一起肠炎沙门菌引起的食物中毒事件的病原学检测及溯源

目的 通过实验室检测分析,查明某起食物中毒事件的原因,为今后防控细菌性食物中毒提供参考。方法 针对各县区送检的病人肛拭子或粪便、市场监督管理局送检的食品样本进行食源性致病菌PCR检测、分离培养、生化鉴定、血清学分型、药敏实验、脉冲场凝胶电泳（PFGE）,分析不同菌株之间的同源性。结果 61份临床及食品样本经荧光定量PCR检测,59份为沙门菌阳性,并分离鉴定到59株沙门菌,经血清分型确认均为肠炎血清型,59株肠炎沙门菌的药敏结果大致相同,PFGE带型完全一致。结论 本次食物中毒事件是由于患者食用了经相同肠炎沙门菌污染的食物引起的,通过PFGE基因分型技术,对本次肠炎沙门菌引起食物中毒事件成功溯源。     

一起由两种型别沙门菌混合感染引起暴发疫情的病原特征

目的 对一起由科瓦利斯沙门菌和鼠伤寒沙门菌混合感染引起的食源性暴发的病原体进行耐药分析和分子分型。方法 参照 GB4789.4-2010标准对可疑菌落进行生化鉴定、血清学分型及药敏试验后,进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型。结果 从两份暴发病例粪便样品中同时检出科瓦利斯沙门菌（8,20∶z4,z23∶-）2株和鼠伤寒沙门菌（4,5,12∶i∶1,2）2株。选择13种常用的抗生素进行药敏试验, 4株沙门菌均对阿米卡星和庆大霉素耐药,其中2株科瓦利斯沙门菌还同时表现出对莫西沙星和四环素耐药。2株科瓦利斯沙门菌和2株鼠伤寒沙门菌的PFGE指纹图谱分别完全一致。结论 这是一起由科瓦利斯沙门菌和鼠伤寒沙门菌混合感染所致的食源性暴发,PFGE分子分型可有效应用于食物中毒的溯源分析。     

广东省清远市清城区一起食源性疾病暴发调查

目的 对一起酒店婚宴食源性疾病暴发事件进行调查和分析,探索致病因素,提出防控措施,为类似事件处置提供参考。方法 对病例进行个案调查描述流行病学特征。开展病例对照研究探讨危险因素。开展现场卫生学调查,采集相关样品并进行实验室检验。结果 核实病例共90例,罹患率7.20%,均为参加同一婚宴（或进食了婚宴食物）的宾客。临床表现为发热（100.00%）、腹泻（98.89%）、腹痛（95.56%）、乏力（80.00%）、寒战（61.11%）、呕吐（37.78%）等,腹泻次数多为（10~20）次/d,大便性状为黄色或黄绿色水样。病例对照研究显示,国际炒饭（OR=90.00,95%CI:4.81~1 683.86）是危险食物。分别从28份病例大便或肛拭子、2份厨房助手肛拭子和7份留样食物样品中检出肠炎沙门菌,菌株具有同源性。结论 这是一起发生在酒店婚宴中由肠炎沙门菌污染引起的食源性疾病暴发事件。引起发病的餐次是2月14日谢刘婚宴,食物为国际炒饭。建议加强对餐饮服务单位特别是承接大型宴会酒店的监督管理,消除食品生产过程存在的安全隐患,预防类似事件的发生。     

一起幼儿园诺如病毒感染暴发疫情的调查

目的 查明荆州市某乡镇某幼儿园一起腹泻暴发疫情的致病因子、传染源和传播途径。方法 制定病例定义开展病例搜索,通过面访和电话调查开展现场流行病学调查,采用回顾性队列研究进行分析。开展现场卫生学调查,利用RT-PCR方法对病例标本、环境标本进行检测。结果 疫情从2月13开始至2月18日结束,共发生诺如病毒感染病例91例,罹患率为18%（91/520）。回顾性队列研究未发现可疑餐次。幼儿园对呕吐物未采取消毒措施,也未采用人员疏散措施。检出7份老师肛拭子、2份幼儿肛拭子、1份食堂工作人员（帮厨）肛拭子和1份环境标本（幼儿用碗）为诺如病毒GII型核酸阳性。结论 本次疫情为一起由诺如病毒引起的腹泻暴发,可疑传染源为首发病例,传播途径主要为接触传播。     

