VEGF受体KDR胞外Ⅴ—Ⅶ区的克隆,单抗制备及KDR在不同来源肿瘤组织 …

目的 利用制备的血管内皮细胞增殖因子（ＶＥＧＦ）受体ＫＤＲ抗体,通过免疫组湍不同来 的表达,为探讨ＶＥＧＦ及其受体对肿瘤生长及转移的作用提供可能方法 采用ＲＴ－ＰＣＲ方法,从人胎儿脐静脉内皮细胞克隆ＫＤＲ胞外Ⅴ－Ⅶ区基因片段,在大肠杆菌中表达,并用传统的杂交瘤融合技术制备小鼠ＫＤＲ单克隆抗体。通过组化及Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ鉴定ＫＤＲ单抗的特生,最后采用Ｓ－Ｐ免疫组化法,分别对不同来源的１１５例     

血管内皮生长因子及其受体在大肠癌中的表达

研究血管内皮生长因子及其受体大肠癌中的表达及其临床意义。「方法」应用免疫组化ＳＰ法检测１５５例大肠癌标本ＶＥＧＦ及ＫＤＲ蛋白的表达。分析ＶＥＧＦ和ＫＤＲ与临床病理因素,微血管计数及预后的关系。「结果」ＶＥＧＦ和ＫＤＲ的表达与大肠癌浸润深度、淋巴结转移、血管侵犯、脏脏转移、Ｄｕｋｅｓ’分期密相关,而与组织学分型和肿瘤大小无关。ＶＥＧＦ和ＫＤＲ的表达密切相关。ＶＥＧＦ和ＫＤＲ表达阳性者ＭＶＣ显著高于阴     

携带DT_(390)-VEGF_(165)或DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因的真核表达载体的构建及表达

抑制血管再生可能是治疗实体瘤的有效途径。肿瘤血管生成的主要调控者是血管内皮细胞生长因子(ＶＥＧＦ)。ＶＥＧＦ的 5种异构体中ＶＥＧＦ165是表达丰度最高的异构体 ,ＫＤＲ和Ｆｌｔ 1为ＶＥＧＦ的高亲和受体。1996年Ｓｏｋｅｒ等在各种肿瘤细胞系上发现了仅与ＶＥＧＦ165外显子 7编码的结构域结合的受体 ,即ＶＥＧＦ165Ｒ[1] 。目前将细菌毒素的跨膜结构域和酶性结构域与细胞因子或抗体构成的融合蛋白靶向杀伤各型细胞的研究已有大量报道 ,但这些融合毒素仅对某些类型的肿瘤有效。为扩大癌症治疗范围 ,我们选择ＶＥＧＦ165和ＶＥＧＦｅｘ…     

血管内皮生长因子（VEGF）在恶性肿瘤中的表达及其临床意义

ＶＥＧＦ于１９８３年由Ｓｅｎｇｅｒ等发现 ,分子量３４ ４２ＫＤ ,以二巯键连接的糖蛋白二聚体形式存在 ,是一种对热酸稳定的外分泌蛋白 ,可在健康人体多数组织中检出 ,但表达量甚微。人ＶＥＧＦ是一种多功能细胞生长因子 ,可以形成４种不同长度的多肽 ,称为ＶＥＧＦ２０６、１８９、１６５和１２１。ＶＥＧＦ有三种受体 ,即Ｆｌｔ １、ＫＤＲ和ＦＬＫ ４ ,均有酪氨酸激酶活性。近年来许多研究表明 ,ＶＥＧＦ是内皮细胞的有丝分裂原 ,诱导内皮细胞的生长 ,并且是有效的血管形成促进因子 ,诱导增加血管的通透性 ,与肿瘤生长、浸润、转移的…     

