亚致死剂量球形芽孢杆菌对按蚊传疟能力的影响

目的 探讨亚致死剂量球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus,Bs)对斯氏按蚊传疟能力的影响.方法 利用亚致死剂量Bs 2 362株处理斯氏按蚊Ⅳ龄幼虫,收集存活按蚊并常规饲养.正常对照组按蚊Ⅳ龄幼虫不进行Bs处理,常规饲养.对3～5d龄的斯氏按蚊成蚊进行约氏疟原虫攻击感染,并于按蚊吸血后第9天解剖蚊胃,观察卵囊的发育情况,比较分析Bs处理对斯氏按蚊传疟能力的影响.结果 正常对照组和Bs处理组按蚊对疟原虫的感染率分别为92.1％和97.6％,Bs处理组感染率高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).Sigma 3.5统计软件分析显示,正常对照组和Bs处理组斯氏按蚊对疟原虫的感染度分别为(56.69±69.29)和(84.19 ±75.64),Bs处理组按蚊卵囊数量显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 亚致死剂量Bs 2362株处理显著增加约氏疟原虫对斯氏按蚊的感染率和感染度,提高了按蚊的传疟能力.     

苏云金杆菌对斯氏按蚊Hor株幼虫杀伤效果的分析

目的检测苏云金杆菌以色列亚种(Bti)对斯氏按蚊Hor株四龄幼虫的杀灭效果及作用特点,为合理使用Bti进行蚊虫防治提供参考标准和理论依据。方法首先采用Probit analysis生物测定的方法研究Bti剂量与斯氏按蚊幼虫累计死亡率的关系,通过线性回归分析获得相关公式,计算半致死浓度(LC50)等重要参数,探讨Bti对斯氏按蚊的杀伤效果。然后利用半致死浓度的Bti处理不同密度的斯氏按蚊幼虫,分析按蚊幼虫密度对Bti杀伤效果的影响。结果Bti对斯氏按蚊四龄幼虫的累计死亡率随作用时间和浓度的升高而增大,Bti的浓度对数值与累计死亡率P值呈较好的线性关系,根据所获得的公式计算出Bti作用12、24、48和72h后,半数致死浓度(LC50)分别为(1242±60)IU/L、(1112±45)IU/L、(1010±73)IU/L、(855±32)IU/L,95%致死浓度(LC95)分别为(4 170±138)IU/L、(3746±444)IU/L、(3462±409)IU/L、(3080±464)IU/L。而且随着幼虫密度的增加,其累计死亡率显著降低。结论 Bti株对斯氏按蚊四龄幼虫具有较好的杀伤效果,作用强、起效快,是一种较为理想的的灭蚊生物制剂;在Bti的使用剂量的确定上,应充分考虑蚊虫密度的因素,蚊虫密度越大所需Bti剂量应适当加大。     

豫南罗索线虫感染按蚊和脉毛蚊的实验研究

脉毛蚊属的银带脉毛蚊对豫南罗索线虫很敏感,在蚊幼虫与寄生前期线幼虫之比为1:1时,感染率高达94.9％。受试的8种按蚊对豫南罗索线虫敏感度有很大差异,在蚊幼虫与线幼虫之比为1:5时,大劣按蚊的感染率高达89.7％,斯氏按蚊和多斑按蚊的感染率分别为44.4％和31.3％,但线幼虫在大劣按蚊体内有88.8％发生黑化死亡,在多斑按蚊体内有发育迟缓现象。其余5种按蚊对此线虫均不敏感。     

不同浓度盐水对大劣按蚊卵及幼虫发育影响的实验观察

本文作者在实验室内对大劣按蚊卵和幼虫在不同浓度盐水中的孵化率和发育情况进行了观察，发现低浓度盐水对大劣按蚊的孵化影响不大．但随着浓度的增加，孵化率依次降低．在0．5％及以下浓度的盐水中，大劣按蚊幼虫均可发育，浓度越低，幼期死亡率也越低，在1．0％及以上浓度的盐水中，幼虫不能存活，只有在0．1％及以下浓度的盐水中，幼虫才能发育为成虫．     