江苏省张家港市2017年人源沙门菌血清型特征及分子分型

目的 分析2017年张家港检出的92株人源沙门菌的血清学特征,用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术对优势血清群进行分子分型研究,为该地区沙门菌菌型库积累数据。方法 收集和提取2017年张家港地区人源沙门菌患者血清学特征,对优势群B群沙门菌进行PFGE分子分型检测,利用PulseNet China网络获得相关性指纹图谱并进行聚类分析。结果 92株沙门菌分离株分布7个血清群和16个血清型,以B群为主（33.70％）,30株B群沙门菌PFGE指纹图谱可分为26个基因型（相似值100% 为同一PFGE 型别）,19个克隆系（相似度在0.85~1.00的为同一PFGE的克隆系）。其中9株德尔卑沙门菌可分为5个克隆系7个基因型,7个基因型相似度60.92％~100％;7株阿贡那沙门菌PFGE指纹图谱5个克隆系6个基因型,6个基因型相似度0~100%;6株鼠伤寒沙门菌可分为3个克隆系5个基因型,5个基因型相似度48.51％~100％。结论 张家港市人源沙门菌血清型多样化分布,B群沙门菌为优势血清群。沙门菌PFGE带型较多,基因多态性较高,同一血清型可获得不同PFGE指纹图谱。其中德尔卑沙门菌亲缘关系近,鼠伤寒部分菌株存在较近的亲缘关系,阿贡那沙门菌各克隆系存在明显差异,亲缘关系较远。     

一起沙门菌食物中毒事件的病原检测与溯源

目的对一起职业院校突发食物中毒事件进行病原检测和溯源分析,为突发食物中毒事件的应急处置提供参考。方法采用现场流行病学调查方法,采集病例粪便/肛拭子样本及剩余食品样本进行细菌学培养、分离和鉴定。提取粪便/肛拭子样本DNA,以实时荧光定量PCR检测沙门菌、志贺菌等病原菌。对检出的沙门菌分离株进行血清学分型、耐药检测及脉冲场凝胶电泳(Pulse Field Gel Electrophoresis, PFGE)分子分型,以BioNumerics软件进行同源性分析。结果现场采集29份样本,经实时荧光定量PCR分析和常规分离鉴定,共检出11株沙门菌,分离株血清型是肠炎沙门菌9,12:g, m:1,7。PFGE分析11株沙门菌同源性100%。结论本起食物中毒事件是由肠炎沙门菌导致的。实时荧光PCR方法结合PFGE分型技术可以快速、准确确定和溯源食物中毒的病原。     

上海市宝山区2015—2018年腹泻病人沙门菌血清分型和分子分型

目的 揭示上海市宝山区腹泻病人分离沙门菌的血清型和分子分型分布特征。方法 对2015—2018年分离的118株沙门菌进行血清分型和脉冲场凝胶电泳（pulsed-field gel electrophoresis,PFGE）分型,通过构建聚类树揭示不同血清型菌株的分子分型特征。结果 118株沙门菌分为25种血清型,前三位为肠炎沙门菌（45株,38.1%）、鼠伤寒沙门菌（26株,22.0%）、伦敦沙门菌（11株,9.3%）。其余22种血清型分别只包含1~3株菌。118株沙门菌通过PFGE分为71个PFGE带型,每个带型分别包含1~19株菌。45株肠炎沙门菌分为8个PFGE带型,相似度为75.0%~100.0%,在聚类树上形成一个簇;26株鼠伤寒沙门菌分为21个PFGE带型,相似度为48.0%~100.0%,在聚类树上形成两个簇;11株伦敦沙门菌分为8个PFGE带型,相似度为80.0%~100.0%,在聚类树上形成一个簇。结论 肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌是上海市宝山区腹泻病人沙门菌优势血清型,但近年伦敦沙门菌有增多的趋势。肠炎沙门菌在本地区传播流行过程中的遗传变异相对比较保守,鼠伤寒沙门菌基因型多态性大,而且存在两个克隆。     

