EMT介导口腔鳞癌淋巴结转移及其机制研究

  目的  探讨EMT在口腔鳞癌淋巴结转移中的作用及其调控机制。   方法  应用免疫组织化学SP法检测CXCR4及EMT相关因子在60例口腔鳞癌中的的表达,应用χ2或Fisher确切概率法分析各指标与口腔鳞癌患者临床病理资料的关系、Spearman相关性分析CXCR4与EMT相关因子的相关性。   结果   χ2或Fisher确切概率法检验显示CXCR4、β-catenin、E-cadherin、N-cadherin、Twist、Snail在淋巴结转组与非淋巴结转移组中表达的差异有统计学意义（P < 0.05）,且CXCR4与分化程度有关,β-catenin与分化程度及T分期有关,E-cadherin与原发部位及分化程度有关,Twist与分化程度有关（P < 0.05）。Spearman分析显示β-catenin的表达与CXCR4呈负相关,相关系数为-0.497;Snail、Twist、N-cadherin的表达与CXCR4呈正相关,相关系数分别为0.256、0.300、0.333（P < 0.05）。   结论   提示EMT在口腔鳞癌的淋巴结转移过程中发挥重要作用,CXCL12/CXCR4生物学轴可能作用于EMT的某个环节,并调控其发生      

E-cadherin和β-catenin在食管鳞癌组织中的表达及其临床病理学意义

背景与目的:上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)不仅在介导钙离子依赖的同型细胞间的黏附中发挥作用,而且在细胞的迁徙和肿瘤浸润转移方面也有着重要的作用.许多研究表明,E-cadherin是作为一种抑癌基因发挥作用的.而最近研究表明,和E-cadherin相反,β-连环蛋白(β-catenin)在促进肿瘤的浸润转移方面具有重要作用.本研究重点探讨E-cadherin和β-catenin在食管鳞癌组织中的表达及其临床病理意义.方法:采用免疫组织化学PV法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中E-cadherin和β-catenin的蛋白表达.结果:(1)正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中E-cadherin的阳性表达率依次降低,分别为95.2%、71.0%、40.3%;随着正常食管黏膜组织向癌组织的转化,β-catenin的膜表达阳性率依次降低,而胞质表达阳性率则依次增高,在低分化癌组织中甚至出现了核表达;E-cadherin的阴性表达率及β-catenin的胞质阳性表达率与食管鳞癌的浸润深度、分化程度及淋巴结转移密切相关(P＜0.05).(2)E-cadherin和β-catenin在食管鳞癌组织中的表达呈负相关(r=-0.453,P＜0.05).结论:食管鳞癌组织中E-cadherin的低表达及β-catenin的胞质高表达与食管鳞癌的浸润、转移有密切的关系.     

HIP1影响食管鳞癌Akt/GSK3β信号通路及EMT相关蛋白表达分析

摘 要：［目的］ 探讨亨廷顿蛋白相互作用蛋白1（huntingtin interacting protein 1，HIP1）促进食管鳞癌转移的作用及机制。［方法］采用qRT-PCR及Western blot检测Akt抑制剂处理HIP1高或低表达食管鳞癌细胞系中HIP1、GSK3β及EMT标志性分子E-cadherin和Vimentin的表达。采用IHC检测食管鳞癌组织样本中目的分子的表达，并分析其表达相关性。［结果］ qRT-PCR和Western blot结果显示：与对照组、shRNA-对照组相比，shRNA-HIP1组细胞中Akt、GSK3β及Vimentin基因和蛋白表达显著降低（P<0.001），E-cadherin基因和蛋白表达显著升高（P<0.001）；与对照组、OE-对照组相比，OE-HIP1组细胞中Akt、GSK3β及Vimentin基因和蛋白表达显著升高（P<0.001），E-cadherin基因和蛋白表达显著降低（P<0.001）。IHC及相关性分析结果显示，HIP1与GSK3β、Vimentin表达呈正相关（r=0.336，P<0.001；r=0.561，P<0.001），与E-Cadherin表达呈负相关（r=-0.169，P=0.027）；GSK3β与Vimentin表达呈正相关（r=0.317，P<0.001），与E-Cadherin表达呈负相关（r=-0.171，P=0.025）。Akt抑制剂处理HIP1高或低表达食管鳞癌细胞系结果显示，Akt抑制剂处理后E-cadherin表达升高，GSK3β及Vimentin表达降低。［结论］HIP1 可能通过激活Akt/GSK3β信号通路促进食管鳞癌EMT的发生。     

