呼吸道合胞病毒蛋白G基因l核苷酸分析

目的:对河南省呼吸道合胞病毒(RSV)进行分离与鉴定.方法:选择2006年冬季至2007年春季河南省部分医院急性呼吸道感染患者,采集咽拭子,利用Hep-2细胞和Vero细胞进行病毒分离,对分离株用特异性RTPCR鉴定;对鉴定阳性的RSV毒株进行蛋白G全基因序列测定,并进行同源性分析,构建基因进化树.结果:共分离到4株RSV毒株,各分离株之间核苷酸同源性92%～99%;与A型RSV标准参考株的核苷酸同源性为86%～92%,与B型RSV标准株的同源性为70%.结论:2006年河南省RSV流行株为A型.     

呼吸道合胞病毒和腺病毒在小儿急性呼吸道感染时的PCR法检测分析

呼吸道合胞病毒和腺病毒在小儿急性呼吸道感染时的ＰＣＲ法检测分析附属医院检验科薛承岩韩艳欣张丽风丁晓旭关键词腺病毒；呼吸道合胞病毒；小儿急性呼吸道感染；聚合酶链反应急性呼吸道感染（ＡｃｕｔｅＲｅｓｐｉｒａｔｏｒｙＩｎｔｅｃｔｉｏｎ，ＡＲＩ）是严重危害婴...     

穿心莲提取物体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

目的：了解穿心莲提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抑制作用。方法：通过光镜观察不同药物浓度下：RSV对Hep-2的致病作用(CPE),四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测穿心莲提取物对RSV的抑制和对：RSV感染HeF2细胞的保护作用。结果：穿心莲提取物对RSV无直接灭活作用,亦不能阻止RSV的吸附,各药物浓度均出现典型的CPE;穿心莲提取物有抑制RSV生物合成的作用,其半数抑制浓度(IC50)是1．52μg,／ml,治疗指数为36,且随着药物浓度的增加,CPE特征明显逐渐减弱,病毒滴度逐渐降低,而病毒抑制率则明显增高。结论：穿心莲提取物在体外可能是通过抑制生物合成来发挥抗RSV作用。     

呼吸道合胞病毒血清特异性抗体消长规律的实验研究

本文对呼吸道合胞病毒(RSV)免疫家兔后血清特异性抗体进行了动态观察。初次免疫后第四天90％家兔血清即可检出一定水平特异性Ig~M,第7—11天达峰值,于第63天完全消失。初次免疫第7天50％家免血清中出现低滴度特异性Ig~A,第35天达峰值,第147天仍有90％家兔血清存在特异性Ig~A。特异性Ig~G于初次免疫后第7天出现于80％的试验家兔血清中,第28—35天达峰值,至第147天仍全部阳性。再次免疫加强三种血清特异性抗体的反应。     

金银花体外抗呼吸道合胞病毒的作用研究

目的 了解金银花体外抑制呼吸道合胞病毒的效果和强度.方法 采用细胞病变抑制实验,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,观察金银花在人宫颈癌传代细胞(Hela)中对人呼吸道合胞病毒3型的抑制作用,以治疗指数(TI)为评价指标.结果 金银花对Hela细胞半数中毒浓度(TC50)为5 mg/ml,最大无毒浓度(TC0)为3.6 mg/ml;对呼吸道合胞病毒有直接灭活作用,其半数抑制率(IC50)为0.16 mg/ml,TI为31.2;在吸附阶段也有作用,其IC50为0.48 mg/ml,TI为10.5;同时金银花有抑制呼吸道合胞病毒生物合成作用,其IC50为1.0 mg/ml,,11为5;金银花不能阻止呼吸道合胞病毒侵入细胞.结论 金银花在体外主要通过直接灭活、阻止病毒吸附和抑制生物合成3种方式发挥抗呼吸道合胞病毒作用.     

