研究ELISA联合荧光定量PCR检测丙型肝炎病毒的效果

目的 评估丙型肝炎病毒检测应用酶联免疫吸附试验（Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA）联合荧光定量聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）检测的应用价值。方法 选取2022年8月—2023年8月滕州市疾病预防控制中心接诊的90例疑似丙型肝炎病毒患者为研究对象,采用ELISA联合荧光定量PCR检测,以丙型肝炎病毒（Hepatitis Virus C, HCV）RNA检测结果作为“金标准”,分析检测方式的应用价值。结果 HCV RNA检测结果显示,阳性率为47.78%,ELISA检测的阳性率40.00%,荧光定量PCR检测发现阳性量率42.22%,联合检测的阳性率46.67%。ELISA检测与荧光定量PCR检测在灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值以及阴性预测值方面比较,差异无统计学意义（P均>0.05）。联合检测的灵敏度为93.02%、准确度为94.44%、阳性预测值为95.24%以及阴性预测值为93.75%,显著高于ELISA检测的67.44%、76.67%、80.56%、74.07%,联合检测的灵敏...     

实时荧光定量聚合酶链反应在丙型肝炎诊断中的临床应用价值

目的探讨丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)荧光定量检测在丙型肝炎诊断中的临床应用价值。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测358例血清中HCV RNA载量及抗-HCV。结果 358例慢性丙型肝炎患者抗-HCV和HCV RNA检出率分别为78.8%和54.2%,经χ2检验差异有统计学意义(P<0.05),HCV RNA的平均载量为4.85×105 copies/mL。结论FQ-PCR检测血清中HCV RNA的载量,是判定HCV感染的直接证据,它反映HCV的活动性和复制程度,有利于抗病毒治疗的疗效观察。抗-HCV和HCV RNA联合检测对丙型肝炎病毒的早期诊断有重要临床应用价值。     

实时荧光定量PCR法在儿童巨细胞病毒感染诊断中的应用分析

目的 分析实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法在人巨细胞病毒（Human cytomegalovirus,HCMV）感染诊断中的应用价值。方法 选取2021年1月至2023年3月我院收治的88例疑似HCMV感染患儿,于清晨采集患儿空腹静脉血5ml及新鲜晨尿的中段尿5ml,采用ELISA法测定HCMV-IgM,采用FQ-PCR法测定HCMV-DNA。统计病毒培养法诊断结果;以病毒培养法诊断结果作为金标准,计算HCMV-IgM、HCMV-DNA诊断HCMV感染结果,并计算诊断HCMV感染结果与病毒培养法诊断结果的一致性。结果 88例疑似HCMV感染患儿中经病毒培养法诊断HCMV感染60例;以病毒培养法诊断结果作为金标准,HCMV-IgM诊断阳性34例,阴性54例,其中漏诊28例,误诊2例,HCMV-IgM诊断结果与病毒培养法诊断结果一致性差（Kappa=0.370,P=0.000）;HCMV-DNA诊断阳性52例,阴性36例,其中漏诊9例,误诊1例,HCMV-DNA诊断结果与病毒培养法诊断结果一致性极好（Kappa=0.757,P=0.000）;HCMV-DNA诊断灵敏度、准确度均高...     

丙型肝炎病毒感染者抗—HCV及HCVRNA的检测分析

目的 为探讨丙型肝炎病毒（HCV）感染血液中抗－HCV及HCVRNA的转归。方法 抗－HCV采用ELISA法检测；HCVRNA采用PCR法检测。结果 123例抗－HCV阳性HCVRNA的阳性检出率为63．4％（78／123）；45例HCVRNA阳性抗－HCV的阳性检出率为86．67％（39／45）；27例HCVRNA阴性感染抗－HCV的阳性检出率为77．78％（21／27）；随机检测了抗－HCV阴性的献血员126名，HCVRNA阳性检出率为0．79％（1／126）。结论 同时检测感染血液中的抗－HCV及HCVRNA对感染的早期诊断，区别急慢性感染以及献血员的筛查，阻断HCV的血源性传播都具有重要性的意义。     

荧光定量PCR法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值

目的 探讨荧光定量PCR法在乙型肝炎病毒检测中的应用价值.方法 选取2017年6月～2019年6月我院收治的180例乙型肝炎病毒携带者,分别使用荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法测定(ELISA)患者血浆标本的血清学标志物和HBV DNA,对两种检测结果进行比较分析.结果 本组180例血清标准的HBV-M模式可分为7组,...     

