川芎嗪对肝星状细胞凋亡的影响及机制研究

目的 研究川芎嗪对大鼠肝星状细胞(HSC)凋亡的影响及可能机制,为肝纤维化的治疗提供新的方法.方法 以血小板衍生生长因子(PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞系HSC-T6,建立体外肝纤维化细胞模型,在此基础上,给予川芎嗪30μmol/L刺激HSC-T6,作用24 h后,Western blot法检测相关蛋白的表达情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Hoechst 33258染色法观察各组HSC的凋亡形态.结果 Western blot法结果表明,与PDGF组比较,川芎嗪组ERS标志性蛋白GRP78表达增多,并且ERS特异性凋亡蛋白CHOP及C-Caspase12表达增强,Bcl-2/Bax比例明显下调,p-ERK/ERK水平降低.流式细胞仪检测结果表明川芎嗪组较PDGF组HSC凋亡率增强,同时Hoechst 33258染色结果表明川芎嗪组HSC呈现典型的核固缩等凋亡形态变化.结论 川芎嗪可以诱导PDGF活化的HSC发生凋亡,其可能与ERS特异性凋亡蛋白CHOP及C-Caspase12的表达上调、ERK1/2磷酸化水平降低,进而下调Bcl-2/Bax比例,发生相关凋亡.     

肝星状细胞凋亡研究进展

细胞凋亡(apoptosis)是一种由基因调控的,具有特征性的细胞主动死亡过程。细胞凋亡与细胞增殖组成一对矛盾统一体,贯穿生命活动的始终。它们共同决定着细胞和组织的基本特征和命运。随着对细胞凋亡分子机制认识的深入,不仅有助于阐明许多长期困扰人类的疾病,而且还可通过诱导细胞凋亡,为一些疾病的治疗提供新的途径。现就肝纤维化逆转过程中肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)凋亡研究进展作一简述。     

肝星状细胞凋亡研究进展

细胞凋亡在机体发育过程中维持细胞群之间的动态平衡、细胞分化以及疾病病理生理过程中发挥关键作用.近年来发现,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)凋亡在肝纤维化的自发性恢复过程中占有主导地位.     

肝星状细胞凋亡与线粒体

肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)活化增殖是形成肝纤维化的主要因素.活化的HSC转分化为肌纤维母细胞样细胞表型,产生大量胶原蛋白等细胞外基质(extracellular matrix, ECM)成分,同时活化的HSC表达金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-2(tissue inhibitor of metalloproteinase 2, TIMP-2)以及转化生长因子-β(transforming growth factor β, TGF-β)等阻碍ECM的降解,加重肝纤维化的程度.     

肝星状细胞凋亡机制及调控研究进展

抑制活化肝星状细胞(HSCs)增殖和诱导其凋亡成为阻止肝纤维化(HF)进程的途径之一。在细胞凋亡的发生过程中,有多种不同因素和途径参与活化HSCs的凋亡,活化HSCs的凋亡受到凋亡和抗凋亡基因、细胞因子等调控。作者就近年来有关HSCs凋亡及其调控的研究进展作一综述。     

钙网蛋白与凋亡细胞的清除

钙网蛋白(calreticulin,CRT)是一种分子量为46.5Kd的可溶性Ca2 结合蛋白,属于KDEL(内质网滞留信号肽)蛋白家族,包含球状的N末端、富含Proline的中间区和富含酸性氨基酸的C末端三个结构域。上世纪70年代初,Ostwald和MacLennan首次从兔骨骼肌的肌浆网中分离获得CRT蛋白,随后Flieg     

姜黄素诱导肝星状细胞凋亡的初步研究

目的　观察姜黄素对体外培养肝星状细胞凋亡的影响。方法　体外培养肝星状细胞株HSC -T6 ,流式细胞仪、透射电镜和琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡的改变。结果　在 2 0 ,4 0 ,6 0 μmol/L 姜黄素培养 2 4h后 ,①流式细胞术检测到明显的亚G1峰 ,各组的凋亡指数 (% )分别是 15 3± 1 88,2 6 7± 2 79,37 6± 4 38,与对照组(1 9± 0 6 4 )相比 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;②透射电镜观察到细胞皱缩、核染色质浓缩沿核膜排列和凋亡小体形成等细胞凋亡特征性的改变 ;③琼脂糖凝胶电泳可以见到明显的DNA梯度带形成。以 4 0 μmol/L 姜黄素作用 12 ,2 4 ,36 ,4 8h ,流式细胞仪检测各组的凋亡指数 (% )分别是 12 0± 2 35 ,2 6 7± 3 4 7,33 8± 1 78和 4 9 3± 1 5 6 ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　姜黄素可以诱导HSC凋亡 ,其作用具有剂量和时间依赖性     

