膝沟藻毒素Gonyautoxins的分离纯化膝沟藻毒素Gonyautoxins的分离纯化

目的从微小亚历山大藻(Alexandriun minutum Halim)Amtk 2中分离纯化膝沟藻毒素gonyautoxins。 方法 用凝胶色谱、离子交换色谱等方法从人工培养的微小亚历山大藻Amtk 2酸酒精萃取物中分离纯化膝沟藻毒素。结果从100 L Amtk 2培养液中获得(6.74±0.31)×109个藻细胞,其酸酒精萃取物经凝胶色谱分离首次在国内得到膝沟藻毒素GTX-4,GTX-1,GTX-3和GTX-2混合物(29.59±0.28) mg。从此混合物中取出4.06 mg经两次离子交换色谱纯化得到纯GTX-4(0.40±0.002) mg, GTX-1(5.95±0.03)×10^-2 mg,GTX-3(6.92±0.05)×10^-4 mg和GTX-2(0.11±0.005) mg。结论人工培养的微小亚历山大藻Amtk 2酸酒精萃取物通过凝胶色谱和两次离子交换色谱分离能够得到纯的膝沟藻毒素GTX-4,GTX-1,GTX-3和GTX-2。     

膝沟藻毒素Gonyautoxins的分离纯化

目的从微小亚历山大藻(Alexandrium mimutum Halim)Amtk 2中分离纯化膝沟藻毒素gonyautoxins. 方法用凝胶色谱、离子交换色谱等方法从人工培养的微小亚历山大藻Amtk 2酸酒精萃取物中分离纯化膝沟藻毒素.结果从100 L Amtk 2培养液中获得(6.74±0.31)×109个藻细胞,其酸酒精萃取物经凝胶色谱分离首次在国内得到膝沟藻毒素GTX-4,GTX-1,GTX-3和GTX-2混合物(29.59±0.28) mg.从此混合物中取出4.06 mg经两次离子交换色谱纯化得到纯GTX-4(0.40±0.002) mg, GTX-1(5.95±0.03)×10-2 mg,GTX-3(6.92±0.05)×10-4 mg和GTX-2(0.11±0.005) mg.结论人工培养的微小亚历山大藻Amtk 2酸酒精萃取物通过凝胶色谱和两次离子交换色谱分离能够得到纯的膝沟藻毒素GTX-4,GTX-1,GTX-3和GTX-2.     

普通念珠藻中多糖的分离纯化研究

目的 研究普通念珠藻多糖分离纯化方法,并测定其相对分子质量.方法 采用水提醇沉法制备粗多糖,Molish反应和硫酸苯酚法对其进行定性和定量检测,二乙胺基乙基纤维素离子交换柱色谱法进行分离纯化,高效凝胶渗透色谱法测定其相对分子质量.结果 普通念珠藻粗多糖的提取率为8.6％,分离获得一个组成均一的酸性多糖组分NSP,其重均相对分子质量为402 717.结论 NSP为首次从普通念珠藻中分离得到一个酸性多糖组分.     

舟山眼镜蛇毒细胞毒素的分离纯化及其体外抗肿瘤活性

目的从眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素 F(CTX F)并鉴定其活性。方法应用凝胶过滤、离子交换柱色谱及疏水柱色谱等方法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化CTX F ,以SRB法观察CTX F对体外培养癌细胞的杀伤作用。结果眼镜蛇毒粗毒经凝胶过滤获得 4个蛋白峰 ,将CTX所在第Ⅳ峰用阳离子交换柱色谱获A、B、C、D、E、F和G等7个组分 ,其中E、F和G具CTX活性 ,将F组分再经凝胶过滤和疏水色谱进一步纯化得不含磷酯酶A2 (PLA2 )的CTX纯品 ,暂定名为CTX F ,它对多种癌细胞株有杀伤作用。结论应用凝胶过滤、离子交换和疏水色谱等方法可从眼镜蛇毒中获得不含PLA2 的CTX ,其组分F有抗肿瘤活性     

辽宁产东亚钳蝎毒中哺乳动物毒素Ⅲ的分离纯化及部分性质的研究

采用 CM—Sephadex C—50,SP—Sephadex C—25离子交换柱层析和 SephadexG—50凝胶过滤三步分离程序,从东亚钳蝎毒中得到一种新的哺乳动物毒素。经低 pH 系统不连续聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳,SDS—不连续聚丙烯酰胺凝胶板电泳及等电聚焦聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳鉴定说明该毒素为电泳纯的蛋白质。用 SDS 电泳法测得其分子量为8,750道尔顿,等电聚焦电泳法测定 pH 为8.2。纯化成份的产率为2.5%。     

中国皖南尖吻蝮蛇毒中细胞毒素的分离纯化和抗癌活性研究

目的寻找皖南尖吻蝮蛇毒中的抗癌组分并初步研究其性质.方法以DEAE-Sepharose FF,SOURCE 30S柱层析纯化粗毒;以MTT法检测细胞毒活性;以SDS-PAGE(银染)测定纯度;以还原性及非还原SDS-PAGE测定分子量;又测定了它们的热稳定性和pH稳定性.结果得到两个电泳纯的蛇毒类抗癌组分,分别命名为ACTX-6和ACTX-8,分子量为98kDa和27kDa,都不是糖蛋白,其中ACTX-6由两个分子量相近的亚单位以二硫键连接而成;它们对肺癌细胞A549最敏感;ACTX-6对热稳定而ACTx-8对热不稳定;ACTX-6的稳定pH范围为7-9,而ACTX-8在6-9的范围内活性都比较稳定.     

