2012年武汉地区手足口病肠道病毒分型与临床特征分析

目的:了解武汉地区手足口病肠道病毒分型和临床特征,为手足口病预防及治疗提供依据。方法:采集手足口病患者咽拭子标本,采用实时荧光定量法检测CA16、EV71和通用型肠道病毒,同时搜集手足口病患儿的临床资料,分析不同病毒型手足口病患儿临床特征。结果:2012年1-12月共收集手足口病咽拭子标本3 083例,其中EV71阳性765例,阳性率为24.81%;CA16病毒阳性559份,阳性率为18.13%;EV71和CA16双阳性61例,阳性率为1.99%;通用型肠道病毒阳性1 698例,阳性率55.07%。1-3岁是手足口病高发年龄段,各病毒型均表现为男性多于女性。3 083例手足口病患者,临床上均有手、足、口或臀部皮疹,大部分患者有发热,部分患者伴有神经系统症状。EV71感染者出现发热、神经系统症状及白细胞增多的比例高于CA16和通用型肠道病毒阳性者。通用型肠道病毒阳性患者出现肺部并发症比例多于EV71感染者。结论:武汉市2012年手足口病主要由EV71、CA16及通用型肠道病毒引起,且以通用型肠道病毒为主。了解不同病毒型手足口病临床特征,对于手足口病预防和治疗具有重要意义。     

手足口病患者病原学快速诊断方法的比较研究

目的比较荧光RT-PCR法与胶体金免疫层析法（GICA）在手足口病（HFMD）患儿病原学快速诊断中的应用价值,为实验室诊断提供参考。方法选取HFMD患儿454例（其中重症患儿190例,普通患儿264例）以及非肠道病毒感染、健康体检儿童共117例。同时采集患儿急性期咽拭子和血清标本各1份,分别进行肠道病毒EV通用型、EV71型和CA16型病毒核酸以及血清EV71-IgM、CA16-IgM抗体检测。比较两种方法对EV71、CA16的检测结果;并以RT-PCR法为金标准,对GICA法检测的诊断性能进行评价。结果荧光RT-PCR法检测重症HFMD组EV71阳性率72.6%（138/190）,CA16阳性率10.0%（19/190）;普通HFMD组EV71阳性率28.0%（74/264）,CA16阳性率30.3%（80/264）,两组HFMD肠道病毒感染分布构成比差异有统计学意义（字2=88.66,P=0.00）。454例HFMD患儿中,RT-PCR法与GICA法检测EV71型,阳性率分别为46.7%和58.6%,差异有统计学意义（字2=39.01,P=0.00）;RT-PCR法与GICA法检测CA16型,阳性率分别为21.8%和30.0%,差异有统计学意义（字2=22.74,P=0.00）。以RT-PCR法法为金标准,GICA法诊断EV71的灵敏度95.7%,特异度84.4%,阳性预测值76.3%,阴性预测值95.2%,准确度84.1%;诊断CA16的灵敏度89.9%,特异度86.7%,阳性预测值65.4%,阴性预测值96.8%,准确度87.4%。结论GICA法是一种简便、灵敏的检测方法,可用于HFMD病原体的快速筛查,与RT-PCR法具有较好的互补性;两种方法联合检测对HFMD的早期诊断与防控具有十分重要的意义。     

RT-PCR检测运城市手足口病患儿肠道病毒结果分析

目的：了解本地区手足口病病毒感染情况,为临床医师治疗手足口病提供基础数据。方法选取我院感染性疾病科收治的手足口病患儿86例,用实时荧光定量 PCR （RT-PCR）检测患儿咽拭子肠道病毒通用型（EV）、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）。结果 EV、EV71、CA16阳性率为分别为44.2%,20.9%,3.5%;男女患儿EV、EV71、CA16阳性率分别为44.4%和43.9%,17.8%和24.4%,2.2%和4.9%;<1岁手足口病患儿,EV、EV71、CA16阳性率分别为46.2%,7.7%,0%;1岁~2岁患儿,EV、EV71、CA16阳性率分别为37.2%,20.9%,2.3%;≥2岁患儿,EV、EV71、CA16阳性率分别为53.3%,26.7%,6.7%。结论运城市手足口病病原以EV71型为主,女患儿EV71感染阳性率高于男患儿,≥2岁患儿病毒检出阳性率最高。     

