大鼠乳腺癌MRI靶向造影剂的实验研究

目的探讨单克隆抗体造影剂在大鼠乳腺癌模型中的靶向性。方法①利用单克隆抗体LM609与钆双胺（Gd-DTPA）制备抗体造影剂（Gd-DTPA-抗体）;⑦制备15只大鼠乳腺癌模型．分为实验组（A、B组）和对照组（C组）;（3）MRI扫描,分别于注射造影剂前、注射造影剂即刻,10min,6、12、24、36、48h不同时刻测量注射不同浓度Gd-DTPA-抗体（A组质量浓度为0．4690μg／mL,B组质量浓度为0．0469μg／mL）瘤体的信号强度,对照组注射普通造影剂Gd-DTPA（质量浓度0．0469μg／mL）。结果实验A、B2组大鼠注射Gd-DTPA-抗体造影剂6h后．瘤体强化信号值逐渐提高,在约24h后肿瘤的强化值达到了最高。C组内．瘤体则表现为造影剂快进快出的方式。结论单克隆抗体造影剂在大鼠乳腺癌模型中具有靶向性。     

血浆对臭氧在水介质中杀菌效果影响的研究

目的探索血浆对臭氧在水介质中杀菌作用的干扰效应,为医用臭氧对腹水等体液中细菌杀灭作用研究摸索臭氧作用的浓度及时间参数。方法在含不同浓度血浆的生理盐水中加入大肠埃希菌（ATCC25922）和金黄色葡萄球菌（ATCC25923）,悬液定量法计算高浓度臭氧（90μg／mL）对其杀菌率;臭氧作用于含10．0％血浆的生理盐水．摸索臭氧有效杀菌的浓度和作用时间参数。结果臭氧杀菌效果随生理盐水中血浆浓度的提高而降低,血浆含量大于10．0％后杀菌效果显著降低（P〈0．05）,90μg／mL臭氧作用20min（流速12ml／min）对含10．0％血浆的生理盐水中大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌杀菌率可分别达到100％、99．05％。不同浓度组（40μg／mL、60μg／mL、90μg／mL）的臭氧杀菌效果有显著性差异（P〈0．05）,臭氧作用不同时间（5min、10min、20min）杀菌效果亦有显著性差异（P〈0．05）,以浓度为90μg／mL臭氧作用20min杀菌效果最好。结论血浆可干扰臭氧在生理盐水中的杀菌作用．血浆含量在10．0％以下时影响作用较小,提高臭氧浓度、延长作用时间可提高杀菌率。     

SPIO标记大鼠骨髓间充质干细胞:生物学活性及体外MRI成像效应评价

为研究不同浓度(25、50、100μg/mL)超顺磁性氧化铁粒子(SPIO)标记对大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)生物学活性、体外MRI成像效应的影响,采用多聚赖氨酸(PLL)包被的SPIO(PLL-SPIO)标记原代分离培养的rMSCs,24h后分别进行阳性标记率、MRI成像效应、细胞增殖凋亡以及干细胞细胞分化能力的综合评价。PLLSPIO标记阳性率、铁含量测定结果显示:铁标记率可达75%~100%。透射电镜观察,可见100μg/mL组rMSCs细胞质内浓聚细小铁颗粒的囊泡样包涵体。采用T1WI、T2WI和T2*WI序列MRI成像扫描显示:25μg/mL组即可引起信号的明显降低。与未标记的对照组细胞相比,25μg/mL和50μg/mL组细胞增殖活力、凋亡、干细胞分化能力检测结果差异皆无统计学意义(P0.05),而100μg/mL组的差异均有统计学意义(P0.05)。结论:25、50μg/mL SPIO可有效标记rMSCs,100μg/mL的SPIO对rMSCs增殖活性和分化能力有抑制作用,这为SPIO进一步的体内及临床MRI分子影像应用提供了基础。     