肝星状细胞凋亡及其调控

目前认为肝纤维化（HF）发生的中心事件是,由各种慢性肝损伤引起肝星状细胞（HSC）的激活并转化为肌成纤维细胞（MF）,从而大量合成各种细胞外基质（ECM）沉积于肝脏,最终导致了HF。在HF恢复期存在广泛性的HSC凋亡。作者就近年来有关HSC凋亡及其调控的研究进展作一综述。     

积雪草酸诱导大鼠肝星状细胞凋亡

目的 探讨积雪草酸诱导大鼠肝星状细胞系 HSC-T6 凋亡的作用。方法 用乳酸脱氢酶 (LDH) 法和 MTT 法检测积雪草酸对 HSC-T6 细胞的细胞毒性和增殖的影响。不同浓度积雪草酸作用外源性β-转化生长因子 (TGF-β) 激活的 HSC-T6 细胞,通过 Western blotting 方法检测 HSC-T6 细胞凋亡信号分子 Caspase-3 以及Ⅰ型胶原蛋白表达。结果 积雪草酸 (≤30 μmol/L) 对 HSC-T6 细胞无显著的细胞毒性且对细胞增殖无明显作用。积雪草酸可上调 HSC-T6 细胞 cleaved-caspase-3,同时抑制Ⅰ型胶原蛋白表达。结论 积雪草酸可通过诱导 HSC-T6 细胞凋亡达到抑制肝纤维化的作用。     

去氢木香内酯对人肝星状细胞增殖及凋亡的影响研究

目的 探讨去氢木香内酯(Dehy)对人肝星状LX-2细胞增殖及凋亡的影响,分析其可能的作用机制.方法 人肝星状LX-2细胞经不同浓度Dehy处理后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞术检测LX-2细胞增殖和周期分布,Hoechst 33342染色法及AV-PI双染法检测LX-2细胞凋亡情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白的表达.结果 给予不同浓度的Dehy作用48 h后,能够明显抑制LX-2细胞的增殖,阻滞细胞周期于S、G2/M期,同时诱导LX-2细胞的凋亡,呈浓度依赖性;Western blot结果显示,Dehy可促进P27、Bax的表达上调,Bcl-2的表达下调.结论 Dehy通过调节Bax、Bcl-2和P27的表达诱导人肝星状LX-2细胞的凋亡和周期的阻滞.     

Adenoviral transduction of PTEN induces apoptosis of cultured hepatic stellate cells

Hepatic fibrosis is the liver＇s wound healing response to virtually all forms of chronic liver injury： toxic insult, viral infection, immunological conditions and metabolic diseases. Uncontrolled liver fibrosis eventually results in cirrhosis and associated complications, such as cancer and liver failure. Given the enormous public health implications, recent improvements in the treatment of chronic liver disease have accelerated interest in uncovering the mechanisms underlying hepatic fibrosis and its resolution. Currently, it is believed that activation of quiescent hepatic stellate cells （HSC） into proliferative, contractile, and fibrogenic cells in response to liver injury appears to be the dominant driving force in fibrosis.     

间充质干细胞旁分泌物质诱导肝星状细胞凋亡的体外研究

目的:研究间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)旁分泌物质对活化的肝星状细胞Lx－2的影响及作用机制?方法:应用6孔塑料细胞培养板,每孔使用半透膜,构建Transwell共培养体系;将骨髓来源的间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BM－MSC)和人肝星状细胞系Lx－2分别接种在体系的上下层,并把此组作为实验组,单独培养的Lx－2作为对照组,观察培养液中MSC旁分泌物质对Lx－2的影响?采用流式细胞术及Hoechst33342染色法分别检测Lx－2细胞凋亡的情况,qRT－PCR和Western blot检测Lx－2中解耦联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)的mRNA和蛋白水平的表达量,荧光探针法检测Lx－2细胞内及线粒体中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的荧光强度,采用硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量?结果:与对照组相比,Hoechst 33342染色后可见部分Lx－2染色质固缩?颗粒状荧光等凋亡细胞典型表现,实验组Lx－2凋亡率是对照组的2.6倍(P < 0.05)?实验组Lx－2中UCP2 mRNA及蛋白表达量显著低于对照组(P < 0.05);实验组Lx－2细胞内和线粒体中ROS水平明显升高?细胞培养上清中MDA为(0.43 ± 0.47) mmol/L,显著高于对照组(0.16 ± 0.43)mmol/L(P < 0.05)?结论:MSC旁分泌物质有诱导Lx－2细胞凋亡的作用;可能与MSC旁分泌物质抑制UCP2的表达,促进细胞内及线粒体ROS过量生成有关?     