一起肠炎沙门菌食物中毒事件病原学分析

目的对一起肠炎沙门菌引起的食物中毒事件开展病原菌分离鉴定及分型分析,为临床治疗和类似事件处置提供参考依据。方法收集中毒事件流行病学资料;采集患者排泄物、从业人员肛拭、可疑食品和环境样本,运用PCR方法快速筛查病原菌;采用实验室传统方法进行细菌分离和病原学鉴定;利用脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis, PFGE)对病原菌进行分子分型及同源分析。结果 23份可疑样本中检出8株肠炎沙门菌,其中可疑食品、患者排泄物和环境样本中分别检出4株、2株和2株。PFGE分型结果显示8株肠炎沙门菌DNA条带图谱完全一致,属同一克隆株。结论本起事件为肠炎沙门菌污染食品引起的食物中毒事件,PCR快速筛查和PFGE同源分析对食物中毒事件快速判定及有效控制提供技术支持。     

广东省中山市2018—2019年沙门菌血清型分布、耐药性及分子分型

目的 了解中山市沙门菌的血清型分布、分子分型特征以及对抗生素的耐药情况。方法 对2018—2019年中山市哨点医院以及食物中毒事件采集检出的沙门菌进行血清型分型,采用微量肉汤稀释法（MIC）对15种药物进行药物敏感试验,应用脉冲场凝胶电泳法（pulse-field gel electrophoresis, PFGE）对3种优势血清型沙门菌进行分子分型。结果 509株沙门菌共鉴定出44种血清型,优势血清型为鼠伤寒沙门菌单相变种（173/509,34.0%）、鼠伤寒沙门菌（107/509,21.0%）、肠炎沙门菌（93/509,18.3%）和斯坦利沙门菌（21/509,4.1%）。179株沙门菌中耐药菌株占93.9%（168/179）,多重耐药菌株占85.5%（153/179）。共产生82种耐药谱,最常见的耐药谱为AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-Sul和AMP-TET-CHL-SXT-Sul。暂未检出对亚胺培南耐药的菌株,对其余14种试验药物均存在耐药现象,其中对氨苄西林、四环素、磺胺异噁唑、氯霉素、复方新诺明耐药率均超过60%。耐受10种及以上抗生素的菌株有22株,占12.3%（22/179）。42株鼠伤寒沙门菌单相变种分出40个PFGE带型,各型别相似度为52.2%~100.0%;32株鼠伤寒沙门菌分出24个PFGE带型,各型别相似度为48.9%~100.0%;21株肠炎沙门菌分出9个PFGE带型,各型别相似度为55.5%~100.0%。结论 中山市沙门菌血清型主要为鼠伤寒沙门菌单相变种、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌,多重耐药现象严重,PFGE分子分型结果呈多样性。     

沙门菌荧光重组酶介导等温扩增检测方法的应用研究

目的 建立基于重组酶介导等温扩增（recombinase-aided amplification, RAA）快速、灵敏、特异检测沙门菌的方法。方法 针对沙门菌invA基因保守区段设计特异性引物、探针,通过引物、探针筛选以及反应条件优化,建立检测沙门菌的荧光RAA方法,通过优化引物浓度、探针浓度、醋酸镁浓度、上样量来确定最佳反应体系组成。采用细菌纯培养物评估该方法的最低检测限、特异性等性能,通过模拟样品以及19份真实样品检测,同时采用国标法GB 4789.4-2016同步验证复核,评估该检测方法的可靠性。结果 该方法在39 ℃条件下20 min内可完成检测反应。利用该方法能够特异检测沙门菌,不能检出其他肠道致病菌。该方法检测细菌纯培养物的灵敏度为19 cfu/mL,检测模拟样品的灵敏度为190 cfu/mL。采用建立的沙门菌荧光RAA方法对采集的环境样品、食品污染及人体肛拭子样品共计19份进行检测,按照GB 4789.4-2016方法同步检测,4份阳性,其中3份样本荧光RAA检测呈现沙门菌阳性,1份肛拭子样本该方法未能检出。结论 荧光重组酶介导等温扩增法检测沙门菌快速、特异、简便、灵敏,能够在食源性疫情现场调查以及食源性疾病监测中发挥一定的作用。     

