2株内生真菌对菊花抗旱特性的影响

目的:以PEG6000模拟干旱条件,研究接种内生真菌(葡萄孢属C1菌Botrytis sp.、球毛壳菌G4菌Chaetomium globosum对药用菊花Ch.morifolium抗旱性的影响.方法:分别用0%,10%,20%,30%,40%PEG6000胁迫菊花组培苗4 d,测定各处理组菊花生物量,叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及叶片丙二醛(MDA)、可溶性蛋白含量.结果:模拟干旱胁迫后,接种内生真菌的菊花长势好于对照(未接菌),PEG6000胁迫4 d后,随着胁迫浓度的增加,菊花总生物量不断减少,接菌组生物量显著高于对照,C4组高于C1组;各处理组MDA含量随着胁迫浓度的增加而不断增加;各处理组POD活性、可溶性蛋白含量随着胁迫浓度的增加均呈现先增加后减小的趋势;对照SOD活性随着胁迫浓度的增加而逐渐增加,接菌组SOD活性基本保持不变;对照PAL活性随着胁迫浓度的增加而逐渐增加.不同浓度PEG胁迫后,接菌组MDA含量始终低于对照,SOD活性、POD活性、可溶性蛋白含量、PAL活性均始终高于对照.结论:接种内生真菌提高菊花的抗旱能力.     

两株内生真菌对菊花抗盐特性的影响

目的用NaCl模拟盐胁迫,研究接种内生真菌对菊花抗盐特性的影响。方法采用盆栽试验,以与内生真菌葡萄孢(C1菌株)、球毛壳菌(C4菌株)共生培养的菊花为材料,研究不同浓度盐胁迫对不同处理组菊花生理指标的影响。结果各处理组菊花根叶的含水量随着盐分胁迫的加重而降低,接菌处理组的根叶含水量减失程度比对照组小。各处理组SOD酶活力、可溶性蛋白量均随NaCl浓度提高而增加,20 g/L NaCl时均达到最大值,接菌处理组SOD酶活力、可溶性蛋白量高于对照组,C4组高于C1组。POD酶活力均先升高后降低,15 g/L NaCl时各处理组POD酶活力达到最大值,C4、C1组POD酶活力分别比对照组高25.50%、1.35%。15 g/L NaCl处理时,C4组PAL活力约是对照组的7倍。结论内生真菌增加了菊花的抗盐能力,C4组效果好于C1组。     

大戟内生真菌对其生长和两种萜类物质量的影响

目的 探讨内生真菌促进大戟药材生产的方法.方法 接种大戟内生真菌到大戟组培苗,将建立共生后的组培苗移栽室外.生长1年后,检测生物量和萜类的量.结果 内生真菌E4(Fusarium sp.Ⅰ)和E5(Fusarium sp.Ⅱ)均促进了宿主植物生长,使根的鲜质量分别提高了49.45%和59.74%;并使大戟的折干率提高了2.99%和6.48%;同时提高了大戟组培期和室外生长1年后二萜物质异大戟素和三萜物质大戟醇的量.室外生长1年后,E4处理组.异大戟素和大戟醇分别比对照提高了92.79%和40%;E5处理组,异大戟素和大戟醇分别比对照提高了105.32%和241.38%.结论 内生真菌E4和E5对大戟有促生长作用,并能同时促进其萜类的合成.     

地黄内生真菌促生作用的初步研究

目的:筛选出促进地黄生长的内生真菌,并初步研究其促生作用.方法:通过4株分离自地黄的内生真菌与地,黄无菌苗及地黄盆栽苗的共生实验,以苗重,叶绿素含量和根冠比为指标筛选出促进地黄生长的内生真菌,通过PC比色法测定真菌分泌IAA的能力并研究内生真菌的促生作用.结果:通过共生实验,发现4株真菌中,Ceratobasidium属内生真菌-菌Ⅳ显著促进盆栽地黄生长(P<0.05),与该菌共生的地黄无菌苗平均增长量是对照组正常生长地黄的1.25倍,并显著提高叶片中的叶绿素含量(P<0.01).通过salkowski比色法表明Ceratobasidium属内生真菌-菌Ⅳ分泌IAA,LAA浓度的峰值约可达到5.712 mg·L-1.结论:Ceratobasidium属内生真菌-菌Ⅳ促进地黄生长.     

