乳腺癌基质降解产物对MCF-7细胞系增殖和侵袭的影响

目的 观察乳腺癌基质降解产物(DECM)对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖和侵袭的影响,探讨DECM对肿瘤增殖和浸润的作用,及对MMP-7蛋白与SDF-1蛋白表达的影响.方法 采用胰酶消化法,分别分离来自人正常乳腺组织、乳腺癌旁组织及乳腺癌组织切取物中细胞和基质,提取基质成分,洗涤基质得到3种母液,分别为正常乳腺组织母液、癌旁组织母液、癌组织母液,再以Ⅳ型胶原酶消化基质,得到3种DECM,分别为乳腺组织DECM、癌旁组织DECM、癌组织DECM,分别用3种母液和3种DECM作用于人乳腺癌细胞株MCF-7,设置空白对照,通过MTT法、软琼脂克隆形成实验观察癌细胞增殖的变化,用Transwell实验观察细胞侵袭能力变化,通过Western Blot检测人乳腺癌细胞株MCF-7细胞中MMP-7和SDF-1蛋白的表达变化.结果 Ⅳ型胶原酶作用人乳腺不同组织来源的基质得到的DECM均可以使MCF-7细胞株增殖和侵袭能力增强,与空白组及相应母液组比较差异有显著性(P＜0.01);DECM可以上调MCF-7中MMP-7和SDF-1蛋白的表达,与空白组及相应母液组比较差异有显著性(P＜0.01).结论 DECM具有促进肿瘤细胞增殖及侵袭能力的生物学活性;该能力可能与上调肿瘤细胞MMP-7和SDF-1蛋白表达有关.     

THBS1在乳腺癌细胞中的表达及对生物学行为的影响

目的 探讨THBS1基因对乳腺癌细胞生物学行为的影响.方法 生物信息学分析THBS1在乳腺癌组织与癌旁组织中的表达差异.利用si-RNA沉默人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231中THBS1基因,检测细胞的增殖、侵袭能力和凋亡率变化.结果 THBS1在乳腺癌组织中表达量高于癌旁组织(P<0.05);与si-NC组...     

膜联蛋白Ⅱ在乳腺癌组织中的表达以及对乳腺癌细胞侵袭的影响

目的探讨膜联蛋白Ⅱ在乳腺癌中的表达以及对乳腺癌细胞侵袭的影响。方法分别采用免疫组化方法检测AnnexinⅡ蛋白在正常乳腺组织、导管原位癌以及侵袭性导管癌组织中的表达情况,并测定高侵袭性乳腺癌细胞株及低侵袭性乳腺癌细胞株中AnnexinⅡm RNA(RT-PCR法)以及蛋白(蛋白印记技术)的表达情况。结果 AnnexinⅡ在正常乳腺组织中主要表达在间质内,在乳腺导管上不表达,在导管原位癌以及侵袭性导管癌组织中间质、血管、肿瘤组织上均有表达。AnnexinⅡ在正常乳腺组织表达的IOD值为(6.5±1.0)×106,在导管原位癌中表达的IOD值为(27.5±3.0)×106,在侵袭性导管癌组织中表达的IOD值为(40.0±11.0)×106。三组间比较,差异有高度统计学意义(P<0.01),导管原位癌、侵袭性导管癌组织中的表达量显著高于正常乳腺组织,而侵袭性导管癌中的表达量显著高于导管原位癌(均P<0.01)。AnnexinⅡm RNA在高侵袭性人乳腺癌细胞株MDA-MB-435s中的表达灰度值(0.83±0.11)显著高于MCF-7株中的表达(0.07±0.01),差异有高度统计学意义(P<0.01);AnnexinⅡ蛋白在高侵袭性人乳腺癌细胞株MDA-MB-435s中的表达(1.47±0.08)显著高于MCF-7株中的表达(0.11±0.03),差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论 AnnexinⅡ在乳腺癌中高表达,并且瘤细胞侵袭性越强,其表达也越强。     

