广东登革3型病毒株的分离培养和鉴定

目的 对2009年发生于广东地区的3例家庭聚集性登革热患者血清进行登革病毒的鉴定和病毒株的培养分离.方法 用胶体金法检测患者血清中登革病毒特异性IgM、IgG抗体;C6/36细胞培养患者血清中登革病毒;RT-PCR扩增C-PrM基因序列的片段以检测患者血清中登革病毒RNA,PCR产物经序列测定后进行生物信息学分析.结果 3例患者血清学检测均为登革病毒特异性IgM阳性、IgG阴性;特异性RT-PCR产物长约290bp,经琼脂糖电泳和测序分析,证实3例患者血清中均存在登革3型病毒;从1例患者血清中培养分离到了登革病毒株,经RT-PCR和测序证实为登革3型病毒.结论 2009年发生于广东地区的3例登革热患者经病毒培养和分子生物学鉴定,证实均为登革3型病毒感染.     

小儿登革出血热233例临床分析

登革出血热是由登革病毒所致的一种危重疾病,主要发生于小儿。我科在80、85和86年登革热大流行中收治登革热患儿659例,其中小儿登革出血热233例,经病毒分离和血清学鉴定,证实我县登革热病毒80年为Ⅲ型,85年和86年为Ⅱ型,现分析报告如下。     

登革疫苗研究进展

随着登革病毒的传播,登革热已经成为热带及亚热带地区重要的,快速增长的公共卫生问题。登革热和严重的登革出血热、登革休克综合症已威胁到全球25亿人的健康。目前,迫切需要一种安全、有效的登革疫苗。然而,基于接种疫苗可能使个体在登革病毒感染时易于发展成严重登革热的担心放缓了登革疫苗的发展。人们已经研发了一系列的候选登革疫苗,包括减毒活疫苗,灭活疫苗,嵌合疫苗,亚单位疫苗,DNA疫苗,核酸疫苗。其中一些正处于临床试验阶段。本文仅就登革疫苗的研究进展作一综述。     

云南省瑞丽市2013年登革热暴发的分子流行病学研究

目的调查云南省德宏州瑞丽市2013年登革热（denguefever,DF）暴发疫情的情况,掌握其分子流行病学特点。方法收集登革热病例资料,采集急性期患者血清标本,用RT-PCR法检测登革病毒（dengue virus,DENV）核酸,并进行登革病毒C/PreM区核苷酸序列测定和分析。结果 2013年8~11月,瑞丽市共确诊登革热232例,其中本地感染病例145例（62.50%）,缅甸输入性病例87例（37.50%）。2013年瑞丽市登革热本地感染病例发病率为77.69/10万。主要流行地区为瑞丽市城区（53.45%,124/232）、姐告镇（16.81%,39/232）和勐卯镇（8.19%,19/232）。经序列测定,获得17株病毒的C/PreM区基因核苷酸序列,系统进化分析表明,5株为登革Ⅰ型病毒,12株为登革Ⅱ型病毒,均与东南亚登革病毒流行株具有较近的亲缘关系。结论瑞丽市在2013年发生了输入性和本地感染并存的登革热流行,并存在登革Ⅰ型和Ⅱ型病毒共同流行,来自缅甸的登革热输入性病例是引起本次登革热本地流行的主要原因。加强输入性病例的监测和管理是防止该病再次流行的关键措施。     

宿主异常免疫反应与登革病毒致病的关系

登革病毒感染在全世界范围内流行的越来越频繁,爆发日益增加,发生登革出血热及登革休克综合症(DHF/DSS)的病例数也呈现增加的趋势.每年,全球范围内有将近一亿人感染登革热,其中大约有50万例登革出血热.目前,登革病毒引起的DHF/DSS的机制尚未完全明了,本文主要就宿主免疫功能异常与登革病毒致病的关系的研究进展作一综述.     

