广州地区肺炎克雷伯菌产TEM型及SHV型β-内酰胺酶基因表型的研究

目的对广州地区产β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌TEM型和SHV型基因型及其分子流行病学进行研究。方法对57株产β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌进行blaTEM和blaSHV基因扩增,分别采用变性高效液相色谱技术和测序法对扩增产物进行分析,以明确基因类型。结果57株肺炎克雷伯菌均扩增出blaTEM和blaSHV基因。测序结果表明,TEM-116 ESBL32株,占54．2％;SHV型以SHV-12为主,占33．3％,其次为SHV-11和SHV-2a等,还发现5种新的SHV基因亚型。54株菌株同产TEM和SHV型β-内酰胺酶,占94．7％;其中13．0％同产TEM-116和SHV-12ESBL。结论TEM-116和SHV-12分别是广州地区产β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌TEM型及SHV型耐药质粒主要的基因亚型,blawTEM和blaSHV在肺炎克雷伯菌中同产的比例很高,这提示本地区即将或已经面临肺炎克雷伯菌新耐药机制的抵抗和流行,必须加强对产ESBL肺炎克雷伯菌的分子流行病学监测。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药基因序列分析

目的研究沈阳地区产超广谱β-内酰胺酶（extended—spectrumβ-lactamases,ESBLs）肺炎克雷伯菌的基因型分布。方法采用聚合酶链反应（PCR）扩增分离31株产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌株的TEM型、SHV型及CTX—M-1型ESBLS基因,1％琼脂糖凝胶电泳,回收DNA片段,测序分析各基因型在耐药的产超光谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌株中的分布。结果TEM-1、SHV-1、CTX—M-1基因扩增阳性率分别为58．0％、90．3％、16．1％。结论分离的ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌存在多个耐药基因。     

血液来源肺炎克雷伯菌耐药表型及基因型分析

目的 了解临床血液来源的肺炎克雷伯菌的耐药表型和基因型分布情况.方法 收集2014年10月至2015年10月四川省人民医院检验科临床分离的37株肺炎克雷伯菌进行耐药分析,采用双纸片扩散法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),PCR扩增CTX-M、TEM和SHV耐药基因,PCR产物测序确定其基因型.结果 37株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的阳性率为27.03％(10/37).与不产ESBLs的菌株相比,产ESBLs的肺炎克雷伯菌对氨苄西林/舒巴坦、氨曲南、头孢曲松、头孢他啶、环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢哌酮/他唑巴坦、妥布霉素和复方新诺明的敏感性明显下降,但对亚胺培南、厄他培南、阿米卡星、头孢吡肟和哌拉西林/他唑巴坦保持较好的敏感性;大部分产ESBLs的菌株表现出对青霉素类、头孢类和氨基糖甙类等药物的多重耐药.产ESBLs的菌株CTX-M基因阳性率为60.00％(6/10),3株为CTX-M-14型;TEM基因阳性率为80.00％(8/10),均为TEM-1型;SHV基因阳性率为90.00％(9/10),5株为SHV-11型.结论 临床血液来源的肺炎克雷伯菌产ESBLs的阳性率较高,耐药性明显高于非产ESBLs菌株,其基因型以TEM-1型和SHV-11型为主.     

124株肺炎克雷伯菌耐药性分析和产ESBLs株耐药基因分型研究

目的 探讨肺炎克雷伯菌耐药性以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型的流行状况.方法 用K-B法检测肺炎克雷伯菌对24种常用抗生素的耐药情况;用PCR扩增所有产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因片段,分析ESBLs各基因型的流行状况.结果 肺炎克雷伯菌除对碳青霉烯类药物敏感外,对其他抗生素耐药严重;产ESBLs肺炎克雷伯菌检出50株,检出率40.32％.ESBLs基因分型结果显示,多株同时携带2种或2种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型基因共同存在.结论 常用抗菌药物耐药严重、呈多重耐药.ESBLs检出率较高,产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因型以CTX-M为主.     