血管内皮细胞生长因子及其受体与肿瘤血管形成

血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）调控血管生长特异性高，作用强，许多肿瘤细胞均有表达；仅有极少正常组织，在特定的条件下，才量表达；也只有血管内皮细胞表达细胞表达ＶＥＧＦ特异性受体，因此，可通过干预ＶＥＧＦ及其受体，抑制肿瘤血管形成，达到预防和治疗肿瘤转移和复发的目的。     

喉粘膜癌前病变和癌变中VEGF、bFGF和KGF的表达分析

目的　探讨血管生成因子在喉癌发生发展中的作用。方法　本文用免疫组织化学和原位杂交方法,观察ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ和ＫＧＦ在喉粘膜不典型增生（ＤＹＳ）及鳞癌（ＳＣＣ）中的表达和分布情况。结果　ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦｍ ＲＮＡ、ＫＧＦ ｍ ＲＮＡ 在ＳＣＣ 中的表达较ＤＹＳ有所增强,其中ＶＥＧＦ不仅在上皮细胞中表达,间质中部分血管内皮细胞及炎性细胞亦表达ＶＥＧＦ;而ｂＦＧＦ、ＫＧＦ的转录仅在ＤＹＳ和ＳＣＣ的间质中出现,上皮细胞未见阳性表达,ｂＦＧＦ、ＫＧＦ阳性反应主要位于血管内皮细胞和成纤维细胞。结论　在喉癌中ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ、ＫＧＦ可能分别通过自分泌或旁分泌方式促进间质中新生血管和间质的形成,直接或间接地影响肿瘤细胞的生长。     

血管内皮生长因子及其受体在结直肠癌中的表达及其意义

目的：探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）及其受体（ＦＬＴ、ＦＬＫ－１）在结直肠癌组织中的表达及其对肿瘤新生血管生成及转移的影响。方法应用免疫组化技术,检测５０例人结直肠癌组织ＶＥＧＦ、ＦＬＴ、ＦＬＫ－１的表达和微血管密度（ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｓ ｄｅｎｓｉｔｙ,ＭＶＤ）,并分析其与病理分型、分级、浸润深度、淋巴结、淋巴管和血管转移的相关。结果ＶＥＧＦ、ＦＬＴ、ＦＬＫ－１主要表达于癌浸润边缘和坏死组     

血管内皮生长因子及其与肺癌关系的研究进展

血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ) ,又名血管通透因子 (ＶＰＦ) ,是一种与肿瘤关系最为密切的血管生成因子。ＶＥＧＦ对肺癌组织的生长和扩散有重要影响。因此 ,探讨ＶＥＧＦ与肺癌的关系成为当今医学研究的热点问题。1　ＶＥＧＦ的结构与功能1.1　ＶＥＧＦ家族　ＶＥＧＦ家族包括 :ＶＥＧＦ、胎盘生长因子 (ＰＬＧＦ)、ＶＥＧＦ Ｂ、ＶＥＧＦ Ｃ、ＶＥＧＦ Ｄ和ＶＥＧＦ Ｅ这 6个成员。ＶＥＧＦ家族受体有三种 :受体 1(Ｆｌｔ 1)、受体 2 (Ｆｌｋ 1/ＫＤＲ)和受体 3(Ｆｌｔ 4) ,这三种均属酪氨酸激酶受体。ＶＥＧＦ各自与相应受体结合后 ,受体…     

结直肠肿瘤微血管计数及血管内皮细胞生长因子表达

目的 探讨血管生成与结直肠肿瘤的发生,发展关系,评估微血管计数（ＭＶＤ值）及血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）表达与结直肠肿瘤预后的相关性。方法 应用免疫组化法回顾性地研究了３２例结直肠肿瘤石蜡包埋的病理组织。结果 正常粘膜,腺瘤,癌组织的ＭＶＤ值递增。不同病理状态下的结直肠癌ＭＶＤ值有差异,ＶＥＧＦ阴性组ＭＶＤ值低于ＶＥＧＦ阳性组,低ＭＶＤ值主ＶＥＧＦ阴性组生存率高于高ＭＶＤ值组及ＶＥＧＦ阳性组。     