辽阳市手足口病患者标本肠道病毒检测结果

目的 通过对辽阳市2016年手足口病的临床诊断病例的咽拭子标本和粪便标本进行肠道病毒核酸检测和病毒分离培养,比较不同病毒分型下两种标本类型阳性率的差异,探究不同类型标本对手足口病实验室诊断的指导意义。方法 收集107例辽阳市2016年手足口病的临床诊断病例的咽拭子和粪便标本,提取样本核酸,用实时定量PCR法检测肠道病毒通用引物、肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型,通过McNemar检验以及Kappa检验对检测结果进行统计学分析。结果 配对采集病例两种类型标本共214份,肠道病毒通用引物、肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型的咽拭子标本核酸检测阳性率分别为48.6%、8.4%、22.4%;粪便标本的核酸检测阳性率分别为59.8%、11.2%、18.7%。PE、EV71病毒的粪便标本的检出率均大于咽拭子标本的检出率,但CV-A16病毒的粪便标本的检出率却小于咽拭子标本的检出率。其他肠道病毒的咽拭子标本和粪便标本的病毒检出率差异有统计学意义（P<0.05）,粪便标本肠道病毒检测阳性率高于咽拭子标本,同时显示较差的一致性（P<0.05）。结论 在手足口病实验室肠道病毒检测中,粪便标本的肠道病毒检测阳性率高于咽拭子标本,今后的手足口病防治工作中为提高标本检测阳性率,若时间紧迫应首先考虑选择采集粪便标本加以检测。     

1株肠道病毒71型毒株的分离与鉴定

目的 探讨手足口病病原体肠道病毒71型(EV71)的分离与鉴定方法。方法 采集手足口病疑似病例的咽拭子标本1份接种于人横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma cell, RD细胞),通过观察病毒的细胞病变效应(cytopathic effect, CPE)来分析EV71的分离效果。分别利用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹分析(Western Blotting)方法来鉴定EV71病毒特异性核酸和蛋白。扩增EV71VP1区全长基因,对其序列进行同源性比较及遗传进化分析。结果 手足口病疑似病例咽拭子标本接种RD细胞传代至第2代后出现CPE。RT-PCR和Western Blotting检测结果均显示,感染组RD细胞中有EV71病毒特异性条带,暂命名为EV71分离株2016SHYP001。序列分析结果显示,2016SHYP001株病毒的VP1区核苷酸与C型代表株的同源性较高,为93.1%~98.3%;其中与C4a亚型代表株的同源性最高,为98.3%。进化树分析发现本地流行株与深圳地区流行株的亲缘较近。结论 成功分离出一株新的EV71病毒株2016SHYP001,其株型为C4a亚型。     

遵义市118例手足口病的核酸检测统计学分析

目的：研究2011年遵义市爆发的手足口病核酸检测与分型的关系,了解此次手足口病核酸检测的临床意义。方法采用信号引物转移定性聚合酶链反应测定患者鼻咽分泌物、大便和痰标本中的萨科奇病毒A 16型（coxsackievirus,CA 16）、肠道病毒71型（enterovirus 71,EV 71）和肠道病毒通用型(universal enterovirus,EV+）三种核酸RNA的载量,用全自动罗氏480 PCR分析仪进行核酸阴阳性分析。结果手足口病核酸RNA定性检出阳性率为58.2%,这次流行以EV+为主占45.1%,其次EV 71占31.1%,CA 16占16.4%,各组间差异有统计学意义（P<0.05)。而且混合感染比例占31.1%,各组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论这次遵义市手足口病流行感染主要是以EV+为主,以及EV+与EV 71或CA 16混合感染的手足口病,其次是单纯的EV+,EV 71和CA 16单一病毒感染的手足口病。     

2010年河池市手足口病病原体检测分析

目的通过对河池市手足口病病例进行病原体检测,明确河池市手足口病流行的主要病原体,为手足口病的诊治、监测及防控提供依据。方法对2010年4-10月份140例临床诊断为手足口病患者的肛拭子和咽拭子标本203份,采用实时荧光PCR法同时检测EV、EV71和CA16病毒核酸。结果 140例病例中EV核酸阳性107例,阳性率76.43%,其中EV71阳性率47.86%(67/140),CA16阳性率10.00%(14/140),其他肠道病毒阳性率18.57%(26/140)。重症病例72例,为5岁以下儿童,其中EV71病毒50例,其他肠道病毒12例。结论①2010年河池市手足口病流行的主要病原体为EV71病毒;②实时荧光PCR法检测EV、EV71和CA16病毒核酸方法简便,速度快,是一种较好的检验方法。     

湘潭市手足口病病原学实验室检测分析

目的:根据手足口病病原学检测结果分析该病流行特征,同时评估从不同部位采集样品的阳性检出率,为手足口病的防控提供科学依据。方法:临床诊断为手足口病例的咽拭子标本,疱疹液标本,粪便标本,采用实时荧光(定量)PCR进行检测,对总肠道病毒阳性的标本,进行EV71和CA16分型,检测结果分组统计分析。结果:在652份监测病例样品中,总肠道病毒阳性样品446份,其中EV71阳性199份,占44.52%;CA16阳性176份,占39.37%;其它型肠道病毒阳性71份,占15.97%。在103份重症病例样品中,总肠道病毒阳性91份,其中EV71阳性77份,占84.62%,CA16阳性3份,占3.29%,其它型肠道病毒阳性10份,占10.10%。结论:湘潭市手足口病流行病原以EV71型和CA16型交替流行;重症病例主要由EV71引起;疱疹液,粪便标本的阳性检出率高于咽拭子。     

