m6A修饰调控卵母细胞及早期胚胎发育的研究进展

N6-甲基腺苷(m6 A)修饰是广泛存在的一种表观修饰,在有性生殖卵子的发育与早期胚胎成熟中发挥重要作用.m6 A修饰呈现出动态变化,m6 A及相关甲基化酶、去甲基化酶和甲基化识别酶的表达参与各种生理活动,主要在调节转录、调控相关蛋白质翻译、影响mRNA稳定性及降解等方面发挥作用.围绕m6 A修饰在生殖领域的研究大多围...     

m~6A甲基化修饰在消化道肿瘤中的研究进展及临床价值探讨

N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化修饰是真核信使RNA(mRNA)中最常见的内部转录修饰, 为一种动态可逆的调控修饰, 调控因子包括甲基转移酶、去甲基化转移酶和m6A识别蛋白。近年来相关研究发现, m6A甲基化修饰在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用。本文就m6A甲基化修饰及其调控因子的相关概念、在消化道肿瘤中的研究进展、对预后的评估价值及治疗耐药等方面进行综述。     

N6-甲基腺苷甲基化在心血管相关疾病中的研究进展

N6-甲基腺苷(m6A)是指在腺嘌呤第6位氮原子上发生的甲基化修饰,对非编码RNA来说普遍存在,在真核生物中是最常见的。m6A的作用是通过参与mRNA与读取蛋白结合,进一步调控mRNA的可变剪切、翻译效率和稳定性等,是一种动态的、可逆的修饰方式。目前的研究表明,m6A甲基化可能在多种心血管疾病的发生、发展中发挥重要作用。本文结合近期的研究进展,对m6A修饰、检测方法以及在心血管系统中的研究进展作一综述。     

m6A修饰在神经系统疾病中的作用

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物mRNA最常见的表观遗传修饰之一,在相关酶的催化调控下,m6A通过介导RNA转录、剪接、翻译、衰变等参与机体的生理和病理生理过程。以往主要关注m6A在肿瘤,如血液系统肿瘤、宫颈癌、乳腺癌等中的调控作用,近年来发现m6A富集于与神经发生、细胞周期、神经元分化等相关的mRNA中,其在神经系统中的调控作用逐渐被重视。m6A修饰水平及相关酶蛋白表达水平发生改变会引起神经系统功能紊乱,参与神经系统疾病的发生与转归。m6A修饰及其相关酶在重度抑郁症、帕金森病、阿尔茨海默症、脆性X综合征、肌萎缩侧索硬化、创伤性脑损伤及神经系统肿瘤等众多神经系统疾病的发展进程中扮演关键角色。     

N6-甲基腺苷甲基化修饰在胃癌转移中的作用及机制研究进展

N6甲基腺苷(m6A)甲基化修饰是一种动态可逆的转录后修饰，主要由甲基转移酶催化mRNA上腺苷酸发生甲基化，去甲基转移酶将甲基去除，然后m6A甲基结合蛋白特异性结合mRNA从而完成m6A甲基化修饰。m6A甲基化修饰通过调控RNA的代谢影响肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移以及对化学治疗药物的耐药性，进而调控肿瘤的发生发展进程。胃癌位居全球常见癌症的第5位，其相关病死率位居世界第4位，严重危害人类健康。最新研究报道，m6A甲基化修饰在调控胃癌转移中发挥重要作用。本文就近年来m6A甲基化修饰在胃癌转移中的作用相关研究进展进行综述，以期为今后胃癌转移机制的阐明、新的候选治疗靶点的发现及抗癌药物的研发提供理论基础。     

m6A RNA甲基化修饰与肿瘤关系的研究进展

N6-甲基腺苷(m6 A)是动态可逆的转录后修饰,是真核信使RNA(mRNA)上最普遍的内部修饰.越来越多的证据表明,m6 A可改变基因表达,从而调节细胞的自我更新、分化、侵袭和凋亡等过程,并且m6 A甲基化失调与异常的RNA代谢直接相关,可导致肿瘤的发生和药物反应的改变.m6 A修饰主要由m6 A甲基转移酶催化,m6...     