副溶血性弧菌耐药检测和分子生物学分型

目的 了解福州市副溶血性弧菌耐药情况及PFGE分型,为副溶血性弧菌污染引起的食物中毒防控提供科学依据.方法 收集福州市2018-2020年分离自福州市超市的海产品、养殖场所的水产品、养殖水、闽江水及食源性疾病暴发事件病例的副溶血性弧菌150株,采用Not I限制性内切酶对进行副溶血性弧菌酶切,以脉冲场凝胶电泳进行PFG...     

一起副溶血性弧菌食物中毒调查

目的 查明2017年6月1日—3日珠海市某海岛建筑工地工人食物中毒的病原体和发生原因,采取针对性防控措施。方法 通过描述性流行病学方法分析病例的临床特征、流行病学特征及相关危险因素,对可疑餐次食物开展病例对照研究,采集病例肛拭子等样品进行检测,副溶血性弧菌采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分析。结果 该建筑工地共有病例51例,罹患率为54.3%,其中中交三航钢筋班46例,上海建工公司5例。临床症状主要为腹泻（96.1%）、腹痛（94.1%）、恶心（70.6%）、呕吐（64.7%）、发热（31.4%）、WBC升高（77.8%）。流行曲线表现为点源暴露,病例的共同餐次为6月1日中交三航钢筋班食堂提供的晚餐,经病例对照研究确定凉拌猪耳是危险食物（OR=9.684,95%CI：2.452~38.242）。21份病例肛拭子和1份制作凉拌猪耳的厨工肛拭子检出副溶血性弧菌,PFGE分析结果 显示19份病例肛拭子和厨工肛拭子同源性为100.0%。结论 本次事件为一起厨工污染凉拌猪耳引起的副溶血性弧菌食物中毒,应加强厨工的健康体检和卫生知识宣教,规范凉拌菜等高危食物的制作和储存。     

广东省东莞市2012—2018年黄金海岸沙门菌临床分离株的病原学特征

目的 通过分析2012—2018年东莞市黄金海岸沙门菌临床分离株的病原学特征,为早期发现该罕见血清型沙门菌引起的聚集病例的及时干预和控制提供病原学依据。方法 对东莞市2012—2018年食源性疾病监测中分离的30株黄金海岸沙门菌临床分离株进行复核鉴定、血清分型、抗生素敏感性试验和脉冲场凝胶电泳（PFGE）的分子分型。结果 30株黄金海岸沙门菌抗原式均为6,8∶r∶l,w,每年菌株数量的构成比有随年度增加而增高的趋势,且差异有统计学意义（χ²=19.67,P<0.05）。东莞市黄金海岸沙门菌对磺胺异噁唑、四环素、复方新诺明、氯霉素、链霉素的耐药率较高,分别为90.0%、90.0%、80.0%、80.0%和76.7%;对头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、亚胺培南的敏感率达到100%;对3类及3类以上抗生素耐药的菌株数达到25株,占比为83.33%。30株黄金海岸沙门菌共分为12个PFGE 型,其中2种PFGE型包含条带的相似率为100%的谱型分别为DG-GC06型15株和DG-GC12型3株。结论 东莞市黄金海岸沙门菌的构成比在2012—2018年间呈逐年上升趋势,多重耐药现象严重,且存在潜在暴发现象,应加强暴发发现、流行病学调查及耐药监测。     

A multistate outbreak of Salmonella javiana and Salmonella oranienburg infections due to consumption of contaminated cheese.