用RT-PCR方法检测登革病毒E基因核酸

目的：应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术建立检测登革2型病毒E基因的方法。方法：分别抽提登革2型病毒NGC株和从登革出血热病人血清中分离得到的2型登革热病毒(DV)核酸(RNA)，合成CD-NA第一链，经过RT-PCR得到cDNA产物，用HinfI限制性内切酶酶切鉴定。结果：通过RT-PCR检测登革2型病毒核酸。结论：登革2型病毒E基因核酸的RT-PCR检测方法的建立为快速诊断登革病毒感染提供了可靠的方法。     

1986年海南登革热患者血清抗体测定

海南岛自80年发生Ⅲ型登革病毒引起的登革热爆发流行后,85年又发生Ⅱ型登革病毒导致的登革热流行。据统计因登革热住院病人中76.14%为登革出血热,明显高于1980年。Halstead 认为黄病毒属病毒的非中和性抗体能提高登革病毒在单核细胞中的复制。受染的单核细胞产生血管渗透因子并激     

登革病毒实验室检测方法及传播影响因素研究进展

登革病毒(DENV)为单股正链RNA病毒,可以引起登革热、登革出血热和登革休克综合征,目前没有特效抗病毒药物和理想疫苗.近年来气候变化和社会因素的影响,使得登革热的发病率逐年上升,给全球传染病防控带来严峻挑战.本文综述了 DENV的病原学、实验室检测方法及传播影响因素三个方面的研究,希望能为登革热的监测、检测和防控提供...     

登革病毒实验诊断的研究和应用

登革病毒是登革热和登革出血热的病原体,由蚊虫传播。它可引起暴发性流行和地方性流行,分布于全球雨量充分的热带和亚热带地区。许多流行病学和病毒学工作者,对其病     

登革病毒基因组核苷酸变异与毒力的关系

登革病毒是一种流行于热带、亚热带地区的蚊媒病毒,其引起的登革热、登革出血热／登革休克综合征（DSS／DHF）已成为严重威胁人类健康的公共卫生问题。登革病毒缺乏精确的复制校正系统．在传播过程中核苷酸的变化会导致病毒毒力的变化,目前其致病与免疫机制尚未明了,缺乏有效的疫苗。本文就登革病毒基因变异与其毒力关系方面的研究进行综述。     

Innate immune responses to dengue virus

Dengue fever/dengue hemorrhagic fever (DF/DHF) has emerged as the most important mosquito-borne viral diseases in tropical areas. The dengue virus (DV) has become endemic in most tropical urban centers throughout the world, and DHF has appeared concomitantly with this expansion. Given the fact that intensity of DV replication during the early times of infection could determine clinical outcomes, which ranges from febrile illness (DF) to life-threatening disease (DHF), it is important to understand the impact of DV infection on innate immunity. Interstitial dendritic cells (DCs) are believed to constitute the first line of the innate host defense against invading DV at the anatomical sites where it replicates after the initial bite by infected mosquito. Early activation of natural killer (NK) cells and type-I interferon-dependent immunity may be also important in limiting viral replication at the early times of dengue infection. The ability of infecting DV to counter the innate antiviral immunity might account for differences in virulence observed between viral strains.     

广州市越秀区一起家庭登革Ⅲ型病毒感染疫点调查

目的通过对一起本地感染登革Ⅲ型病毒疫点调查与处理,为登革热疫情的现场调查和蚊媒控制提供参考。方法对2009年8月广州市越秀区发生的一起感染登革Ⅲ型病毒疫情进行调查,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对病家成员和疫点周围人群进行登革热抗体检测,采用布雷图指数对蚊媒密度进行监测和评估,按照登革热疫点处理规范开展疫情控制。结果现场调查和实验室检测确证矿泉街内发生一起1家3口同时感染登革Ⅲ型病毒的登革热疫情,病例均在1个潜伏期内发病,未出现二代病例,监测点蚊媒密度布雷图指数高达35.19,采取措施后,降低到5以下。结论该疫点可能是由输入病例引起的一起本地感染登革Ⅲ型病毒的家庭聚集性疫情,采取以整治环境卫生、迅速杀灭成蚊、清理积水和隔离治疗病人等综合措施后,疫情在较短时间内得到有效控制。     

