N-乙酰半胱氨酸对兔颈动脉粥样斑块的抑制作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对兔颈动脉粥样硬化斑块中基质金属蛋白酶(MMPs)水平的影响及其形态学改变。方法:体外用动脉导管球囊损伤家兔颈内动脉建立兔动脉粥样硬化模型,随机分为NAC组(给予NAC治疗6周)和对照组(不给予治疗)。光镜下观察兔损伤动脉粥样斑 块形成情况。应用SDS-Page-Zymograph法检测兔实验前后血清MMP-2及MMP-9水平。用免疫组化方法定性检测含MMPs泡沫细胞数量及含TIMP-2泡沫细胞数量。测量血管新生内膜面积、管腔面积及管壁厚度。结果: NAC组兔动脉损伤管腔新生内膜面积［（1.72±0.26)mm²］较对照组［（2.66±0.19)mm²］减少 (P<0.05),内膜厚度［（0.132±0.031)mm］较对照组［（0.231±0.022)mm］减少（P<0.05）,血管腔面积［（0.54±0.15)mm²］较对照组［（0.31±0.12)mm²］扩大（P<0.05）。NAC组血管壁直线距离上含MMPs的泡沫细胞（8.0±1.8）较对照组（22.0±2.2）明显减少（P<0.05） ,含TIMP-2的泡沫细胞（10.0±1.2）较对照组（6.0±1.6）明显增多（P<0.05）。NAC组血清MMP-2、pro-MMP-2及pro-MMP-9水平较对照组明显降低(P<0.05)。结论：NAC能抑制泡沫细胞增生,防止血管硬化,抑制MMPs对动脉粥样斑快的降解,稳定斑块。     

乙酰半胱氨酸对兔动脉粥样硬化斑块形成的干预作用

目的 探讨乙酰半胱氨酸(NAC)对兔动脉粥样硬化中基质金属蛋白酶(MMP)的干预作用.方法 新西兰雄性白兔18只给予高脂饮食喂养,体外动脉导管球囊损伤兔颈内动脉,建立兔动脉粥样硬化模型.分为3组:对照组和2种剂量(15、30 mg/kg)NAC干预组.免疫组织化学法观察动脉粥样硬化斑块形成及MMP、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的分布情况,用酶联免疫吸附试验榆测血清中ox-LDL水平.用酶谱法检测血清中MMP-2及MMP-9的表达.用逆转录聚合酶链反应及琼脂糖凝胶电泳法检测组织中MMP-2及MMP-9的mRNA表达.结果 NAC(15 mg/kg)组比对照组新生内膜面积减少[(1.79±0.24)(2.78±0.17)mm2]、最大内膜厚度减少[(0.16±0.01)比(0.24.4±O.02)mm]、血管腔面积增加[(0.58±0.10)比(0.33±0.11)mm2均P<0.05].第8周时NAC(30mg/kg)组ox-LDL水平[(30.5 4±1.2)mmol/L]较对照组[(36.2±1.8)mmoL/L]下降16%(P<0.01).血清pro-MMP-2,MMP-2,pro-MMP-9水平(INT/mm2:分别为311 ±19、208 4±8、283 ±7)较对照组明显下降(分别为619±17、574±8、564 ±10,均P<0.01).NAC(30 mg/kg)组MMP-2、MMP-9mRNA表达[分别为(2.4 ±0.4)、(2.8±0.2)]比对照组下降[(3.4 ±0.3)、(3.7±0.5),均P<0.05].结论 NAC能抑制动脉粥样硬化的形成并能抑制ox-LDL、MMP-9、MMP-2血清水平及下调mRNA的表达.     