儿童腺病毒肺炎及呼吸道合胞病毒肺炎的临床特征分析

目的 分析腺病毒(ADV)和呼吸道合胞病毒(RSV)感染的肺炎住院患儿的临床特征,为临床诊疗提供参考.方法 回顾性分析2019年1月至12月华中科技大学同济医学院附属湖北妇幼保健院住院的单纯ADV肺炎、单纯RSV肺炎患儿的临床资料,包括一般情况,临床表现,病程早期实验室检查、影像学检查,发生重症或极重度肺炎情况,呼吸支...     

婴幼儿下呼吸道感染腺病毒,合胞病毒血清抗体检测分析

目的：了解泸州地区婴幼儿下呼吸道腺病毒或合胞平素感染的情况。方法：用捕获Ｅｌｉｓａ法对泸州地区１９９７年４月－１９９８年３月住院的１２４例下呼吸道感染婴幼儿的血清Ａｄｖ－ＩｇＭ和ＲＳＶ－ＩｇＭ做了检测。结果：（１）１２４例患儿中Ａｄｖ阳性者３４例,阳性率为２７．４％,ＲＳＶ阳性者２０例,阳性率１６．１％;（２）Ａｄｖ和ＲＳＶ分别是急性支气管肺炎和毛细支气管炎的主要病原;     

清热解毒液抗呼吸道合胞病毒和腺病毒的实验

应用细胞培养技术,对工艺改进后的清热解毒液进行了抗呼吸道合胞病毒和腺病毒的研究。结果表明清热解毒液稀释至1∶10000仍对上述两种病毒的生长有较强的抑制作用。提示清热解毒液治疗呼吸道感染效果较好。     

人呼吸道合胞病毒不同纯化方法的比较研究

目的比较人呼吸道合胞病毒(HRSV)的2种纯化方法。方法 HRSV经超滤浓缩后,分别采用蔗糖密度梯度离心法和Sepharose 4FF凝胶过滤层析法纯化。对纯化产物进行感染性效价、SDS-PAGE还原电泳分析及Western blot检测,并取目的产物免疫ICR小鼠,检测免疫血清的中和抗体效价。结果经还原电泳,蔗糖密度梯度离心和Sepharose 4FF凝胶过滤层析的纯化产物都在60~70kDa间呈现一主要条带,前者证实为HRSV特异性F蛋白;但在Sepharose 4FF凝胶过滤层析3个样品(第2峰)中检测出目的病毒,感染性效价分别为4.50、4.25和6.25 lgCCID50/ml。两种方法所得纯化产物免疫ICR小鼠均能诱导产生中和抗体,几何平均效价(GMT)为1∶13.93~1∶4.00。含铝佐剂组的抗体阳性率和中和抗体GMT分别是不含铝佐剂组的1.5~2.0倍和1.0~1.4倍。β-丙内酯灭活组的抗体阳性率和中和抗体GMT分别是甲醛灭活组的1.0~1.3倍和1.0~1.1倍。结论蔗糖密度梯度离心法和Sepharose 4FF凝胶过滤层析法均能纯化出HRSV,后者效果更好、效率更高。加铝佐剂有助于提高抗体阳转率;β-丙内酯和甲醛2种灭活剂对免疫效果的影响差异不大。     

婴幼儿急性下呼吸道感染呼吸道病毒抗原检测分析

目的：了解婴幼儿急性下呼吸道感染常见病毒的感染发生率及探讨病毒感染与性别的关系。方法：在婴幼儿急性下呼吸道感染的病例中随机抽取男性和女性患儿各1 000例,取其鼻咽深部的刷检物进行直接免疫荧光法检测。结果：2 000例急性下呼吸道感染的婴幼儿中七项呼吸道病毒检出率为27.45%（549/2 000）,其中以（呼吸道合胞病毒）RSV为主,其次分别为（副流感病毒1型）PIV-1、（副流感病毒3型）PIV-3、（腺病毒）ADV、（甲型流感病毒）IFVA、（副流感病毒2型）PIV-2、（乙型流感病毒）IFV-B。其中PIV-3男性与女性感染率比较（χ2=4.465,P〈0.05）,两者差异有统计学意义。结论：引起婴幼儿急性下呼吸道感染的七项病毒中,以RSV为主。并且除PIV-3外,其他六种病毒感染均无性别差异。     