茅苍术悬浮细胞系建立及内生真菌诱导子对其挥发油积累的影响

目的 建立茅苍术悬浮细胞系,研究2种内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞产挥发油的影响.方法 用内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞进行诱导处理后超声提取茅苍术细胞中的挥发油,利用气相色谱法测定挥发油中苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇和苍术素的量.结果 获得的茅苍术悬浮细胞生长较快,于第21天生物量达到最大,为6.95 g/L.未经诱导处理的茅苍术悬浮细胞中仅检出β-桉叶醇,其在培养21 d的细胞中的量达到最大,为17.469μg/g.添加2种内生真菌(分别属于小克银汉霉属和孔球孢霉属,编号为AL4和AL12)的粗诱导子对茅苍术悬浮细胞生物量及挥发油积累均有影响,其中AL4粗诱导子综合效果更好.添加AL4粗诱导子到14 d的茅苍术悬浮细胞培养基中,诱导子质量浓度为每升培养基含糖20 mg,诱导处理7 d后收集细胞,发现其干质量比同期对照提高3.31%,且检出细胞中苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇和苍术素的干质量分别达到14.715、28.395、38.794、8.310μg/g.其中β-桉叶醇的量是对照的2.22倍.结论 添加内生真菌诱导子对茅苍术悬浮细胞的生长及挥发油积累均有促进作用.     

四种内生真菌对金线莲无菌苗生长及多糖含量的影响

 目的　研究离体培养时 4种菌根真菌对金线莲生长及多糖含量的影响。方法　纯培养的菌根真菌分别与金线莲无菌苗共生培养 ,观测对金线莲生长和多糖含量的影响。结果　与对照相比 ,接菌根真菌MF1 5菌可使每瓶金线莲干重提高29.3%(P <0.05) ,MF23可使其提高49.5 %(P <0.01);MF18显著增加了金线莲气生根数量达42.9%(P <0.01);4种真菌对金线莲基生根的数量均无显著影响 ;MF15,MF18,MF23和MF24种真菌均可提高金线莲的多糖含量,分别提高93.5%,100%,89.7%和55.1%。结论在离体培养条件下,选择适当的真菌与金线莲共生培养能促进金线莲的生长 ,提高多糖的含量。     

混合接种丛枝菌根真菌对木香幼苗生长及化学成分的影响

目的:探讨丛枝菌根(AM)真菌混合接种的协同作用对木香幼苗的生长、生理生化特性、根生物量及萜类成分积累的影响,为优势互补效应菌根真菌的组合配置应用提供参考。方法:采用室温盆栽接种实验,通过不同菌株的结合,以不接种为对照,测定不同AM真菌结合接种处理对木香幼苗的根系菌根侵染率、植株生长与生理生化特性、根生物量及木香烃内酯、去氢木香内酯含量的影响。结果:供试AM真菌能与木香根系形成良好菌根共生体,菌根共生体系的形成后可增加木香叶片的叶绿素含量,提高过氧化氢酶(CAT),过氧化物酶(POD),超氧化物歧化酶(SOD)的酶活性,降低丙二醛(MDA)含量。与空白CK组相比,AM真菌处理组能显著促进木香烃内酯、去氢木香内酯含量的积累,木香幼苗共生栽培过程中显著促进其代谢产物木香烃内酯、去氢木香内酯向根中累积,间接提高了木香的入药品质和木香内酯产量。结论:接种外源性AM真菌可提高木香根系菌根生活力,增加对营养物质的吸收,促进木香营养生长。在人工栽培中,S2,S4,S5混合接种处理组的菌根效应最佳,木香生长和药用品质达到最优,为木香菌根生物技术的应用推广提供了技术支撑。     