血清中葡萄糖6-磷酸异构酶在类风湿关节炎中的诊断价值

目的探讨血清中葡萄糖6-磷酸异构酶（glucose-6-phosphate isomerase，GPI）抗原在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者诊断中的意义。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测70例RA患者，26例其他风湿病患者和30例健康对照血清中GPI抗原的浓度，RA患者同时还检测了类风湿因子（RF）。结果70例RA患者血清中GPI浓度为（2．01±1．01）μg／mL，26例其他风湿性疾病组为（0．41±0．18）μg／mL，30例健康对照组为（0．090±0．030）μg／mL，RA患者血清中GPI浓度显著高于其他风湿病组和健康对照组（P〈0．01），在RA活动组和RA非活动组。亦有显著差异（P〈0．05）。通过分段回归分析发现GPI的浓度和RA病情活动成正相关。GPI抗原对RA检测的敏感性为61．4％．特异性为93．3％。结论GPI在部分RA患者血清中显著升高，有可能成为诊断RA及判断其疾病活动性的一个新指标。     

菲立磁胞内标记食蟹猴骨髓基质细胞

目的 探索利用菲立磁和转染试剂体外磁性标记食蟹猴骨髓基质细胞（BMSCs）方法的可行性。方法 无菌条件下取食蟹猴骨髓,梯度密度离心法分离获取BMSCs,使用菲立磁-多聚赖氨酸复合物（FE-PLL）标记BMSCs,普鲁士蓝染色、电镜和台盼蓝排除实验等方法鉴定FE-PLL标记食蟹猴BMSCs的效率和细胞的活力,倒置相差显微镜和免疫细胞化学方法检测BMSCs的增殖和分化能力。结果 菲立磁可以高效率地标记BMSCs,标记效率在99％左右。光镜和电镜下BMSCs胞质内分别可见细小的蓝色铁颗粒和许多包裹铁颗粒的囊泡。FE-PLL标记对BMSCs的活力、增殖和分化等能力没有明显的影响。结论 菲立磁可以用来体外标记食蟹猴BMSCs。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外心肌定向诱导及心肌组织构建研究

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）向心肌定向诱导分化及诱导后BMSCs体外构建工程化心肌组织的可行性。方法用含10μmol／L5-氮胞苷（5-Aza）的完全培养液（LG-DMEM,10％胎牛血清,100U／mL青霉素,100μg／mL链霉素,10μg／L碱性成纤维细胞生长因子）孵育第3代BMSCs24h后改用完全培养基培养4周,采用未处理组作为阴性对照。采用免疫细胞化学方法检测心肌肌钙蛋白T（cTnT）、α-肌动蛋白（α-Actin）的表达;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测早期心肌形成转录因子GATA-4、Nkx2．5、TDGF-1基因的表达。将已诱导4周的BMSCs接种于多聚赖氨酸包被的脱细胞牛心包生物支架上培养2周后检测。结果诱导组细胞向心肌细胞转化,表达cTnT、α-Actin,对照组不表达cTnT、α-Actin;RT-PCR检测BMSCs诱导后表达早期心肌形成转录因子GATA-4、Nkx2．5、TDGF-1等基因;诱导后的BMSCs黏附于脱细胞牛心包生物支架表面,生长良好。结论大鼠BMSCs可向心肌细胞定向诱导分化,与脱细胞牛心包生物支架黏附良好,有望构建理想的组织工程化心肌。     

利血平对耐药结核分枝杆菌临床株的作用

目的观察泵抑制剂（利血平）对耐药结核分枝杆菌临床分离株的作用。方法应用3组BacT．ALERT3D培养仪系统的培养基。分别命名为A、B、C组培养基。3组培养基均接种42株耐药结核分枝杆菌临床分离株，其中A、B组同时加入利福平1μg／mL；环丙沙星2μg／mL；利福平1μg／mL和环丙沙星2μg／mL；A、C组同时加入利血平20mg／L：C组未加入任何抗结核药物。结果在A组培养基中，耐利福平1μg／mL的14株菌株中有2株恢复对利福平的敏感性，12株仍然耐药；耐环丙沙星2μg／mL的6株菌株和耐利福平1μg／mL及环丙沙星2μg／mL的22株菌株全部恢复药物敏感性。在B组培养基中，42株耐药结核分枝杆菌临床分离株．药物耐药性无变化。在C组培养基中，42株耐药结核分枝杆菌临床分离株明显生长，说明利血平对所研究菌株无抑制作用。A组与B组培养基细菌的药物敏感性差异有统计学意义（P〈0．01）。结论结核分枝杆菌存在耐药机制之一的外排系统；泵抑制剂之一利血平对耐药的结核分枝杆菌临床分离株有抑制其外排作用，使结核分枝杆菌恢复敏感性。     

