组织皮瓣移植在口腔及颌面部恶性肿瘤术后修复中的应用

从1986年3月～1995年5月,头颈外科应用前臂游离皮瓣及岛状胸大肌肌皮瓣修复口腔及颌面部恶性肿瘤大面积切除后组织缺损50例(52次手术)。男性36例,女性14例。鳞状细胞癌43例,腺癌7例,前臂游离皮瓣重建舌5例,颊粘膜3例,腮腺癌切除后皮肤缺损4例,岛状胸大肌肌皮瓣修复口底及舌15例,牙龈4例,扁桃体癌术后3例,眼睑癌侵及眶内切除1例。50例中47例成功占94％,其中三年生存率62.9％(22/35),五年生存率36.4％(8/22)。     

GLUT1在口腔鳞状细胞癌组织中的表达和意义

目的 探讨GLUT1表达与口腔鳞状细胞癌发生、发展及其生物学行为的关系.方法 应用免疫组化S-P法检测52例口腔鳞状细胞癌组织及其癌旁不典型增生组织、切缘正常黏膜组织中GLUT1的表达.结果 免疫组化阳性信号定位于细胞膜中,GLUT1在口腔鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常口腔黏膜组织中的阳性表达率分别为88.46%、54.84%和19.23%,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 GLUT1可能参与了口腔鳞状细胞癌的发生和发展过程.     

口腔鳞状细胞癌组织中survivin、IL-24的表达及意义

目的 探讨口腔鳞状细胞癌组织中survivin、IL-24的表达及意义.方法 选取口腔鳞状细胞癌组织65例,同时选取口腔扁平苔藓组织40例、正常口腔黏膜组织33例,采用免疫组化染色法检测survivin、IL-24表达.结果 口腔鳞状细胞癌组织survivin阳性表达率为58.46％,明显高于正常口腔黏膜组织和口腔扁平...     

VacA基因与口腔鳞癌组织中VEGF表达的相关性分析

目的:检测口腔鳞状细胞癌组织中是否存在幽门螺杆菌毒力因子VacA基因以及与VEGF表达的相关性,探讨幽门螺杆菌与口腔鳞状细胞癌的关系.方法:采用聚合酶链反应检测40例口腔鳞状细胞癌组织和23例正常黏膜组织中VacA基因的阳性率,采用免疫组化染色检测VEGF的表达情况,并比较口腔鳞状细胞癌组织VacA基因阳性组和阴性组中...     

P16和survivin蛋白在口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌组织中的表达

目的 探讨P16和survivin蛋白在口腔扁平苔藓(OLP)及口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达意义.方法 采用免疫组化S-P法检测正常口腔黏膜、OLP及OSCC组织中P16和survivin蛋白的表达.结果 P16蛋白在正常口腔黏膜、OLP及OSCC组织中的阳性表达率分别为80.00％、52.63％和21.05...     

口腔鳞状细胞癌中TSLC1基因启动子甲基化状态检测的临床意义

目的:探讨肺癌抑癌基因1(TSLC1)在口腔鳞状细胞癌组织中基因启动子甲基化状态及其与临床病理参数的联系.方法:应用甲基化特异性PCR检测TSLC1基因启动子在55例口腔鳞状细胞癌组织及10例正常组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析.结果:在癌组织中TSLC1基因甲基化阳性率为76.4％(42/55),正常组织未出现TSLC1基因甲基化.TSLC1基因甲基化与口腔鳞状细胞癌临床分期显著相关(P=0.008).结论:TSLC1基因甲基化与口腔鳞状细胞癌临床分期密切相关,可能是参与口腔鳞状细胞癌发展的重要分子事件.     