荧光定量两探针法检测HCV RNA的研究

目的 建立荧光定量两探针检测HCV RNA方法.方法 对105例抗HCV抗体阳性和220例阴性样本,用荧光定量两探针法和2种商品荧光定量试剂进行检测,并对检测结果进行比较.结果 荧光定量两探针法阳性率分别为89.5%（94/105）和2.3%（5/220）.两种商品荧光定量试剂阳性率分别为71.4%（75/105）和0.45%（1/220）;69.5%（73/105）和1.8%（4/220）.结论 荧光定量两探针法检测HCV RNA有较高的敏感性和特异性.     

抗-HCV结果分析及灰区范围设置的探讨

目的分析酶联免疫吸附试验(ELISA)筛查丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)结果,探讨实验室ELISA中灰区范围设置的必要性。方法回顾性分析34 942例患者抗-HCV筛查结果,比较抗-HCV与HCV-RNA及临床确诊丙型肝炎患者间的关系;以初筛S/CO值在0.4~2.0范围内的标本为灰区样本,进行不同厂家试剂复检及HCV-RNA检测,探讨设置抗-HCV检测灰区范围的必要性。结果抗-HCV筛查阳性率0.61%;31~50岁阳性率最高;男性高于女性,两者比较差异有统计学意义(P0.05)。S/CO≥10时抗-HCV与HCV-RNA检测结果符合程度高,S/CO≥3.8时抗-HCV与临床确诊丙型肝炎符合程度高。灰区样本的阳性率0.38%,双试剂双孔复检后阳性率0.20%和0.05%。结论抗-HCV筛查阳性率在不同地域、性别及年龄段存在差异;S/CO值越大,HCVRNA阳性率越高,与临床丙型肝炎的确诊符合程度越高,而抗-HCV筛查落在灰区范围的样本应复检并检测RNA,以减少实验室漏检或假阳性结果的产生。     

丙型肝炎病毒核酸和抗体检测方法在人群筛查中的比较及应用

目的：探讨丙型肝炎病毒核酸和抗体检测方法在人群筛查中的应用。方法采用胶体金快速试验法和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎病毒（HCV）抗体,实时荧光定量 PCR（RT-PCR）检测 HCV-RNA 病毒载量。结果（1）539份样本中,其中266例抗体阴性,263例抗体阳性。（2）在67例 HCV-RNA 病毒载量小于103 IU/mL 组中,ELISA 法检测 HCV 抗体阳性有60例,胶体金快速试验法检测抗体阳性有30例。208例 HCV-RNA 病毒载量大于或等于103 IU/mL 组中,ELISA 法检测的抗体阳性有199例,胶体金快速法检测阳性的有181例,另外有6例两种抗体检测均为阴性患者 RNA 病毒载量大于或等于103 IU/mL。（3）对208例 HCV-RNA 病毒载量大于或等于103 IU/mL 样本分成4个组。GGT、ALT 及 AST 在4组间差异均有统计学意义（P ＜0．05）,而 ALB 及 S/CO 值在4组间差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论在人群筛查中为了减少漏诊率,尽早诊断丙型肝炎,要联合运用以上各实验室检测方法,综合分析。     

南宁市无偿献血人群HTLV检测结果分析

目的了解南宁市无偿献血人群人类嗜T细胞病毒(HTLV)的感染状况,评估HTLV对南宁市血液安全现状的影响。方法使用HTLV酶联免疫吸附试验试剂盒对南宁市61 804份无偿献血者血液标本进行HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体筛查,筛查阳性标本应用免疫印迹试验和实时荧光定量聚合酶链反应进行确证。结果 61 804份无偿献血者血液标本共有HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体阳性24份,初筛阳性率为3.88,其中4份确证阳性,3份不确定,HTLV阳性率为0.65。结论南宁市无偿献血人群中存在一定的HTLV感染,但目前处于较低水平,仍需继续监测。     

实时荧光PCR与COBAS Amplicor PCR-ELISA定量检测血清HBV DNA的比较

目的研究实时荧光聚合酶链反应(PCR)与COBAS Amplicor PCR-酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测血清标本中乙型肝炎病毒(HBV)DNA水平的相关性。方法采用实时荧光定量PCR与COBAS AmplicorPCR-ELISA平行检测110例HBV携带者和40名健康体检者的血清标本,比较2种方法检测结果的相关性和差异程度。结果实时荧光PCR与COBAS Amplicor PCR-ELISA定量检测血清HBV DNA相关性较好,相关系数为0.944,对高浓度标本检测结果的差异性更小。结论我们采用的实时荧光PCR检测血清标本HBV DNA与COBAS Amplicor PCR-ELISA具有较好的相关性,可以为临床提供可靠的结果。     