罗葵地区大劣按蚊成蚊调查

大劣按蚊是海南省山林及山麓地区的主要传疟媒介，１９９１年６月－１９９２年６月，连续１３个月在保葶县罗葵地区什故村对大劣按蚊成蚊进行了调查，发现当地大劣按蚊构成比为６０％（２０７／３４５），４、５、６、７、８月份均有，５月为密度高峰；平均密度为２．４只／人工小时；半通宵观察平均叮人率为２．９６；经产蚊比率为０．６４６，日存活率为０．８８；预期寿命为７．８天；恶性疟原虫孢子增殖需要１１．３天；传染性蚊     

影响生物性杀虫剂球形芽孢杆菌杀灭蚊幼虫效果的因素

<正> 研究证明,球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus简称Bs)具有良好的灭蚊效果,Bs芽孢在幼虫孳生地,尤其是污水型孳生地,具有较长的残效,并有再循环的潜力。被WHO称为最有前途的微生物杀虫剂。但不同的Bs制剂对各种蚊幼虫的毒效不同,孳生环境中的水质:水温、pH值、食物含量等均可影响Bs的灭蚊效果。系统了解这些影响因素对Bs的现场应用具指导作用。一、生物性因素(Biologieal factors): 1、蚊虫种类对球形芽孢杆菌毒效的影响:Bs对按蚊、库蚊、曼蚊、鳞蚊、阿蚊及脉毛蚊幼虫均有较高的毒效,对库蚊幼虫的     

光敏生物素标记DNA探针检测海南大劣按蚊

光敏生物素标记ＤＮＡ探针检测海南大劣按蚊刘斌陆晓林刘忠湘（第四军医大学寄生虫学教研室西安７１００３３）关键词大劣按蚊光敏生物素斑点杂交中图号Ｒ３９１．１同位素３２Ｐ标记的质粒ｐＡＤ－３２０是一株特异性、敏感性均较好的海南大劣按蚊探针．但是，由于同位素...     

疟疾媒介嗜人按蚊对溴氰菊酯的抗药性潜力

目的：研究应用溴氰菊酯浸泡蚊帐时疟疾媒介嗜人按蚊对杀虫剂产生抗药性的潜力，方法：交配后3－5d龄的的雌性嗜人按蚊通过溴氰菊酯药帐吸豚鼠血，控制蚊虫48h死亡率于50％左右，存活蚊产卵并按常规方法饲养传代，连续选育18代，每两对幼虫及成蚊进行敏感度测定，求出幼虫半数致死浓度（LC50）、成蚊半数击倒时间（KT50）、成半数致死时间（LT50），并计算各自的抗性指数。结果：选育过程中按蚊幼虫抗性指数均小于2．0，成蚊抗性指数也小于2．0，结论：模拟溴氰菊酯浸泡蚊帐条件下嗜人按蚊对溴氰菊酯产生抗药性的潜力小，提示局部选择性应用菊酯杀虫可能对媒介按蚊的抗性抗压力较小，可延长菊酯杀虫剂使用寿命。     

约氏疟原虫感染斯氏按蚊与大劣按蚊前后中肠前酚氧化酶的变化

目的比较分析约氏疟原虫感染斯氏按蚊与大劣按蚊前后中肠前酚氧化酶(prophenoloxidase,PPO)的分布及其变化,探讨中肠PPO与按蚊抗疟原虫感染免疫防御反应的关系.方法解剖分离约氏疟原虫感染前和感染后3、5、7、11和15 d斯氏按蚊与大劣按蚊的中肠.利用烟草天蛾PPO抗体分别进行免疫组化染色和免疫印迹分析.结果斯氏按蚊与大劣按蚊在未感染约氏疟原虫前的中肠循环管道内均已存在PPO,而感染后循环管道内的PPO扩散到中肠组织间隙并聚集成片状、块状或条索状,大劣按蚊中肠PPO的聚集程度大于斯氏按蚊;在感染前和感染后不同时期免疫印迹均可检测到斯氏按蚊与大劣按蚊中肠PPO蛋白带,分子量约为67×103,感染后的PPO蛋白带型比感染前明显增强,而且大劣按蚊中肠PPO蛋白带型比斯氏按蚊尤为明显.结论约氏疟原虫感染前按蚊中肠循环管道内存在的PPO可能是经与血淋巴相通的循环管道扩散而来,感染后导致的中肠内PPO不同分布及其变化可能与疟原虫感染按蚊密切相关,并可能具有重要的生理学意义以及与激活按蚊抗疟原虫感染的免疫防御反应相关.     