MEK抑制剂显著增强EGFR CAR-T细胞对口腔鳞癌的抗肿瘤活性

目的:构建靶向表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的二代嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）-T细胞,以探索MEK抑制剂联合EGFR CAR-T细胞是否可以对口腔鳞癌产生显著的抗肿瘤活性。方法:免疫组化法检测口腔鳞癌患者癌和癌旁组织中EGFR的表达;流式细胞术检测口腔鳞癌细胞系中EGFR的表达;慢病毒感染法构建EGFR CAR-T细胞;生物发光法检测EGFR CAR-T细胞联合MEKi对靶细胞的杀伤活性;流式细胞术检测共孵育后效靶细胞的占比情况;活体成像监测小鼠肿瘤的生长;免疫组化法检测小鼠肿瘤组织中CD3的表达;ELISA法检测肿瘤组织中IFN-γ和GrmB的含量。结果:人口腔鳞癌组织较癌旁组织EGFR显著高表达,大部分口腔鳞癌细胞系高表达EGFR。联合MEKi在短时间的共孵育中并不能显著增强EGFR CAR-T细胞对肿瘤细胞系的杀伤活性,但在较长时间的共孵育后,联合MEKi显著增强EGFR CAR-T细胞的增殖（P＜0.01）和对肿瘤细胞的细胞毒性（P＜0.001）。体内实验也表明,联合MEKi较单独使用EGFR CAR-T细胞而言对肿瘤抑制能力更强（P＜0.01）,肿瘤组织中CD3+T细胞的浸润更多（P＜0.001）,肿瘤部位细胞因子IFN-γ（P＜0.001）和GrmB（P＜0.001）的含量也更高。结论:联合MEKi可以在体内外条件下显著增强EGFR CAR-T细胞的抗肿瘤活性,有望成为针对口腔鳞癌的潜在治疗策略。     

口腔鳞癌组织中HSP70基因mRNA的表达及其意义

目的检测HSP70基因的信使RNA在不同分化口腔鳞癌中的表达,以探讨其在口腔鳞状细胞癌组织中表达的意义。方法用半定量RT-PCR方法检测30例口腔鳞状细胞癌和20例正常口腔黏膜中HSP70基因mRNA的表达,并分析HSP70基因mRNA表达量与临床病理特征的关系。结果 HSP70基因mRNA在高、中、低分化口腔鳞状细胞癌及正常组织中的灰度平均值为1.07±0.04,1.21±0.05,1.36±0.03;正常口腔黏膜上皮HSP70 mRNA的灰度平均值为0.95±0.15,表达低于口腔鳞状细胞癌组织,两者之间的差异具有显著性,高中低分化的口腔鳞状细胞癌两两比较,均有统计学差异。结论 HSP70基因表达与口腔鳞状细胞癌发生发展呈正相关关系,这对诊断口腔鳞状细胞癌有重要意义。但是HSP70的mRNA低表达则不能完全当作是口腔鳞状细胞癌中的早期事件。     

口腔鳞状细胞癌及癌旁组织中抑癌基因PTEN mRNA表达的定量研究

目的定量研究蛋白酪氨酸磷酸酶（PTEN）mRNA在口腔鳞状细胞癌及对应癌旁正常组织中的表达。了解PTEN基因的表达与口腔癌发生、发展的关系。材料和方法应用实时荧光定量PCR方法检测42例口腔鳞状细胞癌及对应癌旁正常组织中PTENmRNA的表达,Rotor-Gene Real-TimePCRAnalysisSoftware6．0软件进行mRNA定量分析,在SPSS14．0统计软件平台上用配对t检验方法统计检验。结果42例口腔鳞状细胞癌和对应癌旁正常组织中均有PTENmRNA表达。口腔鳞状细胞癌组织中PTENmRNA表达量[1．10±0．13（10gPTEN／logβ-actin）]低于相应癌旁正常组织（1．48±0．28）,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论口腔鳞状细胞癌的发生与PTENmRNA表达水平降低有一定关系。     