同型半胱氨酸对颈动脉平滑肌细胞增殖和氧化及基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 观察同型半胱氨酸(Hcy)对兔颈动脉平滑肌细胞氧化损伤、增殖,及对基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响,进而从细胞及分子水平探讨Hcy引起动脉粥样硬化(AS)的发病机制.方法 采用不同剂量高蛋氨酸饲料饲喂新西兰大白兔,用HE染色法观察颈动脉增生.分离兔颈动脉平滑肌用胰消化酶处理后进行原代细胞及传代细胞培养.用黄嘌呤氧化法比色测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活力.用可见光比色法测定细胞内过氧化氢(CAT)的活力.免疫印迹法检测MMP-9蛋白的表达.用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测MMP-9 mRNA的表达.结果 光镜下可见高蛋氨酸饮食组局部颈动脉内膜损伤,内皮细胞坏死脱落,中膜平滑肌细胞排列紊乱,内膜下可见泡沫细胞.在高蛋氨酸饮食作用下,颈动脉平滑肌细胞内CAT、SOD 的活力明显增高;免疫印迹法结果显示,随着蛋氨酸含量的增加,各组动物颈动脉平滑肌细胞内MMP-9的蛋白量亦逐渐增高,差异有统计学意义(P＜0.05).经RT-PCR扩增,高蛋氨酸饮食组MMP-9 mRNA表达量增加.结论 高Hcy可加速动脉血管平滑肌细胞的增殖,并可能在一定剂量范围内造成动脉血管平滑肌细胞的超氧化损害增加,造成MMP-9高表达,使机体AS的进程加速.     

基质金属蛋白酶-9在高同型半胱氨酸大鼠中的表达及意义

目的观察基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在高蛋氨酸喂养所致的高同型半胱氨酸血症大鼠中的表达及意义。方法健康wistar大鼠20只,随机分为：正常对照组、高蛋氨酸组,每纽10只,并分别给予普通饲料,普通饲料中添加蛋氨酸（40g／kg饲料）。8周后,腹主动脉采血,同时摘取两侧颈总动脉。采用ELISA法检测大鼠血浆总同型半胱氨酸浓度与MMP-9表达;采用逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）及HE染色分别观察动脉组织中MMP-9 mRNA的表达及动脉损伤情况。结果高蛋氨酸组中血浆同型半胱氨酸浓度,血浆MMP-9蛋白浓度及动脉组织中MMP-9 mRNA的表达水平均显著高于正常对照组,差异具有统计学意义（P〈0．01）;相关性分析显示同型半胱氨酸浓度与MMP-9的表达存在线性正相关关系。同时镜下观察药物高蛋氨酸组动脉损伤程度较对照组明显。结论高同型半胱氨酸可通过上调MMP-9的表达发挥其致动脉粥样硬化的作用。     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对胰腺癌细胞基质金属蛋白酶的影响

目的研究低氧状态下乙酰肝素酶（heparanase,Hpa）反义寡核苷酸（antisenseoligodeoxynu—cleotide,AS—ODN）对胰腺癌高转移细胞株MIAPaCa-2细胞基质金属蛋白酶．2（matrixmetalloproteinase．2,MMP-2）和MMP-9的影响。方法以HpaAS—ODN预先阻断MIAPaCa-2细胞Hpa表达并低氧培养,观察MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表达的变化,明胶酶法检测MMP-2和MMP-9活性的变化,观察阻断Hpa对MMP-2和MMP-9表达及活性的影响。结果低氧培养条件下,MIAPaCa-2细胞MMP-2mRNA及蛋白表达略有上调,但是与常氧条件下培养对比,在6、12和24h差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。以ASODN阻断Hpa后,MMP-2mRNA及蛋白表达均无明显变化。低氧后6hMMP-9mRNA及蛋白表达开始升高,12h（P〈0．05）和24h（P〈0．01）更加明显。阻断Hpa表达后,MMP-9mRNA及蛋白表达在各时间段均有下降,而在24h下降明显,差异具有统计学意义（P〈0．01）。低氧后12h和24h,活化型的MMP-2和MMP-9均显著增强,当Hpa表达被抑制后,于12h（P〈0．01）和24h（P〈0．01）活化型的MMP-9活性受到明显抑制,而各时间内,活化型的MMP-2活性均不受HpaAS—ODN的影响（P〉0．05）。结论低氧可刺激MIAPaCa-2细胞MMP-9mRNA及蛋白的表达,增强酶活性。预先阻断Hpa表达在12h和24h可抑制MMP-9mRNA和蛋白的表达,降低MMP-9的活性,而对MMP-2则无明显影响。     