2011-2013年手足口病病原谱及临床特征分析

目的：探讨2011-2013年手足口病（HFMD）病原体变化趋势。方法采集4064例在我院就诊的HFMD患者的咽拭子标本并提取核酸,采用实时荧光定量PCR方法检测肠道病毒通用型（EV）,肠道病毒71型（EV71）及柯萨奇病毒A组16型（CA16）。结果3年间6岁以上患儿占96.0%;发病以5~7月份为主,占73.5%。2011-2013年HFMD 患者 EV71、CA16和未分型肠道病毒的检出率依次为42.6%、35.3%、18.5%,16.1%、22.6%、11.5%,41.3%、42.1%、70.0%,差异有统计学意义（x2=343.3,P＜0.05）。2013年EV71、CA16检出率明显低于2011、2012年,未分型病毒检出率明显增高（P均＜0.017）。613例重症HFMD患儿中,EV71感染占59.2%、CA16感染占11.1%,未分型病毒感染占29.7%,且均以肺炎合并脑干脑炎为主。结论2011-2013年HFMD病原谱发生了变化,未分型肠道病毒增多,需引起重视。     

环介导等温扩增法快速检测手足口病病原体

目的:建立逆转录(RT)-环介导等温扩增方法(LAMP),以快速检测手足口病最重要的两种病原体:肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)。方法:收集手足口病患儿咽拭子标本93份,针对EV71和CA16病毒的VP1基因特异性序列8个区域各设计6条LAMP引物,分别于63℃(EV71)、65℃(CA16A)扩增1 h,日光下观察结果,与实时荧光定量PCR比较检测特异性和敏感性。结果:EV71、CA16的LAMP最低检测限均为500拷贝/管,与对照病毒无交叉反应。93份标本中,RT-PCR方法检测显示EV71阳性44例,CA16阳性36例;RT-LAMP方法检测显示EV71阳性46例,CA16阳性36例,两种方法间比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:应用RT-LAMP检测手足口病病原体EV71、CA16快速、灵敏、经济、特异性高,适合在基层医疗机构推广应用。     

2010年云浮市手足口病病原学监测结果分析

目的对2010年云浮市哨点医院手足口病（HFMD）监测结果进行分析,了解云浮市手足口病的病原学特征,为云浮市手足口病的防治提供科学的依据。方法收集73例监测哨点医院手足口病病例送检的粪便标本,应用Real time—PCR技术检测肠道病毒7l型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CAl6）、非EV7l和CAl6的其它肠道病毒核酸。结果 73例手足口病患者中42例为肠道病毒核酸阳性,阳性率为57.5%,其中EV71病毒、CAl6病毒以及非EV7l和CAl6的其它肠道病毒分别占总阳性数的71.4%、7.1%、21.4%。三种不同型别肠道病毒在全年中交替变更;病毒检出高峰出现在5～6月,病例人群男性高于女性（1.92：1）,4岁以下儿童病例阳性率最高。结论云浮市2010年手足口病疫情发病高峰为5-6月,4岁以下儿童病例发病数最多,肠道病毒EV71型是2010年云浮市手足口病流行的主要毒株类型。开展手足口病流行病学和病原学研究,将有助于提出更好的预防和控制措施。     

2012年贵阳地区住院患儿手足口病的病原学研究

目的：了解2012年贵阳地区儿童手足口病住院患者的病原体分布情况,为手足口病的诊断、治疗及预防提供依据。方法收集3179例手足口病患儿资料,用荧光定量PCR法进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）定量分型。结果共检测手足口病病例标本3179份,CA16阳性151份,占4．75％;EV71型331份,占10．41％;CA16和EV71混合感染7份,占0．22％;其他型肠道病毒897份,占28．22％。全年有2个发病高峰,分别为4～7月及10～11月,发病年龄主要集中在5岁以下儿童,其中0～3岁发病最高;男性患儿多于女性。结论2012年贵阳地区儿童手足口病住院患者的病原学分布以其他型肠道病毒和EV71型为主。     