产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的基因分型研究

目的了解广东省中医院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的流行、耐药基因型分布。方法对广东省中医院2001年7月至2003年8月间临床分离保存的208株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,用Vitek-32细菌鉴定仪进行细菌鉴定,用双纸片法进行ESBLs初筛,用NCCLS 1999年推荐的确证方法进行ESBLs确证。并采用PCR扩增和PCR产物测序方法对产ESBLs菌株进行基因分型。结果分离到产ESBLs细菌76株,总检出率为36．5％,其中肺炎克雷伯菌阳性率为41．9％（39／93）、大肠埃希菌阳性率为32．2％（37／115）,PCR初步分型结果表明：TEM型42株（55．3％）,均为TEM-1型、CTX-M型27株（35．5％）,SHV型33株（43．4％）。结论CTX-M型和SHV型是我院产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型。     

痰标本中肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因的检测及耐药分析

目的分析痰标本中肺炎克雷伯菌的耐药特点及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率、基因分型。方法收集安徽省内34家医院痰标本中分离到的114株肺炎克雷伯菌,用琼脂稀释法检测其耐药性,标准纸片扩散法及PCR法检测ESBLs基因并初步分型。结果114株肺炎克雷菌中产ESBLs58株(50.9%),其中CTX-M-1型12株,CTX-M-9型15株,TEM型42株,SHV型49株,OXA-1型2株;产ES-BLs肺炎克雷伯菌的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。结论痰标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率高,且呈多重耐药。     

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的耐药表型和基因型研究

目的 检测临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况，了解产超广谱β-内酰胺酶临床分离菌的耐药特性，并探讨耐药性产生的基因背景。方法 通过对近两年（2004～2005）北京地区医院收集到的共295株大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌，进行产ESBEs菌株表型鉴定、PCR检测基因型、等电聚焦电泳鉴定等电点，并对这些菌株耐药的特性和基因型进行了探讨。结果 ESBLs的检出率为18．6％，其中大肠埃希菌的检出率为27．7％，肺炎克雷伯杆菌的检出率为8．57％。引起耐药的基因型主要为TEN型81．8％（45／55），其次CTX—M型74．5％（41／55），然后是SHV型20％（11／55）。大肠埃希菌以TEN型为主（88．4％），肺炎克雷伯杆菌以CTX—M为主（91．7％）。经等电聚焦电泳验证，少数菌株的耐药由TEN、SHV、CTX型酶之外的ESBLs引起。结论 产ESBLs菌在临床上较为普遍，大肠埃希菌以TEN型为主，肺炎克雷伯菌以CTX—M型为主，CTX—M型酶对肺炎克雷伯杆菌的头孢噻肟耐药性起重要作用。     

新生儿科产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析及基因分型

目的：了解本院新生儿科送检标本中,分离的产超广谱13一内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯茵的耐药性及基因分型。方法：收集本院新生儿科送检标本中分离的肺炎克雷伯茵,采用双纸片协同试验的方法进行ESBLs初筛及表型确证试验;K—B纸片扩散法进行抗茵药物敏感性试验;聚合酶链反应（PCR）法分析ESBLs的基因分型。结果：产ESBLs肺炎克雷伯茵的检出率为71．11％（64／90）。产ESBLs肺炎克雷伯菌对第3代头孢菌素与B一内酰胺酶抑制剂合剂、碳青霉烯类抗生素较敏感。ESBLs的基因型分析结果显示,产ESBLs肺炎克雷伯菌中SHV、TEM、CTX-M-1基因扩增阳性率分别为71．64％、37．50％、49．79％,同时携带2种或3种耐药基因的菌株分别占37．71％和12．28％。结论：新生儿科产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药现象严重,ESBLs基因型以SHV、CTX—M一1为主。     

下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌的耐药性基因型分析

目的:观察下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌耐药菌株耐药基因分型,并探讨耐药菌株的流行状况及发生耐药的机制。方法:按常规方法进行细菌分离、培养和菌种鉴定。采用微量液体稀释与K-B法,分别对常用抗生素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药性进行检测。采用纸片法确证产超广谱β-内酰胺酶菌株,并应用PCR技术进一步扩增TEM型、SHV型β-内酰胺酶的基因型。结果:产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对AMP、AMP/SB、PIP、CF、CFZ、CRM、CPD、CAX、CAZ、CTX、CPE和AZT的耐药率高达90%以上。产ESBLs肺炎克雷伯菌中产TEM型、SHV型、TEM和SHV型β-内酰胺酶基因的百分率分别为26.92%、30.76%、7.69%,大肠埃希菌百分率分别为46.15%、5.12%、10.25%。结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对多种不同种类抗生素耐药,且具有多重耐药的特点。产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌携带TEM或SHV型β-内酰胺酶基因,其中肺炎克雷伯菌以产SHV型β-内酰胺酶为主,大肠埃希菌则以产TEM型β-内酰胺酶为主。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药表型和基因型的流行病学研究

