2013-2019年深圳市龙华区外环境禽流感病毒监测分析

目的 了解深圳市龙华区市场外环境禽流感病毒污染情况,及时发现人禽流感潜在危险因素,为科学防控禽流感疫情提供依据.方法 采用荧光定量PCR法对2013-2019年龙华区综合市场采集的1 211份禽类外环境标本进行甲型流感病毒(FluA)及亚型检测.结果 2013-2015年禁售活禽前626份外环境标本中,检出H7亚型病毒...     

不同核酸检测试剂盒检测环境样本禽流感病毒H5亚型的效果比较

目的 比较3种厂家检测禽流感病毒H5亚型的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)试剂对环境标本的检测效果。方法 采用3个不同厂家的核酸检测试剂盒检测活禽市场环境样本中的H5亚型禽流感病毒,比较不同试剂检测结果检出率的差异,使用TA克隆技术,将扩增产物连接到克隆载体上并测序分析,获得反应产物的序列。结果 3种检测试剂中,试剂盒C检测H5的检出率比A高(18.3%vs. 8.4%),差异有统计学意义(χ²=5.440,P=0.039)。对扩增产物片段序列进行分析发现,试剂A对标本核酸的H5扩增产物与KU042758.1序列的相似度最高,为100.00%,试剂C对标本核酸的H5扩增产物与CY091635.1序列的相似度最高,为97.92%,两者无明显的相似区域。结论 试剂C比试剂A对该批临床样本中H5的检出率更高,检出率的差异可能与不同试剂靶序列不一致以及试剂引物与样本核酸的匹配度有关。     

2020年广州市外环境禽流感病毒监测与职业暴露人群血清学分析

目的 分析2020年广州市新冠肺炎常态化管理背景下,禽类市场外环境禽流感病毒的污染情况和职业暴露人群的感染现状,为人禽流感疫情的防控提供科学依据。方法 2020年1—12月在广州市每个社区卫生服务中心辖区内选择1家禽类市场进行抽样,实时荧光定量PCR方法检测A型及H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸。采集职业暴露人群的血清标本,使用血凝抑制试验方法检测抗体滴度。结果 共检测17 068份环境标本,A型及H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸阳性检出率分别为16.94%、1.90%、0.12%、12.66%,H9亚型占A型禽流感病毒总阳性率的74.71%。8～9月和12月出现2次流行高峰,2～3月阳性率最低。广州市周边城区各型别禽流感病毒核酸阳性检出率高于中心城区(χ²=1 118.120、86.531、9.576、881.309,P<0.05)。A型禽流感病毒核酸阳性检出率最高的标本类型分别为禽类饮用水(26.10%)、脱毛机内壁(21.49%)和档口地面(21.08%)。1 712份血清标本,48份为血凝素抗体阳性,H5、H7、H9亚型禽流感病毒均有检出。结论 ...     

广东省肇庆市2015—2018年禽类市场环境禽流感病毒监测

目的 了解肇庆市2015—2018年禽类市场环境中禽流感病毒的动态分布情况,为肇庆市禽流感预警和防控工作提供参考依据。方法 采集2015—2018年肇庆市9个县（市、区）的禽类市场环境标本,用实时荧光PCR法进行A型流感病毒(FluA)核酸检测,FluA阳性标本进行H5、H7、H9亚型流感病毒分型。结果 共采集禽类市场环境标本 4 508份,其中FluA核酸阳性标本共1 154份,总阳性检出率为25.60%;H5、H7、H9和A型未分型阳性检出率分别为 5.72%、2.75%、17.48%和4.44%。FluA阳性检出率在肇庆市9个县（市、区）之间差异有统计学意义(P<0.05),其中阳性检出率最高是鼎湖区。FluA阳性检出率及其他亚型阳性检出率在1、2月份明显高于其他月份,冬春季为禽流感病毒的感染高峰期。FluA阳性检出率在5种类型监测标本之间差异具有统计学意义(P<0.05),其中宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本(简称案板)阳性检出率最高(33.04%),笼具表面擦拭标本(简称笼具)次之(27.22%)。结论 肇庆市禽类市场环境中存在H5、H7、H9及多种亚型混合的致病性禽流感病毒潜在传播风险,尤其在冬春季,需结合人感染高致病性禽流感的流行状况,加强禽类从业人群的健康教育与禽类市场环境禽流感病毒监测,对人感染禽流感发生的预警和风险评估有重要意义。     