穿孔素和颗粒酶B在急性期登革病毒患者体内的表达水平及调控机制初探

目的 登革病毒(Dengue virus,DENV)感染引起的登革热和登革出血热已给世界带来极大危害,明确其感染引起的免疫病理损伤机制尤为关键。方法 以DENV感染急性期患者样本为研究对象,抽取静脉血,利用密度梯度法提取外周单个核细胞（PBMCs）,流式细胞术检测PBMCs各亚群表达穿孔素和颗粒酶B的水平,进而探讨DENV急性期患者T细胞亚群和NK细胞亚群免疫功能的差异。结果 DENV患者CD8⁺T细胞和NK细胞内穿孔素和颗粒酶B的表达水平发生显著上调,细胞脱颗粒水平也显著增加;同时表达穿孔素或颗粒酶B的NK细胞比例显著高于CD8⁺T细胞。另外,本研究还发现三个重要miRNAs （miR-27a*、miR-30e和miR-378）在DENV患者体内的表达量明显降低,已有的研究表明其可能靶向调控穿孔素或/和颗粒酶B的表达。结论 DENV感染可诱导CD8⁺T细胞和NK细胞发挥效应功能,并依赖穿孔素和颗粒酶途径杀伤被病毒感染的靶细胞;DENV患者体内PRF1和GrzB的表达很可能受到miR-27a*、miR-30e和miR-378的靶向调控。通过上述研究为阐明T细胞和NK细胞在DENV感染过程中所发挥的免疫效应功能提供更多的理论基础。     

Dengue viral infections

Dengue viral infections are one of the most important mosquito borne diseases in the world. They may be asymptomatic or may give rise to undifferentiated fever, dengue fever, dengue haemorrhagic fever (DHF), or dengue shock syndrome. Annually, 100 million cases of dengue fever and half a million cases of DHF occur worldwide. Ninety percent of DHF subjects are children less than 15 years of age. At present, dengue is endemic in 112 countries in the world. No vaccine is available for preventing this disease. Early recognition and prompt initiation of appropriate treatment are vital if disease related morbidity and mortality are to be limited. This review outlines aspects of the epidemiology of dengue infections, the dengue virus and its mosquito vector, clinical features and pathogenesis of dengue infections, and the management and control of these infections.     

登革病毒和登革热

登革热（Dengue fever,DF）是由登革病毒（Dengue virus,DV）引起的一种虫媒传染病,主要在热带亚热带地区流行,全世界将近一半的人口有罹患 DF 的风险。 DF 在临床上分为 DF 和重症登革（ severe Dengue）,后者包括登革出血热（ Dengue hemorrhagic fever,DHF）和登革休克综合征（Dengue shock syndrome,DSS）。每年重症登革病例达500000例,其中大多数患者为儿童。2014年 DF 在我国的南方地区出现历史上最严重的疫情,对人类健康和社会经济造成了严重损失。为此,本文对 DV 和DF 的概况作一综述,供广大同行参考。     

Dengue encephalitis–A rare manifestation of dengue fever

The clinical spectrum of dengue fever ranges from asymptomatic infection to dengue shock syndrome. Dengue is classically considered a non-neurotropic virus. Neurological complications are not commonly seen in dengue. The neurological manifestations seen in dengue are encephalitis, meningitis, encephalopathy, stroke and Guillain-Barré syndrome. Dengue encephalitis is a rare disease. We report an interesting case of dengue encephalitis from Southern India. A 49-year-old gentleman presented with fever, altered sensorium and seizures. Dengue NS-1 antigen test was reactive. Dengue IgM was also positive. CSF PCR was negative for herpes simplex 1 & 2. Dengue encephalitis should be considered in the differential diagnosis of fever with altered sensorium, especially in countries like India where dengue is rampant.     

Dengue virus circulation and evolution in Mexico: a phylogenetic perspective

BACKGROUND: Dengue is the most important arthropod-borne viral infection in the Americas. In the last decades a progressive increment in dengue severity has been observed in Mexico and other countries of the region. METHODS: Molecular epidemiological studies were conducted to investigate the viral determinants of the emergence of epidemic dengue, dengue hemorrhagic fever and dengue shock syndrome as major public health problems in Mexico. Bayesian phylogenetic analyses were conducted to determine the origin, persistence and geographical dispersion of the four serotypes of dengue virus (DENV) isolated in Mexico between 1980 and 2002. Tests for natural selection were also conducted. RESULTS: The origin of some, but not all, strains circulating in Mexico could be inferred. Frequent lineage replacements were observed and were likely due to stochastic events. In situ evolution was detected but not associated with natural selection. Recent changes in the incidence and severity of dengue were temporally associated with the introduction and circulation of different serotypes and genotypes of DENV. CONCLUSIONS: Introduction of new DENV genotypes and serotypes is a major risk factor for epidemic dengue and severe disease. Increased surveillance for such introductions is critical to allow public health authorities to intervene in impending epidemics.     

