单采血小板血浆低密度脂蛋白在保存期间对血小板免疫活化的影响

目的：探讨单采血小板血浆低密度脂蛋白（low-density lipoprotein,LDL）升高是否对血小板免疫活化产生影响。方法：选取符合国家献血标准的单采血小板献血员血小板标本35例,于血小板保存箱（22℃±2℃）振摇保存,其中LDL正常组（LDL＜3.4 mmol/L）30例,LDL升高组（LDL≥3.4 mmol/L）5例,流式细胞术检测血小板表面活化指标CD63、CD36、CD40以及CD62p表达水平,比较不同LDL水平对单采血小板免疫活化的影响。结果：随着保存时间的延长,血小板CD63、CD36、CD40以及CD62p表达水平无显著改变（P＞0.05）,不同保存时间LDL升高组与LDL正常组比较,CD63、CD36、CD40以及CD62p表达水平的差异无统计学意义（P＞0.05）。保存第2、3、4、5天的血小板经室温不同静置时间,LDL升高组与LDL正常组比较,CD63、CD36、CD40以及CD62p表达水平的差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：健康献血者单采血小板血浆LDL水平对血小板保存期间的免疫活化无显著影响,LDL水平较高的单采血小板不会激发血小板免疫活化,从而不影响临床输注效果。     

新型血小板添加液对血小板低温液态保存效果的实验研究

目的探讨使用改良的血小板添加液（PAS）替代70％自体血浆在低温液态条件下对血小板的保存效果。方法采集6单位单采血小板,每一单位单采血小板平均分为3组,A组加入70％PAS-Ⅲ M／30％血浆10℃保存;B组加入100％血浆22℃保存;C组加入100％血浆和海藻糖-85℃保存。A、B组在第1、5、7、9天取样检测,C组在20d后复苏取样检测。分别检测PLT计数、PDW、MPV、CD62p、HSR、PAgT、pH值、LDH以及GLU的变化。结果保存期内随保存时间延长,A组和B组CD62p表达增加,HSR和最大聚集率降低;A组的LDH释放、GLU消耗、CD62p表达、HSR、血小板最大聚集率与B组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。B组pH值在第5天起明显降低（P〈0．05）。C组LDH释放明显较其他两组增多,但CD62p表达较少（P〈0．05）。C组PDW显著升高,除与B组第5天结果相似外,均高于A、B组各时间点结果（P〈0．05）。各组PLT计数相差不显著。结论改良的PAS-ⅢM能够很好的替代血浆用于血小板的保存,同时在低温条件下能够很好地保护血小板的功能,保存效果好于血浆常温保存。     

低温体外保存对血小板活化和凋亡的影响

目的 观察保存温度对血小板活化和凋亡的影响,评估低温体外保存血小板的效果.方法 取20份单采血小板,一分为三,一份于(22±2)℃振荡保存(对照组),另两份悬浮于血小板添加液(65％)与自体血浆(35％)的混合液中分别静置于10℃储血冰箱(实验Ⅰ组)和(22±2)℃振荡仪(实验Ⅱ组),于1、3、4、5、7d检测血小板计数(platelet count,PLT)、血小板P选择素(cluster of differentiation 62 platelet,CD62p)表达率、血小板线粒体跨膜电位(mitochondrial transmembrane potentia,△Ψm).结果 随着时间延长,3组PLT比较平稳,在组间、时点间以及组间·时点间交互作用差异均无统计学意义(P＞0.05);随着时间延长CD62p逐渐升高,而△Ψm％逐渐下降,3组CD62p、△Ψm在组间、时点间以及组间·时点间交互作用差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 血小板添加液混合血浆10℃低温保存比(22±2)℃保存血小板的活化和凋亡程度均较低.     