用PCR技术及常规病毒学检测诊断呼吸道合胞病毒感染的方法学比较

分别采用病毒分离法、免疫荧光法及NestedPCR、RT－PCR十核酸探针杂交实验对78例呼吸性疾病患儿鼻腔抽吸物标本中呼吸道合胞病毒（RSV）的感染水平进行了检测。结果表明，在这4种检测方法中，以NestedPCR（巢式PCR）法最为敏感、稳定，RSV感染的阳性率为29·49％，且省时，准确。     

抗中性粒细胞胞浆抗体在肾小球疾病中的检测及临床意义

目的:检测各种肾小球疾病患者血清中抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)并探讨其临床意义。方法:应用间接免疫荧光法(IIF)检测20例正常人及131例各种肾小球疾病患者血清中ANCA。结果:131例患者中有11例ANCA阳性性(阳性率为8.4％),且均为P-ANCA阳性,而20例正常对照组无1例阳性(P<0.05)。ANCA阳性中以新月体性肾炎、狼疮性肾炎、紫癜性肾炎的阳性率较高,分别为67％、25％、16.7％。新月体性肾炎与IgA肾病等原发性肾小球疾病组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:ANCA在各种肾小球疾病中并不少见,尤其是新月体性肾炎、狼疮性肾炎、紫癜性肾炎的阳性率较高,推测ANCA可能在这些疾病的发病机理中起了一定的作用。     

呼吸道合胞病毒感染兔呼吸系统组织病理学的改变和相关指数评分标准的建立

目的探讨RSV感染兔呼吸系统的组织病理学改变及其病理学指数评估方法。方法将RSV 100μL(108 TCID50/mL)鼻腔接种新西兰兔,分别于3和5 d时处死动物,取鼻黏膜、气管、肺门支气管、肺组织做石蜡包埋切片、HE染色,与正常对照组比较,显微镜下观察组织病理学改变。根据病变程度、参考相关文献,制定鼻黏膜、气管/支气管、肺组织的病理学指数评分标准并进行评分。结果与正常对照组相比,接种病毒动物可见鼻黏膜增厚甚至可见坏死脱落灶、单个核细胞浸润以及淋巴样组织增生;气管、支气管黏膜增厚、粗糙、排列紊乱,有坏死脱落,支气管内可见渗出物;肺组织以肺门部位病变显著,可见以围绕支气管或血管组织为主的炎细胞浸润灶,肺泡内、各级细支气管内存在炎性分泌物;接种RSV5 d组病理学指数评分与正常对照组相比有统计学意义。结论RSV鼻腔接种新西兰兔可致其鼻黏膜、气管、支气管及肺组织发生炎性损伤。我们制定的鼻黏膜、气管/支气管、肺组织的病理学指数评分标准适用于动物呼吸系统炎性损伤程度的评估。     

呼吸道合胞病毒感染对豚鼠肺组织M受体变化的影响

目的:研究豚鼠感染呼吸道合胞病毒(RSV)后不同时间内肺组织M胆碱能受体数量和功能的改变。方法:建立RSV感染豚鼠的动物模型,用放射配基结合分析法测定肺组织M胆碱能受体的数量和亲和力。结果:鼻内滴入RSV3天后,豚鼠肺组织就出现炎症改变,5～7天达高峰,14天基本恢复正常。肺组织病毒分离及免疫荧光检查均证实为RSV感染。放射配基结合分析表明肺组织M受体在感染RSV后3天就出现受体最大结合容量(Bmax)增高,平衡解离常数(Kd)值降低,第5、7天时,Bmax达高峰,Kd值达最低值,第21天仍与对照组差异显著(P<0.05)。结论:鼻内滴入RSV可形成豚鼠RSV感染模型。RSV感染后引起肺组织M受体数量的增加,亲和力上升,这种改变持续时间较长,是引起气道高反应性的主要原因之一。     