目的 了解岳阳市产超广谱β-内酰胺酶(ESBh)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分离、分布及其耐药表型和基因型的流行情况，以便对产ESBLs细菌进行监控和治疗。方法 采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)规定的表型筛选和确证试验确定ESBLs的发生率；等电点测定和PCR扩增对ESBLs初步分型；PCR扩增阳性产物测序分析确定其基因型；用纸片扩散法测定其对临床常用抗生素的耐药性。结果 227株大肠埃希菌、120株肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别是47．5％(108／227)、57．5％(69／120)，总分离率为51％。各病区产ESBLB菌的检出率以重症监护(ICU)病房最高(59．4％)，其次为慢性病房和呼吸科病房(54.8％、50％)。产ESBLs菌对亚胺培南全部敏感，对哌拉西林／他唑巴坦没有发现高耐药株，中介占有18．1％。基因分布为SHV-11，12，28，TEM-1，CTX-M-3，13，14。SHV型，SHV型，CTX-M型分别占产ESBL占菌的16．6％，73％和83．52％。结论 产ESBLs大肠杆菌和肺炎克雷伯菌主要来源于ICU病房，对常用抗生素具有多种耐药表型，CTX-M型ESBLs是本市产ESBLB大肠杆菌和肺炎克雷伯菌最主要基因型。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药型与基因分型

目的 分析肺炎克雷伯菌的耐药现状,探讨其耐药型与基因组型间的关系,检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)各基因型的流行状况.方法 用纸片扩散法检测117株肺炎克雷伯菌对20种抗生素的耐药情况.用PFGE实验探讨耐药表型与基因组型间的关系.用PCR扩增所有产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因片段,分析ESBL各基因型的流行状况.结果 肺炎克雷伯菌耐药情况严重,产ESBL肺炎克雷伯菌检出率达到43.59%.PFGE将117株肺炎克雷伯菌分为3群,群间相似度为37.30%,没有发现特异的ESBL条带.PCR扩增检出SHV型15株,占29.40%;TEM型39株,占76.50%;CTX-M型9株,占17.60%.同时携带SHV、CTX-M基因者有19株,占37.30%.结论 该院肺炎克雷伯菌的耐药现象严重、多重耐药现象突出,ESBL检出率高.该次实验未发现由同一菌株所致的医院感染,肺炎克雷伯菌的耐药表型与PFGE基因分型结果 可以表现一致,也可以表现为不同.产ESBL肺炎克雷伯菌的基因型以TEM和SHV为主,同一菌株携带多个基因的现象较为普遍.     

肺炎克雷伯杆菌40株超广谱β内酰胺酶基因的分型

目的：分析肺炎克雷伯杆菌临床分离株中超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型。方法：用表型确证试验检出产ESBL。的肺炎克雷伯杆菌40株，分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物对这些耐药株进行聚合酶链反应(PCR)扩增。结果：PCR扩增结果显示，TEM、SHV和CTX-M的阳性率分别为30％、60％和45％。结论：SHV和CTX．M型是南京医科大学第一附属医院产ESBLs菌株的主要基因型。     