m6A甲基化修饰在乳腺癌中作用及调控机制研究进展

乳腺癌(breast cancer,BC)是全球女性发生率最高的恶性肿瘤,也是危及女性健康的主要危险因素。N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)是高等真核生物mRNA中富含的内部修饰物,对于mRNA代谢和多项生物过程都具有关键作用。近年来研究表明,m6A与多种类型的肿瘤发展息息相关,但是其与BC之间的关联还不十分明确。本文综述了m6A甲基化修饰在癌症中作用的研究进展,包括m6A甲基转移酶、去甲基化酶、甲基识别蛋白各自的生物功能,以及m6A甲基化修饰在BC的增殖、侵袭、耐药及预后等方面的作用。开发针对m6A的化学调节剂为BC的治疗提供了一个全新的可能,同时m6A甲基化修饰因子有望成为BC诊断、预后以及疗效监测的重要治疗靶点。     

t(8;21)急性髓系白血病中RNA N6-甲基腺嘌呤（m6A）的修饰特征

目的 研究（t8;21）急性髓系白血病（AML）中AML1-ETO（AE）融合基因与细胞内N6-甲基腺嘌呤（m6A）修饰的关系。方 法 利用RNA-蛋白免疫共沉淀和高通量测序技术（MeRIP-Seq）在AE（+）和敲除AE的AML细胞系中进行RNA m6A测序,分析整个转录组m6A修饰的变化。利用高通量测序技术进行转录组测序（RNA-seq）。进一步通过GO分析、KEGG通路富集分析对差异修饰的 mRNA 进行功能注释。实时荧光定量PCR检测m6A相关酶表达量变化。结果 RNA m6A甲基化测序在敲除AE和表达AE的AML细胞系中共检测到26 441个基因,包含了72 036个m6A peak。AE敲除后细胞内m6A peak的数目由37 042个变成34 994个,其中有1278个m6A peak升高,1225个下降。AE敲除后新出现了1316个m6A修饰的基因,1830个基因失去了m6A修饰。差异的peak主要在癌症、人类T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ等通路中富集。RNA-seq结果显示,AE敲除后有2483个基因表达上调,3913个基因表达下调。MeRIP-Seq和RNA-Seq联合分析结果显示,与非m6A修饰的基因相比,m6A所修饰的基因表达水平均相对较高（SKNO-1:0.6116±1.263 vs 2.010±1.655,P<0.0001;SKNO-1 siAE:0.5528 ±1.257 vs 2.067± 1.686,P<0.0001）。m6A修饰位于3'UTR或5'UTR的基因较位于外显子区的基因表达量更高（SKNO-1:2.177±1.633 vs 1.333± 1.470 vs 2.449±1.651,P<0.0001;SKNO-1 siAE:2.304±1.671 vs 1.336±1.522 vs 2.394±1.649,P<0.05）。RNA-seq结果显示,有3 种m6A相关酶METTL14、WTAP、ALKBH5的mRNA表达升高（WTAP:5.36±0.5657 vs 13.19±0.3253,METTL14:2.850±0.1556vs 8.815±1.761,ALKBH5:13.70±0.4596 vs 39.84±6.067,P<0.05）。实时荧光定量PCR检测METTL14、WTAP、ALKBH5的表达量变化发现敲除AE后WTAP、ALKBH5的表达量升高,而METTL14的表达量降低（P<0.05）。结论 AE敲除造成m6A相关酶差异,推测AE融合基因或许可以调控一种或多种m6A相关酶的表达控制细胞内的甲基化水平,影响m6A修饰模式。     