Effects of taurine on proliferation and apoptosis of hepatic stellate cells in vitro

BACKGROUND: Hepatic fibrosis, a common response to chronic liver injury, is characterized by increased production of extracellular matrix components, whose major part is produced by hepatic stellate cells (HSCs). Taurine is a sulfur containing beta-amino acid rich in human body, and our previous experiments showed that it can inhibit the deposition of the extracellular matrix in the damaged liver. This work was to investigate the effects of taurine on proliferation and apoptosis of HSC and its possible mechanism. METHODS.. Cell proliferation was detected by the thiazole blue (MTT) colorimetric assay. Cell apoptosis and cell cycle were assessed via flow cytometry. The morphology of apoptotic cells was observed by phase-contrast fluorescent micrography after orange acridine staining,     

苦参素对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨苦参素对肝纤维化发生的作用机制。方法培养激活的HSC-T6分为对照组及实验组,实验组以不同浓度的苦参素干预(分别为30、60、120、240、480、960 mg/L),MTT法检测肝星状细胞的增殖,TUNUL法检测凋亡指数。结果药物干预后肝星状细胞的增殖能力降低,凋亡指数升高,均呈剂量依赖性。结论苦参素能通过抑制肝星状细胞的增殖和促进其凋亡来影响肝纤维化的发展。     

盐酸小檗碱对肝星状细胞自噬和凋亡的影响*

目的 研究盐酸小檗碱对肝星状细胞（HSCs）自噬和凋亡的影响。方法 取指数生长期HSC-LX2细胞,实验分组：溶剂对照组（1‰ DMSO）、盐酸小檗碱5?μg/ml组、盐酸小檗碱10?μg/ml组和盐酸小檗碱20?μg/ml组。盐酸小檗碱干预24?h。流式细胞术检测细胞凋亡、半胱天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3） 阳性细胞荧光强度。通过实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Caspase-3、与Bcl-2相互作用的肌球蛋白样卷曲螺旋蛋白1（Beclin1）、自噬相关基因5（Atg5）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）和c-Jun氨基末端激酶（JNK）mRNA的表达,Western blotting检测Beclin1、Atg5、Akt、p-Akt、JNK及p-JNK蛋白的表达。结果 与溶剂对照组比较,不同盐酸小檗碱浓度干预组HSC-LX2凋亡增加（P?<0.05）,Caspase-3 mRNA表达增加（P?<0.05）,Caspase-3阳性细胞荧光强度及蛋白活性升高（P?<0.05）;Beclin1、Atg5 mRNA及蛋白水平下降（P?<0.05）;Akt、JNK mRNA水平下降（P?<0.05）,Akt、p-Akt、JNK、p-JNK蛋白水平下降（P?<0.05）。结论 盐酸小檗碱可能通过抑制Akt信号通路促进凋亡,通过抑制JNK信号传导途径抑制自噬。     

干扰素-α对肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡的诱导作用

目的：研究干扰素－α（IFN－α）对肝纤维化大鼠肝星状细胞（HSC）凋亡的影响。方法：用四氯化碳（CCl4)复制肝纤维化模型大鼠32只，随机分为A，B，C3组。A组：6只，造模结束即处死；B组14只，皮下注射－α10万／100g8周，C组12只，注射等量的生理盐水8周。治疗结束时用TUNEL法检测各组肝星状细胞凋亡情况；HE染色观察肝组织学变化；免疫组化染色检测中间丝蛋白（Desmin,),α-平滑肌肌动蛋白（α－SMA），I型胶原，转化生长因子1（TGF－β1）等指标。结果：B组较其他两组肝组织学明显改善，肝纤维化程度减轻，I型胶原，TGF－β1的显色指数降低；B组肝星状细胞明显减少，凋亡指数增加，与C组相比，差异有统计学意义。结论：IFN－α在体内可诱导HSC凋亡，这可能是IFN－α抗肝纤维化的作用机制之一。     

细胞因子对肝星状细胞活化与凋亡的影响

肝纤维化是指各种因素引起的肝脏损害和炎症,是各种慢性肝病向肝硬化发展的共有的病理特征,肝星状细胞的活化在肝纤维化的发生发展过程中的中心环节作用一直以来受到人们的关注,本文就针对肝星状细胞的各种细胞因子对肝纤维化发生发展的作用作一综述.