SPIO标记骨髓间充质干细胞移植入心肌梗死大鼠的示踪研究

目的探讨超顺磁性氧化铁微粒（SPIO）体外标记骨髓间充质干细胞（BMSCs）及体内示踪移植入大鼠心肌梗死心脏的BMSCs的能力。方法使用左旋多聚赖氨酸-SPIO共培养方式标记BMSCs。采用普鲁士蓝染色观察细胞内铁颗粒,流式细胞术检测细胞活力,将经过SPIO标记的干细胞移植入心肌梗死大鼠心脏,应用1.5TMRI系统行磁标记干细胞成像。超声心动图检测各组心脏的左室射血分数（EF）,左室舒张末期内径（LVIDd）,左室收缩末期内径（LVIDs）及短轴缩短率（FS）。结果普鲁士蓝染色显示,SPIO标记的BMSCs细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒,标记效率为（99.81±1.57）%;与正常未标记细胞相比较,细胞的活力差异无统计学意义（P〉0.05）。标记了SPIO的BMSCs体内MRI成像时显示,细胞移植区域信号缺失,对应区域病理切片普鲁士蓝染色可见胞浆内染色阳性的细胞。超声心动图显示,PBS组FS移植前后没有明显变化,BMSC组FS从移植前的（23.1±1.88）%上升到第1周的（31.28±4.15）%。BMSC组EF在移植前是（51.13±5.07）%,第1周时上升到（60.12±8.40）%。结论 SPIO能成功地标记BMSCs,且对BMSCs的活力无明显影响。BMSCs移植后能改善心梗大鼠的心功能。SPIO标记的BMSCs移植后在大鼠体内的分布、迁移过程可用MRI进行检测评价。     

汉防己对胸腺的细胞增殖的影响研究

目的研究汉防己（Han-Fang-Chi／Stephenia tetrandra S Moore）对小鼠胸腺的细胞增殖的影响，探讨其作用机制。材料与方法取小鼠胸腺的细胞，分为对照组和药物组（汉防己煎剂浓度分别为1μg／ml，10μg／ml，50μg／ml，100μg／ml），采用MTT法统计学比色意义法观察防己对小鼠胸腺的细胞增殖的影响。结果汉防己煎剂在1～100μg／ml可不同程度抑制胸腺的细胞增殖，结果有（P〈0．05），其半数抑制浓度IC50为8．34μg／ml。结论防己（1～100μg／ml）可不同程度抑制小鼠胸腺的细胞的增殖，具有时间依赖性和剂量依赖性，即随着时间延长和剂量增加，其抑制作用逐渐增强。     

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物诱导HepG2细胞凋亡研究

目的研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物（Silybin-phosphatidylcholine Compound,SPC）诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用及其机制。方法不同浓度SPC处理肝癌HepG2细胞,通过MTT法、细胞形态学观察、流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察SPC对HepG2细胞的生长抑制作用及其细胞凋亡的影响。结果SPC可抑制HepG2细胞的增殖。其GI50为46．8μg/ml;50μg／ml的SPC作用HepG2细胞24h后,细胞出现早期调亡的形态;75μg／ml、100μg／ml的SPC对HepG2细胞凋亡率分别为（17．22±3．45）％和（25．50±5．72）％;50μg／ml、75μg／ml、100μg／ml的SPC作用于HepG2细胞24h后,细胞内的Ca^2＋浓度显著升高（P〈0．05,P〈0．01）。结论SPC能够诱导肝癌细胞系HepG2细胞凋亡,其机制与SPC升高细胞内Ca^2＋浓度有关。     