苏州地区临床产超广谱 β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药特征和耐药基因分型

目的分析苏州地区临床产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药特征和耐药基因型分布情况。方法收集苏州地区5家医院2006年至2009年间自临床标本中分离的肺炎克雷伯菌512株,按CLSI规定的ESBLs初筛和确证试验检测ESBLs,以K-B琼脂扩散法进行药物敏感试验,用PCR方法对分离的产ESBLs菌株进行TEM、SHV和CTX-M基因型检测。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为35.7%（183株）,其中62.8%（115株）携带TEM型基因,36.1%（66株）携带SHV型基因,78.7%（144株）携带CTX-M基因。另外,有41.5%（76株）同时携带两种以上的基因。产酶株的耐药率均明显高于非产酶株（均P〈0.05）。产酶株除对第4代头孢菌素和对加克拉维酸或他唑巴坦等第3代头孢菌素耐药率相对较低外,对其他抗生素均有相当高的耐药率。但无论是产酶株还是非产酶株对亚胺培南的耐药率均为0。结论苏州地区临床产ESBLs肺炎克雷伯菌已达到了较高的比例,并具有多重耐药的特点,其中CTX-M型是最主要的流行基因型。临床上严格控制和合理使用第3代头孢菌素已刻不容缓。     

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌基因型研究

目的：了解泸州地区临床分离产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型的流行特征。方法：用聚合酶链反应法（PCR）对ESBLs菌株进行扩增,产物行琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察结果,明确ESBLs基因型。结果：97株产ESBLs菌株中基因分布数据为TEM基因型15株（15.5%）,SHV基因型17株（17.5%）,非TEM、非SHV基因型占67.0%。结论：本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型部分为TEM型和SHV型,较大部分为其他型ESBLs。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的研究获得性肺炎（HAP）产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法回顾性分析18例感染产ESBLs肺炎免雷伯菌患者的临床资料．采用酶抑制剂增强法作ESBLs表型确证试验．纸片扩散法作药敏试验．聚合酶链反应（PCR）扩增ESBLs基因。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为78．3％；仅对亚胺培南、美罗培南敏感；几乎所有患者均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等；SHV、CTX-M和TEM基因的阳性半分别为72．2％、61．1%和16．7％；44．4％的菌株同时携带多个基因。结论HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重．治疗应首选碳青霉烯类抗生素；不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受各种侵袭性操作可能是其危险因素；最常见的ESBLs基因型是SHV．其次为CTX—M。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药谱的连续监测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌耐药谱的变化,为临床用药提供依据。方法用法国BioMerieux公司的VITEK-60全自动细菌鉴定仪鉴定细菌。采用K-B单片琼脂扩散法做药敏试验；用WHONET5．0分析软件对产ESBLs肺炎克雷伯菌的药敏结果进行统计。结果检出624株肺炎克雷伯菌,其中产ESBILs 269株,占43．1％。药敏结果显示除哌拉西林外,18种抗生素对不产ESBLs肺炎克雷伯菌有较高的抗菌活性。产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药率均明显高于不产ESBLs菌。结论本院检出的肺炎克雷伯菌产ESBLs株可能是头孢菌素型(CTX-M型)和SHV型酶介导。ESBLs尚未得到有效控制。3年间产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药谱变化不大,亚胺培南、美洛培南对产ESBLs株耐药率最低。     

儿童产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性及基因型研究

目的 了解笔者医院儿童产β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因分型,为临床合理使用抗生素提供依据。方法 收集2017年7月~2018年7月从笔者医院常规分离的临床痰液、尿液、血液等各标本进行培养,对肺炎克雷伯菌进行ESBLs筛选及确证。对确证110株产超广谱β-内酰胺酶临床菌株进行19种抗生素的药敏试验,观察产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性。分析了产生肺炎克雷伯菌的ESBL质粒谱,并对产生肺炎克雷伯菌的ESBL携带的ESBL抗性基因进行了扩增和PCR分型。结果 产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯杆菌表现为多重耐药性,对头孢唑啉、头孢唑啉、头孢噻嗪、头孢噻嗪等头孢菌素具有较高的耐药性,耐药率为77.2%～86.0%。酶抑制复合制剂的耐药率为31.8%～80.0%,对亚胺培南耐药率为0。耐药基因型检出率中,SHV型占4.5%,CTX-M-9型占32.7%,TEM型占41.8%,CTX-M-1型占42.7%。另有41株(37.3%)检测到两种或两种以上耐药基因型,其中以CTX-M-1型与TEM型或CTX-M9型为主。结论 超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的产生引起对多种抗生素具有多重耐药性,临床应重视其检测和药敏试验。亚胺培南等碳青霉烯类抗生素目前仍是治疗产广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌感染最有效的药物。     