单采血小板的储存时间与CD62P的相关性研究

目的探讨单采血小板的储存时间与血小板膜蛋白CD62P表达之间的相关性。方法招募自愿献血的健康献血者30名,按照血站标准采集30袋单采血小板,每袋200mL,血小板计数>2.5×1011/袋,置于22℃血小板保存箱保存7d,分别在保存的第1d、第3d、第5d、第7d通过流式细胞仪检测血小板膜蛋白CD62P。结果随着保存时间的延长,CD62P表达明显增强(P<0.05),两者呈现正相关关系。结论随着保存时间的延长,血小板体外活化程度增高。     

单采血小板静置和振荡状态保存对血小板功能的影响

目的将单采血小板分成静置和振荡组,比较两组之间的血小板粘附、聚集和血小板糖蛋白CD41/CD62表达。方法将单采血小板分别于22±2℃静置和在血小板专用振荡仪中振荡保存48 h。分别进行血小板粘附试验(玻球法)、血小板聚集试验(ADP诱导)和血小板膜糖蛋白CD41/CD62表达(流式细胞仪法)进行对比观察。结果静置组和振荡组血小板粘附、聚集功能以及CD41/CD62表达均无明显差异。结论静置和振荡保存对血小板粘附、聚集功能和血小板膜糖蛋白表达等生物学特征无明显影响。     

机采血小板储存期内活化和凋亡的分析

目的 在血小板储存期内动态观察机采血小板活化和凋亡的变化,评估储存时间对血小板活化和凋亡的影响.方法 利用流式细胞技术对储存2天、3天和5天的机采血小板表面P-选择素(CD62P)的表达进行检测,Annexin V染色检测血小板的早期凋亡率[血小板膜磷脂酰丝氨酸(PS)的表达].结果 相对储存第2天的血小板,储存第4天和第5天的机采血小板表面CD62P的表达显著增强(P＜0.05),血小板早期凋亡率也显著增加(P＜0.05).结论 延长血小板的储存时间将加速血小板的活化和凋亡.     

脑梗死患者血浆CD_(62P)和IL-6动态变化及临床意义

目的分析急性脑梗死患者血浆CD62p和IL-6水平动态变化及临床意义,探讨其在脑梗死后炎性病理损伤中的可能作用机制.方法用ELISA法和放射免疫法测定60例脑梗死患者发病第48 h,第6～8天及第15天血浆CD62p和IL-6水平,同期测定对照组为30例年龄,性别相匹配的健康者血浆CD62p和IL-6水平.所有脑梗死患者依据发病后第48～72h的CT检查结果计算脑梗死体积.结果发病48 h内脑梗死患者血浆CD62p和IL-6浓度均显著高于正常对照组(P＜0.01);血浆CD62p和IL-6水平随发病后时间的推移而逐渐下降,血浆CD62p水平在发病第2天[(9.25±1.82)ng/mL],第6～8天[(7.12±1.75)ng/mL]和第15天[(3.55±1.43)ng/mL]三个时间点两两比较差异显著(P＜0.05);IL-6水平在发病第2天[(365.4±28.8)pg/mL]与第6～8天[(346.7±28.9)pg/mL]比较无统计学意义(P＞0.05),发病第15天[(308.5±26.9)pg/mL]较第6～8天明显降低差异有显著性(P＜0.01),血浆CD62p和IL-6水平至第15天时仍高于对照组(P＜0.01);发病6～8 d内血浆CD62p和IL-6水平均和脑梗死体积呈正相关(r=0.368,P＜0.05和r=0.594,P＜0.01),血浆CD62p和IL-6水平呈正相关(r=0.453,P＜0.05).结论急性脑梗死患者血浆CD62p和IL-6升高,二者可能参与了脑缺血炎性病理损伤,CD62p的升高可能与IL-6升高有关,二者水平可能能够反映脑缺血后炎性病理损伤的程度和脑梗死体积大小.     

常温和冰冻保存条件下单采血小板制品凝血功能的差异

目的探讨常温(22±2)℃振荡、-80℃冰冻保存下单采血小板制品凝血功能的差异。方法随机选取16份单采血小板,应用无菌接管技术将每份单采血小板样本分成8份。其中4份于(22±2)℃常温振荡保存,分别在采集当日、第3天、第5天、第8天进行检测;另4份置于冻存管中-80℃保存,分别在采集后第3天、第5天、第8天及1年进行检测。采用血细胞计数仪检测血小板计数、平均血小板体积(MPV),采用血栓弹力图检测凝血时间、α角、最大振幅、凝血指数,采用流式细胞术检测血小板CD62P表达水平、膜联蛋白V(Annexin V)结合率。结果采集后各时点,随着保存时间增加,常温保存的血小板凝血时间延长而凝血指数降低,但冰冻保存的血小板凝血时间缩短而凝血指数增高;与常温保存的血小板比较,冰冻保存的血小板的各时点凝血时间更短,而采集后第5天、第8天的凝血指数更高(均P<0.05)。采集后各时点,两种保存条件下血小板的CD62P表达水平和Annexin V结合率均随着保存时间增高;与常温保存的血小板比较,冰冻保存的血小板各时点的Annexin V结合率更高,采集后第5天、第8天的CD62P表达水平更低(均P&...     