对约氏疟原虫不同易感性的大劣按蚊和斯氏按蚊基因组RAPD序列比较

目的分析对约氏疟原虫不易感的大劣按蚊和易感的斯氏按蚊基因组RAPD谱带并测序,探讨媒介按蚊基因型与疟原虫基因型间的相互关系。方法用已筛选的一条随机引物,随机扩增大劣按蚊和斯氏按蚊成蚊的基因组DNA,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,对相同迁移率的DNA条带克隆、测序,并采用相关在线程序及软件进行序列比较分析。结果大劣按蚊和斯氏按蚊RAPD谱带具有明显的种间差异,但有4对相同迁移率的条带。序列分析显示4对DNA条带在序列长度和组成上呈现多态性,序列的GC含量和简单重复序列存在差异,序列相似性介于48％～52％之间。结论大劣按蚊和斯氏按蚊之间存在不同的遗传背景,其基因多态性可能与产生对约氏疟原虫的易感性不同有关,为进一步研究按蚊与疟原虫之间的相互作用奠定了基础。     

大劣按蚊化学不育防制实验研究

用200p■p■m 六磷胺(Hempa)水溶液浸泡Ⅳ龄大劣按蚊幼虫,取24小时后雄性蛹,在两个实验地区的孳生地或附近定点羽化释放,三批共释放不育雄蚊15,482只,结果证明先以223杀虫剂先行喷洒后再释放不育雄蚊的效果较单纯释放不育雄蚊为优,有10.8%的捕获雌蚊所产的卵完全不育,平均卵的孵化率从释放前的84.8%下降为26.2%,与对照组比较,x~2检验差异有显著意义(x~2=10.70 p>0.05)。两个实验点均未发生新发病例。     

球形芽孢杆菌与苏云金杆菌以色列亚种混用杀灭蚊幼虫的实验室与现场观察

本文报导了球形芽孢杆菌2362株与苏云金杆菌以色列亚种混用杀灭蚊幼虫的效果。混用克服了2362对伊蚊效果差及B.t.i持效短的缺点,且对B.t.i有显著增效作用。表明两菌混用在实验室与现场的灭蚊幼效果均优于单菌应用。     

大劣按蚊卵黄蛋白原cDNA的克隆及转录水平研究

目的克隆大劣按蚊卵黄蛋白原c DNA,进行序列分析,并研究该基因在不同蚊期的转录水平变化。方法首先提取大劣按蚊总RNA,反转录成c DNA;然后设计昆虫卵黄蛋白原简并引物,以该c DNA为模板进行PCR扩增和测序,对所获取的序列进行生物信息学分析;最后利用实时荧光定量PCR方法检测卵黄蛋白原基因在蚊卵、幼虫、蛹和成蚊各时期的转录水平变化。结果 PCR成功扩增出了清晰的单一目的条带,经测序为一段1 071 bp的序列,BLAST比对分析显示该序列与浅色按蚊、库态按蚊和斯氏按蚊的卵黄蛋白基因同源性高达90%,与冈比亚按蚊、微小按蚊和美彩按蚊的同源性达89%。对大劣按蚊各时期卵黄蛋白原转录水平的研究结果显示,4 d龄按蚊卵黄蛋白原m RNA水平是3 d龄按蚊的15.2倍,而吸血后卵黄蛋白原m RNA水平高效上调,是未吸血组的955.7倍(P0.01);吸血组6 d龄按蚊卵黄蛋白原m RNA表达较吸血组4 d龄按蚊骤降(下降近1 870倍),而与未吸血组6 d龄按蚊相比,差异无统计学意义。结论本研究成功地克隆了大劣按蚊卵黄蛋白原基因的c DNA;大劣按蚊血餐后24 h卵黄蛋白原基因高效表达,提示卵黄蛋白原基因可能参与了大劣按蚊蚊卵的发育。     