半乳糖凝集素-9和T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨半乳糖凝集素-9(Galectin-9)和T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM3)在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法收集42例口腔扁平苔藓组织、25例口腔鳞状细胞癌组织及30例正常口腔黏膜组织,采用免疫组织化学染色法检测3种组织中Galectin-9和TIM3的表达情况,分析Galectin-9和TIM3表达情况与口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌患者临床特征的关系,采用Pearson相关分析法分析口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌患者中Galectin-9和TIM3表达的相关性。结果口腔鳞状细胞癌组织中Galectin-9的阳性表达率低于口腔扁平苔藓组织和正常口腔黏膜组织,TIM3的阳性表达率高于正常口腔黏膜组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05);口腔扁平苔藓组织中Galectin-9的阳性表达率低于正常口腔黏膜组织,TIM3的阳性表达率高于正常口腔黏膜组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。糜烂型口腔扁平苔藓患者口腔扁平苔藓组织中Galectin-9的阳性表达率低于非糜烂型口腔扁平苔藓患者,TIM3的阳性表达率高于非糜烂型口腔扁平苔藓患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同分化程度、淋巴结转移情况口腔鳞状细胞癌患者口腔鳞状细胞癌组织中Galectin-9的表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);不同分化程度口腔鳞状细胞癌患者口腔鳞状细胞癌组织中TIM3的表达情况比较,差异有统计学意义(P﹤0.05)。Pearson相关分析结果显示,口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌患者中Galectin-9和TIM3的表达均呈负相关(r=-0.415、-0.437,P﹤0.01)。结论Galectin-9和TIM3可能参与口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌的发生发展,并可能与口腔扁平苔藓的癌变有关。     

口腔癌、癌前病变及癌前状态中抑癌基因PTEN的表达及其临床意义的研究

目的研究PTEN蛋白在口腔鳞状细胞癌、癌前病变及癌前状态组织中的表达及其与口腔鳞状细胞癌的临床病理及预后的关系。了解PTEN蛋白表达在口腔癌发生、发展中的作用。方法免疫组织化学法检测10例正常口腔粘膜、14例口腔扁平苔癣、20例口腔白斑、30例癌旁组织及46例口腔鳞状细胞癌组织中PTEN蛋白的表达水平,并进行半定量分析。结果正常口腔粘膜、口腔扁平苔癣、口腔白斑、癌旁组织及鳞状细胞癌组织中PTEN蛋白表达总阳性率分别为70．00％（7／10）、57．14％（8／14）、45．00％（9／20）、73．3％（22／30）及19．57％（9／46）。口腔白斑、扁平苔癣及鳞状细胞癌组织中VrEN蛋白表达水平显著低于正常口腔粘膜（P〈0．05）。口腔鳞状细胞癌组织中PTEN蛋白表达水平显著低于患者自身癌旁组织（P〈0．01）。结论PTEN蛋白表达水平降低或缺失在口腔鳞状细胞癌的发生发展过程中可能起重要作用。免疫组织化学法检测PTEN蛋白的表达对口腔癌早期诊断和预后判断的价值有待进一步研究。     

口腔鳞状细胞癌中肿瘤干细胞分离和鉴定的方法研究进展

摘 要：口腔鳞状细胞癌是最常见的头颈部恶性肿瘤之一,复发率高,容易远处转移,对治疗不敏感,严重威胁人类健康。当前临床肿瘤免疫治疗不能有效清除缺乏分化抗原表位的肿瘤干细胞,需要灵敏而又特异的标记物来鉴定肿瘤干细胞。目前,从口腔鳞状细胞癌组织中分离肿瘤干细胞的方法主要有基于细胞表面标志的分离法和侧群细胞分离法。鉴定口腔鳞状细胞癌中肿瘤干细胞的方法包括体外细胞成球实验和体内致瘤能力的鉴定。对口腔鳞状细胞癌中肿瘤干细胞分离和鉴定方法的研究将为研发抗肿瘤干细胞疫苗提供理论基础和实验依据,从而为口腔鳞状细胞癌患者开辟新的免疫治疗途径。     