上皮-间叶转变相关蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其预后意义

背景与目的:非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者最主要的死亡原因是手术后肿瘤转移,而上皮-间叶转变(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)是肿瘤发生侵袭、转移的重要原因.本研究探讨EMT相关蛋白Snail、Vimentin、E-cadherin和B-catenin在NSCLC患者中的表达及其预后意义.方法:采用组织芯片技术和免疫组织化学EnvVision两步法检测Snail、Vimentin、E-cadherin和β-catenin蛋白在165例NSCLC患者中的表达情况.根据免疫组织化学结果对NSCLC患者分组,分析Snail、Vimentin、E-cadherin和β-catenin蛋白在判断患者预后和生存情况中的作用.结果:165例NSCLC患者中,Snail、Vimentin、E-cadherin和β-catenin的阳性表达率分别为45.5%、33.9%、66.7%和50.9%.E-cadherin 的表达与Snail呈负相关(P＜0.001),而与β-catenin的表达呈正相关(P=0.003).Snail、Vimentin、E-cadherin/β-catenin复合体异常表达组的生存期均显著低于正常组(P=0.005 9,P=0.025 7,P=0.002 5).上述任意两个蛋白的异常表达是一个独立的预后因素(P＜0.001).结论:EMT相关蛋白Snail、Vimentin和E-cadherin/β-catenin复合体三者中的任意2种蛋白异常表达可作为判断患者预后的独立指标.     

β-catenin及c-myc在食管癌中的表达及临床病理意义

目的 探讨Wnt信号通路组件蛋白β-链接素(β-catenin)及c-myc在食管癌中的表达及临床病理意义.方法 收集手术切除食管鳞癌标本60例,取癌旁正常黏膜组织60例作为对照.采用免疫组织化学二步法检测食管癌及癌旁组织中β-catenin及c-myc的表达.结果 β-catenin在食管癌组织中主要表达在胞质,出现有胞核阳性异常表达.c-myc在食管癌组织中主要在胞质中表达,β-catenin和c-myc在食管癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织,差异均具有统计学意义(x2=32.144、24.470,均P=0.000).c-myc蛋白的表达在食管癌的淋巴结转移方面差异具有统计学意义(P＜0.05).β-catenin蛋白的表达在肿瘤分化程度和淋巴结转移方面差异具有统计学意义(均P＜0.05).3-catenin与c-myc的表达呈正相关(r=0.512,P=0.000).c-myc阳性表达者5年生存率较阴性表达者低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 作为Wnt通路的相关基因,β-catenin和c-myc可能与食管癌的发生、发展及转移有关.c-myc的高表达提示患者的预后不良,可能成为食管癌的预后指标之一.     