荔枝核提取物体外抗病毒活性及其机制研究

目的:研究荔枝核提取物(LSE)的体外抗病毒活性,并初步研究其抗病毒的作用机制。方法:采用细胞病变效应(CPE)减少法和MTT法检测LSE对柯萨奇B3病毒(CoxB3)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的体外抗病毒活性,并通过观察直接杀病毒作用、对宿主细胞的保护作用、抑制病毒吸附作用以及在病毒感染后不同时间加入实验,对LSE抑制HSV-1的作用机制进行探讨。结果:LSE有一定的细胞毒性,它不能抑制CoxB3在宿主细胞内的增殖,但对RSV、HSV-1和HSV-2表现出明显的浓度依赖性抗病毒活性,其IC50值分别为32.3,27.9和20.4μg/mL。该提取物预培养Vero细胞后不能保护细胞免受HSV-1感染,但它对HSV-1有直接的灭活作用。LSE可影响HSV-1对Vero细胞的吸附,当浓度为31.3μg/mL时对病毒吸附的抑制率为51。LSE对HSV-1在细胞内的增殖表现出很强的抑制活性。结论:LSE具有较强的体外抗RSV和HSV活性,它对HSV的抑制作用可能通过多种方式和途径实现。     

呼吸道合胞病毒A、B亚型变异的进一步研究

利用抗呼吸道合胞病毒的单克隆抗体，通过间接免疫荧光法和免疫转印法对本室分离到的武汉地区1988年～1993年的72株呼吸道合胞病毒进行了分型，可将其分为A、B两型和B_1、B_2亚型；其中,A型株占29.2％，B型株占70.9％。流行病学分析显示，本地区呼吸道合胞病毒流行株5年中有4年以B型株为主；A、B两型的分布还具有局灶化特点；两型在性别、发病年龄方面无显著性差异。     

呼吸道合胞病毒所致豚鼠中耳内耳病变的光镜观察

将呼吸道合胞病毒注入豚鼠中耳腔内,于接种后不同时间取材进行病毒分离,血清学检查及光镜观察。中耳粘膜病毒培养阳性率一周内为50％。血清特异性抗体IgG滴度呈逐渐增高的趋势。光镜观察中耳粘膜以变性坏死性炎症为主。伴有以淋巴细胞为主的炎性细胞浸润,三周后基本恢复。耳蜗毛细胞部分变性,少数坏死。前庭终器感觉毛细胞亦出现变性。结果表明:呼吸道合胞病毒能致豚鼠急性中耳炎症,并使内耳感觉毛细胞变性。     

逆转录-聚合酶链反应-酶联夹心杂交法检测呼吸道合胞病毒及其亚型感染

目的:建立一种呼吸道合胞病毒(RSV)及其亚型核酸检测方法并初步应用于临床,检测浙南地区RSV及其亚型的流行情况.方法:根据RSV G蛋白基因核苷酸序列设计引物和探针,通过逆转录-聚合酶链反应-酶联夹心杂交法(RT-PCR-ELSH)随机检测了浙南地区连续两年冬春季期间202例急性下呼吸道感染的婴幼儿鼻咽部分泌物中RSV及其亚型的病毒核酸;与病毒分离培养、直接免疫荧光法(DFA)、OligoDetect试剂盒比较探讨其临床实用性.结果:202例标本中RSV阳性123例,阳性检出率为60.9%,2002～2003年和2003～2004年冬春季分别为68.2%和52.6%;两个冬春季都以RSV A亚型为主,占78.9%,2002～2003年冬春季A亚型占RSV阳性标本中的76.7%,2003～2004年A亚型占82.0%;RT-PCR-ELSH阳性检出率与其他三种方法的阳性检出率差异无显著性(P＞0.05).结论:RT-PCR-ELSH法用于检测RSV及其亚型,是一种灵敏度高、特异性强,方便、快速的方法,非常适用于临床标本的大批量检测和流行病学调查;RSV是引起浙南地区冬春季婴幼儿急性下呼吸道感染的最主要的病原体,并以A亚型为主.