CD44V在口腔鳞状细胞癌患者外周血及癌组织表达的研究

目的:研究口腔鳞状细胞癌患者外周血可溶性CD44V的含量及口腔鳞癌组织中CD44v5、CD44v7的表达。方法:采用酶联免疫吸附试验检测39例口腔鳞状细胞癌患者术前外周血及30例健康成人外周血中可溶性CD44V含量;采用免疫组织化学方法测定同一口腔鳞状细胞癌患者口腔鳞癌组织中CD44v5、CD44v7的表达。结果:39例口腔鳞状细胞癌患者外周血可溶性CD44V的含量明显低于正常对照组,两者有统计学差异(P<0.05)。11例发生淋巴结转移的口腔鳞状细胞癌,其原发灶与转移灶(淋巴结)内CD44v5、CD44v7的表达水平均有统计学差异(P<0.05),且原发灶高于转移灶。同一口腔鳞状细胞癌患者术前外周血可溶性CD44V含量水平与口腔鳞癌组织中CD44v5、CD44v7的表达强度均未见相关性。结论:外周血中可溶性CD44V的含量水平对于口腔鳞状细胞癌的诊断可能具有参考价值;CD44v5、CD44v7的表达与口腔鳞状细胞癌的转移有一定的相关性。     

诱导型一氧化氮合酶和p53蛋白在口腔癌前病变及口腔鳞癌中的表达及相互关系

一氧化氮（NO）是人体内细胞间信息传递的重要调节因子，在体内由一氧化氮合酶（NOS）催化生成。NOS有三种异构酶：神经型（nNOS）、上皮型（eNOS）和诱导型（iNOS）。研究表明NOS特别是iNOS在一些肿瘤如：乳腺癌、胃癌、子宫癌等组织中的表达高于正常组织，且NO与肿瘤的生长有关[１]，但确切机制尚不清楚。p５３是一种重要的抑癌基因，研究发现正常细胞及一些肿瘤中野生型p５３可以降低iNOS表达[２]，但口腔肿瘤中少有报道。本文即是利用免疫组化技术检测口腔鳞癌发展过程中iNOS和p５３蛋白的表达，并分析二者关系及其意义。…     

颊脂垫瓣在口腔黏膜癌术后缺损修复中的应用

目的研究颊脂垫瓣在口腔恶性肿瘤切除后组织缺损修复中的应用效果。方法总结15例应用颊脂垫瓣修复口腔恶性肿瘤切除后组织缺损临床资料，观察颊脂垫瓣的愈合过程及修复效果。结果所有患者颊脂垫瓣成活愈合良好，术后1周颊脂垫瓣明显水肿，组织瓣表面有薄层伪膜覆盖，1周后伪膜逐渐消失，2周后伪膜完全消失，2～3周后水肿明显消退，颊脂垫表面逐渐上皮化，2～3个月再生的粘膜变得光滑，呈粉红色，与正常口腔粘膜类似。结论颊脂垫瓣为修复口腔恶性肿瘤缺损提供了一种良好的手段，值得临床推广。     

胸大肌肌皮瓣修复口腔口咽癌手术后组织缺损

目的：总结胸大肌岛状肌皮瓣应用于口腔口咽癌手术所致大型组织缺损的体会及其应用价值。方法： 对51例因口腔癌或口咽癌手术治疗导致口腔颌面大型组织缺损的患者均选用胸大肌岛状肌皮瓣同期整复。结果： 51例胸大肌肌皮瓣中43例完全成活, 1例肌皮瓣皮肤完全坏死, 7例远心端部分皮肤坏死。所有组织缺损, 伤口愈合, 患者术后语音和吞咽功能得到修复。结论： 胸大肌肌皮瓣解剖变异较小, 血供可靠, 皮瓣制作简便安全, 组织量大, 是同期整复口腔颌面部大型组织缺损合适材料。     