OBJECTIVE--To determine the source of an outbreak of Salmonella javiana and Salmonella oranienburg infections. DESIGN--Laboratory-based statewide surveillance for Salmonella infections and two separate case-control studies. SETTING--Community- and industry-based studies conducted from May through October 1989. PARTICIPANTS--Thirty-one culture-confirmed outbreak-associated cases of S javiana infection and 60 community controls matched for telephone prefix, gender, and age in case-control study I; 50 cases, 100 community controls, and 64 family member controls in case-control study II. RESULTS--One hundred thirty-six culture-confirmed cases of S javiana infection and 11 cases of S oranienburg infection were associated with the outbreak in Minnesota. Outbreak-associated cases were also identified in Wisconsin (15 cases), and in Michigan and New York (one case each). Cases were more likely than controls to have consumed mozzarella cheese manufactured at a single cheese plant (plant X) or cheese that had been shredded at processing plants that also shredded cheese manufactured at plant X (odds ratio [OR], 7.2; 95% confidence interval [CI], 1.7 to 23.2; P < .01). The outbreak-associated strains of both serovars were isolated from two unopened 16-oz (0.45-kg) blocks of mozzarella cheese produced at plant X. The most probable numbers of Salmonella organisms in these samples were 0.36/100 g and 4.3/100 g. CONCLUSIONS--The potential for bacterial pathogen contamination of cheese during manufacture and processing has important epidemiologic implications, particularly because cheese consumption has recently increased in the United States. Low-level contamination of a nationally distributed food product can cause geographically dispersed foodborne outbreaks that may be difficult to detect.     

一起弗劳地柠檬酸杆菌引起的食物中毒病原鉴定及耐药性分析

目的 对一起突发食物中毒事件进行病原检测及耐药性分析,为突发食物中毒事件的应急处置提供参考。方法 对采集的样本按照GB 4789等标准方法进行致病菌检测,分离株采用VITEK2和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行菌株鉴定,同时采用微量肉汤稀释法进行细菌药物敏感性试验,并对不同来源分离株进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型,以BioNumerics软件分析菌株之间的相关性。结果 13份剩余食物和3份腹泻患者粪便经分离鉴定,有7份剩余食物样本的菌落总数、大肠菌群全部超标,有5份剩食物和2个病例的粪便中检出弗劳地柠檬酸杆菌,药敏试验结果显示,7株弗劳地柠檬酸杆菌对环丙沙星、四环素、氯霉素、庆大霉素、阿米卡星、头孢噻肟和美罗培南均敏感,但对氨苄西林完全耐药,无多重耐药现象;检出的7株弗劳地柠檬酸杆菌,经脉冲场凝胶电泳（PFGE）检测结果为：7株弗劳地柠檬酸杆菌的PFGE条带一致、同源性100%,显示为同一克隆。结论 本起食物中毒事件是由弗劳地柠檬酸杆菌导致的,通过飞行质谱方法可以快速、准确确定食物中毒的病原,利于感染性疾病的早期诊疗,建议加大相应的管理力度,提高食品安全意识,预防类似事件的发生。     

广东省中山市2017年沙门菌耐药菌谱及分子分型分析

目的 了解中山市2017年沙门菌的耐药特征及分子分型,为临床合理用药和食源性疾病的溯源提供科学依据。方法 对中山市2017年食源性疾病监测（3个哨点医院）的沙门菌分离株采用微量肉汤稀释法进行14种抗生素药敏试验,运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术对肠炎沙门菌进行分子分型。 结果 中山市2017年食源性疾病监测检出的285株沙门菌对14种抗生素敏感性试验结果显示,237株（占83.16％）沙门菌对13种抗生素呈现不同程度的耐药性,未发现对亚胺培南（IPM）耐药菌株。耐药抗生素最多的种类达到11种,耐药率较高（40 %以上）的抗生素为氨苄西林（AMP）、四环素（TET）、氨苄西林/舒巴坦（SAM）、氯霉素（CHL）;共有87类耐药谱型,其中多重耐药谱型75类（86.21%）,多重耐药菌株数为176株（61.75%）。25株肠炎沙门菌的PFGE分为5种带型,相似度为63.9%~100.0%。结论 中山市2017年食源性疾病监测显示沙门菌耐药状况较为严重,呈多重性和多态性,应采取综合措施控制耐药性;肠炎沙门菌PFGE的相似度较高,存在优势带型。