血清药理法研究补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞内药物浓度的作用

为了探讨补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞内Rh123浓度的作用,选择人肺腺癌A549/DDP耐药细胞株为模型,采用荷瘤动物血清药理及流式细胞法,并与正常动物药物血清为对照,结果补肾化瘀解毒方荷瘤动物药物血清能显著提高肺癌A549/DDP耐药细胞内Rh123浓度(P<0.05),与正常动物药物血清无显著性差异(P>0.05),表明补肾化瘀解毒方药物血清能提高肺癌耐药细胞内药物浓度作用。     

补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞内Ca2+浓度的影响

现代医学研究表明 ,肿瘤耐药性尤其是多药耐药基因 (multidrug resistantgene,MDR)的表达使肿瘤对多种化疗药物产生耐受。这是导致化疗失败的主要原因 [1 ] ,并且也是肺癌化疗缓解后复发和转移的重要原因。研究还表明细胞内钙离子的浓度及活性改变对肿瘤化疗耐药性的产生有一定的影响。我们通过临床和实验研究发现 ,补肾助阳与化瘀解毒两类中药对肺癌化疗具有明显的增效解毒作用。为此根据既往的临床和实验研究基础 ,并吸取现代医学的研究成果 ,我们拟定了具有补肾助阳、化瘀解毒功效的补肾化瘀解毒方 ,选择人肺腺癌耐药细胞株为模型 ,采…     

补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌耐药细胞内Ca2+浓度影响的研究

为了探讨补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞内Ca2+浓度的影响,选择人肺腺癌耐药株A549/DDP为模型,采用荷瘤动物血清药理及流式细胞法,并与正常动物含药血清为对照,结果补肾化瘀解毒方荷瘤动物含药血清与正常动物药物血清均能显著降低肺癌A549/DDP耐药细胞内Ca2+浓度(P＜0.001),但荷瘤动物药物血清降低作用显著高于正常动物药物血清(P＜0.05).表明补肾化瘀解毒方药物血清有阻止肺癌耐药细胞内Ca2+的内流或释放作用,但荷瘤动物药物血清与正常动物药物血清具有差异性.     

补肾化瘀解毒方荷瘤药物血清对A549/DDP耐药逆转作用的研究

目的 :为了探讨补肾化瘀解毒方对肺癌耐药的逆转作用 ;方法 :选择人肺腺癌耐药细胞株 A5 4 9/DDP为模型 ,采用荷瘤动物血清药理及体外细胞毒试验方法 ;结果 :补肾化瘀解毒方荷瘤动物含药血清对肺癌耐药细胞 A5 4 9/DDP有抑制作用 ,并能增强 A5 4 9及 A5 4 9/DDP对化疗药物 DDP的敏感性 ;结论 :表明补肾化瘀解毒方荷瘤药物血清对化疗药物具有增敏和化疗耐药逆转作用     

补肾化瘀解毒复方含药血清对肺癌A549/DDP耐药细胞周期的影响

目的 探讨补肾化瘀解毒复方含药血清对肺癌耐药细胞周期的影响.方法 采用血清药理学及流式细胞法,分析补肾化瘀解毒复方含药血清分别与顺铂(DDP)和维拉帕米(VRP)合用后A549/DDP耐药细胞周期的变化.结果 补肾化瘀解毒复方含药血清均能明显增加A549/DDP耐药细胞G0/G1期细胞数,减少S期和G2/M期的细胞比例(P＜O.05).结论 补肾化瘀解毒复方含药血清能使A549/DDP耐药细胞阻滞于G0/G1期,协同增强DDP和VRP阻止A549/DDP耐药细胞DNA的合成,抑制肺癌耐药细胞的分裂增殖.     