105例口腔颌面部外非何杰金氏恶性淋巴瘤的临床病理和免疫组化的研究

本文对１０５例口腔颌面部结外ＮＨＬ进行了临床病理分析，其中２９例作了免疫组化（ＡＢＣ法）研究。１０５例中男性７６例，女性２９例，平均年龄４４．２岁。发病部位最多为牙龈２１例（２０％）和腮腺２０例（１９．１％）。组织学类型：Ｂ细胞来源者７４例（７０．５％），Ｔ细胞来源者２９例（２７．６％）。随访结果提示，组织类型和治疗方法和预后有关。     

冷冻切片标本PALM显微切割系统提取高质量RNA的可行性研究

目的:探讨应用PALM激光微光束显微切割系统从组织中获取单一细胞成分的可行性.方法:手术切除标本经OCT包埋后制成冷冻切片,经HE染色后,利用PALM激光微光束显微切割系统分离并收集靶细胞.采用Agilent Bioanalyzer 2100的Pico-chip对靶细胞RNA的质量进行鉴定.结果:常规下每例标本制备8～10张冷冻切片,可获取20 000～30 000个靶细胞.RNA总量约为50 ng.Agilent Bioanalyzer 2100图谱显示,RNA的完整性得到了很好的保存.结论:采用PALM激光微光束显微切割系统可以成功地从冷冻切片组织中分离单一细胞,并提取高质量的RNA.该系统操作具有快捷、准确的特点,是当前解决组织中细胞异质性的良好方法.     

AJUBA在口腔鳞癌中的表达和意义及其相关机制

  目的  探讨AJUBA (ajuba LIM protein)基因在口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及其对OSCC细胞增殖、迁移能力的影响。  方法  采用qPCR和免疫组织化学方法检测OSCC和癌旁组织中AJUBA的表达情况,分析AJUBA与OSCC临床病理参数之间的关系。通过MTT实验、划痕实验及Transwell实验探究AJUBA对OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。West-ern blot法检测AJUBA对OSCC细胞Snail/E-cadherin信号通路相关蛋白表达的影响。  结果  AJUBA在OSCC组织中显著高表达,与T分期、肿瘤分化、淋巴结转移和复发相关(P < 0.05),且其表达提示不良预后。敲降AJUBA后,OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力受到抑制。Western blot结果显示AJUBA能够促进Snail的表达,抑制E-cadherin的表达。  结论  AJUBA在OSCC组织中高表达,可能通过Snail/E-cadherin信号通路参与OSCC的增殖和侵袭。      

口腔鳞状细胞癌中SOCS3及其DNA甲基化的表达及生物学意义

  目的  研究口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)的DNA甲基化及蛋白表达水平, 探讨其在OSCC发生、发展、浸润和转移中的作用。  方法  采用甲基化特异性焦磷酸测序技术(Pyrosequencing)和Western blot法分别检测100例口腔鳞状细胞癌组织中SOCS3的DNA甲基化及蛋白表达水平, 并与20例正常口腔黏膜组织进行对照研究, 分析其与OSCC临床病理参数的关系。  结果  1) OSCC组织SOCS3 DNA甲基化的阳性率为85%, 显著高于正常口腔黏膜组织的20%(P < 0.05);2)OSCC组织中SOCS3蛋白表达(1.76±0.12)明显低于正常口腔黏膜组(1.93±0.25), 差异有统计学意义(P < 0.01)。口腔鳞状细胞癌组织中甲基化组SOCS3蛋白表达(1.72±0.21)显著低于非甲基化组(1.92±0.23), 差异有统计学意义(P < 0.01);3)在TNM分期中Ⅲ期组表达均低于Ⅰ~Ⅱ期组(P < 0.05), 伴有淋巴结转移组表达也低于无淋巴结转移组(P < 0.05);4)口腔鳞状细胞癌组织中SOCS3蛋白表达水平与肿瘤分化级别呈正相关(r=0.416, P < 0.05), 与TNM分期、淋巴结转移呈负相关(r=-0.357, P < 0.05)。  结论  口腔鳞状细胞癌组织中SOCS3 DNA甲基化阳性率高, 导致SOCS3基因表达下调, 与口腔鳞状细胞癌的分化、浸润和转移密切相关。