2011-2012年深圳市重症手足口病的病原学和流行病学分析

目的了解深圳市手足口病(HFMD)重症病例的病原学类型和流行病学特征,为本地区手足口病的预防控制提供理论依据。方法收集2011-2012年深圳市各医院送检的220例手足口病重症病例的粪便样本,应用Real-time RT-PCR技术检测肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)、肠道病毒通用型(EN)。结果 2011-2012年深圳市共发现220例重症手足口病病例,其中,2012年HFMD重症患者数量为2011年的32.53%。220例重症手足口病病例中,EV71型占80.45%,CA16型占5.00%,其他肠道病毒则占13.19%。2011年5、6月为深圳市手足口病重症的高发月份,而2012年5月和7月为高发月份。1岁组重症病例最多有82人,占重症病例总数的37.27%。重症病例人群男性多于女性(1.62∶1)。结论 EV71是引起深圳市手足口病重症病例的最主要原因,其他肠道病毒比CA16更容易引起手足口病重症。     

惠州地区2010年手足口病实验室检测分析

目的了解惠州市手足口病例肠道病毒的感染情况,为制定预防和控制肠道病毒感染策略提供依据。方法采集2010年5月至12月惠州市中心人民医院、惠州市第一人民医院等全市各大医院的998例疑似手足口病患者的疱疹液、脑脊液、咽拭子、粪便等标本,采用实时荧光RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒（EV）、肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CA16）。结果在检测的682份EV阳性标本中,EV71阳性率偏高,为总数的48.9%,而CA16阳性率较低,为总数的5.71%;在998例疑似手足口病患者中,男性患者居多,占62.12%,女性患者相对较少,占37.88%;0～4岁的儿童是手足口病的高发人群,占所有患者的92.99%;5～7月的夏季为手足口病感染的高峰期,其阳性率占98.9%。结论惠州市2010年5月～12月手足口病的病原体以肠道病毒71型为主,0～4岁的男性儿童是感染肠道病毒的高危人群,5～7月的夏季较为高发。     

2010年东莞市手足口病病原监测分析

目的了解东莞市手足口病病原谱构成及其流行特征。方法采用实时荧光PCR检测2010年手足口哨点监测医院上送的标本,应用Excel和SPSS分析。结果380例病原阳性病例中,EV71（占29.47%）所占构成比略高于CoxA16（占24.47%）,未分型肠道病毒占46.05%。病原感染构成比无性别差异,以5岁以下人群感染为主（占96.72%）。EV71与CoxA16在0~1岁人群感染构成比最低（各为14.43%与11.34%）,在1～5岁人群感染构成比较稳定（占36.13%）,6岁后以EV71感染为主（占40.0%）;3～7月以EV71与CoxA16流行为主,其中6～7月以EV71为主（约占47.91%）;8月后以未分型感染为主,其中10～12月感染构成比最高（占87.50%）;各监测点EV71与CoxA16呈交替流行,未分型肠道病毒占较大比例。病例样品检出率较高（达89.41%,380/425）,以粪便为主（占87.29%）,其检出率明显高于肛拭子（73.08%）。结论东莞市手足口病病原谱构成与流行在人群年龄、时间、地域方面均呈动态变化,以CoxA16伴随EV71流行为主,其它未分型肠道病毒也占相当比重。     

菏泽市2013～2017年手足口病病毒学监测分析

目的 探讨菏泽市2013～2017年手足口病流行病毒类型,为菏泽市手足口病疫情的防控和实施策略提供科学依据。 方法 2013～2017年菏泽市各县区手足口病定点医疗单位收集的临床诊断病例的粪便或肛拭子标本,提取病毒核酸,应用实时荧光定量PCR进行病毒的核酸检测;用描述性流行病学方法分析流行病学特征。 结果2013～2017年共收集样本2751份,其中阳性样本2294份,阳性率为83.39%;EV71阳性样本1111份,阳性率为40.39%;CA16阳性样本387份,阳性率为14.08%;其他肠道病毒阳性样本796分,阳性率为28.93%。2013年、2015年优势株为EV71;2014年优势株为CA16;2016、2017年以其他肠道病毒型为优势株。不同年龄组、性别、季节分布差异有显著性（P<0.05）。各年手足口病毒型别分布差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 2013~2017年菏泽市手足口病流行病毒类型从高到低分别是EV71、其他肠道病毒和CA16。EV71是引起重症病例的主要病原体。在高发季节前,应加强托幼机构及散居儿童的卫生健康教育和防控力度,提前做好低幼儿童的疫苗宣传及接种工作;强化手足口病监测力度。     

1073例儿童手足口病病原学检测结果及临床特征分析

目的 了解手足口病(HFMD)儿童病例中肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的感染状况及重症HFMD病例的临床特征和实验室检查结果.方法 采集HFMD患儿咽拭子标本,检测EV71和CA16感染情况,分析患儿性别、年龄分布情况并对重症患儿的临床特征和实验室检查结果进行回顾性分析.结果 1073例H...