MH134-88体外细胞系的建立及其生物学特性的研究

MH134-88是将用四氯化碳诱发成功的C_3H/HeN系小鼠的腹水型肝癌株(MH134)经极限稀释及克隆化方法在体外培养,连续传代而建成的一个纯度较高的小鼠肝癌细胞系。MH134呈悬浮培养,生长迅速,特性稳定,迄今已传200余代。本文对其生物学特性进行了较系统的观察与研究。支原体检测阴性,具有较大推广应用的价值。     

人子宫颈癌细胞系HCC—94的建立及其生物学特性

为建立子宫颈癌的体外培养细胞系，以人子宫颈高分化吕裸鼠移植瘤为材料进行体外培养，原代培养生长后行传代培养，并按照细胞系建立标准检测细胞的一系列生物不特性，并行克隆，无血清培养及对铂类抗癌药物的敏感性试验。     

人肝肿瘤耐药细胞亚系建立及生物学特性研究

目的:以阿霉素(DOX)诱导建立人肝肿瘤细胞系HepG2的多药耐药亚系HepG2/DOX,并对HepG2/DOX的生物学特性及耐药机制进行研究.方法:以浓度梯度递增方法,用DOX诱导HepG2产生耐药性.显微镜观察细胞形态,绘制生长曲线,作染色体常规及G带分析.MTT法检测HepG2、HepG2/DOX细胞对抗癌药物的敏感性.应用免疫组化法检测MDR-1基因产物PgP的表达.结果:HepG2/DOX与HepG2在形态上染色体数目和结构均有差异.细胞可在EOX浓度为0.1μg/ml培养基内生长,但生长速度减慢.DOX、顺铂(CDDP)、丝裂霉素(MMC)、氟脲嘧啶(5-FU)、氨甲喋吟(MTX)对HepG2、HepG2/DOX细胞的IC50值(μg/ml)分别为(0.070和1.161)、(0.214和1.317)、(0.162和0.498)、(0.313和1683)、(0.007和0.217).HepG2/DOX细胞PgP表达增高.在无DOX培养基内生长5周后,DOX对HepG2/BOX的IC50值(μg/ml)为0.684.结论:HepG2/DOX有多药耐药的特点,其耐药性与Pgp的表达增高及倍增时间延长有关.     

一株小鼠自发性乳腺癌细胞系MA—891的建立及其免疫生物学…

从津白Ⅱ号小鼠自发性乳腺癌ＴＡ２ＭＡ８９１建立了体外长期传代细胞系ＭＡ８９１。ＭＡ８９１细胞保持了ＴＡ２ＭＡ８９１的高转移特性，皮下接种后肿瘤进行生长，并无一例外地发生肿瘤肺转移。ＭＡ８９１细胞的免疫原性极弱，表现为：（１）淋巴细胞－肿瘤细胞混合培养（ＭＬＴＣ）只能诱导出低水平的细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬ）；（２）肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）含量少，体外经ＩＬ－２扩增后只表现出微弱的细胞毒活性；（３）在上     

人尿道高分化鳞癌系HUS-98的建立及生物学特性

目的 以尿道高分化鳞状上皮转移癌患者腹水为材料，建立体外培养的人尿道鳞癌细胞系HUS-98。方法 按照细胞系建立标准检测细胞的一系列生物学特性，包括光镜、电镜观察，生长曲线、染色体数目、裸鼠致瘤性、致瘤性病毒基因等。结果 细胞维持培养15个月，传120代，生长稳定。细胞群体倍增时间52.3h。细胞呈贴壁生长，趋向复层，无接触抑制。光镜和电镜检查均显示高分化鳞癌特征性结构。染色体数目分布 34～120之间，主流范围在62～72之间（57%）。PCR检测乳头瘤病毒12，18型、疱疹病毒Ⅱ型、EB病毒和巨细胞病毒均阴性；乙肝病毒基因阳性。三次裸鼠移植试验均未致瘤。结论 该细胞系的建立将有助于尿道肿瘤的生物学特性的研究。     

肝癌细胞系EHBC-512的建立及其生物学特性分析

目的:建立一株新的肝癌细胞系EHBC-512并分析其生物学特性,为后续研究奠定基础.方法:切取肝癌手术标本进行体外原代培养,采用光镜、电镜观察细胞形态,流式细胞检测细胞周期,并进行染色体核型分析,免疫荧光及化学发光法检测细胞上清液AFP的表达;裸鼠体内种植观察异种成瘤情况.结果:光镜下细胞形态具有肝癌细胞特征;电镜下细胞具有较多的线粒体,核异形性明显,染色体众数为110～120条.细胞群体倍增时间为48 h,贴壁率达90%.免疫荧光染色显示:细胞AFP、CK18表达,CEA、CK19未表达;细胞高分泌AFP,上清液AFP含量>1 210 μg/L.裸鼠体内成瘤病理检测与原发灶保持相同的结构和细胞形态.结论:成功建立一株生物学特性稳定并能体外高分泌AFP的人类肝癌细胞系(EHBC-512),为肝癌研究提供新的研究工具.     