多聚左旋赖氨酸协同超顺磁性氧化铁标记大鼠C6脑胶质瘤细胞

目的 观察多聚左旋赖氨酸（PLL）协同超顺磁性氧化铁（SPIO）对大鼠C6胶质瘤细胞的标记率及对标记细胞生物活性的影响.方法 将未标记的C6胶质瘤细胞设为对照组,25 mg/L SPIO（A组）、25mg,LSPIO＋0.75mg,LPLL（B组）、50mg,LSPIO＋1.5mg,LPLL（C组）标记的C6胶质瘤细胞设为实验组.各组细胞处理后分别培养6、24及48 h进行MTS细胞活性检测;普鲁士蓝染色评定标记率;3.0 T MRI GRE/30° T2＊WI序列对各组细胞体外成像,比较R2＊值及信号强度差异.结果 各实验组细胞处理后48 h均未见细胞活性显著降低（均P〉0.05）.普鲁士蓝染色显示B组、C组细胞标记率均达到98%以上,而A组约为70%,SPIO与PLL混合标记细胞随SPIO浓度增高染色程度逐渐加深.3.0T MRI体外细胞成像对标记细胞有较敏感的信号变化,对照组及A、B、C组R2＊值分别为11.76±5.74、12.13±4.39、61.22±27.85、90.07±35.59,对照组与A组间R2＊值差异无统计学意义（P〉0.05）;B、C组分别与其它各组间比较差异均有统计学意义,且此两组之间差异亦有统计学意义（均P〈0.01）.结论 PLL可增强SPIO对C6脑胶质瘤细胞的标记作用并对标记细胞活性未产生明显影响.3.0T MRI GRE/30°T2＊WI序列对离体标记细胞有较敏感的信号变化,R2＊值随着细胞内SPIO浓度的增加而增大.25 mg/L SPIO＋0.75 mg,L PLL可获得满意的体外标记效果.     

超顺磁氧化铁标记对干细胞转铁蛋白受体和铁蛋白轻链基因及蛋白表达的影响

目的研究超顺磁氧化铁（SPIO）标记对大鼠脂肪干细胞（ADSCs）转铁蛋白受体（TfR）和铁蛋白轻链（Fn-L）基因及蛋白表达的影响。方法实验通过医院伦理委员会的批准。标记组（实验组）采用多聚赖氨酸（PLL,终质量浓度为1.5μg/mL）介导SPIO（终质量浓度为50μg/mL）标记ADSCs。在2、4、8、16、24、96、168、336、504、672 h,分别用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）和WesternBlot实验定量检测实验组和未标记组（对照组）TfR和Fn-L基因及蛋白表达水平。结果 PLL-SPIO标记ADSCs后,实验组Fn-L mRNA（2、4、8、16、24、96、168、336 h）及蛋白（16、72、96、168 h）（P均〈0.05）表达水平会暂时性升高,至标记后一定时间,Fn-L mRNA（504、672h）及蛋白（336、504、672h）表达水平两组间差异无统计学意义（P均〉0.05）;实验组TfR mRNA（2、4、8、16、72、96、168、336 h）及蛋白（24、96 h）（P均〈0.05）表达水平会暂时性减低,至标记后一定时间,TfRmRNA（504、672 h）及蛋白（168、336、504、672 h）表达水平两组间差异无统计学意义（P均〉0.05）。结论在一定浓度内,PLL-SPIO标记ADSCs,对Fn-L和TfR基因及蛋白表达仅产生暂时性影响;从而为细胞内标记过程的安全性提供了实验依据。     

超顺磁性氧化铁纳米颗粒体外标记兔骨髓间充质干细胞的安全性以及MRI成像特征*☆

背景：传统的干细胞标记方法常需要病理组织学等侵袭性手段检测,无法动态观察整个实验过程,也不适合临床研究。 目的：观察超顺磁性氧化铁纳米颗粒体外标记对兔骨髓间充质干细胞生物学特性的影响以及标记兔骨髓间充质干细胞的体外MRI成像特征。 方法：采用红细胞裂解贴壁法培养扩增兔骨髓间充质干细胞。采用不同浓度超顺磁性氧化铁纳米颗粒(100,50,25,12.5 mg/L)联合多聚赖氨酸(0.75 mg/L)标记兔骨髓间充质干细胞。对标记兔骨髓间充质干细胞进行MRI检测,观察其成像特征。 结果与结论：25 mg/L的超顺磁性氧化铁纳米颗粒联合0.75 mg/L多聚赖氨酸标记兔骨髓间充质干细胞具有较好的安全性和有效性。此浓度对细胞的生长活性没有影响,不影响骨髓间充质干细胞的成骨成脂分化能力。MRI扫描在T2*WI序列上能明显有效地显像超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记的兔骨髓间充质干细胞。 关键词：超顺磁性氧化铁纳米颗粒;骨髓间充质干细胞;标记;磁共振;安全性 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.06.001     