CEACAM1与CD105在肾细胞癌中的表达及意义

目的:观察细胞黏附分子1(CEACAM1)与CD105分子在肾细胞癌(RCC)中的表达变化,研究其与肿瘤血管生成、肿瘤侵袭和转移的关系。方法:采用免疫组化SP法,检测47例肾细胞癌组织中CEACAM1和CD105的表达情况;并记录微血管密度(MVD)值,对肾细胞癌及癌旁正常肾组织中CEACAM1和CD105的表达情况进行相关分析。结果:⑴CEACAM1在肾癌中表达强度明显低于癌旁正常组织(P<0.05);CEACAM1在Ⅰ~Ⅱ期中表达明显高于Ⅲ~Ⅳ期(P<0.05)。⑵肾癌组织中CD105-MVD值明显高于癌旁正常组织MVD,二者相比差异有统计学意义(P<0.01)。CD105-MVD值在各病理分级G1、G2、G3组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05),在不同临床分期中表达有显著差异(P<0.01)。⑶CEACAM1与CD105-MVD表达呈负相关(r=-0.427,P<0.01)。结论:⑴肾癌中存在CEACAM1的表达下调和CD105-MVD升高,肾细胞癌中CEACAM1与CD105-MVD存在负相关。⑵CEACAM1在肾癌中的表达促进了肾细胞癌微血管的生成,提示CEACAM1可以作为抗肿瘤血管生成疗法的治疗靶点之一。     

SNHG17对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞体外增殖及迁移的影响

目的 探讨SNHG17在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系和组织中的表达及对肿瘤细胞增殖及迁移的影响.方法 收集2018年1月至2019年12月深圳市人民医院病理科40例三阴性乳腺癌组织标本,通过碱性磷酸酶原位杂交检测癌和癌旁正常组织中SNHG17的表达情况.构建过表达SNHG17质粒,经一代测序验证质粒.采用荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测转染SNHG17过表达质粒后过表达组和对照组SNHG17 RNA表达水平.使用CCK8检测过表达SNHG17对MDA-MB-231细胞增殖的影响.通过平板克隆形成实验观察过表达SNHG17对MDA-MB-231细胞克隆能力的影响.进行Transwell小室实验观察过表达SNHG17对肿瘤细胞的迁移能力及侵袭能力的影响.结果 原位杂交显示SNHG17在乳腺癌组织表达水平高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05).构建SNHG17过表达质粒,经过一代测序验证碱基序列完全匹配.通过qRT-PCR发现,SNHG17过表达组与对照组相比,细胞中SNHG17RNA表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05).CCK8检测表明SNHG17过表达组MDA-MB-231细胞增殖活性较对照组增加,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);不同检测时间之间MDA-MB-231细胞增殖活性差异有统计学意义(P<0.05);组间与时间之间存在交互作用,组间差异随时间变化而增加,差异具有统计学意义(P<0.05).平板克隆形成实验结果显示,SNHG17过表达组克隆细胞数较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05).进一步Tr-answell细胞迁移和侵袭实验结果显示,SNHG17过表达组MDA-MB-231细胞迁移和侵袭数目均较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 SNHG17在MDA-MB-231细胞系及乳腺癌组织中高表达,过表达SNHG17后可促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭.     

结直肠癌中肿瘤相关巨噬细胞及基因表型的分析研究

目的结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)CD68~+及CD163~+的检测及与基因表型的关系。方法免疫组化方法检测41例CRC肿物,癌旁5 cm(M5)、10 cm(M10)。不典型增生(Atypical hyperplasia,AH)组织CD68~+及CD163~+的表达,采用病理切片扫描仪细胞计数。对41例CRC肿物进行基因检测。结果CRC患者CD68~+及CD163~+检测肿物组织高于癌旁5 cm、10 cm(P0.01);肿物与不典型组织比较差异无统计学意义(P0.05);癌旁组织M5与M10比较差异无统计学意义(P0.05);回归分析提示CD163~+表达与K-ras基因突变有显著性关系(P0.05)。CD68~+及CD163~+的表达与B-raf基因突变、MSS(微卫星稳定型)、淋巴结转移、脉管癌栓、神经侵犯无相关性(P0.05)。结论 CD68~+及CD163~+在结直肠癌肿物间质中高表达,并高于癌旁组织,与AH表达无相关性。CD163~+在肿物的表达与K-ras基因突变有相关性。     