海带硫酸多糖的提取、纯化及其理化分析

目的研究海带硫酸多糖 (LPS)的提取制备及其组分的纯化和理化性质。方法采用酶解法从海带提取制备LPS,海带浆加入纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶 ,50℃水解 4h。取滤液加入氯化钙 ,离心去除海藻酸钙。取上清液加入十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)与LPS结合沉淀 ,离心收集CTAB LPS沉淀物。加入氯化钙溶液进行盐解 ,将LPS游离释放出来 ,加入乙醇使LPS析出。离子交换色谱和凝胶过滤色谱法分离纯化其多糖组分。结果酶解提取法的收率为 5‰ ,色谱法分离得到 4个主要多糖组分 ,测定其分子量分别为 2 1 0、1 2 0、40 0和 1 4 0kD。酶解法的提取收率高于水煮法。结论LPS的开发具有广阔的前景     

红树林放线菌产抗菌活性物质的分离纯化研究

对红树林放线菌产生的抑菌活性物质进行了分离提取，采用的方法为有机溶剂萃取法、酸提取法、离子交换柱层析、大孔吸附树脂柱层析等，获得了两个具有抑菌活性的组分，经HPLC分析两组分均为纯物质，初步确定为核苷类抗生素。     

蚯蚓纤溶酶的分离纯化研究

目的从赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)中分离纯化出一种相对分子质量(Mr)较小的纤维蛋白溶解组分———蚯蚓纤溶酶(EFE),为其注射剂的研制开发打下基础。方法采用盐析、透析、凝胶过滤色谱、离子交换色谱等方法分离纯化EFE,用SDS-PAGE对纯化的活性组分进行Mr测定,用酶谱分析方法初步探讨蚯蚓中存在的其它纤溶酶活性组分。结果分离纯化得到了EFE单一组分,经SDS-PAGE EFE呈单一条带,Mr约为25 000。经酶谱分析发现纤溶酶活性组分Mr分布在25 000~50 000之间。结论反复使用色谱技术可分离纯化EFE,并得到单一组分。     

Variety of PSP toxins in four culture strains of Alexandrium minutum collected from southern Taiwan.

Paralytic shellfish poisoning (PSP) toxin profiles were compared among four culture strains of Alexandrium minutum. GTX-1, 2, 3 and 4 are the PSP toxins that occur in A. minutum, and other PSP toxins were not detected. When comparing the toxin profile of four A. minutum strains, GTX1 and 4 were the major toxins in Amtk1, Amtk2, and Amtk4, but in Amtk7, GTX3 and 2 were the major toxins. The results indicate that strains with various toxin profiles exist in southern Taiwan, and suggest that the comparison of the toxin profiles between strains at different localities is difficult. Additionally, the toxin profiles of A. minutum strains cultured in the same environment were different, suggesting that it was owing to the intrinsic nature of toxic algae.     

高效液相色谱法在合成多肽分离与纯化中的应用

近年来，多肽药物化学形成并迅速发展成为药物化学的重要分支。而随着分离纯化技术的进展，又大大加快了新活性多肽的发现和合成速度。在多肽合成中．许多杂质显示与产物类似的性质，随着肽链的增长，分离的难度也增大，因此纯化的方法和工艺显得异常重要。本文综述了凝胶过滤色谱、离子交换色谱和反相色谱等高效液相色谱技术在合成多肽分离与纯化中的设计和应用。     

Isolation of bacteria from toxic dinoflagellate Alexandrium minutum and their effects on algae toxicity

Attempts were made to isolate the bacteria from toxic dinoflagellate Alexandrium minutum T1 and to study the effect of these bacteria on the growth and toxicity of A. minutum T1. It was found that intracellular bacterial species including Pasteurella haemolytica, Pseudomonas vesicularis, and Sphingomonas sp., and extracellular bacterial species including Pasteurolla pneumotropica, Morganella wisconsensis, Flavobacterium oryzihabitans, Pseudomonas pseudomallei, and Sphingomonas sp. All of them were cultured and determined to have non-PSP-producing ability. The maximum cell number of A. minutum cultured without isolated bacteria was higher than that cultured with isolated bacteria. The total toxicity of A. minutum cultured with bacteria was similar to that of A. minutum T1 cultured without bacteria from lag phase to stationary phase, but it was lower after stationary phase. The growth of A. minutum T1 cultured without antibiotics was also better than that cultured with antibiotics. The total toxicity of A. minutum cultured without antibiotics was higher than that of A. minutum cultured with antibiotics. However, the cell toxicity of A. minutum did not decrease even if the culture medium was added with antibiotics.     

层析法提纯人绒毛膜促性腺激素(HCG)的研究

本文比较了离子交换、羟基磷灰石吸附、凝胶过滤及亲和层析等四种层析方法各自对HCG粗品的一次纯化效果。其中亲和层析所获得的纯化倍数相当于其它方法的几十倍,而且具有操作简单、时间短的优点。通过选择合适的洗脱条件,可以将吸附的HCG全部洗脱下来。