喜炎平注射液抗Ⅱ型登革病毒作用的体内及体外实验研究

目的 分别通过体外和体内实验研究喜炎平注射液对Ⅱ型登革病毒（Dengue virus serotype 2, DENV2）的抗病毒作用。方法 体外实验以利巴韦林注射液作为阳性对照药物,分别以灭活、抑制进入、治疗性给药以及预防联合维持治疗的方式处理人肝癌细胞株HepG2细胞,在不同时相点收获上清和细胞,分别利用间接免疫荧光（indirect immunofluorescence assay, IFA）和实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR, qPCR）检测DENV2的病毒载量,从而评价喜炎平注射液的体外抗DENV2作用。体内实验以SCID小鼠为实验鼠,腹腔注射HepG2细胞,建立模型小鼠,腹腔注射感染DENV2,次日给予不同剂量（1、2、4 mg/只）的喜炎平注射液,连续给药4 d,部分小鼠于感染第6日取材,利用IFA检测实验鼠脾、肝及血清中病毒载量,并观察实验鼠的生存率。结果 体外实验显示,喜炎平注射液能够灭活DENV2,并抑制DENV2进入细胞,同时无论是治疗还是治疗联合预防给药,均可对DENV2的复制具有良好的抑制作用,即在病毒感染早期及晚期,喜炎平均可发挥抗病毒作用,且优于利巴韦林。进一步在体内实验中同样显示喜炎平具有较好的抗病毒作用,可以降低实验鼠脾、肝及血清中病毒载量,并可提高实验鼠的生存率。结论 喜炎平注射液具有明显的抗DENV2病毒的作用,可为DENV感染的治疗提供新的候选药物。     

汕头市2006年登革热的流行情况及防制对策

目的分析2006年汕头市登革热流行特征和防治措施,探索适宜的防制对策。方法对2006年汕头市登革热监测、实验室结果及疫情调查处理进行综合分析。结果汕头市2006年报告登革热177例,发病率为18.72/10万。疫情波及1区个8个镇（街道）,病例集中在9-10月份,流行期为53d。临床表现以轻型登革热为主。在7份急性期病人的血标本中分离出3株登革Ⅰ型病毒。病例以多点散发流行为主。疫点媒介密度高,传染源未及时发现是造成传播扩散的主要因素;设立定点医院,开展地毯式病例搜索和清理伊蚊孳生地是疫情得到较快控制的主要措施。结论2006年汕头市登革热疫情是由登革Ⅰ型病毒引起的,病例临床症状轻。以疫情多发区为中心,以周边区为重点,采取加强传染源控制管理和清除蚊媒孳生地及疫点紧急灭蚊等综合措施,是较快扑灭疫情的有效防制对策。     

广东阳江市2001和2006年两次登革热流行特征分析

目的分析阳江市2001和2006年两次登革热流行特征，为今后防制工作提供参考。方法收集临床个案和疫点流行病学调查资料；病人采血检测登革病毒IgM抗体，用C6／36细胞分离登革病毒，并用单克隆抗体鉴定型别。结果阳江市2001年8月初至11月初发生登革热流行流行102d，高峰8上旬～10月中旬，确诊136例，发病率为5．31／10万；2006年6月下旬至9月上旬发生疫情，共流行67d，高峰8月中下旬，确诊22例，发病率0，84／10万；病例的消长情况与当地的蚊媒消长情况一致；8～11月份布雷图指数为0．00～111．00；实验诊断150例，临床确诊8例，从13例病人血标本中分离到11株病毒，均为登革病毒Ⅰ型。结论阳江市两次流行的登革热病例病情以轻型居多，发病人群以青壮年为主，人群在流行后经过5～6年普遍易感，流行高峰在8～10月，皆发现白纹伊蚊是当地的传播媒介。