异丙酚和氯胺酮持续静脉端输注对体外循环心脏直视手术中脑损伤的保护作用

目的 探讨异丙酚和氯胺酮持续静脉端输注对体外循环心脏直视手术中脑损伤的保护效应.方法 将择期行体外循环（CPB）心内直视手术患者90例随机分为三组,每组30例.A组为对照组,B组和C组为实验组,A组常规CPB,不行氯胺酮/异丙酚持续静脉端输注,B组在CPB期间氯胺酮/异丙酚1∶1混合1 mg/（kg·h）微泵持续静脉端输注,C组在CPB期间氯胺酮/异丙酚1∶1混合2 mg/（kg·h）微泵持续静脉端输注.常规低温体外循环麻醉处理,维持循环稳定.所有病例均在麻醉诱导后（TS1）,CPB结束后1 h（TS2）、24h（TS3）、48 h（TS4）四个时点各取颈内静脉血3 mL备检S1001β蛋白;在麻醉诱导后（TN1）,CPB结束后24 h（TN2）、48 h（TN3）、72 h（TN4）各取颈内静脉血3 mL备检神经元性烯醇化酶（NSE）.S100β蛋白与NSE均采用酶联免疫法测定.所有病例均在麻醉诱导后（T1）、CPB开始后5 min（T2）、CPB低温稳定期鼻咽温（28～32℃）（T3）、复温至鼻咽温34℃（T4）及停CPB后5 min（T5）5个时点取颈内静脉血测定颈内静脉氧饱和度（SjvO2）.结果 所有患者的血清S100β蛋白值均在TS2升高,TS3回至基础值;血清NSE值均在TN2后升高,TN4回复基础值.与A组比较,B组和C组TS2的血清S100β蛋白值[（3.97±0.65）、（2.78±0.10）μg/L]及TN2的血清NSE值[（9.73±1.57）、（8.36±1.67）μg/L]差异有高度统计学意义（P＜0.01）.C组与B组相比,患者TS2血清S100β蛋白及TN2血清NSE水平差异有统计学意义（P＜0.05）.90例患者SjvO2在T2-3升高,T4时轻度降低,T5回复基础值.A组与B、C组比较,T3[B组：（88.7±6.2）％;C组：（89.8±7.5）％]、T4[B组：（67.6±3.9）％;C组：（69.3±4.3）％]SjvO2值差异有统计学意义（P＜0.05）,其他各时点组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）,所有患者均无永久性中枢神经系统功能障碍.结论 CPB期间产生可逆性脑损伤,异丙酚/氯胺酮持续静脉端输注能减轻CPB的脑损伤程度,同时可改善CPB期间脑氧供需失衡,且有剂量依赖性.     

米格列奈对内皮细胞一氧化氮合成及氧化应激的影响

目的 观察口服降糖药米格列奈对高糖环境下内皮细胞一氧化氮（NO）合成及氧化应激反应的影响.方法 成功培养及传代人主动脉内皮细胞（HAECs）,分为对照组（葡萄糖浓度为5.5 mmol/L）、高糖组（葡萄糖浓度为30 mmol/L）、米格列奈组（30 mmol/L葡萄糖＋10 μmol/L米格列奈）.ELISA法测NO、上清液中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的含量;比色法分别检测6、12、24、48、72 h上清中超氧化物岐化酶（SOD）的活力及丙二醛（MDA）的含量.结果 ①米格列奈组24 h NO含量为（232.7 1±8.78）μmol/L,较高糖组低（P＜0.05）,随后逐渐升高,48 h和72 h含量[（263.48±6.32）、（270.91±6.03）μmol/L]较高糖组明显增高,差异有统计学意义（P＜0.05）.②干预24、48、72 h测米格列奈组eNOS的含量[（51.96±2.65）、（59.28±3.63）、（60.41±4.48） μmol/L]均较高糖组增高,差异有统计学意义（P＜0.05）;同步测iNOS含量[（53.28±3.45）、（62.09±3.71）、（59.90±3.60） μmol/L]与高糖组相比明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.③干预6、12、24、48、72 h测米格列奈组SOD活力[（3.99±0.46）、（5.70±0.14）、（4.98±0.37）、（3.18±0.25）、（3.35 ±0.51） U/mL]较高糖组高,差异有统计学意义（P＜0.05）;测MDA含量[（0.500±0.014）、（0.633±0.018）、（0.623 ±0.051）、（0.510±0.030）、（0.513±0.015） nmol/mL]较高糖组明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 米格列奈能减少高糖环境中动脉内皮细胞iNOS的生成,增强eNOS的活性和表达,促进内皮细胞NO的产生,同时能减轻高糖引起的氧化应激损伤.     