川产道地药材姜黄、郁金新品种“川姜黄1号”选育研究

采用系统选育方法,选育高产优质的姜黄新品种"川姜黄1号"。2014—2015年在双流、崇州、温江开展连续2年多点试验,对其生物学性状、物候期、农艺性状、产量和品质等指标进行综合考评。结果表明,"川姜黄1号"与当地对照比较,姜黄(根茎)平均增产20.61%,挥发油平均高出24.17%,姜黄素含量平均提高26.62%;郁金(块根)平均增产54.59%,挥发油平均高出36.28%,总姜黄素含量平均提高25.31%。"川姜黄1号"与"黄丝郁金1号"相比,姜黄(根茎)平均增产123.68%,挥发油平均提高7.69%,姜黄素含量平均高出58.23%;郁金(块根)挥发油平均提高52.82%,总姜黄素含量平均高出38.34%。新品种"川姜黄1号"与当地对照相比具有较好的丰产性,且所产姜黄、郁金的内在品质均较优;与"黄丝郁金1号"相比其所产姜黄的产量明显增加,并且姜黄、郁金的内在品质优,尤其是姜黄的姜黄素及郁金的总姜黄素含量显著高于"黄丝郁金1号"。"川姜黄1号"产量高、内在品质优,稳定性好、适应性强,适宜在成都金马河流域的双流、崇州、温江等地栽培推广。     

药用植物苍术内生菌的研究进展及展望

药用植物内生菌对宿主的生长发育和品质形成具有重要的促进作用。因此,该文对药用植物苍术内生菌的相关研究进行了综述。根据前人的研究结果发现,苍术具有丰富多样的内生真菌、细菌和放线菌资源,其中的有益菌对苍术的生长发育具有积极的促进作用。苍术的挥发油与内生菌之间存在紧密的相互作用关系,不同内生菌对苍术挥发油的组成和含量具有不同的调节作用,可能在苍术的品质形成过程中发挥重要作用。然而,通过传统培养分离方法获得的苍术内生菌群信息不足以反映苍术内生菌的真实情况,而且有关不同化学型及不同产地的苍术内生菌群研究较少,不利于苍术与内生菌之间生态学关系的研究,限制了苍术内生菌资源的有效开发和利用。因此,该文对未来苍术内生菌的研究方向提出可行性建议:(1)利用高通量测序技术与传统培养分离相结合的方法挖掘苍术核心内生菌资源;(2)探究苍术内生菌多样性与化学型之间的关系;(3)加强内生菌在苍术栽培中的应用,为提高苍术的栽培效率和品质提供科学指导。     

1株选择性降解茅苍术挥发油内生真菌的筛选与鉴定

目的:从茅苍术Atractylodes lancea根中分离内生真菌,筛选能选择性降解转化茅苍术挥发油的菌株,实现内生真菌对茅苍术挥发油主要成分的转化作用.方法:利用微生物体外转化方法,通过气相色谱追踪挥发油变化,筛选出能选择性利用挥发油的内生真菌.通过单因素试验研究碳源、转速、装液量、初始pH和植物组织添加对内生真菌降解的影响,并选取对降解影响较大的因素进行正交试验.结果:筛选到的内生真菌ALG-13可以选择性利用挥发油,改变了挥发油主要成分相对百分比.总体表现为苍术酮和苍术素增加,β-桉叶醇和茅术醇含量减少.经过真菌选择性降解后,挥发油组分更加接近道地茅苍术的挥发油组成.ALG-13基于形态特征、ITS序列系统学分析,确定为生赤壳属真菌Bionectria ochroleuca.最优降解条件为200 r·min-1,pH4.5,250 mL装液量为50 mL、蔗糖为碳源.结论:内生真菌ALG-13可以选择性降解挥发油,使挥发油组分接近道地药材.     