低频脉冲电磁场影响超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记BMSCs的增殖和成软骨分化

目的　探讨外加低频脉冲电磁场（low frequency pulsed electromagnetic fields,LFPEMFs）对超顺磁性氧化铁纳米颗粒（superparamagnetic iron oxide nanoparticle,SPIO）标记的骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）增殖和成软骨分化的影响。 方法　体外培养BMSCs并进行SPIO标记。将SPIO标记的细胞分为4组并给予不同干预: LFPEMFs组,成软骨诱导组,LFPEMFs+成软骨诱导组,对照组。采用CCK8检测各组细胞的增殖情况,PCR及免疫荧光染色检测BMSCs成软骨分化水平。 结果 CCK8检测表明,LFPEMFs刺激促进细胞增殖;分化培养21 d时,LFPEMFs+成软骨诱导组细胞的Aggrecan 和CollagenⅡ表达量明显高于对照组（P<0.05）。 结论 LFPEMFs刺激可以促进SPIO标记的BMSCs的增殖和成软骨分化。     

透明质酸修饰的壳聚糖复合支架用于神经组织工程可行性研究

目的探索壳聚糖复合支架经透明质酸（HA）及多聚赖氨酸（PLL）修饰后,神经元在体外复合支架黏附情况,以及将不同复合支架植入鼠脑,观察支架对大鼠脑组织炎症反应、胶质纤维表达的差异。方法孔隙为（70.32±15.33）μm壳聚糖复合支架分别用质量浓度0.05mg/mLHA和质量浓度2mg/mLPLL进行表面涂镀法修饰,继而在上述两组及未修饰复合支架上进行小鼠神经细胞培养,1d后对支架细胞固定行扫描电子显微镜形态学观察,记录两组各30例支架高倍视野下细胞黏附数量;另将复合支架植入大鼠脑皮层损伤区,术后不同时间点分别取脑组织支架行苏木精-伊红染色、免疫组织化学观察炎性细胞及胶质纤维的表达情况。数据用SAS9.1.3统计软件处理,P〈0.05为差异有统计学意义。结果 HA修饰的壳聚糖复合支架上细胞黏附较多[扫描电子显微镜,×1700,（24.9±4.5）/高倍镜],而经PLL修饰的壳聚糖复合支架上细胞黏附相对较少[扫描电子显微镜,×1700,（19.2±3.2）/高倍镜],未修饰支架上细胞碎片较多,并且细胞聚集,细胞总数少;在体内用HA修饰的壳聚糖复合支架组与其他组相比,支架周围炎症反应轻、支架周围胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞数少。所获得数据分析后差异均有显著统计学意义（P〈0.01）。结论 HA修饰的壳聚糖复合支架能够提高体外神经元黏附,并且在体内观察炎性细胞,胶质纤维表达均优越于PLL修饰的壳聚糖复合支架、单纯壳聚糖复合支架。HA修饰的壳聚糖复合支架在神经组织工程应用中更具有研发前景。     

不同浓度腐胺对人肝细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨不同浓度腐胺对体外培养人正常肝细胞增殖、凋亡的影响。方法将体外培养的人正常肝细胞株LO2分为腐胺组与对照组,不同浓度腐胺组以含腐胺浓度分别为0.25、0.50、1.00、10.00、20.00、40.00、80.00、160.00、320.00、640.00μg/mL完全培养基培养细胞,对照组以不添加腐胺完全培养基培养细胞。对照组与不同浓度腐胺组处理的LO2细胞培养12 h后,再以四唑化合物电子耦联显色法（MTS）、流式细胞技术（FCM）分别测定细胞的增殖活性（用吸光度值表示）与凋亡率,并对两组数据进行相关性分析。结果 MTS结果显示,0.25、0.50、1.00、10.00、20.00μg/mL浓度腐胺组LO2细胞吸光度值均较对照组（0.474±0.022）升高,差异有统计学意义（P〈0.05）,并且1.00μg/mL浓度时达到峰值（0.834±0.012）;80.00μg/mL及以上浓度腐胺组LO2细胞吸光度值较对照组降低,差异有统计学意义（P均〈0.01）;40.00μg/mL腐胺组LO2细胞吸光度值（0.477±0.009）与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。流式细胞技术结果显示,0.25、0.50、1.00、10.00、20.00μg/mL浓度腐胺组LO2细胞凋亡率均较对照组（15.23±1.82）%降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,并且1.00μg/mL腐胺组细胞凋亡率达到最低值（2.30±1.00）%;80.00μg/mL及以上浓度腐胺组LO2细胞凋亡率较对照组升高,差异有统计学意义（P均〈0.01）;40.00μg/mL腐胺组LO2细胞凋亡率（16.10±1.45）%与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。相关性分析结果显示,各组浓度腐胺处理LO2细胞其细胞增殖与凋亡率呈负线性相关关系（r=-0.989,P=0.000）。结论低浓度（0.25-20.00μg/mL）腐胺对人正常肝LO2细胞增殖有促进作用,而较高浓度（80.00μg/mL及以上）的腐胺则出现明显的诱导凋亡作用,低浓度腐胺促进细胞增殖可能是通过抑制细胞凋亡而实现。     