下调METTL3-LYN m6A-IGF2BP2通路抑制内皮细胞迁移

目的 研究甲基转移酶样蛋白3(methyltransferase like 3,METTL3)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)迁移能力的影响,并初步探究其作用机制.方法 通过在线设计靶向METTL3第1个外显子的sgRNA,构建到lentiCRISPR v2载体;Western blot和免疫荧光染色实验检测METTL3蛋白表达水平;细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;m6A甲基化RNA免疫沉淀实验检测细胞迁移相关基因酪氨酸激酶LYN mRNA上m6A甲基化修饰情况;荧光定量PCR(qPCR)检测LYN的表达情况;利用shRNA敲低m6A识别蛋白IGF2BP1和IGF2BP2,siRNA敲低m6A识别蛋白YTHDF2,qPCR检测识别蛋白敲低水平及LYN的mRNA表达情况;RNA免疫沉淀实验进一步检测IGF2BP2与LYN mRNA的结合情况;放线菌素D抑制转录后,qPCR检测LYN mRNA半衰期.结果 利用CRISPR-Cas9技术成功构建METLL3基因敲低的HUVECs细胞系.METTL3基因敲低后,内皮细胞的迁移能力下降(P＜0.05),细胞迁移相关基因LYN mRNA上m6A甲基化修饰水平显著降低(P＜0.01),且LYN mRNA的表达明显下调(P＜0.05).敲低m6A识别蛋白YTHDF2和IGF2BP1,对LYN mRNA的表达量无显著影响(P＞0.05),而敲低IGF2BP2,LYN的mRNA表达量显著下调(P＜0.01),RNA免疫沉淀实验结果显示IGF2BP2与LYN mRNA结合.mRNA半衰期实验结果表明敲低IGF2BP2降低LYN mRNA稳定性.结论 敲低METTL3抑制内皮细胞迁移,其机制可能通过IGF2BP2识别并结合LYN mRNA上m6A修饰位点,调控其mRNA稳定性来发挥作用.     

RNA m6A甲基化修饰酶调控肿瘤的功能及其抑制剂的研究进展

RNA修饰在生命活动和疾病的发生和发展中发挥着重要的作用.氮6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenine,m6A)修饰是信使RNA中广泛存在的甲基化修饰,是动态变化的.近年来在肿瘤中发现m6A修饰酶和结合蛋白表达异常,可通过改变靶基因的RNA m6A修饰水平来调控肿瘤的进展.该文综述了 m6A的去甲基化酶和甲基转移...     

m6A甲基化修饰调控结直肠癌细胞中PD-L1表达

目的 检测程序性死亡配体-1(PD-L1)mRNA在结直肠癌细胞中是否存在m6A甲基化修饰以及m6A对PD-L1表达的影响,为结直肠癌的免疫治疗提供新的理论依据.方法 利用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(qPCR)及蛋白质印迹法检测m6A相关蛋白表达变化对PD-L1mRNA和蛋白表达的影响,通过双荧光素酶报告基因实验验...     

双酚A暴露对KGN细胞m6A修饰水平的影响

目的 研究双酚A(BPA)暴露对卵巢颗粒细胞功能表观遗传学的影响。方法 将人卵巢颗粒瘤细胞(KGN细胞)暴露于BPA(浓度分别为0、0.02、0.2、2、20μg/mL) 24 h,作为溶剂对照组、0.02μg/mL BPA组、0.2μg/mL BPA组、2μg/mL BPA组、20μg/mL BPA组,测定mRNA m6A的修饰水平和m6A甲基化调控基因的表达变化;Merip-qPCR法检测抗氧化转录因子(Nrf2)的m6A修饰水平。结果 BPA下调mRNA m6A修饰水平(P<0.001),并改变了m6A甲基化调控基因的表达(P<0.05),2μg/mL BPA组的超氧化物歧化酶(SOD)表达降低(P<0.05),Nrf2的m6A修饰水平降低(P<0.05)。结论 BPA暴露通过下调Nrf2的m6A修饰导致人卵巢颗粒瘤细胞(KGN细胞)氧化应激增加,颗粒细胞功能损伤,对卵巢颗粒细胞表观遗传学产生影响。     