急性冠脉综合征患者介入治疗前后血小板活化标志物、聚集功能及凝血活性的变化

目的:探讨血小板活化分子标志物P-选择素(CD62P)、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(PAC-1)、血小板聚集率(MAR)、血浆纤维蛋白原(Fib)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT)在急性冠脉综合征(ACS)患者介入治疗前后的变化。方法:采用流式细胞术检测ACS患者和冠状动脉造影结果正常者血清中CD62p及PAC-1水平,采用血小板聚集仪检测各组人群血小板聚集率(MAR)水平,应用凝血分析仪检测血浆Fib、PT、APTT及TT水平。观察各组患者经皮冠脉介入(PCI)术前后CD62p、PAC-1、MAR、Fib、PT、APTT及TT水平的变化。结果:ACS患者中,不稳定心绞痛(UAP)组及急性心肌梗死(AMI)组术后CD62p、PAC-1以及MAR水平较术前均明显升高(P<0.01),AMI组显著高于UAP组(P<0.05),UAP组和AMI组术后血浆Fib浓度较术前均显著升高(P<0.01),PT、APTT及TT的水平显著降低(P<0.01)。结论:ACS患者血小板活化程度及凝血活性水平升高可能是PCI术后血栓形成及支架内再狭窄的原因,检测ACS患者治疗前后CD62P、PAC-1、MAR、Fib、PT、APTT及TT水平对观察病情和预后判定具有重要意义。     

重症脓毒症患者血小板膜糖蛋白CD62p和CD63变化的临床意义

目的 观察重症脓毒症患者血小板膜糖蛋白CD62p、CD63表达水平的变化,探讨两者与重症脓毒症严重程度及预后的关系.方法 用荧光素标志的单克隆抗体和流式细胞仪检测40例重症脓毒症患者发病后不同时间血小板糖蛋白CD62p、CD63的分子表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定发病后24 h内血清前降钙素(PCT)和C反应蛋白(CRP)浓度, 并且进行相关性分析.结果 重症脓毒症患者发病后各时间点CD62p、CD63水平较正常对照均显著升高( P均<0.01);死亡组患者各时间点CD62p、CD63水平较存活组均升高(P 均<0.05).CD62p、CD63水平与PCT、CRP呈正相关.结论 重症脓毒症患者血小板处于高激活状态, CD62p、CD63水平均显著 升高,可以作为判断疾病严重程度及预后的指标.     

混合手工与机采血小板聚集反应和体外激活程度的研究

目的 比较混合手工浓缩血小板与机采血小板聚集反应性和体外激活程度的差别.方法 分别用血小板聚集仪和流式细胞仪测定混合手工血小板组与机采血小板组血小板对血小板聚集反应诱导剂ADP的最大聚集率与膜表面糖蛋白分子CD62p和PAC-1的表达率.结果 两组血小板对ADP的最大聚集率分别为(84.1 9.0)%和(87.9±11.1)%,P＞0.05;两组血小板膜表面糖蛋白分子CD62p和PAC-1的表达率分别为CD62p(13.4±4.6)%,(11.6±2.9)%,P＞0.05及PAC-1(9.3±3.7)%,(8.1±2.9)%,P＞0.05.结论 混合手工浓缩血小板与机采血小板的聚集反应性和激活程度无显著性差异.     

γ射线辐照和保存期对血小板的影响

目的了解γ射线辐照和保存期对单采血小板的影响。方法单采血小板分为两组:一组25Gy剂量辐照,一组不辐照处理,作为对照组;在贮存的第0、5天分别检测单采血小板计数、pH和表达CD62P的特异性荧光结合阳性血小板百分率(%)。结果保存过程中,辐照组血小板计数及pH值与对照组无显著差异(P>0.05);5天的贮存可显著增加了血小板表达CD62P百分率(P<0.05),但辐照组与对照组的血小板在贮存第5天时表达CD62P百分率无显著差异(P>0.05)。结论25Gy的辐照对血小板制品的质量无明显影响,与普通血小板制品相同,辐照单采血小板可保存5天。     