超微超顺磁性纳米氧化铁标记犬口腔黏膜上皮细胞与磁共振成像实验

BACKGROUND: Epithelial cells are commonly used as the seed cell in tissue engineering; however, there is still a lack of an effective in vivo noninvasive trace technology. OBJECTIVE: To investigate the feasibility of labeling canine oral epithelial cells with ultrasmall superparamagnetie iron oxide (USPIO) and magnetic resonance imaging (MRI) in vitro.  METHODS: Oral epithelial cells from beagles were primary cultured, and then labeled by 0.75 mg/L poly-L-lysine combined with USPIO (0, 5, 10, 25, 50 and 100 mg/L), respectively. To determine the optimal dosage, the intracellular iron expression was identified by Prussian blue staining, and the cell viability in different groups was detected by cell counting kit-8. Finally, 2×105 labeled cells were suspended with 1 mL PBS buffer, and were screened using 3.0 T MR on T2*WI sequences in vitro.  RESULTS AND CONCLUSION: USPIO prepared with 0.75 mg/L poly-L-lysine could successfully label dog oral epithelial cells. Prussian blue staining showed intracellular blue spots, and the intracellular blue spots became more with the concentration increasing and saturated at the concentration of 25 mg/L. Cell counting kit-8 indicated that the cell viability did not change when the concentration < 25 mg/L. Among the T2*WI sequences, the MRI signal intensity decreased with the concentration increasing. In conclusion, canine oral epithelial cells can be effectively labeled with USPIO making no impact on cell viability when the concentration < 25 mg/L, and MRI can be used to track these labeled cells in vitro．     

过表达Akt1对小鼠骨髓间充质干细胞生物学功能的影响

目的探讨Akt1过表达对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学功能的影响。方法雄性健康C57小鼠,鼠龄7~8周,体质量18~25 g。取该小鼠胫骨和股骨,利用BMSCs的贴壁生长能力进行分离,并对获取的细胞进行流式鉴定。构建Akt1-IRES-GFP逆转录病毒载体,感染BMSCs,并筛选、扩增Akt1过表达的BMSCs。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot测定转染Akt1表达情况。用不同浓度(0、10、50、100 ng/mL)的γ干扰素(IFN-γ)处理Akt1-BMSCs及BMSCs,采用四唑氮化合物(MTS)法绘制生长曲线,通过Ca2+依赖性磷脂结合蛋白/碘化丙啶(AnnexinV/PI)复染,观察不同浓度IFN-γ对Akt1-BMSCs及GFP-BMSCs细胞凋亡的影响。结果成功培养出小鼠BMSCs,高表达CD29、CD44、Sca-1,而不表达CD45、CD34,CD11b、CD31、FLK-1、MHC-Ⅱ。成功筛选并扩增出Akt1-BMSCs;RT-PCR显示,Akt1-BMSCs的Akt1基因表达量明显高于BMSCs(P0.01);Western blot显示,Akt1-BMSCs的总Akt1蛋白及磷酸化Akt蛋白均高于BMSCs。流式细胞仪检测Akt1-BMSCs及GFP-BMSCs的绿色荧光蛋白(GFP)的表达量均高于95%。细胞增殖及凋亡实验显示,在正常培养及高浓度IFN-γ(100 ng/mL)的刺激下,Akt1-BMSCs显示出了增殖及抗凋亡优势。结论 Akt1-BMSCs比相同代数的BMSCs在正常培养及高浓度IFN-γ(100 ng/mL)的刺激下增殖及抗凋亡能力增强,可用于进行下一步的研究。     

黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马神经元凋亡及相关基因表达的影响

目的 探讨黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对缺血再灌注大鼠海马神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响.方法 实验动物随机分为假手术组、模型组、BMSCs组、BMSCs+黄芪组.采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,BMSCs组、BMSCs+黄芪组分别于建模成功后3 h...