m~6A RNA甲基化修饰在常见心血管疾病和心肌肥大中的研究进展

心血管疾病是影响全球伤残调整生命年和导致死亡的主要原因。最近研究报道，mRNA最普遍的内部修饰N6-腺苷酸甲基化(m6A)在心血管疾病中发挥重要作用。本文概述了m~6A RNA甲基化修饰的关键酶及动态调节过程，重点阐述了m~6A RNA甲基化在心肌肥大和心力衰竭、高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病、心律失常等常见心血管疾病中的研究进展，并对m~6A RNA甲基化新技术进行了讨论。     

m6A甲基化在鼻咽癌中的研究进展

N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基化是哺乳动物最常见的mRNA修饰方式,受m6A甲基化酶、m6A去甲基化酶、m6A甲基识别蛋白等三类分子的动态调控。m6A甲基化修饰相关蛋白在鼻咽癌组织标本中表达异常,有望成为鼻咽癌诊断和治疗的潜在分子靶点。本文就m6A甲基化及其对鼻咽癌增殖、转移、多重耐药性和放疗增敏方面的影响进行综述。     

双氢青蒿素对SLE小鼠巨噬细胞mRNAm6A甲基化的影响研究

目的探讨双氢青蒿素对系统性红斑狼疮（SLE）小鼠巨噬细胞mRNAN6-腺嘌呤（m6A）甲基化修饰水平的影响。方法从SLE小鼠腹腔中获取腹腔巨噬细胞,在体外用双氢青蒿素刺激巨噬细胞。采用DotBlot法检测巨噬细胞mRNAm6A甲基化修饰水平,分别采用RT-PCR、Westernblot法检测巨噬细胞m6A甲基化转移酶（METTL3）、m6A去甲基化修饰酶（ALKBH5和FTO）的mRNA和蛋白表达水平,m6A-qRT-PCR法检测TLR7和TLR9mRNAm6A甲基化修饰水平。结果与空白对照比较,60滋mol/L双氢青蒿素刺激来源SLE小鼠的巨噬细胞后,巨噬细胞mRNA的m6A甲基化修饰水平显著降低（P＜0.05）;巨噬细胞的METTL3mRNA和蛋白水平均明显上调（均P＜0.05）,而ALKBH5的mRNA和蛋白水平均明显下调（均P＜0.05）,且呈现双氢青蒿素浓度依赖;同时双氢青蒿素刺激后TLR7和TLR9mRNAm6A修饰水平降低（均P＜0.05）,进而抑制TLR7和TLR9的蛋白表达（均P＜0.05）。结论双氢青蒿素可能通过调控巨噬细胞mRNAm6A甲基化修饰水平抑制TLR7、TLR9蛋白表达的机制发挥治疗SLE的作用。     

m6A甲基化修饰蛋白在卵巢癌中的研究进展

N6-甲基腺苷（m6A）是一种广泛存在于肿瘤细胞中的表观遗传学修饰,为动态、可逆性修饰mRNA。卵巢癌是妇科癌症中病死率最高的恶性肿瘤。m6A甲基化修饰蛋白的高表达或低表达会促进或抑制卵巢癌,但其具体机制尚未完全明确。因此,探究m6A修饰蛋白对卵巢癌进展的影响将为卵巢癌的早期诊断及治疗提供帮助。该文就近年来m6A修饰蛋白对卵巢癌的增殖、转移的影响及其机制研究作一综述。     

皮肤病中编码RNA的m6A修饰

N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是真核生物mRNA上最主要的转录后修饰,受甲基转移酶、去甲基酶和m6A结合蛋白调控,对mRNA的剪接、翻译、降解起重要调节作用。皮肤病尤其免疫性皮肤病和皮肤肿瘤发病机制复杂,治疗困难,严重影响患者的生活质量。近年来研究发现m6A及其调控蛋白可影响众多皮肤病的发生和发展。m6A修饰可参与皮肤附件的发育,包括毛囊、汗腺形成。在黑色素瘤、皮肤鳞状细胞癌、梅克尔细胞癌、银屑病等多种皮肤病中,m6A修饰水平显著改变,并影响细胞增殖、分化、迁移等多种生物学过程。m6A及其调控蛋白可能成为皮肤病潜在的分子标志或治疗靶点,在皮肤病的早期诊断、疗效判断、预后预测、基因治疗等方面有广阔的临床应用前景。     