一株小鼠自发性乳腺癌细胞系MA-891的建立及其免疫生物学特征

从津白Ⅱ号小鼠自发性乳腺癌TA2MA891建立了体外长期传代细胞系MA891。MA891细胞保持了TA2MA891的高转移特性，皮下接种后肿瘤进行生长，并无一例外地发生肿瘤肺转移。MA891细胞的免疫原性极弱，表现为：（1）淋巴细胞-肿瘤细胞混合培养（MLTC）只能诱导出低水平的细胞毒T细胞（CTL）；（2）肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）含量少，体外经IL－2扩增后只表现出微弱的细胞毒活性；（3）在小鼠体内不能诱导特异性肿瘤排斥反应。MA891可作为研究人类肿瘤生物治疗的有用实验模型。     

人骨肉瘤细胞系OS-9901的建立及其生物学特性

目的：建立人骨肉瘤细胞系,为骨肉瘤研究提供新的实验模型。方法：取经病理证实的新鲜骨肉瘤手术标本,进行体外原代组织块培养。对存活细胞进行形态学观察、组织化学梁 色、细胞周期检查、核型分析、电镝观察和异种移植等。结果：建成细胞系ＯＳ－９９１０,其形态学表现、组化染色、电镜观察和异种移植等均符合骨肉瘤细胞特征。经半年多体外培养,已连续传代７０余次,细胞倍增时间为３３h,细胞周期测定：Ｇ１期６０．２％、Ｔ     

人体肺腺癌细胞系PCCQ-87的建立及其生物学特性研究

从原发性肺腺鳞癌患者手术切除癌标本，采用静置于贴壁法培养建立PCCQ-87细胞系。细胞形态呈多边形上皮样、镶嵌性排列、重叠性增殖。细胞繁殖迅速，倍增时间27.38小时。染色体数目范围较广（34～106），以超二倍体为主，核型分析有异常染色体存在。在免疫抑制的615小鼠上移植成功率为100％。移植瘤病理切片，光镜下可见组织结构和细胞形态与原标本切片基本相符。电镜检查第35代细胞和移植瘤细胞均可见细胞间连结、丰富的微绒毛及分泌颗粒。实验结果表明本细胞系为人肺腺癌细胞系。     

MCF-7/BCRP细胞系的建立及其生物学特征

目的：建立表达乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的耐药细胞系MCF-7／BCRP。方法：提取MCF-7细胞的总RNA,设计BCRP基因上下游引物,用RT-PCR法克隆出BCRP基因全长并连接到真核表达栽体pcDNA3．1(-)上,转染MCF-7细胞后以G418筛选细胞。采用米托蒽醌外排实验、细胞毒性实验、细胞群体倍增时间、免疫荧光法鉴定构建的耐药细胞系。结果：MCF-7／BCRP对米托蒽醌耐药指数增加至14．72：外排米托蒽醌的作用增强;细胞群体倍增时间较亲代细胞延长：MCF-7／BCRP细胞能表达一定量的BCRP。结论：MCF-7／BCRP细胞能够表达BCRP并具有BCRP的耐药表型。     

克隆化兔骨髓基质干细胞系的建立及其生物学特性研究

目的 建立克隆化兔骨髓基质干细胞（MSC）系，并对其生物学特性进行研究，为组织缺损修复寻找理想的种子细胞提供新的途径。方法 应用密度梯度离心和贴壁分离培养方法，从兔骨髓中获得原代骨髓MSCs，再应用克隆化分离培养技术，建立克隆化扩增的骨髓MSC系。体外传代培养、低温冻存复苏、形态学观察、生长曲线测定、染色体分析和分化潜能鉴定。结果 建立了一株克隆化兔骨髓MSC系。该细胞系在含10％胎牛血清的LG-DMEM中连续传代至第32代，仍保持旺盛的增殖能力，P4和P32代细胞染色体众数保持稳定的二倍体核型，成骨细胞诱导试验阳性。结论 获得一株具有旺盛的增殖能力和分化潜能，遗传性能稳定的克隆化兔骨髓MSC系。     

人肝癌细胞系HCC—9204的建立及其特性研究

作者用组织块培养法，对１２例肝细胞肝癌手术标本进行培养，并对能存活的细胞进行形态学观察，ＬＤＨ同工酶谱和ＡＦＰ检查，核型分析，对数求解和放射自显影测定细胞增殖周期，异种移植及生物学特性研究。结论：ＨＣＣ－９２０４是一株人体肝癌细胞系，可用于肝癌防治研究。     