Cripto-1 蛋白在乳腺癌中的表达和预后意义*

目的:研究具有促进上皮间质转化作用的Cripto- 1 蛋白在乳腺癌中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学LSAB法检测205 例乳腺癌标本中Cripto- 1、E-cadherin（E-CD）及β-catenin 的表达,并分析Cripto- 1 蛋白与E-CD及β-catenin 的关系,同时分析Cripto- 1 蛋白与临床病理学特征、复发转移及生存时间的关系。结果:Cripto- 1 蛋白表达于癌细胞质,阳性表达率为82.9%（170/205）,其表达与病理组织学分期（r=0.418,P=0.000）、HER2/neu （r=0.223,P=0.001）、淋巴结转移个数（r=0.293,P=0.000）、淋巴结外软组织癌浸润（r=0.206,P=0.003）、肿瘤远处转移（r=0.273,P=0.000）呈正相关;而与ER、PR表达及年龄无明显相关性;在179例浸润性导管癌中Cripto- 1 蛋白的表达与其组织学分级（r=0.194,P=0.009）呈正相关;E-CD表达在肿瘤细胞膜,而β-catenin 除了表达在细胞膜外还表达在细胞质。Cripto- 1 的表达与E-CD呈明显负相关（r=-0.324,P=0.000）,而与β-catenin 在胞质中的表达呈明显正相关（r=0.412,P=0.000）;Mann-Whitney检验结果显示Cripto- 1 蛋白在淋巴结阳性组的表达明显高于阴性组（Z=-3.465,P=0.001）;在远处转移组的表达明显高于无远处转移组（Z=-3.899,P=0.000）;Kaplan-Meier 生存分析结果显示Cripto- 1 蛋白的表达程度与患者的生存率呈明显负相关（P<0.05）;Cox-Regression证明Cripto- 1 蛋白的表达是乳腺癌独立的预后因素（HR= 2.353）。结论:Cripto- 1 蛋白可能通过EMT 促进乳腺癌的侵袭和转移,其表达与乳腺癌的侵袭、转移密切相关,是导致预后不良的重要因素之一,可作为乳腺癌的独立预后因子。      

β-catenin在胃腺癌原发灶和转移淋巴结的表达及意义

目的：探索β-catenin在胃腺癌原发灶及转移淋巴结的表达情况,判断其是否与浸润程度相关及能否为胃癌浸润转移提供依据。方法免疫组织化学法对156例胃腺癌组织、40例对应转移淋巴结、12例正常胃黏膜组织进行β-catenin检测,分析β-catenin在胃腺癌及对应转移淋巴结的表达情况,明确β-catenin的表达与胃腺癌临床病理特征之间的关系,判断原发灶与转移淋巴结β-catenin表达有无差异性。结果β-catenin在正常胃组织细胞膜的阳性表达率为100．0％（12/12）,在胃腺癌组织细胞膜的表达率为29．5％（46/156）,在转移淋巴结细胞膜的表达率为10．0％（4/40）。β-catenin阳性表达与患者的年龄（χ2＝2．160,P＝0．142）、性别（χ2＝1．229,P＝0．268）无关,与肿瘤浸润深度（χ2＝4．032,P＝0．045）、肿瘤分化程度（χ2＝6．093,P＝0．048）、肿瘤分期（χ2＝4．591,P＝0．032）、淋巴结转移（χ2＝4．485,P＝0．034）有关;β-catenin的异常表达或表达缺失在胃腺癌转移淋巴结的发生率高于原发灶组织（χ2＝6．362,P＝0．012）。结论β-catenin可帮助判断胃腺癌恶性程度、肿瘤侵袭转移能力等生物学行为。     

EGFR及β-catenin在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）和β-连环蛋白（β-catenin）在食管鳞癌组织中的表达及临床意义。方法采用S-P免疫组化技术检测60例食管鳞癌及其相应的癌旁正常组织中EGFR和β-catenin的表达,并随访6～18个月。结果食管鳞癌组织中EGFR和β-catenin的阳性率为71．7％（43／60）、65％（39／60）,与癌旁正常组织中的阳性率18．3％（11／60）、91．7％（55／60）差异有统计学意义（P〈0．05）;EGFR和β-catenin的表达与食管鳞癌的TNM分期、分化程度、淋巴结转移、18个月生存率相关（P〈0．05）,且EGFR与癌浸润深度相关（P〈0．05）;EGFR和β-catenin表达呈负相关（r=-0．384,P〈0．01）。结论EGFR和β-catenin的表达与食管鳞癌的发生、发展及预后相关;联合检测二者在食管鳞癌组织巾的表达,可能有助于食管癌疗效和预后的判断。     