血管内皮生长因子及其受体与骨肉瘤关系的研究进展

血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）是一种序列高度保守、高度特异性的促血管内皮细胞生长因子,广泛分布于人和动物体内的大脑、肾脏、肝脏、脾脏、胰腺和骨骼等组织中,对内皮细胞具有强烈的促有丝分裂作用,刺激血管内皮细胞增殖和血管通透性增加,促进新生血管形成。ＶＥＧＦ通过与血管内皮细胞表面受体（ＶＥＧＦＲ）特异性结合发挥生物学效应。抑制ＶＥＧＦ及ＶＥＧＦＲ的活性可以减缓或阻滞骨肉瘤侵袭和转移。研究表明,ＶＥＧＦ及ＶＥＧＦＲ对肿瘤血管及淋巴管的生成及肿瘤侵袭和转移起重要作用。本文对ＶＥＧＦ及ＶＥＧＦＲ与骨肉瘤血管与淋巴管生成及其侵袭与转移的关系作一综述。     

胃癌组织EGFR、Ki-67表达及临床病理学意义

表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和Ｋｉ－６７是与细胞调控密切关联的相关因子。我们采用免疫组化方法测定３０例胃癌组织的ＥＧＦＲ及Ｋｉ－６７的表达,以探讨其与胃癌生物学行为的关系。方法３０例胃癌组织标本来自本院外科１９９０年到１９９２年的肿瘤手术标本。切片除作ＨＥ染色病理诊断外,分别行ＥＧＦＲ及Ｋｉ－６７免疫组化。相关试剂均为福建迈新公司提供。ＥＣＦＲ阳性位于胞膜及胞浆上,Ｋｉ－６７阳性颗粒则表达于胞核上。免疫组化测定以随机计算１０个高倍镜视野胃癌组织内的肿瘤细胞与阳性瘤细胞数,计算阳性细胞率,再以阳性…     

VEGF的单抗制备及胃癌细胞MGC803表达VEGF的鉴定

目的 从胃癌细胞ＭＧＣ８０３克隆并在体外表达血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）,利用ＶＥＧＦ１２１单克隆抗体对其产物进行鉴定,为进一步明确肿瘤组织中ＶＥＧＦ来源,并以ＶＥＧＦ为靶点治疗奠定基础。方法 用杂交瘤技术制备ＶＥＧＦ１２１单克隆抗体,通过ＥＬＩＳＡ、＾３－ＴｄＲ掺入检测其活性;用ＲＴ－ＰＣＲ从ＭＧＣ８０３细胞克隆ＶＥＧＦ基因,与原核表达载体ＰＧＥＸ２Ｔ重组,大肠杆菌中进行表达,以Ｗｅｓｔｅｒ     

CEA启动子驱动cd—tk表达对CEA阳性肿瘤细胞的杀伤作用

目的：大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ，ｃｙｔｏｓｉｎｅｄｅａｍｉｎａｓｅ）和Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＴＫ，ｔｈｙｍｉｄｉｎｅｋｉｎａｓｅ）融合基因ｃｄｔｋ，在癌胚抗原（ＣＥＡ，ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｙｏｎｉｃａｎｔｉｇｅｎ）阳性肿瘤细胞表达，联合使用前体药５氟胞嘧啶（５ｆｌｕｏｒｏｃｙｔｏｓｉｎｅ，５ＦＣ）和丙氧鸟苷（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ，ＧＣＶ）可明显增强对肿瘤细胞的杀伤作用。方法：ＰＣＲ法分别扩增出ＣＥＡ启动子、ｃｄ和ｔｋ；构建真核表达载体ｐＣＥＡｃｄｔｋ；用脂质体将它导入ＣＥＡ阳性肿瘤细胞株ＨＴ２９、ＬｏＶｏ、ＳＧＣ７９０１、ＧＬＣ８２及ＣＥＡ阴性细胞株ＢＥＬ７４０２中；ＭＴＴ法检测５ＦＣ、ＧＣＶ对这类细胞的毒性作用及对放疗射线的增敏效果。结果：融合基因ｃｄｔｋ只在ＣＥＡ阳性细胞中表达，且表达该基因的肿瘤细胞对５ＦＣ和ＧＣＶ都很敏感。联合使用ＧＣＶ和５ＦＣ时，对这些肿瘤细胞的毒性明显增加，该体系也可明显增强放疗射线对细胞的杀伤作用。结论：与单独使用ＣＤ／５ＦＣ，ＴＫ／ＧＣＶ相比，ＣＤＴＫ／５ＦＣ＋ＧＣＶ体系对肿瘤细胞的杀伤作用明显增强，该体系对放疗射线有较强的增敏作用。     