惠州市2013-2015年外环境禽流感病毒监测分析

目的 了解惠州市外环境H5、H7、H9亚型禽流感病毒的动态分布情况,为防治人感染禽流感提供科学依据.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应方法对2013-2015年惠州市外环境标本(禽类粪便、笼具表面、刀具、地面、砧板等)进行禽流感病毒核酸检测,阳性者进一步检测H5、H7、H9亚型核酸,数据用Excel软件进行统计分析.结果 2013-2015年共采集并检测各类环境标本847份,其中流感病毒A型(FluA)阳性标本298份,阳性率为35.18％,H9亚型阳性占63.09％,H5亚型阳性占15.77％,H7亚型阳性占3.36％.不同场所和不同类型标本检测阳性率最高分别为农贸市场和宰杀或摆放禽肉案板表面,阳性率为41.23％及52.41％.结论 惠州市活禽市场特别是农贸市场等外环境中检出H5、H7、H9及多种亚型混合等多种亚型禽流感病毒存在,存在感染人的风险,应积极采取综合性防控措施.     

2019年广州市花都区涉禽场所外环境禽流感病毒监测分析

目的 掌握2019年广州市花都区外环境中禽流感病毒的分布情况及流行趋势,为制定人感染禽流感防控决策提供科学依据.方法 采集2019年花都区禽类市场环境样本,采用实时荧光定量PCR法进行A型流感病毒(influenza A virus,FluA)核酸检测,FluA核酸阳性样本进行H5、H7、H9亚型流感病毒分型,样本率间...     

商丘市2016—2020年流感病毒核酸监测结果分析

目的：分析商丘市2016—2020年流感病毒核酸监测结果。方法：收集中国流感监测信息系统中2016—2020年商丘市哨点医院流感样病例（ILI）监测数据,采用实时荧光定量PCR法检测流感病毒核酸,并对ILI监测阳性结果进行病原学分析。结果：2016—2020年商丘市第一人民医院（哨点医院）共报告3889份ILI,阳性785份,阳性率为20.19%;785份阳性样本中,甲型阳性样本450份（57.32%）,其中季节性H3N2阳性238份、新甲H1N1阳性212份,乙型阳性335份（42.68%）;商丘市流感流行趋势具有明显冬春季分布的特点,12月至次年2月达到流行高峰,次年3月或4月流行强度开始回落;不同性别阳性率比较,差异无统计学意义（P<0.05）;0～4岁采集样本例数最多,5～14岁阳性率最高。结论：2016—2020年商丘市流感病毒流行高峰为12月至次年2月,0～14岁为易感群体,冬春季节是重点防控时期。     

十堰市2013年三类场所禽流感核酸检测结果分析

目的了解2013年十堰市3类场所禽流感流行特点,为有效防控禽流感提供依据。方法 2013年选择十堰市与禽类有接触的且有代表性的3类场所,按月份采集不同种类的外环境标本160份,采用Real-time PCR方法检测流感病毒核酸,使用SPSS 17.0进行数据分析。结果外环境中甲型流感(Flu A)、H5、H9、H5-H9、N1检出率分别为29.38%、21.25%、11.88%、6.88%、4.38%;3类场所中大型家禽养殖场未检测到阳性标本,活禽农贸市场与大型家禽屠宰厂流感病毒核酸检测阳性率分别为45.00%和48.33%;大型家禽屠宰厂H5亚型阳性率明显高于H9亚型(χ2=24.020,P‐0.05);在活禽农贸市场检出7份N1核酸阳性标本,其H5亚型与H9亚型存在着显著性差异(χ2=4.091,P‐0.05);外环境中禽流感病毒核酸检出率整体上下半年高于上半年,且存在两个峰,4月与11月。结论十堰市3类场所分布着包括H5N1在内的多种禽流感病毒,相关部门应在上半年4月与下半年11月重点监测活禽农贸市场和大型家禽屠宰厂禽流感感染状况,并制定防控多种禽流感亚型的综合措施。     