酸性富含半胱氨酸分泌型蛋白表达与食管鳞癌术后预后的相关性

目的 探讨食管鳞癌患者中酸性富含半胱氨酸分泌型蛋白（SPARC）表达与术后临床特征及预后的相关性。方法 随机选择在郑州大学附属肿瘤医院行手术治疗的初诊食管鳞癌患者89例,收集肿瘤标本和癌旁正常组织,应用免疫组织化学法检测SPARC蛋白的表达,统计分析其与患者临床特征和预后的相关性。结果 食管鳞癌组织SPARC蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织（65.17% vs.8.00%, P=0.000）,SPARC蛋白优势定位于肿瘤细胞间质中。SPARC蛋白表达与术后淋巴结转移呈负相关（OR=0.369, P=0.038）,与病理大体形态、肿瘤分化程度和其他临床特征无关。食管鳞癌患者术后生存与SPARC蛋白表达无关（HR=0.80, P=0.691）,而与肿瘤部位（HR=0.34, P=0.037）、分化程度（HR=4.12, P=0.000）和分期（HR=6.36, P=0.017）有关。结论 SPARC蛋白在食管鳞癌间质中高表达,与淋巴结转移负相关,与食管鳞癌术后生存无关。     

CXCL12和CXCR4在食管鳞癌组织中的表达及其与预后的关系

背景与目的：新近研究显示CXCL12／CXCR4在多种肿瘤组织中有表达,并与肿瘤细胞的增殖、侵袭特性相关;本研究旨在检测CXCL12及其受体CXCR4在食管鳞癌中的表达,研究两者对食管癌预后的影响及其与临床及病理因素之间的关系。方法：收集食管癌术后标本186例及正常食管上皮组织20例（对照组）,应用免疫组化法检测食管癌组织中CXCR4与CXCL12的表达。结果：186例食管癌组织中CXCR4的表达率为67．2％,CXCL12的表达率为63．4％,20例正常食管上皮组织中无CXCR4及CXC112蛋白表达。多因素分析：PTNM分期及CXCR4的表达是影响食管癌根治术后患者预后的独立因素（P〈0．05）：CXCL12阳性组与阴性组5年生存率分别为18．8％和21．0％,差异无统计学意义（P〉0．05）。CXCR4阳性组与阴性组5年生存率分别为2．2％和28．5％。差异有统计学意义（P〈0．05）;有淋巴结转移组及病理分期T3期组CXCR4表达率较无淋巴结转移组及病理分期T1-2组高（P〈0．05）,食管癌组织中CXCR4的表达与CXCL12的表达之间无相关性。结论：CXCL12和CXCR4在食管癌组织中均有较高的表达,CXCR4的表达水平与食管肿瘤的发展及预后有一定的关系。     

CXCR4和VEGF—C在乳腺癌组织中的表达及与淋巴结转移之间的关系

目的探讨趋化因子受体（CXCR4）和血管内皮生长因子C（VEGF—C）在人乳腺癌组织中的表达及与淋巴结转移之间的关系。方法选择65例乳腺癌标本,应用免疫组织化学染色方法,检测CXCR4和VEGF—C在人乳腺癌组织中的表达,同时对其与临床病理参数的关系进行统计学分析。结果CXCR4在乳腺癌组织中的阳性表达率为43．1％,其中淋巴结转移组表达率为57．9％,无淋巴结转移组表达率为22．2％,差异有非常显著的统计学意义（P〈0．01）。VEGF—C在乳腺癌组织中的阳性表达率为50．2％,其中淋巴结转移组表达率为68．4％,无淋巴结转移组表达率为25．9％,两者差异非常显著（P〈0．01）。而且,CXCR4阳性表达与VEGF—C阳性表达呈显著正相关（P〈0．05）。乳腺癌CXCR4和VEGF—C的表达水平与乳腺癌淋巴结转移密切相关,而与病人的月经状态、临床分期、病理类型等无相关性（P〉0．05）。结论CXCR4和VEGF—C的表达可作为评估乳腺癌病人淋巴转移的一个观测指标。     