RNA甲基化转移酶METTL3在白血病中的研究进展

近年来,RNA修饰成为表观遗传调控的研究新领域,其中,N6-甲基腺苷(m6A)修饰是发生在腺嘌呤第六位N原子上的甲基化修饰,是真核细胞mRNA最常见、最丰富的化学修饰,由甲基转移酶复合体、去甲基化转移酶及相应的阅读器协同调控,对维持mRNA的稳定性、调节剪接和翻译等过程具有重要意义,并参与肿瘤、生殖、生物节律等多种病理、生理过程。甲基转移酶样蛋白3(METTL3)作为核心成分,在正常造血和恶性血液肿瘤中起着至关重要的作用。该文重点关注METTL3的结构,及其在正常造血和血液恶性肿瘤中的作用,以及METTL3治疗血液肿瘤的潜力,归纳METTL3在白血病中的研究进展及相关作用机制,为白血病的治疗提供新的思路。     

RNA m6A修饰与免疫功能调控

目前，在编码和非编码RNA中已经发现超过100种化学修饰。N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine, m6A）是真核细胞中最常见和最丰富的转录后水平RNA修饰，m6A甲基转移酶及去甲基化酶参与m6A修饰水平的动态可逆调节，m6A修饰识别蛋白特异性识别m6A修饰并调控RNA的剪接、转运、稳定性和翻译。 m6A修饰几乎参与了从正常发育到疾病的所有主要生物过程，包括对免疫系统的调控。免疫系统的正常发育和功能行使依赖于相关基因表达的精准调控，而m6A修饰在该调控中起到关键作用。本文围绕m6A修饰的概念、功能和作用机制，特别是其在免疫系统功能调控中的作用进行综述，讨论了目前该研究领域的挑战并展望未来的研究方向，以期为m6A修饰参与免疫调控的研究提供理论依据和参考。     

S100A6在急性髓细胞白血病中的表达及对疗效的影响

目的 了解S100A6 mRNA在人急性髓细胞白血病(AML)中的表达及对疗效、预后的影响。 方法 选取南京医科大学第二附属医院2009年11月—2014年6月收治的初治AML患者42例,另选取健康对照者12例,Real-time PCR检测AML患者治疗前后及对照组骨髓单个核细胞S100A6 mRNA表达,比较AML患者与对照组及AML不同类型间S100A6表达。比较M3、M4、M5患者中治疗有效组与治疗无效组治疗前后S100A6表达差异,复发组与无复发组S100A6表达差异,比较M3、M4、M5患者S100A6高表达组与低表达组间CR1(第一次完全缓解)、CR2(第二次完全缓解)的表达差异、2年总生存率(OS)表达差异及复发率表达差异。采用SPSS 19.0统计软件比较各组间差异。 结果 S100A6在M3、M4、M5患者中表达较对照组高(P<0.05),在M1、M2、M6、M7患者中表达较对照组差异无统计学意义(P>0.05)。M3、M4、M5患者治疗有效组治疗前后S100A6表达差异有统计学意义(P<0.05),治疗无效组差异无统计学意义(P>0.05)。M3、M4、M5患者2年内复发组治疗前S100A6表达较无复发组高(P<0.05)。S100A6高表达组与低表达组间CR1率、CR2率、2年OS率差异均无统计学意义(P>0.05)。M3、M4、M5患者S100A6高表达组较低表达组复发率明显提高(P<0.05)。 结论 S100A6在AML患者中的表达与AML分型、疗效及预后相关,可作为白血病疾病诊断分子标志之一。