实时荧光PCR与COBAS Amplicor PCR-ELISA 定量检测血清HBV DNA的比较

目的研究实时荧光聚合酶链反应（PCR）与COBAS Amplicor PCR-酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测血清标本中乙型肝炎病毒（HBV）DNA水平的相关性。方法采用实时荧光定量PCR与COBAS AmplicorPCR-ELISA平行检测110例HBV携带者和40名健康体检者的血清标本,比较2种方法检测结果的相关性和差异程度。结果实时荧光PCR与COBAS Amplicor PCR-ELISA定量检测血清HBV DNA相关性较好,相关系数为0.944,对高浓度标本检测结果的差异性更小。结论我们采用的实时荧光PCR检测血清标本HBV DNA与COBAS Amplicor PCR-ELISA具有较好的相关性,可以为临床提供可靠的结果。     

血清中HBV-DNA的两种定量PCR方法的比较

目的 比较乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)定量测定的两种方法:聚合酶链式反应-酶联免疫吸附测定(PCR-ELISA)法和荧光定量-聚合酶链式反应(FQ-PCR)法。方法 检测了两种方法的灵敏度、批内批间可信度和特异性。结果 PCR-ELISA法和FQ-PCR法在特异性和批内批间可信度方面相似。在85个HBV表面抗原阳性的病人血清中两种方法的检测结果96％保持一致,HBV-DNA血清阳性率分别为84％和80％,其结果取对数后有一定线性关系(r=0.588 9)。PCR-ELISA法的灵敏度比FQ-PCR法高出一个稀释度,PCR-ELISA的最小检测限7.6×10~3拷贝/ml,而FQ-PCR为2.1×10~4拷贝/ml。但FQ-PCR法的技术复杂性要简单得多,分析时间(2 h)比PCR-ELISA(8 h)要短得多。结论 两种方法各有优缺点,每个实验室都应根据各自的需求加以选择。     

荧光定量 PCR 法检测乙肝病毒 DNA 和乙肝病毒标志物检测的临床价值分析

目的：探讨荧光定量 PCR 法（FQ-PCR）检测乙肝病毒 DNA（HBV-DNA）和乙肝病毒标志物（HBV-M）ELISA 法检测的临床价值。方法选取2013年4～12月在该院检测的653例乙肝患者,先采用 ELISA 法对其血液标本进行 HBV-M 模式定性检测,检测顺序为乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗体（HbsAb）、乙型肝炎 e 抗原（HbeAg）、乙型肝炎 E 抗体（Hbe-Ab）、乙肝表面核心抗体（HbcAb）;再采用 FQ-PCR 法进行 HBV-DNA 定量检测,观察不同 HBV-M 模式检测结果。结果 HB-sAg、HbeAg、HbcAb 检测同时阳性简称“大三阳”。大三阳[1（＋）、3（＋）、5（＋）模式]和[1（＋）、3（＋）模式]的 HBV-DNA 阳性率分别为97．97％、94．74％,显著高于其他模式的 HBV-DNA 阳性率（P ＜0．05）。大三阳的 HBV-DNA 表达水平（5．59×10^6±2．42×10^5）copies/mL,明显高于其他模式（P ＜0．05）。结论联合 HBV-M 定性及 HBV-DNA 定量检测,对临床早期诊断及用药具有重要指导价值。     

荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA和乙肝病毒标志物检测的临床价值分析

目的 探讨荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA)和乙肝病毒标志物(HBV-M)ELISA法检测的临床价值。方法 选取2013年4~12月在该院检测的653例乙肝患者,先采用ELISA法对其血液标本进行HBV-M模式定性检测,检测顺序为乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HbsAb)、乙型肝炎e抗原(HbeAg)、乙型肝炎E抗体(HbeAb)、乙肝表面核心抗体(HbcAb);再采用FQ-PCR法进行HBV-DNA定量检测,观察不同HBV-M模式检测结果。结果 HBsAg、HbeAg、HbcAb检测同时阳性简称“大三阳”。大三阳[1(+)、3(+)、5(+)模式]和[1(+)、3(+)模式]的HBV-DNA阳性率分别为97.97%、94.74%,显著高于其他模式的HBV-DNA阳性率(P<0.05)。大三阳的HBV-DNA表达水平(5.59×106±2.42×105)copies/mL,明显高于其他模式(P<0.05)。结论 联合HBV-M定性及HBV-DNA定量检测,对临床早期诊断及用药具有重要指导价值。     

实时荧光定量PCR检测早产孕妇血浆中游离胎儿DNA

近年来研究学者证实孕妇血浆中存在着胎儿DNA[1],这一发现有极重要的潜在临床应用价值,这为非损伤性的疾病诊断及孕期监测提供了一种新的工具。本研究应用实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测出现早产宫缩的孕妇血浆中游离胎儿DNA来确定胎儿DNA在母血浆中的存在,以期为孕期监测和早产的病理生理过程的进一步研究奠定基础。一、材料和方法1.对象本院2004年1月~2005年2月收治的自发性规则宫缩的孕妇102例,其中初次妊娠者69例,2次妊娠者31例,多次妊娠者2例。孕妇妊娠孕周为28~37周。孕妇年龄2 l~35岁。取2名健康男性及2名未孕且无妊娠…     

