双酚A对成年雄性小鼠的生殖毒性及其作用机制

目的: 探讨双酚A(BPA)对成年小鼠睾丸组织的损伤作用,阐明BPA对动物机体的生殖毒性及其作用机制。方法: 8周龄昆明小鼠40只随机分为对照组(玉米油)和低(100 mg·kg^-1 BPA)、中(200 mg·kg^-1BPA)、高(400 mg·kg^-1BPA)剂量BPA组。灌胃染毒4周后,取小鼠睾丸组织,采用流式细胞术检测小鼠睾丸组织中细胞凋亡率;免疫组织化学法检测Fas和FADD蛋白表达情况。结果: 与对照组比较,低剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、Fas和FADD阳性细胞表达率无明显变化(P>0.05);中和高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、Fas和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05)。与低剂量BPA组比较,中和高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、FAS和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05);与中剂量BPA组比较,高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、FAS和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05)。中剂量BPA组细胞凋亡率与FAS、FADD阳性细胞表达率呈正相关关系(r=0.430,P<0.05;r=0.238,P<0.01),高剂量组细胞凋亡率与Fas、FADD阳性细胞表达率呈正相关关系(r=0.637,P<0.01;r=0.359,P<0.01)。结论: 一定剂量BPA会导致小鼠睾丸组织中细胞凋亡率升高,凋亡调控基因Fas和FADD表达上调;BPA对小鼠睾丸组织有损伤作用,其生殖毒性与激活Fas死亡受体信号通路从而导致细胞过度凋亡有关。     

围生期双酚A暴露对雄性子代大鼠中脑多巴胺神经细胞凋亡的影响

目的探讨围生期双酚A暴露对大鼠雄性子代腹侧中脑区多巴胺神经元凋亡及对酪氨酸羟化酶(tyros ine hydroxy lase,TH)蛋白表达的影响。方法孕鼠自妊娠第10 d起至哺乳期结束分别每日给予50(高)、5(中)、0.5(低)、0(对照)m g/kg.bw双酚A灌胃染毒,于子代出生后(postnata l day,PND)第21、30 d取雄性仔鼠脑,采用免疫组化方法检测腹侧中脑区C aspase-3、B cl-2和TH的表达,原位凋亡检测PND 21时腹侧中脑区神经细胞的凋亡。结果仔鼠出生后的两个检测时间点,高、中剂量染毒组的腹侧中脑区与对照组相比C aspase-3表达明显增加,B cl-2表达明显降低,PND 21时腹侧中脑区可见较多的凋亡细胞。PND 21及PND 30时腹侧中脑区TH表达降低。结论围生期双酚A高、中剂量暴露能导致断乳期雄性子代鼠脑多巴胺神经元的凋亡增加,使腹侧中脑多巴胺神经元富集区酪氨酸羟化酶减少,从而影响多巴胺神经系统的功能。     

对INT-FAK信号通路调控脑缺血后神经细胞凋亡的思考

脑缺血性疾病是人类健康的主要杀手之一,相关研究表明,神经细胞的凋亡是造成脑缺血疾病中神经系统损害的主要机制之一,而以整合素-黏着斑激酶（INT-FAK）控制调节的PI3K/PDK/Akt以及Raf/MEK/ERK两条主要信号途径引起的细胞凋亡是其主要作用机制。凋亡过程出现的诸多能加以调控的信号分子,都可以作为治疗脑缺血性损伤的潜在靶点。随着对脑缺血损伤与神经细胞凋亡关联的深入研究,抗凋亡治疗已经成为治疗脑缺血性疾病的重要途径。     

硒对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其作用机制

目的: 探讨硒对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌细胞凋亡的抑制作用,阐明其对PI3K-Akt信号传导通路中Akt、磷酸化Akt(p-Akt)及其下游靶基因编码的Bax和Bcl-2蛋白的作用机制。 方法: 60只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、病毒对照组和硒干预组(n=20)。正常对照组小鼠连续3 d腹腔注射不含病毒的培养液200 μL;病毒对照组小鼠腹腔注射100半数组织培养感染剂量(TCID₅₀)柯萨奇病毒B组病毒(CVB3)液200μL,连续3d;硒干预组小鼠在病毒对照组同样的处理后灌胃给予100 μg·kg^-1亚硒酸钠,每日1次,连续处理14d。接种CVB3的第15天处死小鼠,TUNEL法检测心肌细胞的凋亡情况,光镜下观察心肌病理变化,Western blotting法检测心肌细胞中Akt、p-Akt、Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平。 结果: 与病毒对照组比较,硒干预组小鼠生存率明显升高(P<0.01)。硒干预组小鼠的心肌病理改变较病毒对照组减轻。硒干预组小鼠心肌细胞凋亡率低于病毒对照组(P<0.01)。与病毒对照组比较,硒干预组小鼠心肌细胞中p-Akt、Bcl-2蛋白表达水平增加,Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低,Bax/Bcl-2蛋白比值下降(均P<0.01)。 结论: 硒对CVB3感染导致的VMC小鼠心肌细胞有保护作用,其作用机制与硒通过活化心肌细胞的PI3K-Akt信号通路、调控其下游Bcl-2和Bax蛋白表达和抑制心肌细胞凋亡有关。     