E-cadherin、β-catenin和MMP-7在胆管癌中的表达及意义

目的研究E—cadherin、β-catenin和MMP-7在胆管癌中的表达情况，并分析i者的相互关系。方法应用免疫组化法检测E—cadherin、β-catenin和MMP-7在48例胆管癌和26例癌周正常组织中的表达情况，分析二三者与胆管癌临床病理参数的关系，探讨其相关性。结果在胆管癌中，E—cadherin的阳性表达率、13-catenin的异常表达率及MMP-7的阳性表达率分别为16．7％、68．8％和83．3％。E—cadherin、β-catenin和MMP-7的表达水平在胆管癌不同的侵犯深度（P值分别为0．001、0．005和0．008）、有无淋巴结转移（P值分别为0．018、0．012和0．007）及不同的临床分期（P值分别为0．003、0．009和0．008）中有显著性差异。E—cadherin的表达水平与生存时间有关（P=0．032）。E—cadherin的阳性表达和MMP-7的阳性表达（r=-0．365，P=0．011）有明显的负相关性。结论E—cadherin、β-catenin和MMP-7的表达与胆管癌的发生、侵袭、转移有一定关系，可作为判断预后的参考指标。     

β-链接素、诱导型一氧化氮合酶与环氧合酶-２在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的　观察β 链接素（β-ｃａｔ）、诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）和环氧合酶 ２（ＣＯＸ-２）在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达情况,探讨三者的表达及其联合表达在ＮＰＣ发生、发展、侵袭和转移过程中的可能作用。方法　采用免疫组织化学染色法观察５０例ＮＰＣ石蜡标本和１５例正常鼻咽组织中β-ｃａｔ、ｉＮＯＳ和ＣＯＸ-２的蛋白表达情况。结果　正常鼻咽组织中ｉＮＯＳ、ＣＯＸ-２未见表达,而β-ｃａｔ胞膜表达。ＮＰＣ中,所有病例β-ｃａｔ胞质均呈阳性表达,与正常组比较,差异有统计学意义（χ^２＝２４.２０７,Ｐ＝０.０００）。β-ｃａｔ胞膜表达明显降低,与正常黏膜组比较,差异有统计学意义（χ^２ ＝２４.２６５,Ｐ＝０.０００）;ｉＮＯＳ表达阳性３７例（χ^２＝２５.３７１,Ｐ＝０.０００）,ＣＯＸ-２表达阳性３３例（χ^２＝２０.１０９,Ｐ＝０.０００）,与正常组比较,差异有统计学意义。胞质内β-ｃａｔ、ｉＮＯＳ、ＣＯＸ-２的表达在不同临床分期及有无淋巴结转移之间差异有统计学意义。三者胞质的表达强度均呈正相关（Ｐ＜０.０１）。结论　胞质内β-ｃａｔ、ｉＮＯＳ和ＣＯＸ-２的过度表达与ＮＰＣ的发生、发展、浸润和转移相关;胞质内β-ｃａｔ、ｉＮＯＳ与ＣＯＸ-２的表达强度呈正相关,能同时针对三者起作用的化疗药物具有更好的抗瘤效应或放疗增敏效应。     

WT1和β-catenin蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨肾母细胞瘤基因1（WT1）和β-链蛋白（β catenin）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达情况,分析两者与临床病理特征的关系以及两者表达的相关性。方法采用免疫组化En Vision二步法检测WT1和β catenin蛋白在48例NSCLC组织中的表达情况,以20例癌旁组织作对照。结果 WT1蛋白在NSCLC和癌旁组织中的阳性表达率分别为62.5％和10.0％（P＜0.05）,β-catenin蛋白在NSCLC和癌旁组织中的异常表达率分别为72.9％和15.0％（P＜0.05）。WT1蛋白表达与淋巴结转移有关,而与性别、年龄、肿块直径、病理类型、组织分化和pTNM分期均无关（P＞0.05）;β-catenin蛋白异常表达与组织分化有关（P＜0.05）,而与性别、年龄、肿块直径、pTNM分期、淋巴结转移和病理类型均无关（P＞0.05）。NSCLC中WT1蛋白与β-catenin蛋白表达呈正相关（r=0.331,P＜0.05）。结论 WT1和β-catenin蛋白可能与NSCLC的发生、发展有关。     