实时荧光定量PCR检测早产孕妇血浆中游离胎儿DNA

近年来研究学者证实孕妇血浆中存在着胎儿DNA,这一发现有极重要的潜在临床应用价值,这为非损伤性的疾病诊断及孕期监测提供了一种新的工具。本研究应用实时荧光定量聚合酶链反应（RQ-PCR）检测出现早产宫缩的孕妇血浆中游离胎儿DNA来确定胎儿DNA在母血浆中的存在,以期为孕期监测和早产的病理生理过程的进一步研究奠定基础。     

ELISA和RT-PCR联合检测手足口病患儿5种病毒结果比较

目的采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测手足口病患儿血清肠道病毒71型(EV-A71)IgM、柯萨奇病毒A 16型(CV-A16)IgM和粪肠道病毒通用型(EV)、EVA71、CV-A16型病毒RNA,并对检测结果进行比较分析。方法采用ELISA检测对2 596例手足口病患儿血清EV-A71IgM、CV-A16IgM,采用RT-PCR检测粪便或肛拭子标本中EV-RNA、EV-A71RNA、CV-A16RNA。结果 2 596例患儿中EV-A71IgM、EV-A71RNA、CV-A16IgM、CV-A16RNA阳性分别为367例(14.1%)、50例(1.9%)、320例(12.3%)、91例(3.5%)。ELISA和RT-PCR检测EV-A71差异有统计学意义(P0.01),且两种方法一致性较差(P0.01);检测CV-A16差异有统计学意义(P0.01),且一致性较差(P0.01)。EV-RNA阳性2 296例(88.4%),EV-A71IgM和CV-A16IgM双阳性137例(5.3%),EV-A71RNA和CVA16RNA双阳性0例(0.0%)。结论手足口病患儿进行EV-A71和CV-A16检测,ELISA血清学检测阳性率高于RT-PCR粪便中核酸检测,且两种方法一致性较差。     

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用

多聚酶链反应飞速的发展使其成为了分子生物学实验室重要的工具 ,实时荧光定量PCR(real timequantitativePCR)技术以其敏感性高、重复性好、速度快和污染少使PCR技术又向前迈进了一步。本文对real timeQ PCR技术的原理、五种主要的荧光化学及定量方法作一介绍 ,同时也讨论了此技术存在的不足 ,并对其目前在研究领域中主要的应用进行了概述。     

3种检测乙型肝炎病毒方法的比较及临床应用

目的探讨3种检测乙型肝炎病毒(HBV)方法的比较和临床应用。方法采用微粒子酶免疫分析(MEIA)法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清HBV标志物,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测HBV-DNA。结果 MEIA法与ELISA法检测HBV血清学结果的符合率较高,经χ2检验,两种测定方法所得结果差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ组的HBV-DNA阳性率显著高于其他组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MEIA法联合FQ-PCR法或者ELISA法联合FQ-PCR法应用,为临床提供HBV感染、复制及传染性的判断,对于疗效的分析具有重要价值。     

乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR的建立与应用

目的　建立血浆 (血清 )HBVDNA荧光定量PCR检测方法 ,探讨其临床应用价值。方法　用PUCm T载体和PCR纯化产物连接 ,转染DH5α菌 ,筛选阳性菌落 ,提取质粒 ,制作外标准品 ;在HBV基因组S区设计一对引物和TaqMan探针 ,严格优化反应物的组成和扩增条件 ,并对该方法进行评价。结果　建立的HBVDNA荧光定量PCR最低可检出 80 0拷贝 /ml;批内误差为 1 8%～ 6 5% ,批间误差为 2 6 %～ 9 1 % ;在 1 0 4 ～ 1 0 11拷贝 /ml之间与Ct值具有很好的线性 (Ct =- 1 .391 1ln(X) 4 1 .6 5,r =- 0 .9958) ;外周血HBVDNA临床定量检测发现 ,HBeAg阳性的 1 30例中 ,HBVDNA阳性率为 1 0 0 % ,含量为1 0 6 89± 1.6 9拷贝 /ml,抗HBe阳性的 96例中HBVDNA阳性率为 55 2 % ( 53/ 96 ) ,含量为 1 0 4 .0 9± 1.19拷贝 /ml;6 2例献血员未检出HBVDNA。乙肝临床治疗监测发现 ,外周血中HBVDNA含量检测可有效反映治疗效果 ,指导临床用药。结论　荧光定量PCR检测方法是一种相对准确、灵敏度高、特异性较强和较简便的HBVDNA定量检测技术 ,对乙肝诊断、指导临床用药和治疗监测方面具有实用价值