高致病性禽流感通用和H5亚型荧光定量PCR方法的建立

目的:建立高致病性禽流感H5亚型荧光定量PCR方法.方法:根据禽流感病毒(AIV)M基因和H5-HA基因分别设计AIV通用和H5亚型特异荧光定量PCR引物和探针,优化反应体系和反应条件,分析该试剂的敏感性、特异性、重复性等.结果:经优化反应体系和反应条件后,AIV通用试剂和AIV-H5试剂的敏感性达到1×101.25EID50水平;与细胞培养比较,AIV-H5试剂Kappa吻合系数κ为0.991(P<0.01),统计学显示两种检测结果的吻合度很强;批内和批间精密度CT值的CV值均远小于10%,可重复性良好.结论:本项目研制的AIV通用试剂和AIV-H5试剂的敏感性、特异性、重复性均好,适合在禽流感疫情和疑似H5禽流感病例中检测使用.     

无锡市活禽交易市场家禽禽流感监测

目的 了解无锡市活禽交易市场中家禽禽流感病毒感染情况,评估人感染禽流感风险。方法 采集禽类咽拭子和肛拭子标本,采用荧光定量PCR技术检测禽流感甲型通用及H5、H7、H9亚型病毒核酸,并进行统计学分析。结果 2014年11月—2015年3月共采集并检测禽类标本1 962份,甲型流感病毒核酸阳性248份,阳性率为12.64%;检出的禽流感病毒型别以H9亚型194份(9.89%)为主,其次为H5亚型38份（1.94%）、H7亚型8份（0.41%）和混合型8份（0.41%）。阳性率较高的监测场所为城乡活禽市场(24.06%)和农贸市场(14.06%)。监测期间,不同月份禽流感病毒阳性率差异有统计学意义(χ²=74.60,P<0. 01)。不同类型标本中,除混合感染外,咽拭子中禽流感病毒核酸检出率均高于肛拭子。结论 无锡市活禽市场禽类禽流感病毒污染较为严重,且型别多样,存在人感染禽流感病毒的风险,应加强禽类及其环境中禽流感病毒的实时监测。     

建立禽流感H7和H9亚型荧光定量PCR检测方法

目的建立高致病性禽流感H7和H9亚型荧光定量PCR方法。方法根据禽流感病毒(avian influenzavirus,AIV)HA-H7基因和HA-H9基因分别设计特异AIV H7和H9亚型特异荧光定量PCR引物和探针,优化反应体系和反应条件,分析该试剂的敏感性、特异性、重复性等。结果经优化反应体系和反应条件后,AIV H7试剂和AIV H9试剂的敏感性达到1×104.67EID50和1×103.80EID50水平,特异性与细胞培养敏感性类似;批内和批间精密度Ct值的CV值均远小于10%,可重复性良好。结论本项目研制的AIV H7和H9亚型的敏感性、特异性、重复性均好,适合在禽流感H7和H9亚型疫情和人类疑似禽流感病例中检测使用。     

不同职业暴露人群感染H5N1禽流感病毒风险性分析

目的了解长沙地区不同类型禽类职业暴露人群高致病性禽流感H5N1亚型病毒的抗体分布状况,分析不同职业暴露人群H5N1感染的风险性。方法采集菜市场家禽屠宰零售人员、大型家禽饲养企业工人和农村个体家禽散养人员的血清标本,用单放射免疫扩散溶血技术（SRH）检测H5N1抗体。结果市场零售人员、农村个体家禽散养人员、企业饲养人员H5N1感染率分别为25%、1%和1.92%,男性从业人员H5N1抗体阳性率为10%,女性为23.88%。结论市场零售人员感染H5N1风险性远高于农村散养人员和企业饲养人员,不同职业人员中女性H5N1抗体阳性率高于男性从业人员。     