喉癌中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子和基质金属蛋白酶2、9的表达及其临床意义

目的 探讨喉癌中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白表达与肿瘤浸润、转移和预后的关系.方法 应用免疫组化EnVision二步法检测48例喉癌、15例喉炎组织中CD147、MMP-2、MMP-9的表达,并与临床病理特征和预后进行对比.结果 CD147、MMP-2、MMP-9在喉癌的阳性表达率分别为87.5%、75.0%、79.2%,明显高于喉炎组26.7%、6.7%、33.3%(P＜0.01);CD147、MMP-2、MMP-9的阳性表达均与喉癌临床分期和淋巴结转移有关;3项指标在喉癌中的表达具有相关性(P＜0.01);单因素生存分析显示CD147和MMP-2、MMP-9在表达阴性的5年生存率(分别为83.3%、83.3%、90.0%)高于表达阳性(25.0%、7.7%、18.2%),差异均有统计学意义(均P＜0.05);多元回归分析证实MMP-9是危险因子,其表达越高患者预后越差(P＜O.05).结论 CD147、MMP-2、MMP-9与喉癌侵袭、转移有关;CD147与MMP-2、MMP-9的产生有密切的关系;MMP-9可能成为独立的预后判断因子.     

基质金属蛋白酶MMP9与各类型冠心病的相关性

目的:探讨基质金属蛋白酶与各类型冠心病的关系。方法:对于96例冠心病入院患者,根据冠心病心绞痛类型分组并且抽取静脉血5ml,离心后取血清采用SDS-Page-Zymograph method检测MMPs含量,采用冠脉造影确定冠脉狭窄程度,进行统计学分析。结果:各组MMP9测量值,急性心肌梗死、劳力型不稳定心绞痛与正常组差异有统计学意义(P<0.05),变异性心绞痛与正常组差异无统计学意义(P>0.05),急性心肌梗塞组差异最明显。MMP9与冠状动脉病变程度积分(γ=5.01,P<0.05)之间有统计学意义,与病变血管程度有统计学意义,与病变分支数无统计学意义。结论:MMP9与急性心肌梗死、劳力型不稳定心绞痛、冠脉狭窄程度有统计学意义,而与变异型心绞痛、冠脉病变分支数无统计学意义。     

乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶-9在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨乙酰肝素酶（Hpa）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在胃癌组织中表达的临床病理意义及其与胃癌进展的关系。方法：采用免疫组化SABC法检测65例胃癌、20例癌旁非瘤组织中Hpa、MMP-9的表达,比较胃癌和癌旁非瘤组织以及不同肿瘤浸润深度及淋巴结有无转移胃癌患者Hpa、MMP-9的阳性表达,并对Hpa、MMP-9在胃癌中的表达进行相关性分析。结果：胃癌组织Hpa、MMP-9阳性表达率（60．0％、55．4％）均明显高于癌旁非瘤组织（15．0％、15．0％）（P均〈0．01）;Hpa及MMP-9表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移关系密切（P〈0．05）;胃癌组织中Hpa和MMP-9的表达呈正相关（rs=0．531,P=0．000）。结论：Hpa、MMP-9在肿瘤侵袭转移中起重要作用,可作为胃癌预后判断的指标。     

MMP2和MMP9在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP2)及基质金属蛋白酶-9(MMP9)与子宫内膜癌的侵袭和转移的关系.方法采用免疫组织化学法检测121例子宫内膜癌患者的子宫内膜癌组织中MMP2及MMP9的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果子宫内膜癌组织中MMP2及MMP9表达显著高于正常子宫内膜组织(P＜0.01),MMP2及MMP9强阳性表达率与手术病理分期、肌层浸润、病理分级及有无淋巴转移有关.结论MMP2及MMP9与子宫内膜癌的侵袭和转移有关.     