Ｃａｓｐａｓｅ ３与β-ｃａｔｅｎｉｎ在分化型甲状腺癌中的表达及意义

目的：研究Ｃａｓｐａｓｅ ３和β ｃａｔｅｎｉｎ蛋白在分化型甲状腺癌（ＤＴＣ）中的蛋白表达情况,探讨它们在ＤＴＣ发生发展中的作用及相互关系。方法：采用免疫组织化学ＳＰ法,对５２例ＤＴＣ组织和１０例正常甲状腺组织中的Ｃａｓｐａｓｅ-３和β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达情况进行检测。结果：ＤＴＣ组织中的Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白表达率为５１.９２％（２７／５２）,明显低于正常甲状腺组织的９０.００％（９／１０）,Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白的表达与ＤＴＣ病理分级有关（Ｐ＜０.０５）,但与临床分期及颈淋巴结转移无关;ＤＴＣ组织中的β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达率为６７３１％（３５／５２）,明显高于正常甲状腺组织的２０００％（２／１０）,β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白的表达与ＤＴＣ颈淋巴结转移有关（Ｐ＜００５）,但与临床分期及病理分级无关;在ＤＴＣ组织中Ｃａｓｐａｓｅ ３和β ｃａｔｅｎｉｎ蛋白的表达呈负相关（ｒｓ＝－０.６５９,Ｐ＜０.０１）。结论：Ｃａｓｐａｓｅ-３和β-ｃａｔｅｎｉｎ蛋白的异常表达共同参与了分化型甲状腺癌的发生发展,可能成为判断分化型甲状腺癌恶性程度、转移及预后的指标。     

趋化因子受体CXCR4和VEGF-C蛋白在食管癌组织中的表达及临床意义

[目的]探讨趋化因子受体（CXCR4）和血管内皮生长因子（VEGF-C）在食管癌组织中的表达情况,及其在食管癌发生、浸润、转移中的作用。[方法]应用免疫组织化学方法检测82例食管癌组织、20例正常食管组织中CXCR4、VEGF-C表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。[结果]CXCR4在82例食管癌组织中的阳性表达率为64.6%,CXCR4表达与食管癌患者年龄、性别无关（P〉0.05）,而与分化程度、病理类型、TNM分期、浸润深度和淋巴结转移有相关性（P〈0.05）。VEGF-C在82例食管癌组织中的阳性表达率为74.4%,VEGF-C表达与食管癌患者年龄、性别、分化程度和病理类型无关（P〉0.05）,而与TNM分期、浸润深度和淋巴结转移有相关性（P〈0.05）。[结论]CXCR4和VEGF-C在食管癌组织中呈高表达,且与食管癌细胞侵袭、转移和淋巴结转移相关,在促进食管癌侵袭和转移中可能存在协同作用。     

直肠癌中HER-2、VEGF与CXCR4的表达及相关性

[目的]研究HER-2、VEGF与CXCR4在直肠癌中的表达及三者之间的相关性。[方法]采用免疫组化EnVision二步法检测HER-2、VEGF与CXCR4在15例癌旁正常组织及50例直肠癌中的表达水平，分析三者表达水平与临床病理因素的关系及三者之间的相关性。[结果]在正常直肠癌旁组织及直肠癌中HER-2蛋白的阳性表达率分别为0.6％，差异无显著性（P〉0．05）；而VEGF蛋白的阳性表达率分别为13．3％、62．0％，CXCR4蛋白的阳性表达率分别为20．0％、68．0％，均有显著性差异（P〈0．01）。直肠癌组织中HER-2蛋白表达与临床病理因素间无相关性．HER-2蛋白表达与VEGF蛋白、CXCR4蛋白表达之间亦未见相关性（r=-0．024，P〉0．05；r=-0．173，P〉0．05）；而VEGF、CXCR4蛋白阳性表达与淋巴结转移及Dukes’分期均显著相关，VEGF与CXCR4蛋白表达水平之间成正相关（r=-0．346，P〈0．05）。[结论]HER-2蛋白在直肠癌中的表达与VEGF和CXCR4蛋白不存在相关性，与侵袭、转移无关。VEGF与CXCR4蛋白的表达存在相关性，均与直肠癌侵袭、转移有关。