深圳市龙岗区涉禽场所禽流感外环境监测结果分析

目的了解深圳市龙岗区涉禽场所外环境禽流感病毒的污染情况,探索影响其病毒核酸检出率的因素。方法 2015年11月—2016年4月,选择龙岗区不同涉禽场所,按月采集不同类型外环境标本,采用RT-PCR方法检测禽流感病毒核酸。结果 590份外环境标本中,215份检出A型流感病毒核酸,A型、H5亚型(均为H5N6)、H9亚型和H7N9禽流感病毒核酸检出率分别为36.44%、18.81%、10.17%和2.37%。非条件多因素Logistic回归分析显示,市场禁售活禽/采取休市措施、市场改造升级、销售冰鲜禽类及其制品可降低外环境标本A型、H5亚型、H9亚型流感病毒核酸的检出率,而小型活禽零售市场、市场通风不良、2016年1月—4月间外环境采样是促进A型、H5亚型和H9亚型流感病毒核酸检出的危险因素。结论深圳市龙岗区H5、H9、H7N9等禽流感病毒的污染广泛,涉禽市场暴露存在人感染禽流感疫情的风险。加强涉禽市场外环境监测力度,全面禁售活禽、推广"冰鲜上市"是降低人禽流感发生风险的关键。     

广东省揭阳市2009—2018年流行性感冒病原学监测

目的 分析揭阳市2009—2018年流感病原学监测结果,了解揭阳市流感流行规律,为流感防控工作提供科学依据。方法 对揭阳市2009—2018年国家级流感监测哨点医院采集的流感样病例（ILI）咽拭子标本,采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）的方法检测流感病毒核酸,并对数据进行分析。结果 揭阳市2009—2018年国家级哨点医院共报告就诊病例为1 264 223例,报告流感样病例16 266例,ILI率为 1.29%。2009—2018年共采集咽拭子标本9 322份,共检出1 250份阳性标本,阳性率为13.41%,监测峰值为每年冬春季和夏季。2009年流感病毒以新甲型H1N1为主,2010和2011年流感病毒以B型为主,2013和2016年流感病毒以2009年新甲型H1N1为主, 2012、2014、2015和2017年流感病毒以季节性H3为主, 2018年流感病毒以B型Yamagata系为主。结论 揭阳市2009—2018年流感流行的季节性特征明显,每年优势毒株不同,交替流行,建议继续加强流感病毒病原学监测。     

实时荧光定量PCR在铁路运输动物携带甲型流感病毒检测中的应用

目的探讨应用实时荧光PCR对铁路运输动物携带甲型流感病毒进行快速检测的可行性,为制定铁路系统有效的流感监测方案奠定基础。方法采集死禽咽喉部和泄殖腔拭子,活体动物用拭子涂抹泄殖腔外周,粪便和毛用拭子涂抹表面。依据《全国流感监测实施方案》、甲型流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)说明书以及ABI7500F型实时荧光定量PCR的SDS软件操作。结果共采集广州中铁快运货场动物样本250份,检出甲型流感病毒核酸阳性11份,阳性率4.4%,其中以鸽类样本的阳性检出率最高,鹅次之,鸭最低。结论实时荧光PCR检测方法适合铁路运输的实际要求,结合进一步病毒分型和病毒基因测序,对掌握病毒流行趋势,做好预防控制工作具有重要意义。     

深圳市首例人禽流感病例的实验室检测分析

目的对深圳市首例人禽流感病例进行实验室确诊，并研究其携带病毒关键基因的遗传特性。方法采用实时荧光RT-PCR方法检测高致病性禽流感病毒（H5N1）核酸，采用血凝抑制方法检测患者血清抗高致病性禽流感病毒的抗体滴度变化，利用MEGA3．1软件分析患者携带病毒HA、NA基因的进化关系。结果成功确认了深圳市首例人禽流感病例，患者携带病毒为H5N1高致病性禽流感病毒，HA、NA基因进化关系比较特殊。结论深圳地区禽鸟中可能携带高致病性禽流感病毒，具有潜在感染人类的可能。