长链非编码RNAAC003973.4对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响研究

目的检测长链非编码RNAAC003973.4在人乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中的表达,探讨其对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测20例乳腺癌组织及配对的癌旁组织,以及检测乳腺癌细胞株（BT-549、MDA-MB-231、MCF-7、T47D）和正常乳腺上皮细胞株MCF-10A中AC003973.4的表达。取AC003973.4表达水平最低的乳腺癌细胞株转染过表达质粒以上调AC003973.4的表达,分别采用MTS法、Transwell迁移和侵袭实验检测AC003973.4对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;生物信息学法预测AC003973.4互补结合的miRNA及下游靶基因,qRT-PCR法检测miRNA和下游靶基因mRNA的表达,Westernblot检测相关蛋白的表达。结果乳腺癌组织AC003973.4表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.01）。乳腺癌细胞株AC003973.4表达水平明显低于人正常乳腺上皮细胞（均P＜0.05）,MCF-7细胞中AC003973.4的表达水平最低（P＜0.01）。上调MCF-7细胞AC003973.4的表达后,细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显减弱（均P＜0.05）。AC003973.4可互补结合miR-224-5p,miR-224-5p可互补结合PTEN。上调MCF-7细胞AC003973.4的表达后,miR-224-5p的表达均下调（P＜0.01）,PTENmRNA和蛋白的表达均上调（均P＜0.01）,细胞增殖相关蛋白CDK4、CyclinD1与细胞迁移相关蛋白Zeb-1、N-cadherin表达均下调（均P＜0.01）。结论乳腺癌组织和细胞株中AC003973.4表达水平降低,上调AC003973.4表达可减弱乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能与调节miR-224-5p与PTEN基因的表达有关。     

miRNA-191对人乳腺癌细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨miR-191在人乳腺癌细胞中的表达情况,研究其对乳腺癌细胞的增殖、侵袭的影响。方法 real-time PCR检测乳腺癌细胞[MDA-MB-231(雌激素受体阴性,ER-)、MCF-7(雌激素受体阳性,ER+)]和正常乳腺上皮细胞(HBL-100)中miR-191表达水平的差异;利用Lipofectamine2000将miR-191抑制体瞬时转染乳腺癌MCF-7,并用real-time PCR检测转染效果;分别用CCK-8法检测MCF-7细胞增殖,流式细胞术检测MCF-7细胞的细胞周期,Transwell法检测MCF-7细胞的侵袭能力。结果与正常乳腺细胞相比,miR-191在乳腺癌细胞中高表达(P<0.01),且在ER(+)乳腺癌细胞MCF-7中的表达水平高于ER(-)乳腺癌细胞MDA-MB-231(P<0.01),转染miR-191抑制体后,MCF-7细胞增殖能力(0.65±0.04)较阴性对照组(1.18±0.05)明显受到抑制(F=122.238,P<0.01),侵袭能力(56.67±2.58)较阴性对照组(82.5±5.79)减弱(F=18.734,P<0.01),G0/G1期的细胞比例(73.39±1.10)%较阴性对照组(69.28±2.11)%增加(F=61.060,P<0.01),S期细胞比例(20.9±1.17)%较阴性对照组(25.48±1.19)%减少(F=46.937,P<0.01)。结论 miR-191在人乳腺癌细胞中,特别是ER(+)乳腺癌中高表达,转染miR-191抑制体后,MCF-7细胞增殖、侵袭能力明显受到抑制。     