补肾化瘀解毒方加减治疗肺癌验案举隅

肺癌的发生与素体阳气不足有关,经手术或放化疗后常寒热虚实错杂,治疗应扶正与祛邪兼顾,以补肾、化瘀、解毒为主要治法。曹勇教授自拟的补肾化瘀解毒方可加减应用于肺癌治疗的各个阶段、各个证型。列举3则验案说明补肾化瘀解毒方在抑制肿瘤生长、减轻放化疗不良反应、防止病情传变方面有重要作用。     

化瘀解毒方对胃癌细胞凋亡的作用及机制

目的:观察化瘀解毒方(Huayu Jiedu recipe,HYJDR)对胃癌细胞凋亡的影响,探讨HYJDR对胃癌细胞凋亡的作用机制,为HYJDR的临床运用提供实验依据。方法:运用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测HYJDR(5,10,15,20,25,30 g·L~(-1))对胃癌SGC-7901细胞活力影响,测定HYJDR对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)。利用碘化丙啶(propidium iodide,PI)和hoechst双荧光染色检测HYJDR对胃癌SGC-7901细胞的凋亡影响情况。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HYJDR对胃癌凋亡相关蛋白表达情况的影响。实时荧光聚合酶链反应(Realtime-polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测HYJDR对胃癌细胞凋亡相关蛋白信使RNA(mRNA)表达水平的影响。结果:与空白组比较,HYJDR质量浓度10 g·L~(-1)时可以明显抑制胃癌细胞的增殖活力,随着HYJDR浓度的增加,细胞活力下降明显(P0.05),呈明显的浓度依赖性。HYJDR可以促进胃癌细胞的凋亡,随着HYJDR浓度的增加,细胞的凋亡逐渐增多。与空白组比较,HYJDR可以明显抑制胃癌细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)表达(P0.05),同时提高Bcl-2细胞凋亡抵抗蛋白(Bcl-2 antagonist of cell death,Bad)和Bcl-2相关蛋白X(Bcl-2-associated X,Bax)等促凋亡蛋白表达(P0.05)。PCR结果显示,与空白组比较,HYJDR(5,10 g·L~(-1))组可以有效抑制胃癌细胞中Bcl-2 mRNA表达(P0.05),HYJDR各组促进Bad mRNA表达(P0.05)。结论:HYJDR可以明显促进胃癌细胞SGC-7901的凋亡,其作用很可能是通过提高Bad mRNA表达,抑制Bcl-2蛋白表达来实现的。     

冰茶栓对星形胶质细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的:应用血清药理学观察冰茶栓(BCS)对体外培养星形胶质细胞(Astrocyte AST)增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:原代培养SD乳鼠大脑皮层AST,将纯化后的细胞经免疫细胞化学鉴定后,随机分为药物组(高、中、低剂量)和对照组,加入相应血清共培养48h后,MTT比色法观察AST的增殖情况,流式细胞仪检测AST的凋亡率和细胞周期的变化。结果:MTT结果显示,冰茶栓高、中剂量组较空白血清组细胞数量明显减少(P<0.01,P<0.05),低剂量组与空白血清组比较无显著差异;流式细胞仪检测结果显示,冰茶栓组细胞凋亡比例较对照组明显增加(P<0.01);冰茶栓组G1期细胞比例较对照组明显提高(P<0.01),S期和G2/M期细胞比例较对照组明显降低(P<0.01)。结论:冰茶栓对体外培养的星形胶质细胞增殖具有明显的抑制作用,并可诱导其凋亡,抑制其由G1期向S期和G2/M期的转化。     