γ射线辐照血小板不同保存时间质量参数变化分析

目的分析经γ射线辐照前后手工浓缩血小板和单采血小板在不同保存时间的CD62P、平均血小板体积（MPV）、分布宽度（PDW）的变化。方法随机选择手工浓缩血小板（PCs）和单采血小板（A-PCs）各20袋,每袋平均分为两份,其中一份经137铯辐照,剂量25Gy,另一份不辐照;在22℃±2℃的血小板恒温振荡保存箱内保存72h。经辐照的手工血小板和单采血小板分别设为观察组1、观察组2;不辐照的血小板分别设为对照组1、对照组2。流式细胞仪检测血小板辐照前及保存24h、72h后P选择素表达情况,全自动血球计数仪检测MPV、PDW。结果辐照组与对照组血小板表达CD62P百分率均随保存时间延长而增高,保存72h后两组差异有统计学意义（P〈0.01、P〈0.05）;辐照组与对照组的血小板随着保存时间的延长MPV、PDW逐渐增加,但相同时间段相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论γ射线照射对血小板的质量无明显影响,但辐照后血小板应尽可能在72h内应用。     

血小板单采术对血小板的影响评估

目的：探讨用血细胞分离机分离浓缩血小板的单采术对血小板的影响。方法：用血细胞计数仪对单采术前后的血小板作MPV检测；用瑞氏染色法观察单采术前后的血小板形态的变化；用血液粘附仪检测单采术前后血小板粘附率的变化；用血液凝聚仪检测单采术前后血小板聚集率的变化；用CD41a、CD62p标记好单采术前后的血小板标本，用流式细胞仪检测其阳性率的变化。结果：单采术前后血小板的MPV无变化，形态无改变，粘附率、聚集率无变化，CD41a、CD62p阳性率无变化。结论：血小板单采术对血小板的形态、功能都不会造成影响。     

多种耐药相关蛋白在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨低浓度DMSO(2%)和第二信使调节剂混合物(thrombosol)低温保存血小板的效果.方法:应用6%DMSO(对照组)、2%DMSO thrombosol(实验组)为新鲜浓缩血小板的冰冻保护剂-80℃保存,1周后复温检测血小板计数、肾上腺素或凝血酶诱导的聚集反应、血小板表面CD41、CD42b、CD62p和CD35分子改变.结果:复温后,实验组血小板计数和凝血酶诱导的聚集反应明显高于对照组(P＜0.05,P＜0.01),但仍然低于新鲜血小板(P＜0.01).冰冻血小板CD62p表达较新鲜血小板显著升高(P＜0.05,P＜0.01),但实验组显著低于对照组(P＜0.05).与新鲜血小板相比,冰冻血小板肾上腺素诱导的聚集反应和CD42b表达均下降(P＜0.05,P＜0.01),但实验组与对照组间比较无明显差异.结论:与常规6%DMSO低温保存血小板相比,2%DMSO加第二信使调节剂混合物低温保存血小板的效果有明显改善.     

γ射线辐照对血小板CD62p表达率的影响

目的探讨γ射线辐照对单采血小板活化及输注效果的影响。方法将30袋单采血小板随机分为对照组和辐照组,分别测定保存前及保存第1、3、5天时血小板活化标志物CD62P的表达率;观察两种血小板输注后出血改善情况及血小板计数的变化情况。结果辐照组与对照组相比,保存前及保存第1、3天时CD62P的表达无显著性差异（P〉0.05）,保存至第5天时,辐照组CD62P的表达较对照组低（P〈0.05）;临床输注后,出血情况均有不同程度改善,两组患者输注血小板后其回收率无明显差异。结论γ射线辐照对单采血小板活化及输注效果均无明显影响,可以达到与输注未经辐照的等量血小板同样的疗效。     

急性白血病患者治疗前后血清IFN-γ、VEGF、IL-10及IL-12水平的变化及意义

目的分析急性白血病(AL)患者化疗前后血清IFN-γ、VEGF、IL-10及IL-12水平的变化。方法采用ELISA双抗体夹心法检测130例急性白血病患者化疗前后IFN-γ、VEGF、IL-10及IL-12水平,并与正常对照组比较。结果化疗前AL患者的VEGF、IL-10、IFN-γ和IL-12活性水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。化疗后AL患者的VEGF、IL-10、IFN-γ和IL-12活性水平与化疗前比较,有统计学意义(P<0.05),其变化情况:长期缓解组>中期缓解组>短期缓解组。结论 IFN-γ、VEGF、IL-10及IL-12参与AL发病,VEGF、IL-10、IFN-γ和IL-12的水平可作为临床上评估AL患者免疫状态和预后的指标。     