内生真菌对台湾金线莲栽培及酶活性的影响

目的 :研究在野外盆栽条件下内生真菌对台湾金线莲的影响。方法 :组培苗移栽 1年后收获 ,统计成活率 ,称鲜重和干重 ,同时测定几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶活性。 结果 :接菌的台湾金线莲成活率达 100 %。对台湾金线莲鲜重的增加有极显著差异 ,对干重的增加有显著差异 ,且接菌后 4种酶活性均高于对照组。结论 :在台湾金线莲的家栽过程中可利用内生真菌提高成活率。     

4种内生真菌对金钗石斛无菌苗生长及其多糖和总生物碱含量的影响

目的 :研究离体培养时 4种菌根真菌对金钗石斛生长及化学成分含量的影响。方法 :利用纯培养的菌根真菌分别与金钗石斛无菌苗共生培养 ,观测它们对金钗石斛生长及其多糖和总生物碱含量的影响。结果 :与对照相比 ,Mycena sp. (MF2 3 )极显著降低了金钗石斛鲜重的 2 4.9% (P<0 .0 1) ;所有实验菌株对金钗石斛干重均无显著性影响 ;Epulorhiza sp. (MF18)和MF2 3显著提高了金钗石斛的折干率 (P<0.0 5) ,Mycena sp. (MF2 4)极显著提高了金钗石斛的折干率 (P<0. 0 1) ,分别最多提高了 51.3 % ,43 8%和 63. 3 % ;Epulorhizasp (MF15)和MF2 4比对照极显著增加了金钗石斛气生根数量的 4.25倍和 4.13倍 (P<0 .0 1) ;MF2 3极显著减少了金钗石斛基生根数量的46.5% (P<0. 0 1) ;MF15,MF18,MF2 3和MF2 4分别可使金钗石斛多糖含量提高 153 .4% ,52. 1% ,18.5% ,76.7% ;MF2 3使金钗石斛总生物碱含量提高 18.3 %。结论 :在离体培养条件下 ,内生真菌与金钗石斛共生培养能影响金钗石斛的生长和总生物碱的含量 ,提高多糖的含量。     

芍药花瓣与被斑蝥采食花瓣挥发性成分GC-MS分析

目的:野生芍药花瓣与被斑蝥采食花瓣挥发性成分比较分析。方法:采用水蒸气蒸馏法提取芍药干燥花瓣挥发油,石油醚浸出法提取新鲜花瓣挥发性物质,GC-MS分析、鉴定其化学成分。结果:斑蝥咬食的干燥花瓣挥发油的得率较未被咬食的有明显增高,分别为0.13%和0.06%(mL·g-1),斑蝥的采食对芍药花瓣的挥发性成分组分影响不大,但是其相对含量会有所变化。从芍药干燥和新鲜花瓣挥发性物质中分别鉴定出34种和19种化学成分。新鲜花瓣含有更多的分子量小的芳香成分,如苯甲醛,苯乙醛,苯乙醇等。结论:斑蝥的采食对芍药花瓣的挥发性成分总量和各组分的相对含量有影响。干燥花瓣和新鲜花瓣的的主要成分变化较大。     

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??OBJECTIVE To provide the scientific basis for the application of mycorrhizal fungi in Dendrobium officinale artificial cultivation. METHODS The dominant strain was screened in a planting base by using biomass as the index. The effects of initial inoculums and supplementary inoculation on the growth and the chemical composition of D. officinale were further investigated. RESULTS Mycorrhizal fungi M2(Mycena sp.) was found to be the advantageous strain. After 16 months of growth, the stem dry weight(SDW) and plant dry weight(PDW) of the three M2-treatment groups were significantly higher than those of CK, and the SDW of group M(M2 initial inoculums of 1.0 g??clump^-1) was the highest, which increased by 39.2% and 11.1% compared with CK and group L(M2 initial inoculums of 1.0 g??clump^-1)(P<0.05), respectively. Furthermore, M2 had no effect on the chemical properties of stem polysaccharide, and could improve the contents of naringenin and bibenzyls in the stems. The supplementary inoculation of M2 enhanced the plant-growth-promoting effects of M2. The SDW of the supplementary group increased by 18.0%(P<0.05) compared with the non-supplementary group, while supplementary inoculation had a certain effect on the chemical properties of polysaccharide. CONCLUSION Mycorrhizal fungus M2 has good application prospects for D. officinale artificial cultivation.     