斯氏按蚊MyD88基因生物信息学分析及其在抗约氏疟原虫感染中的作用

目的 对斯氏按蚊MyD88基因进行生物信息学分析,并研究其在抗约氏疟原虫感染中的作用。方法 首先,通过VectorBase数据库获取斯氏按蚊MyD88基因cDNA序列,并利用VectorNTI、DNAMAN等软件对MyD88基因cDNA序列进行生物信息学分析。然后,根据MyD88的cDNA序列设计Real-time PCR引物,提取斯氏按蚊总RNA,通过反转录合成 cDNA,利用Real-time PCR方法检测MyD88基因在蚊各个生活史阶段转录水平情况及其在约氏疟原虫感染后的转录水平变化。结果 斯氏按蚊MyD88基因位于斯氏按蚊KB664619号染色体155 163~158 066 bp的反义链上,包含两个外显子,其cDNA全长1 383 bp,编码460个氨基酸。系统发育树结果显示,斯氏按蚊与大劣按蚊和冈比亚按蚊系统发育的距离近,其氨基酸序列同源性达79%。对斯氏按蚊各时期MyD88基因转录水平的研究结果显示,吸食正常血和感染血均能够上调MyD88的转录,吸血后3 d和5 d吸感染血组MyD88基因转录水平上调明显,显著高于正常血组和未吸血组。结论 本研究证实了Toll信号通路中的MyD88基因在蚊抗疟原虫感染的天然免疫中发挥了重要作用,在感染后3 d时作用明显。     

与按蚊唾液腺抗疟原虫子孢子入侵相关的差异表达cDNA文库构建

目的 构建与按蚊唾液腺抗疟原虫子孢子入侵相关的差异表达cDNA文库,为进一步筛选、克隆按蚊唾液腺抗疟原虫子孢子入侵差异新基因奠定基础.方法 以大劣按蚊-约氏疟原虫为实验模型,分别将饱吸约氏疟原虫感染鼠血和正常鼠血后14 d的大劣按蚊作为T 组和D 组,采用抑制差减杂交方法和T/ A克隆技术构建按蚊唾液腺抗疟原虫子孢子入...     

生物灭蚊幼控制永城市疟疾流行效果

目的研究实施生物灭蚊幼措施防治永城市疟疾暴发流行的效果。方法选择永城市2006年出现疟疾暴发和疟疾疫情较重的5个乡镇的31个行政村实施生物灭蚊幼措施,使用球形芽孢杆菌悬浮剂喷洒村内和村周水塘,剂量为8ml／m^2水面,15d喷洒一次至流行季节结束,喷洒前和喷洒后2d调查中华按蚊蚊幼密度和成蚊密度。收集疟疾报告、个案调查等资料进行统计,并与5个乡镇中未实施生物灭蚊幼措施的行政村疟疾发病情况进行比较分析。结果喷洒后2d蚊幼密度下降75．6-100％,成蚊密度下降50—100％。永城市2007年没有出现疟疾暴发点。实施生物灭蚊幼措施行政村当年共发病323例,发病率为0．48％,较上年0．98％的发病率下降51．3％,有统计学差异（X^2=118．099,P〈0．001）。与未实施生物灭蚊幼措施的行政村相比,两者2006年发病率没有统计学差异（X^2=2．818,P=-0．093）,2007年前者低于后者0．54％的发病率,有统计学差异（X^2=4．378,P=-0．036）。结论球形芽孢杆菌水面喷洒可降低中华按蚊蚊幼密度和成蚊密度,实施生物灭蚊幼措施可有效减少疟疾发病率。