机采浓缩血小板-80 ℃长期冻存条件下CD62p表达与ADP诱导的再表达

目的 通过对冻存损伤关键因素的了解评估冻存血小板潜在的冻存期限.方法 采用流式细胞技术观察冻存1～6年复苏后血小板CD62p表达和ADP诱导后CD62p再表达能力.结果 在-80℃保存12～48个月,冻存血小板CD62p的表达受得良好抑制,可与22℃保存28 h的液体血小板质量相近;而ADP-CD62p再表达能力充分,36个月时为(70.2±10.3)%,与常温24 h的液体血小板的(70.4±21.5)%相比无显著性差异(P＞0.05);但48个月时下降至(35.2±18.2)%,与冻存36个月比较有非常显著性差异(P＜0.01).作为对照,液体血小板在采集后1 h的CD62p表达率为(2.2±1.5)%,在22℃条件下随保存时间的延长迅速升高,24 h有显著性差异(P＜0.05),48 h和72 h有极显著性差异(P＜0.01);而采集后1 h的ADP-CD62p再表达率为(83.5±14.7)%,其后迅速下降,48 h后有极显著性差异(P＜0.01).结论 新鲜血小板常温条件下待冻期间发生的代谢损伤是影响冻存血小板质量的关键因素,选择≤24 h的新鲜血小板用于-80℃冻存至少可以保存3年.     

脑梗死患者血小板活化状态及血小板参数的研究

目的:探讨脑梗死患者血小板膜糖蛋白P选择素(CD62P)、溶酶体蛋白(CD63)以及血小板3项参数即血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)和血小板最大聚集率(MAR)的变化及意义。方法:采用流式细胞术测定168例脑梗死患者血小板活化指标CD62P、CD63的表达,同时对其进行血小板3项参数PLT、MPV和MAR的测定,并与对照组比较。结果:(1)脑梗死患者急性期CD62P、CD63、MPV及MAR较健康对照组以及恢复期患者显著升高,而且恢复期患者上述指标仍高于健康对照组(均为P<0.01),而PLT在脑梗死急性期、恢复期及健康对照组之间均无显著性差异(均为P>0.05)。(2)CD62P、CD63、MPV及MAR与神经功能缺损程度评分呈显著直线正相关(r=0.84、0.817、0.684和0.698,均为P<0.01),而PLT与神经功能缺损程度评分间无相关性(r=0.32,P>0.05)。结论:脑梗死患者血小板大量活化及其体积和最大聚集率的升高参与了脑梗死的病理过程,MPV和MAR较PLT更能反映脑梗死的严重程度。     

地塞米松与甲基强的松龙对特发性血小板减少性紫癜患者T细胞亚群的影响对比研究

目的 比较地塞米松与甲基强的松龙对特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者T细胞亚群的影响.方法 将96例成人特发性血小板减少性紫癜患者随机分为A组及B组,每组48例.2组均接受小剂量丙种球蛋白治疗,A组加用大剂量甲基强的松龙冲击治疗,B组加用大剂量地塞米松冲击治疗.比较2组疗效、T细胞亚群、炎性因子、血小板峰值及变化时间、不良反应.结果 治疗后,A组总显效率(79.17％,38/48)与B组总显效率(75.00％,36/48)无统计学差异(P>0.05).治疗后,2组到达峰值时间无统计学差异(P>0.05);但A组的血小板峰值高于B组,且血小板升高至≥50×109/L的时间少于B组(均P<0.05).治疗后,2组CD4+、CD4+/CD8+均升高,CD8+、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)水平均降低(均P<0.05);A组CD4+、IL-6、IFN-γ及TNF-γ水平低于B组,CD8+高于B组(均P<0.05),2组间CD4+/CD8+无统计学差异(P>0.05).2组间血糖一过性增高、高血压、胃部不适等不良反应无统计学差异(P>0.05);2组均无股骨头坏死发生.结论 地塞米松和甲基强的松龙联合小剂量丙种球蛋白对特发性血小板减少性紫癜患者治疗效果、安全性均较好,可有效抑制炎症反应,改善细胞免疫功能.