白及内生真菌的分离鉴定及其胞外多糖的抗氧化活性分析

目的:缓解白及药用资源压力,分离鉴定白及内生真菌并进行内生真菌胞外多糖活性强弱研究。方法:分离鉴定白及内生真菌,进行液体发酵培养获得胞外多糖,通过建立铁氰化钾法,2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)法,水杨酸法,2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)法4种体外模型研究白及内生真菌胞外多糖的抗氧化活性。结果:从白及新鲜根中分离得到10株内生真菌,鉴定合并菌株后得到6株不同的菌株,其中10号菌株胞外多糖(0.1 g·L-1)总还原力最强,其维生素C(VC)当量高达12.01 mg·L-1,其次为6号菌株;清除DPPH自由基活性最强的为1号和6号菌株为16.6%;6号菌株清除羟基自由基活性最强为21.6%,最弱的为10号菌株仅为11.0%;测定其清除ABTS自由基活性时则发现,10号菌株活性最强为13.6%,其次为6号菌株,最弱的为5号仅为1.8%。结论:白及内生真菌胞外多糖具有一定的抗氧化活性,其中6号菌株胞外多糖总还原力,清除DPPH自由基活性,清除羟基自由基活性、清除ABTS自由基均较好,可以加以开发和利用。     

药用植物三尖杉内生真菌的分离鉴定及抗菌活性

目的：研究药用植物三尖杉Cephalotaxus fortunei内生真菌的分离鉴定及抗菌活性。方法：用组织培养方法从野生三尖杉的根、茎、叶中分离内生真菌,采用滤纸片扩散法对分离得到的内生真菌的代谢产物做抑菌活性研究。结果：分别从三尖杉根、茎、叶中共分离得到30株内生真菌;抑菌活性研究显示,有20株内生真菌的代谢产物至少对1种靶标菌有抑制活性,占总分离菌株的66.7%,其中菌株CFEF013对所有靶标菌均有抑制作用;经形态学和分子生物学鉴定,对7株具有较强抑菌活性的菌株分属镰孢菌属Fusarium 4株,壳囊孢属Cytospora 1株,拟盘多毛孢属Pestalotiopsis 1株,毛霉菌属Mucor 1株。结论：药用植物三尖杉内生真菌种类具有一定的多样性,内生真菌代谢产物抑菌活性良好。     

内生真菌对福建金线莲栽培及酶活性的影响

 目的研究在野外盆栽条件下内生真菌AR-18对福建金线莲(Anoectochilus roxburghii)生长发育的影响。方法福建金线莲组培苗接菌移栽于草炭土或蛭石基质中,1年后收获,观察苗的生长势,统计成活率,称鲜重和干重,同时测定β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶活性。结果在草炭土和蛭石基质上,接菌的福建金线莲苗成活率均达100%;真菌对福建金线莲鲜重的增加有极显著促进作用(P<0.01),分别为对照组的1.77和1.83倍;真菌对福建金线莲干重的增加有显著促进作用(P<0.05),分别为对照组的1.13和1.28倍。接菌后4种酶活性均高于对照组。结论在福建金线莲的家栽过程中可利用内生真菌提高成活率和产量。     

稀土对灵芝生长影响的初步研究

 目的：研究在灵芝培养料中添加稀土元素对灵芝的菌丝生长、子实体的鲜重和干重的影响。方法：采用稀土拌料的方法。结果：稀土的浓度对灵芝菌丝的生长均有一定程度的抑制作用,抑制率在7.49％～10.96％之间;稀土浓度对灵芝的菌丝均有增白作用,洁白度随稀土浓度的增加而降低。稀土在100,150μg·g^-1时,灵芝子实体的干重和鲜重有显著增加。在50μg·g^-1时,虽灵芝子实体的鲜重有所减少,但其干重却增加2.0％。结论：稀土浓度在100～150μg·g^-1时,灵芝的产量增加显著,可供生产使用。