儿童临床产ESBLs菌基因型分布及其耐药特征的研究

目的:对本地区2002～2004年儿童临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBLs)细菌的流行特点和基因型别进行分析,了解产ESBLs细菌的耐药基因的型别分布和耐药特征变化情况.方法:用microscan walkaway-4.0细菌鉴定仪对4022株革兰氏阴性菌鉴定到种并做药敏分析,K-B法确认产ESBLs菌株,并用PCR法扩增,筛选其中108株ESBLs阳性菌株进行初步基因分型.结果:产ESBLs菌1468株,大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌的分别为52.5%和65.8%;总产酶率为58.0%;2002～2004年产酶率分别为:68.2%、56.9%、50.8%.PCR初步分型结果表明:108株ESBLs菌检测到TEM、SHV及CTX三种基因型;大肠埃希氏菌59株,主要为TEM型(56/59);肺炎克雷伯菌29株,主要为SHV型(28/29);阴沟肠杆菌13株,以TEM型为主(12/13);铜绿假单孢菌7株,以TEM型为主(6/7).2002年以TEM型为主(75%),2003年主要为TEM型(40%)和SHV型(57.1%),2004年主要为TEM型(90.9%),CTX为少见基因型(3.7%).产ESBLs菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类抗生素耐药率为56.2%～100%,具有多重耐药特点.结论:产ESBLs菌发生率在逐年下降,产ESBLs菌主要携带TEM和SHV型β-内酰胺酶基因,其中绝大部分产TEM型β-内酰胺酶;但耐药情况不容乐观;提示临床应加强细菌耐药性与基因型变化的了解,合理用药,减少耐药菌的产生,更好的控制院内感染.     

院内感染肺炎克雷伯杆菌的耐药性及其产ESBLs研究

目的 :监测肺炎克雷伯杆菌对 17种常用抗生素的耐药性及其产ESBLs菌株院感情况。方法 :收集、分离、鉴定肺炎克雷伯杆菌。用K -B纸片扩散法进行药敏实验 ,并按NCCLS推荐方法检测产ESBLs菌株。结果 :共分离到 12 8株非重复肺炎克雷伯杆菌 ,其中产ESBLs株 6 0株 ,占 4 6 .88%。产ESBLs菌株对 17种抗生素的耐药率分别为氨苄青霉素 10 0 %、哌拉西林 96 .7%、奥格门丁 4 2 .6 %、舒普深 4 7.2 %、头孢唑啉 96 .7%、头孢呋新 96 .7%、头孢他啶 18.3%、头孢噻肟 71.7%、氨曲南 4 3.3%、亚胺培南 0 %、环丙沙星 31.7%、庆大霉素 86 .7%、阿米卡星 6 6 .7%、萘啶酸 6 6 .7%、氯霉素 6 1.5 %、四环素 6 4 .9%、头孢吡肟 36 .1% ;不产ESBLs菌株对上述大多数抗生素的耐药性较低 ,与产ESBLs菌株的耐药性比较除氨苄青霉素、亚胺培南外 ,其他均有显著性差异 ,P <0 .0 1。结论 :亚胺培南是治疗产ESBLs肺炎克雷伯杆菌菌株感染的首选药物。肺炎克雷伯杆菌的耐药株日趋增多 ,应采取措施控制肺炎克雷伯杆菌引起的医院感染流行。     

儿童患者中检出产ESBLs大肠埃希菌的耐药性和基因分型

目的了解本地区儿童患者临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药基因型别和耐药性的变化情况。方法收集自儿童患者分离鉴定的大肠埃希菌株1327株，通过K-B法作药敏试验，采用美国NCCLS1999年推荐的抑制剂增强纸片法确认产ESBLs株，并对ESBLs进行初步基因分型。结果检出产ESBLs菌株702株，检出率为52．9％，产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类抗生素耐药率为55．5％。95．0％；PCR初步分型结果，单独携带TEM型基因的占56．7％，单独携带SHV型基因的占15．0％，携带两种基因的占25．8％。结论产ESBLs大肠埃希菌检出率逐年上升，具有多重耐药的特点；产ESBLs大肠埃希菌主要携带TEM型和SHV型β-内酰胺酶基因，其中绝大部分产TEM型β-内酰胺酶。