三氧化二砷对HL-60细胞MMP-2及MMP-9表达的影响

目的: 探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As₂O₃)对HL-60细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9表达的影响。方法: 以HL-60细胞为对象,加入0.0、2.5、5.0、7.5 μmol/L As₂O₃干预48 h。RT-PCR检测MMP-2和MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果: HL-60细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达随着As₂O₃浓度的增加而减少,5.0和7.5 μmol/L As₂O₃组与对照组差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。As₂O₃呈剂量依赖性抑制HL-60细胞MMP-2、MMP-9蛋白的表达,As₂O₃各组与对照组差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。结论: As₂O₃可抑制HL-60细胞MMP-2、MMP-9的表达,这一效应可能是As₂O₃治疗白血病的分子机制之一。     

盐酸右美托咪定对脓毒症急性肺损伤小鼠基质金属蛋白酶7抑制作用研究

目的:探讨右美托咪定对脓毒症急性肺损伤(ALI)小鼠基质金属蛋白酶7(MMP7)的抑制作用.方法:制备脓毒症致ALI模型,将昆明小鼠随机分为对照组和ALI组及治疗组,每组32只;损伤组及治疗组腹腔注射大肠杆菌脂多糖10 mg/kg,治疗组在注射脂多糖后给予腹腔注射右美托咪定25μg/kg,对照组仅注射等剂量生理盐水,并...     

卡维地洛对兔心肌梗死后胞外基质重构及基质金属蛋白酶的影响

目的:探讨第三代β受体阻滞剂卡维地洛对兔心肌梗死(MI)后胞外基质重构的作用及机制. 方法:将36只新西兰大耳白兔随机分为MI组、MI 卡维地洛组、假手术组,每组12只. 采用结扎冠状动脉左室支建立MI模型,另以开胸后在相应部位挂线不结扎为假手术组. 4 wk后行血流动力学检查; 测量体质量(BW)、左、右心室质量(LVW,RVW); 苦味酸-酸性品红染色检测非梗死区的胶原容积分数(CVF); 免疫组化检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,酶谱法测定二者的活性. 结果: MI后4 wk存活动物为MI组8只,MI 卡维地洛组9只,假手术组10只. MI组RVW, LVW/BW, 左室舒张末压(LVEDP)、非梗死区CVF均显著升高,MMP-2, MMP-9的表达及其活性亦明显升高(P均＜0.01);MI 卡维地洛组与MI组比较,RVW/BW, LVEDP, CVF显著降低(P＜0.05～0.01). MMP-2, MMP-9表达及活性显著减弱(P＜0.05～0.01). 结论:卡维地洛缓解了MI后心肌细胞外基质的重构,其机制可能与对MMPs的表达和活性调节有关.     

基质金属蛋白酶2(9)在糖尿病患者动脉粥样硬化斑块中的表达及意义

目的检测2型糖尿病患者动脉粥样硬化斑块内基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的表达和分布,探索MMP2和MMP9在糖尿病患者动脉粥样硬化斑块中表达的作用.方法应用免疫组织化学方法,分别检测MMP2和MMP9在13例健康人动脉,17例非糖尿病动脉粥样硬化患者及23例糖尿病患者动脉粥样硬化斑块内的分布和表达.结果抗MMP2、抗MMP9免疫沉积物主要集中在斑块核心周围,特别是在斑块的肩部和纤维帽.糖尿病组动脉粥样硬化斑块内抗MMP2免疫沉积物表达显著高于非糖尿病组(P＜0.05);糖尿病组动脉粥样硬化斑块内MMP9表达也显著高于非糖尿病组(P＜0.01).MMP2和MMP9在糖尿病患者动脉粥样硬化斑块中的表达明显高于非糖尿病患者.结论对动脉粥样硬化斑块不稳定性起重要作用的MMP2和MMP9,在糖尿病患者动脉中表达增强可能促进粥样硬化斑块的破裂.     