胃腺癌的血管内皮细胞生长因子和KDR受体的表达及其临床意义

目的：研究胃腺癌的血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ, ＶＥＧＦ）及其受体 ＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ）的表达,并探讨其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色法检测ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的表达,并分析其与６１例胃腺癌临床病理特征之间的关系。结果：胃腺癌组织ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的阳性表达率分别为５５．９％和３９．３％;其中粘液腺癌和管状腺癌表达率较高（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ表达率分别为７１．４Ｔ／４２．８％和６１．９％／５２．４％;ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的阳性表达与ＴＮＭ分期有显著差异（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,阳性率为Ⅵ＞Ⅲ＞Ⅱ＞Ⅰ期,Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ期的表达率分别为 ８０．０％／５０．０％,６８．２％／４５．５％,４０．０％／３０．０％和３６．８％／３１． ６％;胃腺癌并转移患者,ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的阳性表达分别为７６．２％和４７．６％,远高于无转移的４５．０％和３５．０％（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）;术后生存期小于１年的ＶＥＧＦ的表达率为６６．７％,明显高于术后生存期１年以上的５２．２％。结论：ＶＥＧＦ是胃腺癌血管生成的正向调     

非小细胞肺癌组织中血管内皮生长因子表达与树突状细胞分布的关系

目的 探讨非小细胞肺癌组织中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）表达与树突状细胞（ＤＣ）分布的关系。方法 ４６例原发性非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）冰冻组织切片经抗ＶＥＧＦ,抗ＣＤ８３抗体免疫组化染色,以观察ＮＳＣＬＣ组织中ＣＤ８３阳性之ＤＣ的密度及ＶＥＧＦ的表达强度,并分析两者的相关性。结果 ＶＥＧＦ免疫组化染色显示４６例肿瘤标本中阴性者１６例,１＋者１３例,２＋者５例,３＋者６例,４＋者６例;按每个高倍视     

上皮性卵巢肿瘤组织中血管生成与细胞增生的相关性探讨

近几年在肿瘤血管生成方面的研究中发现,血管生成与肿瘤细胞增生之间存在相互作用、相互促进的关系。血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）是卵巢癌发生、发展中重要的促血管生成因子,肿瘤细胞增殖核抗原（ＰＣＮＡ）是目前最常用的细胞增殖动力学指标,本文将通过检测ＶＥＧＦ及其受体ＶＥＧＦＲ－ １、ＶＥＧＦＲ—２及ＰＣＮＡ在卵巢癌组织中的表达,探讨两者之间的相关性。１材料与方法１．１研究对象 标本选自山东医科大学附属医院病理科１９９８年１月～１９９９年６月手术标本的存档蜡块,共５３份。正常卵巢组织１０份,良性卵巢肿瘤…     