乳腺癌患者D-双功能蛋白表达与肿瘤标志物CEA和CA153关系的临床研究

目的探讨乳腺癌组织中D-双功能蛋白(DBP)表达及其与血清肿瘤标志物CEA、CA153水平的相关性,及对乳腺癌诊断和治疗的临床意义。方法选取2012年1月-2015年12月唐山市妇幼保健院住院的20例乳腺癌切除术患者作为试验组,同期20例健康体检的正常者作为健康对照组,应用化学发光法检查血清肿瘤标志物CEA和CA153的表达水平,免疫组织化学法检测乳腺癌组织和癌旁组织DBP的表达水平,分析比较其差异、相关性。结果试验组血清肿瘤标志物CEA、CA153水平均显著高于正常对照组,差异均有统计学意义(t=39. 22、42. 87, P均<0.01),乳腺癌组织中DBP表达水平高于癌旁组织,乳腺癌组织DBP的灰度值为(96.3±11.4),癌旁组织为(29. 8±5.7),差异具有统计学意义(t=2.301,P<0.05)。试验组患者中,DBP的表达与血清CEA和CA153水平均呈正相关(r=0.800,P<0.01;r=0.709,P<0.01)。结论 DBP表达在乳腺癌的发展进程中具有重要的意义,并为乳腺癌的诊疗提供了一个新的研究靶点。     

肿瘤相关巨噬细胞在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的 探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMS)在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化Evision法,检测乳腺浸润性导管癌80例(其中伴淋巴结转移者38例,无淋巴结转移者42例)及癌旁正常乳腺组织(30例)中TAMS的标记物CD68、CD163的表达,并分析其与乳腺癌临床病理因素间的相关性.结果 CD68、CD163在乳腺浸润性导管癌中的表达阳性率分别为63.75%,53.75%,其中淋巴结转移组(阳性率分别为73.68%,68.42%)与无淋巴结转移组(52.38%,45.23%)及癌旁正常组织(13.33%,13.33%)中的表达差异具有统计学意义(P<0.05).TAMS与乳腺癌的组织学分级 、临床分期密切相关(P<0.05),CD68的表达与CD163的表达呈正相关关系(r=0.581,P<0.05).结论 TAMS的异常高表达对乳腺癌患者的预后不利,TAMS表达的检测可作为判断乳腺癌侵袭转移及临床预后的重要指标.     

MicroRNAs in breast cancer and breast cancer stem cells and their potential for breast cancer therapy

The discovery of the first miRNA,lin-4,in Caenorhabditis elegans initiated a new era of miRNA biology.Since then,thousands of miRNAs have been identified and annotated,many of which have been shown to play roles in a variety of biological processes,including development,differentiation,apoptosis,proliferation,and cell death.1 Furthermore,growing evidence indicates that miRNA deregulation is a critical cause of cancer formation.The biogenesis,function,and potential application of miRNAs have become active areas of research.With the development of molecular biological technologies,such as northern blotting with radio-labeled probes,cloning,quantitative PCR,serial analysis of gene expression (SAGE)-based techniques,bead-based profiling methods,and oligonucleotide microarrays,2 it is possible to conduct miRNA research precisely and comprehensively.     

乳腺癌特异基因1在乳腺癌表达的意义

目的 检测乳腺癌特异基因1(BCSG1)在乳腺癌中的表达，评价其表达与乳腺癌临床病理因素的相关性。方法 利用逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR法)检测28例乳腺癌、7例乳腺增生症及5例乳腺纤维瘤中BCSG1的表达。结果 28例乳腺癌中有BCSG1表达12例(42．9％)，其中Ⅲ／Ⅳ期乳腺癌的表达率为69.2％(9／13例)，乳腺良性病变中BCSG1无一例表达。BCSG1的表达与乳腺癌分期密切相关(P=0．02)，与患者年龄、月经、肿瘤部位以及雌激素受体、孕激素受体、核增殖抗原、C—erbB2的表达等无相关性。结论 BCSG1可能是与肿瘤恶性进展有关的肿瘤标记物，是乳腺癌发生过程中的中晚期事件，为判定乳腺癌预后的新指标。     

Familial breast cancer

Familial breast cancer is important because of all the known risk factors associated with developing the disease. The one with the most predictability is a positive family history. It is also important because a family history causes anxiety in the families concerned, and young women will often ask their chance of developing the disease. This form of breast cancer accounts for 10% of causes and has factors that distinguish it from the sporadic variety. Relatives of familial breast cancer patients are not only at an increased risk of developing the disease (if female) but also of developing other tumours especially colonic.