人肺腺癌细胞系SPC—A8的建立及生物学特性

１９８９年８月４日，作者以一例肺腺癌手术标本（原发灶）为原代培养材料，建立了能长期稳定传代培养的肺腺癌细胞系ＳＰＣ－Ａ８。类多边形细胞贴壁生长，倍增时间３２．５小时，克隆形成率２３．９％，ＤＮＡ指数２．１６，染色体众数在７７－８２范围内，核型为８６．ＸＹ．＋３Ａ，－２Ｂ，＋１１Ｃ，－３Ｄ，＋８Ｅ，＋６Ｆ，＋１０Ｇ，另有５条染色体不能分组。ＳＰＣ－Ａ８细胞的Ｇ６ＰＤ和ＬＤＨ同功酶谱与ＨｅＬａ细胞相同     

Wistar大鼠自发性乳腺肿瘤细胞系的建立及其生物学特性

目的 从Wistar大鼠自发性乳腺肿瘤中分离出乳腺肿瘤细胞系(ZHL2006),并对其进行鉴定,为动物模型的开发、肿瘤发病机制的探讨提供有价值的线索.方法 对一例Wistar大鼠自发性乳腺腺癌瘤组织进行培养.对传代培养细胞进行细胞生长曲线测定、细胞形态结构分析、细胞染色体分析,检测广谱细胞角蛋白(PCK)表达、软琼脂集落形成实验等检测.将细胞接种于10只裸鼠,并对形成的肿瘤进行病理组织学检查,并进行分离培养.结果 ZHL2006细胞在体外生长迅速,群体倍增时间为43.6 h;倒置显微镜及Giemsa染色镜下观察细胞为多边形及梭形;透射电镜观察可见细胞表面有微绒毛,核高度不规则,核浆比例增大,核仁明显等;染色体数目和结构异常,具有癌细胞特性.广谱细胞角蛋白(PCK)染色阳性,说明其自上皮而非来自基质;同时ZHL2006细胞系在软琼脂中可形成克隆,具裸鼠致瘤性.该乳腺肿瘤细胞系经体外长期培养后已形成永生化细胞系,并具有明显的恶性细胞表型.裸鼠接种实验成功率为6/10,复制肿瘤细胞和原发肿瘤形态结构一致,细胞培养形态结构一致.结论 本研究成功的建立了大鼠乳腺肿瘤细胞系,该细胞系具有典型的恶性肿瘤特征,能应用于裸鼠并成功复制出乳腺肿瘤模型.     

不同转移潜能乳腺癌细胞亚系的建立与生物学特性的分析

目的探讨利用细胞穿透人工基质膜能力的差异筛选不同转移潜能乳腺癌细胞的可行性,并分析二者生物学特性差异。方法人乳腺癌细胞系MDA-MB-435s经过连续人工基质膜侵袭试验后获得高、低转移潜能细胞株,并应用细胞生长曲线测定、侵袭力、黏附率实验,促血管形成实验分析所筛选出的不同转移潜能乳腺癌细胞的生物学性质的差异。结果获得2株转移潜能不同的乳腺癌细胞株,它们具有差异明显的体外生长速度、侵袭力、黏附力和促血管形成能力。结论利用细胞穿透人工基底膜能力的差异能够筛选出高、低转移潜能的乳腺癌细胞。     

人小细胞肺癌SH77多药耐药细胞系的建立及其生物学特征分析

目的　建立人小细胞肺癌SH77/CDDPMDR细胞株并检测其生物学特性。方法　应用肺癌化疗的一线药物顺铂采用逐步增加剂量的方法诱导人SCLC细胞系SH77,建立MDR细胞系SH77/CDDP ;检测耐药细胞及其亲代细胞对 7种化疗药物的敏感性 ;观察细胞形态和超微结构 ;测定细胞生长曲线和细胞周期。结果　在国内首次成功建立了SCLCMDR细胞系SH77/CDDP ,药敏结果显示该细胞对 7种化疗药物有不同程度的抗药性 ;耐药细胞较其亲代略增大 ,核浆比例减小 ,线粒体、高尔基体、粗面内质网和游离核糖体增多 ,细胞表面指状突起明显 ;耐药细胞与其亲代细胞增殖速度接近 ;其S期细胞增多 (P <0 .0 5 ) ,提示耐药细胞DNA合成增加。结论　SH77/CDDP是可靠的人SCLCMDR细胞模型 ,SH77/CD DP的建立为进一步探讨顺铂致人SCLCMDR的发生机制奠定了基础