呈现时间-剂量相关性,24、48、72 h的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为144.33、134.11、120.04 mg/L;Giemsa染色可见细胞明显的凋亡形态学特征;莪术油干预SW1463细胞24 h后,与对照组比较,Caspase-3、Bax蛋白表达显著上调、Bcl-2蛋白表达显著下调（P<0.05）。结论 莪术油能明显抑制SW1463细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调Caspase-3和Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达相关。     

5-氟尿嘧啶对人SKOV3卵巢癌细胞株细胞增殖和Skp2的影响

目的：探讨体外不同浓度5-氟尿嘧啶对人SKOV3卵巢癌细胞株细胞增殖和Skp2表达的影响。方法不同浓度5-氟尿嘧啶0、10、20、40和80μg／ml作用于人SKOV3卵巢癌细胞株后72h,通过细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测各组卵巢癌细胞增殖情况,采用免疫细胞化学染色法和Realtime PCR技术检测各组Skp2蛋白和mR-NA水平的变化。结果不同浓度的5-氟尿嘧啶作用于人SKOV3卵巢癌细胞株72h后,随着浓度的增加,细胞增殖受限明显,Skp2蛋白和mRNA表达水平明显降低,并与5-氟尿嘧啶的浓度呈负相关（ r＝－0．816,P＜0．05;免疫组化Skp2：r＝－0．926,P＜0．05;RealtimePCRmRNA：r＝－0．899,P＜0．05）。结论5-氟尿嘧啶能够抑制SKOV3卵巢癌细胞株的增殖,并能抑制Skp2蛋白和mRNA的表达。     

苯丁酸钠体外对人肝癌细胞分化、抑癌基因表达的调控

目的探讨苯丁酸钠(SPB)诱导人肝癌细胞Bel-7402生长抑制、分化和细胞周期阻滞,以及对抑癌基因P21WAF1/CIP1、P27表达的影响。方法培养Bel-7402,应用溴化四唑蓝比色法观察SPB对Bel-7402的生长抑制作用,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,流式细胞术分析细胞周期,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bel-7402细胞中P21WAF1/CIP1、P27mRNA表达水平。结果SPB处理后Bel-7402的生长缓慢,处理后的细胞成纤维母细胞样改变,细胞阻滞于G1期(78.8±3.6,50.6±4.0;P<0.05),P21WAF1/CIP1基因表达水平增强(0.08±0.13,0.72±0.14;P<0.05),P27mRNA的表达明显增强(0.09±0.11,0.61±0.12;P<0.05)。结论SPB抑制人肝癌细胞株Bel-7402的生长,诱导人肝癌细胞分化,使细胞阻滞于G1期,SPB诱导抑癌基因P21WAF1/CIP1、P27表达。     

氧化苦参碱对人食管癌细胞株Eca109增殖及凋亡的影响

目的:观察氧化苦参碱(Oxy)对食管癌细胞株Eca109的抑制增殖及诱导凋亡作用。方法:培养食管癌细胞株(Eca109),以MTT比色法、生长曲线、及流式细胞术测定Oxy对食管癌细胞株Eca109抑制增殖及诱导凋亡的作用。免疫沉淀法并ERK活性试剂盒测定ERK活性;免疫印记法测定p-ERK1/2、Cyclin D1、p21waf/cip1、Bax及Bcl-2表达。结果:MTT实验及生长曲线显示Oxy明显抑制Eca109细胞增殖,流式细胞术显示Oxy可诱导Eca109细胞凋亡;免疫沉淀法显示Oxy可抑制ERK活性,免疫印记法显示Oxy抑制p-ERK1/2、Cyclin D1及Bcl-2表达,同时上调p21waf/cip1和Bax表达,Bax/Bcl-2比值增加。结论:氧化苦参碱可以抑制食管癌细胞株Eca109增殖,机制与影响ERK及下游CyclinD1、p21waf/cip1表达有关;其诱导凋亡途径与上调Bax表达,降低Bcl-2表达有关。