磷脂酰肌醇3激酶信号通路影响细胞凋亡在肺腺癌A549细胞群集耐药中的作用

目的探讨PI3K信号通路在肿瘤群集耐药中的作用.方法采用旋转培养瓶结合台式水浴恒温振荡器旋转培养的方法,进行肺腺癌A.549细胞体外立体培养,通过Western blot、原位细胞凋亡检测、四唑盐(MTT)比色法及血球计数器计数法检测Akt、Bcl-2、Bad的表达、细胞凋亡率及对阿霉素(ADM)敏感性.结果①立体培养细胞存在Akt的高表达;②同平面培养比较,立体培养细胞存在Bcl-2高表达,Bad低表达,细胞凋亡率低,对ADM敏感性低的特征,阻断PI3K信号通路后,两者差异明显缩小.结论PI3K信号通路可通过抑制细胞凋亡在肺腺癌A549细胞群集耐药中发挥作用,阻断PI3K信号通路可能逆转该耐药现象.     

肉豆蔻木脂素通过PI3K/AKT信号通路诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的 探讨肉豆蔻木脂素（myrislignan, MYR）对胃癌细胞凋亡的影响及与磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K）/蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)信号通路的关系。方法 采用不同浓度的MYR（即0、25、50、100和200μmol/L）作用胃癌细胞（SGC-7901）48 h和72 h,CCK8法检测细胞活性。选择MYR(50、100和200μmol/L)作用胃癌细胞（SGC-7901）48 h,同时设置正常对照（Control）组和溶剂对照（0.1%DMSO）组,采用流式细胞仪检测凋亡率,蛋白质印迹法检测PI3K、AKT、Bcl2关联X蛋白（Bcl-2 associated X protein, BAX）、半胱天冬酶（cysteine-dependent aspartate-specifc protease, Caspase）-3和Caspase-9蛋白的表达水平。特异性PI3K激活剂（20μmol/mL）作用胃癌细胞（SGC-7901）48 h（分组为：Control组、0.1%DMSO组、MY...     

紫草素诱导肺腺癌A549细胞凋亡及其机制的研究

目的 研究紫草素(shikonin, SK)诱导肺腺癌A549细胞凋亡及其作用机制。方法 不同浓度紫草素作用于肺腺癌A549细胞后,CCK-8法检测细胞的增殖情况;DAPI荧光染色法和FCM检测细胞凋亡;Western blotting检测紫草素处理48h后Bax、Bcl-2、p-Akt、p-ERK1/2的蛋白水平。结果 紫草素显著抑制肺腺癌A549细胞的增殖活性(P<0.05),诱导细胞凋亡,与空白对照组比较,紫草素处理组Bax表达上调(P<0.05),Bcl-2、p-Akt、P-ERK1/2表达下调(P<0.05)。结论 紫草素可以显著抑制肺腺癌A549细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与线粒体凋亡途径,PI3K/Akt信号通路和ERK 1/2信号通路有关。     

蟛蜞菊内酯通过抑制JAK2/STAT3信号通路诱导人肺腺癌A549细胞凋亡

目的 探讨蟛蜞菊内酯对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及作用机制.方法 不同浓度蟛蜞菊内酯(0、5、10、20、40μmol/L)作用于A549细胞12、24、48 h,M T T检测细胞的增殖情况.将细胞分为对照组,甲氨蝶呤组(2μg/mL甲氨蝶呤),蟛蜞菊内酯组(20μmol/L蟛蜞菊内酯).流式细胞术检测细胞凋亡和...     