组织基质金属蛋白酶系统与心室重塑

急性心肌梗死后的左室重塑是导致心力衰竭重要的病理生理过程,也是导致心脏性死亡的重要危险因素.基质金属蛋白酶(MMPs)与基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)是维持细胞外基质(ECM)平衡的调控物质.心梗后的左室重塑与组织基质金属蛋白酶系统失衡导致的ECM降解有密切关联.本文对MMPs/TIMPs系统在心梗后心室重塑中的调节机制及其作用作一综述.     

普罗布可对冠心病患者血清中MMP-2的抑制作用

目的：探讨抗氧化剂普罗布可对冠心病患者血清中基质金属蛋白酶原2 (pro-MMP-2) 、基质金属蛋白酶2 (MMP-2)的抑制作用。方法：采用明胶酶谱法和酶法测定30例冠心病患者普罗布可治疗前及治疗1个月后静脉血pro-MMP-2 、MMP-2及血清胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) 、甘油三酯( TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平。结果：冠心病患者药物治疗后pro-MMP-2、MMP-2、TC、LDL-C较治疗前降低,上述各指标治疗前后比较差异均具有显著性（P<0.05）。药物治疗前后HDL-C、TG比较差异均无显著性（P>0.05）。结论：普罗布可在降低血清TC、LDL-C的基础上,对基质金属蛋白酶有抑制作用,提示普罗布可可作为一种稳定斑块的基质金属蛋白酶抑制剂应用于临床。     

同型半胱氨酸对A7r5细胞增殖及MMP-2表达的影响

目的:观察同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)增殖及基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响.方法:分别用0、0.25、0.5、1 mmol/L Hcy作用A7r5细胞48 h后,细胞计数及MTT法检测A7r5细胞的增殖情况,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MMP-2 mRNA的表达,免疫印迹法(Western blot)检测MMP-2蛋白的表达.结果:随着Hcy浓度的增加,A7r5细胞数目和吸光度(OD)值呈剂量依赖性增加,其中0.25、0.5、1 mmol/L Hcy组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05～P<0.01).MMP-2 mRNA的表达随着Hcy浓度的增加而增加,呈剂量依赖性,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05).Hcy呈剂量依赖性上调A7r5细胞MMP-2蛋白的表达,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05～P<0.01).结论:Hcy在一定范围内呈剂量依赖性促进A7r5细胞增殖,可在蛋白及mRNA水平使A7r5细胞MMP-2表达呈剂量依赖性增加,这一效应可能是Hcy致动脉粥样硬化的分子机制之一.     

实验性肝纤维化形成和逆转过程中基质金属蛋白酶-13蛋白及其mRNA表达

目的：研究基质金属蛋白酶－13（matrix metalloproteinase 13,MMP-13)在大鼠四氯化碳实验性肝纤维化形成和逆转过程中的表达。方法：应用免疫组织化学和核酸原位杂交方法研究MMP－13蛋白及其mRNA在四氯化碳实验性大鼠肝纤维化形成和逆转过程中的表达变化，并进行网织纤维染色和胶原纤维染色。结果：MMP－13蛋白及其mRNA在肝脏间质细胞和部分肝细胞中表达。在纤维化形成过程中MMP－13蛋白及其mRNA的表达量相对增加；在纤维化逆转过程中MMP－13蛋白及其mRNA的表达量是由强渐弱的动态变化。结论：肝脏间质细胞是MMP－13蛋白及其mRNA的主要细胞来源，MMP－13在肝纤维化形成和逆转过程中具有重要作用。