扶正培元方对Lewis肺癌小鼠免疫逃逸相关T细胞亚群比例的调控作用

目的 观察扶正培元方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫逃逸相关T细胞亚群比例的调控作用.方法 按随机数字表法将30只健康C57BL/6J小鼠分为中药组、中药加化疗组、化疗组、模型组和正常对照组,每组6只.除正常对照组外,其余各组小鼠右侧腋窝皮下接种Lewis肺癌细胞悬液0.2 ml.于接种次日开始给药,中药组灌胃扶正培元方8.17 g/kg;中药加化疗组腹腔注射环磷酰胺60 mg/kg,同时灌胃扶正培元方8.17 g/kg;化疗组腹腔注射环磷酰胺60 mg/kg,灌胃等体积生理盐水;模型组和正常对照组灌胃等体积生理盐水.连续给药后13 d,采用流式细胞仪检测各组荷瘤小鼠脾细胞CD4、Foxp3、CD8、CD28细胞表达.结果 与模型组比较,化疗组及中药加化疗组瘤重[(1.76±0.42)g、(1.40±0.43)g比(4.37±0.59)g]减轻(P<0.01);中药组及中药加化疗组小鼠脾细胞CD4+Foxp3+T细胞[(11.25±1.69)%、(9.30±2.68)%比(14.21±1.50)%]下降(P<0.05或P<0.01).结论 扶正培元方可调节荷瘤小鼠调节性T细胞比例,改善其体内存在的免疫耐受状态.     

扶正减毒方调控Th1/Th2免疫平衡对晚期肺癌免疫治疗的影响及机制研究

目的:基于Th1/Th2失衡探讨扶正减毒方对晚期肺癌免疫治疗的机制.方法:选取符合纳入标准的40例晚期肺癌患者,随机分为两组各20例.对照组予单纯程序性细胞死亡蛋白-1(programmed death-1,PD-1)抑制剂治疗,治疗组在对照组基础上予扶正减毒方治疗;在入组时及第12周检测患者血清Th1、Th2细胞、I...     

复方芒果叶抗炎物质筛选和作用机制研究

目的探究复方芒果叶的抗炎活性,明确其抗炎药效物质基础,初步阐明其网络调控机制。方法采用UPLC-Q/TOF-MS法结合核因子-κB(NF-κB)荧光素酶报告基因检测系统对复方芒果叶进行抗炎成分的筛选;运用网络药理学对其中药效成分进行作用靶点与通路的预测;并利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人支气管上皮细胞BEAS-2B炎症模型以及采用酶联免疫法(ELISA)对复方芒果叶的抗炎活性进行验证。结果从复方芒果叶中筛选出16个主要抗炎成分;预测这些抗炎成分分别作用于40个靶点并与11条炎症通路相关,活性验证结果表明芒果苷、补骨脂素、人参皂苷Rg1 3个化合物均具有很好的抗炎作用,且各成分间两两配伍具有协同作用。结论初步揭示了复方芒果叶抗炎作用与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、黏着斑(focal adhesion)、血管内皮生长因子(VEGF)信号通路等多重调控机制有关。     

肺癌平药物血清诱导A549人肺癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨肺癌平治疗肺癌的作用机制.方法:采用血清药理学方法孵育A549人肺癌细胞株,通过电镜、流式细胞术检测肺癌平药物血清作用后对细胞凋亡的影响.结果:肺癌平药物血清作用后电镜下可见凋亡小体形成,流式细胞仪检测可见亚二倍体核型峰的特征.结论:肺癌平治疗肺癌的作用机制是通过诱导肺癌细胞凋亡实现的.     

基于网络药理学和分子对接探讨鸡血藤治疗肺癌的分子作用机制

通过网络药理学和分子对接方法探讨鸡血藤治疗非小细胞肺癌的分子机制研究.以中药鸡血藤Spatholobi Caulis为对象,通过在中药药理学系统分析平台(TCMSP)数据库中获得鸡血藤中活性成分和相应潜在的药物靶点,利用GeneCards数据库收集癌症相关基因,借助Cytoscape软件构建鸡血藤活性成分-作用靶点-通...     