甲氧滴滴涕对雄性生殖系统的氧化损伤作用

目的观察甲氧滴滴涕(MXC)对雄性小鼠的生殖系统毒性作用并探讨其毒性作用的可能机制.方法光镜观察喂服MXC小鼠睾丸和附睾的变化,并以生物化学的方法测定氧化损伤相关指标的改变.结果精子活动度和活率降低,畸形率增高,生精小管上皮变薄;睾丸和附睾的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和超氧化物歧化酶(SOD)活力显著下降(p＜0.001),丙二醛(MDA)含量明显升高(P＜0.01),维生素E组各项指标的变化均较21 d组的变化小(P＜0.05).结论MXC对雄性小鼠生殖系统具有一定的毒性作用,可导致睾丸和附睾抗氧化能力下降,脂质过氧化增加,其毒性作用可被维生素E减轻.     

苯与甲醛联合染毒对小鼠睾丸及精子的损伤作用

目的 通过研究苯与甲醛联合染毒对雄性小鼠睾丸及精子的损伤情况,探讨苯与甲醛联合对其损伤的作用机制。 方法 选择40只SPF级成年雄性小鼠随机分为4组,分别为对照组(A组)、苯单独染毒组(B组)、甲醛单独染毒组(C组)、苯与甲醛联合染毒组(D组),每组小鼠10只。A组小鼠灌胃生理盐水和植物油;B组灌胃200 mg/(kg.bw)剂量的苯;C组灌胃10 mg/(kg.bw)剂量的甲醛、D组灌胃苯200 mg/(kg.bw)+甲醛10 mg/(kg.bw)。各组均连续染毒5 d,再饲养30 d后称重处死动物,分离双侧睾丸测定其睾丸脏器系数、光学显微镜下观察小鼠精子数量、死亡精子和畸形精子;按照常规方法制作睾丸组织病理切片,HE染色后置显微镜下观察其睾丸组织病理变化;采用试剂盒检测睾丸T-AOC和Na+-K+-ATP酶活性;采用SPSS 17.0软件对实验数据进行统计分析。 结果 D组小鼠体重及睾丸脏器系数均分别低于A、B、C组(P<0.05);与A及B、C组比较,D组小鼠精子数减少[14.9/(107个·g附睾)],精子的死亡率(45.17‰)、畸形率(58.33‰)均增加(P<0.05);B、C、D三个染毒组小鼠睾丸组织均出现不同程度病理损害,其中D组病理损害明显;D组小鼠睾丸T-AOC、Na+-K+-ATP活性较B、C组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论 甲醛与苯联合染毒对小鼠睾丸及精子有明显损伤作用;其损伤机制可能通过抑制ATP酶活性降低睾丸生殖细胞的抗氧化性有关。      

硒对氟致雄性大鼠生殖损害的拮抗作用

目的 :探讨硒对高氟所致雄性大鼠生殖损害的拮抗作用。方法 :1 0 0只雄性Wistar大鼠随机分成对照组、氟 (NaF 1 5 0mg/L)组、氟加低硒 (0 .5mg/L亚硒酸钠 )组、氟 (NaF 1 5 0mg/L)加中硒 (2 .0mg/L亚硒酸钠 )组、氟(NaF 1 5 0mg/L)加高硒 (4 .0mg/L亚硒酸钠 )组 5组 ,通过饮水加氟、加硒的方法染毒 1 0周。观察氟、硒对大鼠体重、睾丸和附睾质量及其脏器系数 ,精子计数、活动率及畸形率 ,睾丸、附睾生化标志酶 ,血清性激素 ,睾丸组织病理切片以及初级精母细胞染色体畸形率的影响。结果 :①右侧睾丸质量对照组为 (1 .80± 0 .2 2 )g ,氟加高硒组为 (1 .6 1±0 .1 1 )g ,2者相比差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。②精子计数 :氟组 (9.2 3× 1 0 7ml-1 )、氟加中硒组 (37.6 7× 1 0 7ml-1 )与对照组 (2 8.6 0× 1 0 7ml-1 )比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 0 1 ) ;精子畸形率 :氟组 (36 .33% )氟加中硒组 (1 2 .70 % )与对照组 (1 4 .83% )比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 0 1 ) ;精子活动率 :氟组 (6 2 .0 7%± 6 .5 0 % )氟加中硒组 (6 8.2 1 %± 4 .99% )与对照组 (73.6 7%± 6 .5 1 % )比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 0 1 )。③LDH :氟组 ((5 79.4 7± 97.1 6 )u/g)、氟加中硒组 ((72 6 .1 3± 1 1     

男性生殖亚健康中医"以肾为本"

根据"男性生殖健康"概念以及目前对于亚健康诊断的诸多标准,首次提出"男性生殖亚健康"概念,从病因、症状(男性生殖细胞数量下降、性功能减退、男性更年期综合征、前列腺亚健康态)等方面作出分析,并从中医理论"肾藏精、主生殖"入手.阐述男性生殖亚健康的发生机制重在肾的阴阳失衡、精气不足,临床治疗应遵循"治未病"的思想,以防为主,防治结合,"以肾为本"干预男性生殖亚健康.     