血管生成抑制剂TNP-470对肝癌组织VEGF表达的影响

ＮＰ 470对肿瘤生长和转移的抑制作用已较为肯定 ,我们的实验也证实ＴＮＰ 470能抑制裸鼠人肝癌的生长和转移[1] 。研究表明 ,ＴＮＰ 470的抗血管生成作用是通过抑制血管内皮细胞的增殖来实现的[2 ] 。ＶＥＧＦ是由肿瘤细胞分泌的一种生长因子 ,能促进血管内皮细胞增殖 ,从而在肿瘤血管生成中起重要作用。迄今 ,未见ＴＮＰ 470对体内癌组织ＶＥＧＦ表达影响的报道。我们利用高转移人肝癌裸鼠模型 (ＬＣＩ Ｄ2 0 ) ,通过逆转录ＰＣＲ(ＲＴ ＰＣＲ) ,检测了ＴＮＰ 470对肝癌组织ＶＥＧＦ表达的影响 ,旨在进一步揭示ＴＮＰ 470的抗血管生成作用…     

肝门部胆管癌组织中VEGF和血管生成相关性的研究

目的：探讨肝门部胆管癌组织中血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）和血管生成的相关性。方法：应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和免疫组化技术对２６例肝门部胆管癌、癌周组织及１２例正常组织中ＶＥＧＦｍＲＮＡ和蛋白及微血管密度（ＭＶＤ）进行了检测。结果：２６例肝门部胆管癌组织中ＶＥＧＦｍＲＮＡ阳性表达率为７６．９％（２０／２６）;癌周组织阳性表达率为２８．９％（７／２６）;正常组织表达率为８．３％（１／１２）,三者差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。ＶＥＧＦｍＲＮＡ阳性表达与ＶＥＧＦ蛋白表达具有一致性;ＶＥＧＦｍＲＮＡ阳性者ＭＶＤ值显著高于阴性者（Ｐ＜０．０１）;ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达和ＭＶＤ与肝门部胆管癌的分化程度、浸润转移密切相关（Ｐ＜０．０５）;而与发生部位、病理类型、肿瘤大小、临床分型无关（Ｐ＞０．０５）。结论：ＶＥＧＦ在肝门部胆管癌发生和浸润转移过程中发挥重要作用,肿瘤血管生成与肝门部胆管癌浸润转移密切相关。     

大肠癌组织血管内皮生长因子的表达及其与复发转移的关系

目的：研究血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）在大肠癌中的表达及其与复发转移的关系。方法：采用免疫组化法对正常肠粘膜、良性腺瘤入大肠癌中的ＶＥＧＦ进行了定位观察。结果：大肠癌ＶＥＧＦ的表达比正常粘膜上皮及腺瘤细胞明显提高,并且与癌的复发和转移有关,在有复发转移的大肠癌组,ＶＥＧＦ的表达更加明显,结论：ＶＥＧＦ表达水平反映了肿瘤血管内皮细胞增殖儿血管构建的水平,可作为肿瘤预后的一个指标。     

照射后TGF-α、EGF及其受体EGF-R表达在小鼠小肠上皮细胞再增殖过程中的作用

目的探讨ＴＧＦα、ＥＧＦ及其受体ＥＧＦＲ在小鼠小肠上皮受照射后再增殖中的作用。材料与方法雄性Ｃ３Ｈｆ／Ｋａｍ小鼠５Ｇｙ全身一次性照射后，不同时间杀死小鼠取出空肠，常规ＨＥ染色高倍下计数隐窝细胞数和分裂相；并以免疫组化法定量测定隐窝区和绒毛区ＴＧＦα、ＥＧＦ和ＥＧＦＲ的表达。结果照射后３～４天小鼠小肠上皮隐窝细胞及分裂相均达到高峰；而ＴＧＦα、ＥＧＦ和ＥＧＦＲ在照射后第１天即在隐窝区达到高峰，随之下降，其表达变化时间上领先于细胞分裂。结论ＴＧＦα、ＥＧＦ和ＥＧＦＲ的表达可能在小鼠小肠上皮受照射后的再增殖过程中起着重要的作用。