基于网络药理学的当归补血汤辅助治疗肺癌的作用机制研究

[目的]运用网络药理学的方法,探究当归补血汤作为化疗后辅助用药治疗肺癌的可能作用机制。[方法]通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库查询当归补血汤中的成分,并通过口服生物利用度(OB)≥30%,类药性(DL)≥0.18,筛选出活性成分,通过中药成分靶点数据库(HIT)及Swiss Target Prediction Database进行成分靶点的垂钓,通过Therapeutic Target Database(TTD)、Drugbank、DisGeNET数据库查询肺癌相关靶点,利用Cytoscape 3.2.1构建成分-靶点等多层次网络图。使用DAVID数据库对当归补血汤辅助治疗肺癌的潜在作用靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析。[结果]当归补血汤中共筛选得到27个活性成分,其中23个属于黄芪,4个属于当归,黄芪中的山奈酚、槲皮素、芒柄花素可能是辅助治疗肺癌比较重要的成分,微管相关蛋白Tau(MAPT)、细胞色素P450 19A1(CYP19A1)、雌激素受体α(ESR1)可能是当归补血汤辅助治疗肺癌比较重要的潜在作用靶点。GO富集分析显示,靶点涉及到170个生物过程相关条目、30个细胞组成相关条目、54个分子功能相关条目。KEGG通路富集分析显示,癌症通路(pathwanys in cancer)、癌症蛋白聚糖(proteoglycans in cancer)、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路(PI3K-Akt signaling pathway)等是比较重要的通路。[结论]当归补血汤中的活性成分山奈酚、槲皮素、芒柄花素可能通过作用于MAPT、CYP19A1、ESR1发挥辅助治疗肺癌的作用,为进一步研究其辅助治疗肺癌的作用机制奠定基础。     

红花多糖抗肿瘤活性及对T739 肺癌鼠CTL,NK细胞杀伤活性的影响

目的:研究红花多糖(safflower polysaccharide,SPS)体内外的抗肿瘤活性及对荷瘤鼠CTL,NK细胞杀伤活性的影响.方法:利用昆明种小鼠(KM)制备小鼠肉瘤S180的体内移植性肿瘤模型,腹腔连续给予SPS 10 d,称肿瘤质量;利用T739小鼠制备小鼠肺腺癌LA795的体内移植性肿瘤模型,腹腔连续给予SPS 10 d,称肿瘤质量,测定CTL及NK细胞杀伤活性;用台盼蓝拒染法观察SPS对3种肿瘤细胞的体外抗肿瘤作用.结果:SPS 40 mg·kg~(-1)对小鼠肉瘤S180的抑制作用最明显,抑瘤率为51.33%(P<0.01);对小鼠肺癌LA795也有抑制作用,使肿瘤体积明显减小为3.29 mm~3(P<0.05);能明显提高荷瘤小鼠脾CTL细胞、NK细胞杀伤活性(P<0.05).结论:SPS具有抗肿瘤作用,其作用机制可能与增强CTL,NK细胞的细胞毒活性有关.     

丹参-人参组分配伍对肺癌A549增殖、凋亡和骨架的影响

中药组分配伍抗肿瘤研究是近年来治疗恶性肿瘤的新方向。该研究通过正交设计优选丹参-人参活性组分抗肺癌A549的有效配伍,并探讨其对肺癌A549细胞增殖、凋亡和骨架的影响。研究发现,正交设计优选出丹参-人参组分配伍抗肺癌的最佳组合为丹参总酚酸、人参总皂苷和人参多糖的最佳配伍剂量为5,10,5 mg·L-1。并利用CCK-8法结合实时细胞分析技术检测丹参-人参组分配伍对肺癌细胞增殖的量效和时效关系,结果显示丹参-人参组分配伍能以时间和剂量依赖性的方式显著抑制肺癌A549细胞的增殖。进一步采用流式细胞术分析丹参-人参组分配伍对肺癌细胞凋亡的影响和高内涵细胞成像系统分析丹参-人参组分配伍对肺癌细胞骨架蛋白F-actin表达的影响,结果显示丹参-人参组分配伍能够显著诱导肺癌A549细胞凋亡和显著降低肺癌A549细胞骨架的面积,且呈一定的剂量依赖性。综上表明丹参-人参组分配伍能抑制肺癌A549细胞的增殖和生长,具有治疗肺癌的应用前景,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡及减少微丝形成相关。