2,4-滴丁酯对雄性小鼠生殖毒性的研究

【摘要】 目的 研究2,4-滴丁酯对雄性小鼠的生殖毒性作用。 方法 将48只雄性ICR小鼠随机分为4组,即对照组（玉米油）和低（10 mg/kg）、中（20 mg/kg）和高剂量（40 mg/kg）2,4-滴丁酯染毒组,每组12只。采用灌胃方式进行染毒,每天1次,每周连续染毒6天,实验周期为5周。染毒结束后采用分光光度法对睾丸组织中总抗氧化能力（T-AOC）、乳酸脱氢酶（LDH）、琥珀酸脱氢酶（SDH）、Na﹢K﹢-ATPase及Ca﹢﹢Mg﹢﹢-ATPase的活性进行测定。结果 T-AOC活力随着2,4-滴丁酯染毒剂量的升高逐渐下降,高剂量组与其他组比较差异显著;与对照组和低剂量2,4-滴丁酯染毒组相比较,高、中剂量组睾丸组织中LDH活力值较低,差异显著,且高剂量组与中剂量组比较差异显著;SDH活力随着2,4-滴丁酯染毒浓度的升高逐渐降低,高、中剂量组与对照组相比较差异显著,且高剂量组与中、低剂量组比较差异显著;与对照组和低剂量2,4-滴丁酯染毒组相比较,高、中剂量组睾丸组织中Na﹢K﹢-ATPase活力值较低,且差异显著;实验组Ca﹢﹢Mg﹢﹢-ATPase活力与对照组比较差异显著。结论 2,4-滴丁酯染毒对雄性小鼠睾丸组织具有一定的毒性作用。     

甲醛对雄性Wistar大鼠生殖毒性的影响研究

目的:探索不同剂量的甲醛对雄性大鼠精子畸形率、骨髓微核率、血清睾酮水平以及睾丸组织的影响。方法:选择性成熟Wistar大鼠40只随机分成5组:0.9%氯化钠注射液组（阴性对照组）和高、中、低剂量甲醛染毒组（20 mg·kg-1·d-1、2 mg·kg-1·d-1、0.2 mg·kg-1·d-1）及50 mg·kg-1·d-1环磷酰胺组（阳性对照组）。通过腹腔注射染毒1周,测定血清睾酮水平,染毒结束后2 d摘眼球采血,颈椎脱臼法处死大鼠,统计精子畸形率和骨髓微核率,对大鼠睾丸做石蜡组织切片,观察睾丸组织损伤情况。结果:精子畸形率:与阴性对照组比较,中、低剂量染毒组精子畸形率上升（P<0.05）,高剂量染毒组和阳性对照组精子畸形率上升更明显（P<0.01）;骨髓微核率:与阴性对照组比较,中、低剂量染毒组骨髓微核率上升不明显（P>0.05）,高剂量染毒组和阳性对照组上升明显（P<0.01）;血清睾酮水平:与阴性对照组比较,高、中、低剂量染毒组和阳性对照组血清睾酮水平均明显降低（P<0.01）。睾丸石蜡切片显示高剂量染毒组组织损伤严重。结论:甲醛可以引起雄性大鼠精子畸形,增加骨髓微核率,降低血清睾酮水平,对雄性大鼠具有一定的生殖及遗传毒性。     

饮用水中有机污染物的雄性生殖毒性病理学研究

目的：探讨饮用水有机污染物的潜在生殖危害。方法：用GDX-102树脂吸附饮用水中有机污染物：昆明种雄性小鼠分为对照组及12.5、25、50L/kg试验组，腹腔注射染毒，分别于染毒后10、35d处死动物取材，应用光镜和电镜技术对睾丸、附睾、精囊、前列腺进行组织病理学研究。结果：染毒后10d，仅发现50L/kg组间质细胞增生，坏死生精细胞较多；染毒后35d，50L/kg组间质细胞呈大片聚集状增生，曲细精管萎缩，生精细胞空泡化。电镜观察所见，染毒后10d，50L/kg组Leydig细胞线粒体肿胀、嵴紊乱；染毒后35d，Leydig细胞、生精细胞损伤随剂量增加而加重，损伤以线粒体的肿胀、空泡化甚至溶解为主。附睾、精囊、前列腺均未发现异常形态学变化。结论：饮用水有机污染物存在生殖危害，睾丸是其作用靶器官，靶细胞为Leydig细胞和生殖细胞，线粒体为主要作用部位。     

锌对邻苯二甲酸酯类暴露致雄性生殖毒性的干预作用

目的：研究锌对邻苯二甲酸酯类（PEs）暴露致雄性小鼠生殖毒性的干预作用。方法：36只雄性ICR小鼠随机分对照组,邻苯二甲酸丁苄酯（BBP）、邻苯二甲酸正二丁酯（DBP）、邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）3种邻苯二甲酸酯类（PEs）等毒性混合物（MIXPs）暴露组（MIXPs组）以及MIXPs+ZnSO4组。MIXPs组小鼠经口灌胃MIXPs 160 mg·kg-1·d-1,MIXPs+ZnSO4组小鼠同时经口灌胃MIXPs 160 mg·kg-1·d-1+ZnSO4 50 mg·kg-1·d-1,对照组小鼠灌胃等容量的赋形剂（0.5% CMC-Na）。连续干预90 d,眶静脉取血后、取睾丸和附睾等雄性生殖器官,观察精子形态,试剂盒测定睾酮、SOD、MDA、T-AOC等水平。结果：与对照组相比,MIXPs组小鼠体质量显著降低,肛殖距缩短（均P＜0.05）;血清睾酮水平显著降低,精子畸形率显著升高,睾丸组织中SOD、MDA显著改变（均P＜0.01）;而MIXPs+ZnSO4组与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：锌可抑制MIXPs暴露诱导小鼠雄性生殖毒性,可能与其改善睾丸组织的抗氧化水平,提高血清睾酮水平有关。     

锌对氟致雄性大鼠生殖损伤的拮抗作用

目的:探讨不同剂量的锌对高氟所致雄性大鼠生殖损伤的拈抗作用.方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为5组,即对照组(去离子水)、氟组(25 mg/kg氟化钠)、氟加低锌组(25 mg/kg氟化钠 4 mg/kg硫酸锌)、氟加中锌组(25 mg/kg氟化钠 20 mg/kg硫酸锌)、氟加高锌组(25 mg/kg氟化钠 50 mg/kg硫酸锌),每组10只,灌胃6周.观察氟、锌对精子数量、活动率和畸形率、血清性激素、睾丸生化标志酶及睾丸组织病理学切片的影响.结果:①精子计数、活动率:氟加中锌组大鼠精子计数、精子活动率均高于氟组、氟加低锌组和氟加高锌组,差异均有统计学意义(P＜0.05);精子畸形率:氟加中锌组大鼠精子畸形率低于氟组、氟加低锌组和氟加高锌组,差异均有统计学意义(P＜0.05).②血清睾酮含量:氟加中锌组血清睾酮含量高于氟组和氟加高锌组,差异有统计学意义(P＜0.05).③睾丸乳酸脱氢酶活力:氟加中锌组高于氟加高锌组,差异有统计学意义(P＜0.05).睾丸氟含量:氟加中锌组低于氟组,差异有统计学意义(P＜0.05).④睾丸组织病理学检查结果:氟组、氟加高锌组与对照组比较,形态结构疏松;氟加低锌组、氟加中锌组与氟组比较,结构较完整.结论:中等剂量的锌可以拮抗高氟所致的雄性生殖毒性.     

丙泊酚对大鼠移植肾脏细胞凋亡通路的影响

目的 研究丙泊酚对肾移植大鼠肾脏局部血流动力学的改变和内源性线粒体凋亡信号通路中关键蛋白表达的变化.方法选择成年近交系Lewis雄性大鼠40只行异体肾移植,实验鼠分为三组:对照组(C组),肾移植组(RT组),肾移植 丙泊酚组(RT P组).术中分别记录实验鼠的左肾肾静脉血流速度,不同时间进行比较;用蛋白免疫印迹方法检测细胞凋亡信号通路相关蛋白Bd-2,Bax,caspase 3和细胞色素C的表达. 结果 ①肾静脉血流速度:RT组和RT P组组内比较供肾在受体均比在供体显著下降(P<0.05),组间比较RT P组供肾血流速度显著下降(P<0.05).②凋亡相关蛋白:RT组移植肾与对照组相比Bcl.2表达减弱,Bax,caspase 3,细胞色素C表达增强;RT P组移植肾与RT组相比Bcl-2表达增强,而Bax,细胞色素C,caspase 3表达降低. 结论 丙泊酚可降低肾移植大鼠移植肾的肾静脉血流速度;丙泊酚抑制大鼠移植肾脏的缺血/再灌注损伤引发的内源性线粒体细胞凋亡信号通路中相关蛋白的表达,起到肾保护的作用.